含有地夸磷索或其盐，乙烯基系高分子及纤维素系高分子的眼科用组合物的制作方法

1.本发明涉及含有地夸磷索或其盐、乙烯基系高分子及纤维素系高分子眼科用组合物。


背景技术：

2.地夸磷索(diquafosol)是也被称作p1,p4‑
二(尿苷
‑5’
)四磷酸或up4u的嘌呤受体激动剂，具有促进泪液分泌的作用，作为其盐的地夸磷索钠作为“diquas
(注册商标)
滴眼液3％”(以下也称作“diquas
(注册商标)
滴眼液”)而被用于干眼症的治疗(日本专利第3651707号公报(专利文献1)，diquas(
注册商标)
滴眼液3％药品说明书(非专利文献1))。另一方面，diquas(
注册商标
)滴眼液的用法用量通常为1天6次、每次1滴而进行滴眼(非专利文献1)。然而，在日常生活中有难以每天规律、频繁滴眼的情况，因而存在因滴眼依从性不良而导致无法获得预期效果的患者。
3.作为探索具有更高的泪液量增加作用的新型干眼症治疗剂的尝试，已知有将地夸磷索或其盐和现有的干眼症治疗剂并用的例子。日本特开2012
‑
077080号公报(专利文献2)公开了，通过将地夸磷索或其盐与作为干眼症治疗剂的透明质酸并用，泪液分泌被协同地促进。日本特开2015
‑
160826号公报(专利文献3)公开了，通过将地夸磷索或其盐与作为干眼症治疗剂的瑞巴派特(rebamipide)并用，泪液分泌被协同地促进。
4.现有技术文献
5.专利文献
6.专利文献1：日本专利第3652707号公报
7.专利文献2：日本特开2012
‑
077080号公报
8.专利文献3：日本特开2015
‑
160826号公报
9.非专利文献
10.非专利文献1：diquas(注册商标)滴眼液3％药品说明书


技术实现要素：

11.发明要解决的课题
12.提供具有更高的泪液量增加作用且能提高滴眼依从性的、含有地夸磷索或其盐的新型眼科用组合物是有趣的课题。
13.用于解决课题的手段
14.本技术的发明人进行了深入研究，结果发现含有地夸磷索或其盐、乙烯基系高分子及纤维素系高分子的眼科用组合物(以下，也称作“本组合物”)具有高的泪液量增加作用，且即使滴眼次数比现有的diquas
(注册商标)
滴眼液少，也可以获得同等的治疗效果。此外，发现本组合物不显示神经刺激性，可进一步改善滴眼液的舒适感。即，本发明涉及以下内容。
15.(1)眼科用组合物，其含有地夸磷索或其盐、乙烯基系高分子及纤维素系高分子。
16.(2)如(1)所述的眼科用组合物，其中，所述乙烯基系高分子含有聚乙烯基吡咯烷酮。
17.(3)如(1)或(2)所述的眼科用组合物，其中，所述纤维素系高分子含有选自由羟乙基纤维素及甲基纤维素组成的组中的至少1种。
18.(4)如(1)～(3)中任一项所述的眼科用组合物，其含有k值为17以上的聚乙烯基吡咯烷酮。
19.(5)如(1)～(4)中任一项所述的眼科用组合物，其含有k值为17～90的聚乙烯基吡咯烷酮，。
20.(6)如(1)～(5)中任一项所述的眼科用组合物，其含有k值为30的聚乙烯基吡咯烷酮，。
21.(7)如(1)～(6)中任一项所述的眼科用组合物，其中，所述乙烯基系高分子的浓度为0.001％(w/v)以上。
22.(8)如(1)～(7)中任一项所述的眼科用组合物，其中，所述纤维素系高分子的浓度为0.0001～5％(w/v)。
23.(9)如(1)～(8)中任一项所述的眼科用组合物，其中，所述地夸磷索或其盐的浓度为0.0001～10％(w/v)。
24.(10)如(1)～(9)中任一项所述的眼科用组合物，其中，所述地夸磷索或其盐的浓度为0.01～5％(w/v)。
25.(11)如(1)～(10)中任一项所述的眼科用组合物，其中，所述地夸磷索或其盐的浓度为1～5％(w/v)。
26.(12)如(1)～(11)中任一项所述的眼科用组合物，其中，所述地夸磷索或其盐的浓度为3％(w/v)。
27.(13)如(1)～(12)中任一项所述的眼科用组合物，其为滴眼剂。
28.(14)如(1)～(13)中任一项所述的眼科用组合物，其为水性。
29.(15)如(1)～(14)中任一项所述的眼科用组合物，其为溶解型。
30.(16)如(1)～(15)中任一项所述的眼科用组合物，其粘度于25℃为1～500mpa
·
s。
31.(17)如(1)～(16)中任一项所述的眼科用组合物，其中，所述地夸磷索的盐为地夸磷索钠。
32.(18)如(1)～(17)中任一项所述的眼科用组合物，其用于干眼症的预防或治疗。
33.(19)如(1)～(18)中任一项所述的眼科用组合物，其特征在于，以1天1～6次、每次1～5滴的方式滴眼施予。
34.(20)如(1)～(19)中任一项所述的眼科用组合物，其特征在于，以1天2～4次、每次1～2滴的方式滴眼施予。
35.(21)如(1)～(20)中任一项所述的眼科用组合物，其特征在于，以1天3次或4次、每次1～2滴的方式滴眼施予。
36.(22)干眼症的预防或治疗剂，其含有地夸磷索或其盐、乙烯基系高分子及纤维素系高分子。
37.(23)如(22)所述的干眼症的预防或治疗剂，其特征在于，以1天3次或4次、每次1～2滴的方式滴眼施予。
38.(24)干眼症治疗用滴眼剂，其为溶解型且水性的干眼症治疗用滴眼剂，含有3％(w/v)的浓度的地夸磷索钠、羟乙基纤维素及k值为30的聚乙烯基吡咯烷酮的，所述干眼症治疗用滴眼剂的特征在于，以1天3次、每次1～2滴的方式滴眼施予。
39.(25)干眼症的治疗方法，其包括对患者施予含有地夸磷索或其盐、乙烯基系高分子及纤维素系高分子的眼科用组合物的步骤。
40.(26)眼科用组合物在用于制造用于预防或治疗干眼症的医药品中的用途，所述眼科用组合物含有地夸磷索或其盐、乙烯基系高分子及纤维素系高分子。
41.(27)眼科用组合物，其用于干眼症的预防或治疗，且含有地夸磷索或其盐、乙烯基系高分子及纤维素系高分子。
42.发明效果
43.由后述的试验结果也可知：本组合物具有高的泪液量增加作用。因此，本组合物相较于滴眼施予现有的diquas
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滴眼液的情况而言能够期待更强的干眼症治疗效果。另外，现有的diquas
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滴眼液需要1天滴眼6次，还存在因滴眼依从性(adherence)不良而不能得到预期效果的患者，而本组合物对干眼症具有充分的治疗效果，并且降低滴眼次数，可期待滴眼依从性的提高。进而，现有的diquas
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滴眼液含有浓度为3％(w/v)的地夸磷索四钠盐，本组合物可期待以更低浓度发挥相同程度或其以上的干眼症治疗效果。另外，本组合物不显示神经刺激性，因此能够改善滴眼液的舒适感。
附图说明
44.图1是表示受试药滴眼施予后的角膜荧光素染色评分的图。
45.图2是表示添加地夸磷索钠后的最大荧光强度(rfumax)的图。
具体实施方式
46.关于本发明，进行更详细地说明。
47.在本说明书中，“(w/v)％”，是指100ml的本发明的眼科用组合物中所包含的对象成分的质量(g)。
48.本说明书中，“pvp”是指聚乙烯基吡咯烷酮。
49.本说明书中，“hec”是指羟乙基纤维素。
50.本说明书中，“mc”是指甲基纤维素。
51.本说明书中，“cmc
‑
na”是指羧甲基纤维素钠。
52.本说明书中，“hpmc”是指羟丙基甲基纤维素。
[0053]“地夸磷索”为下记化学结构式所表示的化合物。
[0054]
[化学式1]
[0055][0056]
作为“地夸磷索的盐”，只要是作为医药品允许的盐，则并无特别限制，可列举与锂、钠、钾、钙、镁、锌等形成的金属盐；与盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硝酸、硫酸、磷酸等无机酸形成的盐；与乙酸、富马酸、马来酸、琥珀酸、柠檬酸、酒石酸、己二酸、葡糖酸、葡庚糖酸、葡糖醛酸、对苯二甲酸、甲磺酸、乳酸、马尿酸、1,2
‑
乙二磺酸、羟乙磺酸、乳糖酸、油酸、帕莫酸(pamoic acid)、聚半乳糖醛酸、硬脂酸、鞣酸、三氟甲磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、硫酸月桂基酯、硫酸二甲酯、萘磺酸、磺基水杨酸等有机酸形成的盐；与溴甲烷、碘甲烷等形成的季铵盐；与溴离子、氯离子、碘离子等卤素离子形成的盐；与氨形成的盐；与三亚乙基二胺、2
‑
氨基乙醇、2,2
‑
亚氨基二(乙醇)、1
‑
脱氧
‑1‑
(甲基氨基)
‑2‑
d
‑
山梨醇、2
‑
氨基
‑2‑
(羟基甲基)
‑
1,3
‑
丙二醇、普鲁卡因、n,n
‑
双(苯基甲基)
‑
1,2
‑
乙二胺等有机胺形成的盐；等等。
[0057]
本发明中，“地夸磷索或其盐”中还包含地夸磷索(游离体)或其盐的水合物及有机溶剂合物。
[0058]“地夸磷索或其盐”中存在多晶型及多晶型组(多晶型体系)的情况下，上述多晶型体及多晶型组(多晶型体系)也包含在本发明的范围内。此处所谓多晶型组(多晶型体系)，是指根据上述结晶的制备、结晶、保存等条件及状态，晶型发生变化时的各阶段中各晶型及其过程整体。
[0059]
作为本发明的“地夸磷索或其盐”，优选的是地夸磷索的钠盐，特别优选下述化学结构式所示的地夸磷索四钠盐(在本说明书中，也简称为“地夸磷索钠”)。
[0060]
[化学式2]
[0061][0062]
关于地夸磷索或其盐，可以利用日本特表2001
‑
510484号公报中公开的方法等来制造。
[0063]
本组合物还可以含有地夸磷索或其盐以外的有效成分，但优选含有地夸磷索或其盐作为唯一的有效成分。
[0064]
本发明中，地夸磷索或其盐的浓度并无特别限定，例如，优选为0.0001～10％(w/v)，更优选为0.001～5％(w/v)，进一步优选为0.01～5％(w/v)，更进一步优选为0.1～5％(w/v)，进一步优选为1～5％(w/v)，特别优选为3％(w/v)。更具体而言，优选为0.001％(w/v)、0.002％(w/v)、0.003％(w/v)、0.004％(w/v)、0.005％(w/v)、0.006％(w/v)、0.007％(w/v)、0.008％(w/v)、0.009％(w/v)、0.01％(w/v)、0.02％(w/v)、0.03％(w/v)、0.04％(w/v)、0.05％(w/v)、0.06％(w/v)、0.07％(w/v)、0.08％(w/v)、0.09％(w/v)、0.1％(w/v)、0.2％(w/v)、0.3％(w/v)、0.4％(w/v)、0.5％(w/v)、0.6％(w/v)、0.7％(w/v)、0.8％(w/v)、0.9％(w/v)、1％(w/v)、1.5％(w/v)、2％(w/v)、2.5％(w/v)、3％(w/v)、3.5％(w/v)、4％(w/v)、4.5％(w/v)或5％(w/v)。
[0065]
本发明中，“乙烯基系高分子”为将有双键的乙烯基化合物聚合而得到的合成高分子的1种。就乙烯基系高分子而言，只要作为医药品可接受，则没有特别限制，例如，可列举聚乙烯醇等乙烯醇系高分子、聚乙烯基吡咯烷酮等乙烯基吡咯烷酮系高分子、羧基乙烯基聚合物等。其中，优选聚乙烯基吡咯烷酮等乙烯基吡咯烷酮系高分子。
[0066]
另外，乙烯基系高分子的分子量没有特别限制，例如，可使用重均分子量2500～300万、优选1万～150万、更优选1万～50万，进一步优选1万～40万左右的乙烯基系高分子。
[0067]
另外，这些乙烯基系高分子可使用市售品，可使用这些化合物中的1种或组合使用2种以上。
[0068]
本发明中，乙烯基系高分子的浓度没有特别限制，例如，可以为0.001％(w/v)以上，优选0.001～10％(w/v)，更优选0.01～10％(w/v)，进一步优选0.05～10％(w/v)，更进一步优选0.1～10％(w/v)，进一步优选0.1～5％(w/v)，特别优选1～5％(w/v)。
[0069]
在本发明中，所谓聚乙烯基吡咯烷酮，是指n
‑
乙烯基
‑2‑
吡咯烷酮聚合而成的高分子化合物。本发明中所使用的聚乙烯基吡咯烷酮的k值优选为17以上，更优选为17～90，进一步优选为25～90，更进一步优选为30～90，特别优选30。可列举例如聚乙烯基吡咯烷酮k17、聚乙烯基吡咯烷酮k25、聚乙烯基吡咯烷酮k30、聚乙烯基吡咯烷酮k40、聚乙烯基吡咯
烷酮k50、聚乙烯基吡咯烷酮k60、聚乙烯基吡咯烷酮k70、聚乙烯基吡咯烷酮k80、聚乙烯基吡咯烷酮k85、聚乙烯基吡咯烷酮k90、聚乙烯基吡咯烷酮k120等。需要说明的是，聚乙烯基吡咯烷酮的k值是与分子量相关的粘性特性值，是将利用毛细管粘度计测定的相对粘度值(25℃)应用于下述的fikentscher的式(1)而算出的数值。
[0070]
[数学式1]
[0071][0072]
式(1)中，η
rel
为聚乙烯基吡咯烷酮水溶液相对于水而言的相对粘度，c是聚乙烯基吡咯烷酮水溶液中的聚乙烯基吡咯烷酮浓度(％)。
[0073]
在本发明中，聚乙烯基吡咯烷酮可以单独使用一种，另外，也可以任意地组合使用k值不同的两种以上的聚乙烯基吡咯烷酮。
[0074]
本发明中，聚乙烯基吡咯烷酮的浓度没有特别限定，例如，可以为0.001％(w/v)以上，优选0.001～10％(w/v)，更优选0.01～10％(w/v)，进一步优选0.05～10％(w/v)，更进一步优选0.1～10％(w/v)，进一步优选0.1～5％(w/v)，特别优选1～5％(w/v)。
[0075]
本组合物还含有纤维素系高分子。所谓纤维素，为d
‑
吡喃葡萄糖通过β1
→
4糖苷键连接而成的纤维状高分子。本发明中，“纤维素系高分子”为以纤维素或其衍生物为单元而构成的高分子。
[0076]
作为纤维素系高分子，只要作为医药品可接受，则没有特别限制，例如，可列举甲基纤维素、乙基纤维素、羟甲基纤维素、羟乙基纤维素、羟丙基纤维素、羟乙基甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羧甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、醋酸羟丙基甲基纤维素琥珀酸酯、羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯、羧甲基乙基纤维素、醋酸邻苯二甲酸纤维素等，优选羟乙基纤维素、甲基纤维素，更优选羟乙基纤维素。
[0077]
本发明中，纤维素系高分子可以单独使用1种，也可以任意组合使用2种以上的纤维素系高分子。
[0078]
本组合物中的纤维素系高分子的浓度没有特别限定，例如，优选0.0001～5％(w/v)，更优选0.001～3％(w/v)，进一步优选0.01～2％(w/v)，更进一步优选0.1～1％(w/v)。
[0079]
作为本组合物中使用的乙烯基系高分子与纤维素系高分子的组合，优选的是聚乙烯基吡咯烷酮与羟乙基纤维素的组合，更优选k值为30的聚乙烯基吡咯烷酮(聚乙烯基吡咯烷酮k30)与羟乙基纤维素的组合。组合使用k值为30的聚乙烯基吡咯烷酮与羟乙基纤维素的情况下，例如，k值为30的聚乙烯基吡咯烷酮的浓度优选0.1～5％(w/v)，羟乙基纤维素的浓度优选0.01～2％(w/v)。
[0080]
另外，本组合物中加入的聚乙烯基吡咯烷酮及羟乙基纤维素的量也能够使本组合物的粘度成为后述的优选范围。
[0081]
本组合物中，可含有聚乙烯基吡咯烷酮、优选k值为30的聚乙烯基吡咯烷酮作为唯一的乙烯基系高分子，含有羟乙基纤维素作为唯一的纤维素系高分子。
[0082]
在本组合物中，能够使用通用的技术并根据需要进一步添加制药学上可接受的添加剂。可以根据需要选择并添加例如：磷酸钠、磷酸氢钠、磷酸氢钠水合物、磷酸二氢钠、乙酸钠、ε
‑
氨基己酸等缓冲剂；氯化钙、氯化钠、氯化钾、浓甘油等等渗剂；依地酸钠、依地酸钠水合物等稳定剂；聚山梨酯等表面活性剂；抗坏血酸等抗氧化剂；苯扎氯铵、葡萄糖酸氯己
定等防腐剂；盐酸、氢氧化钠等ph调节剂；等等。这些添加剂可以单独使用一种，另外，也可以任意地组合使用两种以上。
[0083]
如上所述，本组合物可以含有苯扎氯铵，葡萄糖酸氯己定等的防腐剂，也可以不含防腐剂、或者实质上不含防腐剂。
[0084]
本组合物的ph只要是作为医药品可接受的范围，则不限定于特定的值。然而，本组合物的ph优选为8以下，更优选为4～8的范围，进一步优选为5～8的范围，更进一步优选为6～8的范围，特别优选为7左右。
[0085]
在本发明中，所谓“眼科用组合物”，是指用于在眼部疾病等的预防和/或治疗中使用的组合物。作为其剂型，可列举例如滴眼剂、眼软膏、注射剂、软膏(例如，能够施予至眼睑皮肤)等，优选为滴眼剂。此处，滴眼剂与滴眼液或滴眼药含义相同，隐形眼镜用滴眼剂也包含在滴眼剂的定义中。
[0086]
本组合物优选为将水作为溶剂(基剂)的水性眼科用组合物，更优选为水性滴眼剂。
[0087]
就本组合物而言，根据有效成分、添加剂的性质、含量等，可以为溶解型滴眼剂，也可以为悬浮型滴眼剂。
[0088]
就本组合物的粘度而言，只要在作为医药品可接受的范围内，则没有特别限定。以成为优选1～500mpa
·
s的范围、更优选1～100mpa
·
s的范围、进一步优选1～50mpa
·
s的范围、更进一步优选1～40mpa
·
s的范围的方式进行调节，并利用旋转粘度计(25℃；50s
‑1的剪切速度)进行测定。
[0089]
本组合物的渗透压只要在作为医药品所允许的范围内，则并不限定于特定的值。然而，本组合物的渗透压优选为2以下，更优选为0.5～2的范围，进一步优选为0.7～1.6的范围，更进一步优选为0.8～1.4的范围，特别优选为0.9～1.2。
[0090]
本组合物能够收纳于由各种原材所制造的容器中来保存。能够使用例如聚乙烯制、聚丙烯制等的容器。在本组合物为滴眼剂的情况下，收纳于滴眼容器中，更详细而言，收纳于“多剂量型滴眼容器”或“单位剂量型滴眼容器”中。
[0091]
在本发明中，所谓“多剂量型滴眼容器”，是指具备容器主体和能够安装于该容器主体的盖体的滴眼容器，并且所述滴眼容器的盖体能够自由地打开、再密封。在该多剂量型滴眼容器中收纳有通常用于在一定期间使用的多次量的滴眼液。
[0092]
另一方面，所谓“单位剂量型滴眼容器”是指出于下述目的的滴眼容器：在瓶口部熔接密封有盖体，并且在使用时使该盖体与瓶形主体的熔接部断裂打开而使用。在该单位剂量型滴眼容器中收纳有一次量或数次使用量的滴眼液。需要说明的是，通常，单位剂量型滴眼容器中收纳的滴眼液不含或者实质上不含苯扎氯铵等防腐剂。
[0093]
本组合物的用法能够根据剂型、应施予的患者的症状的轻重、年龄、体重、医生的判断等而适当变化，例如在选择滴眼剂作为剂型的情况下，能够以1次量1～5滴、优选1～3滴、更优选1～2滴、特别优选1滴的方式、1天1～6次、优选1天1～4次、更优选1天1～2次、每天～每周进行滴眼施予。更具体而言，此处滴眼次数例如优选为1天6次、1天5次、1天4次、1天3次、1天2次或1天1次，更优选为1天6次、1天4次、1天3次或1天2次，更进一步优选为1天4次或1天3次，特别优选为1天3次。
[0094]
另外，在本组合物中的地夸磷索或其盐的浓度为3％(w/v)的情况下，能够以1次量
1～5滴、优选1～3滴、更优选1～2滴、特别优选1滴的方式、1天6次、1天5次、1天4次、1天3次、1天2次或1天1次、优选1天6次、1天4次、1天3次或1天2次、更优选1天4次或1天3次、特别优选1天3次进行滴眼施予。
[0095]
另外，1滴优选为约0.1～30μl，更优选为约0.5～20μl，进一步优选为约1～15μl。
[0096]
本组合物作为干眼症的预防或治疗剂有效。干眼症定义为“因各种因素所致的泪液及角膜结膜上皮的慢性疾病，且为伴随眼不适感、视觉异常的疾病”，干燥性角膜结膜炎(kcs：keratoconjunctivitis sicca)包含在干眼症中。在本发明中，由于软性隐形眼镜的佩戴而引起的干眼症症状的产生也包含在干眼症中。
[0097]
在干眼症症状中，除眼干燥感、眼不适感、眼疲劳感、沉重感、畏光感、眼痛、视觉模糊(朦胧)等自觉症状外，还包括充血、角膜结膜上皮损伤等客观表现。
[0098]
关于干眼症的病因，不清楚的方面还很多，但报告有以下原因：休格伦氏症候群(sjogren’s syndrome)；先天性无泪腺症；结节病；因骨髓移植引起的移植物抗宿主病(gvhd：graft versus host disease)；眼天疱疮(ocular pemphigoid)；蒂芬斯
‑
强森症候群(stevens
‑
johnson syndrome)；因沙眼等引起的泪道阻塞；糖尿病；因角膜屈光矫正手术(lasik：laser(
‑
assisted)in situ keratomileusis)等引起的反射性分泌的下降；睑板腺功能不全；因眼睑炎等引起的油层减少；因眼球突出、兔眼等引起的眨眼功能损伤或眼睑闭合功能损伤；来自胚细胞的粘蛋白分泌下降；vdt(visual display terminals)作业；等等。
[0099]
另外，本组合物能够对佩戴有软性隐形眼镜的干眼症患者的眼睛进行滴眼。此处，所谓对佩戴有软性隐形眼镜的干眼症患者的眼睛进行滴眼，是指在干眼症患者的角膜上佩戴有软性隐形眼镜的状态下滴加滴眼液。
[0100]
实施例
[0101]
以下，示出药理试验的结果及制剂例，这些例子是用于更好地理解本发明，并不限定本发明的范围。
[0102]
[试验1]
[0103]
使用正常雄性白色家兔，评价本组合物滴眼后的泪液量的经时变化。
[0104]
(药物制备方法)
[0105]
滴眼液1：
[0106]
按照表1所示的处方表，制备滴眼液1(表1中，单位为g/100ml)。即，将地夸磷索钠(9g)、磷酸氢钠水合物(0.6g)、依地酸钠水合物(0.03g)及氯化钠(1.35g)溶解于灭菌纯化水，得到50ml的6倍浓厚液。另外，将6倍浓厚液10ml和灭菌纯化水5ml混合后，将pvp k30(1.2g)溶解，然后，适当添加ph调节剂，将ph调节为7，加入灭菌纯化水而制成20ml，得到3倍浓厚液。将羟乙基纤维素(15g)溶解于灭菌纯化水，使总量成为1500g，然后进行高压蒸汽灭菌(121℃，20分钟)，得到1.00％(w/w)羟乙基纤维素溶液。在1.00％(w/w)羟乙基纤维素溶液3.6g中添加3倍浓厚液4ml，加入灭菌纯化水将总量调节为12ml，然后适当添加ph调节剂，将ph调节为7，由此制备滴眼液1。
[0107]
滴眼液2：
[0108]
按照表1所示的处方表，制备滴眼液2。即，将地夸磷索钠(9g)、磷酸氢钠水合物(0.6g)、依地酸钠水合物(0.03g)及氯化钠(1.35g)溶解于灭菌纯化水，得到50ml的6倍浓厚液。另外，将6倍浓厚液10ml和灭菌纯化水5ml混合，然后，适当添加ph调节剂，将ph调节为7，
加入灭菌纯化水而制成20ml，得到3倍浓厚液。将pvp k90(4g)溶解于灭菌纯化水，使总量成为100g，然后进行高压蒸汽灭菌(121℃，20分钟)，制成4.00％(w/w)pvp k90溶液。在4.00％(w/w)pvp k90溶液6.0g中添加3倍浓厚液4ml，加入灭菌纯化水将总量调节为12ml，然后适当添加ph调节剂，将ph调节为7，由此制备滴眼液2。
[0109]
滴眼液3：
[0110]
按照表1所示的处方表，制备滴眼液3。即，将地夸磷索钠(9g)、磷酸氢钠水合物(0.6g)、依地酸钠水合物(0.03g)及氯化钠(1.35g)溶解于灭菌纯化水，得到50ml的6倍浓厚液。另外，将6倍浓厚液10ml和灭菌纯化水5ml混合后，将pvp k30(1.2g)溶解，然后，适当添加ph调节剂，将ph调节为7，加入灭菌纯化水而制成20ml，得到3倍浓厚液。在3倍浓厚液4ml中加入灭菌纯化水，将总量调节为12ml，然后适当添加ph调节剂，将调节ph为7，由此制备滴眼液3。
[0111]
滴眼液4：
[0112]
按照表1所示的处方表，制备滴眼液4。即，将地夸磷索钠(9g)、磷酸氢钠水合物(0.6g)、依地酸钠水合物(0.03g)及氯化钠(1.35g)溶解于灭菌纯化水，得到50ml的6倍浓厚液。另外，将6倍浓厚液10ml和灭菌纯化水5ml混合，然后，适当添加ph调节剂，将ph调节为7，加入灭菌纯化水而制成20ml，得到3倍浓厚液。将羟乙基纤维素(15g)溶解于1500ml的灭菌纯化水，进行高压蒸汽灭菌(121℃，20分钟)，得到1.00％(w/w)羟乙基纤维素溶液。在1.00％(w/w)羟乙基纤维素溶液3.6g中添加3倍浓厚液4ml，加入灭菌纯化水将总量调节为12ml，适当添加ph调节剂，将ph调节为7，由此制备滴眼液4。
[0113]
滴眼液5：
[0114]
按照表1所示的处方表，制备滴眼液5。即，将地夸磷索钠(9g)，磷酸氢钠水合物(0.6g)、依地酸钠水合物(0.03g)及氯化钠(1.35g)溶解于灭菌纯化水，得到50ml的6倍浓厚液。另外，将6倍浓厚液10ml和灭菌纯化水5ml混合，然后，适当添加ph调节剂，将ph调节为7，加入灭菌纯化水而制成20ml，得到3倍浓厚液。在3倍浓厚液4ml中加入灭菌纯化水，将总量调节为12ml，然后，适当添加ph调节剂，将ph调节为7，由此制备滴眼液5。
[0115]
滴眼液6：
[0116]
按照表2所示的处方表，制备滴眼液6(表2中，单位为g/100ml)。即，将地夸磷索钠(18g)、磷酸氢钠水合物(1.2g)、依地酸钠水合物(0.06g)溶解于灭菌纯化水，得到100ml的6倍浓厚液。另外，将6倍浓厚液5ml和灭菌纯化水5ml混合，然后，将pvp k25(0.9g)、氯化钠(0.135g)溶解，适当添加ph调节剂，将ph调节为7，加入灭菌纯化水而制成15ml，得到2倍浓厚液。将羟乙基纤维素(15g)溶解于灭菌纯化水，使总量成为1500g，然后进行高压蒸汽灭菌(121℃，20分钟)，得到1.00％(w/w)羟乙基纤维素溶液。在1.00％(w/w)羟乙基纤维素溶液3.75g中添加2倍浓厚液7.5ml，加入灭菌纯化水将总量调节为15ml，然后，适当添加ph调节剂，将ph调节为7，由此制备滴眼液6。
[0117]
滴眼液7：
[0118]
按照表2所示的处方表，制备滴眼液7。即，将地夸磷索钠(18g)、磷酸氢钠水合物(1.2g)、依地酸钠水合物(0.06g)溶解于灭菌纯化水，得到100ml的6倍浓厚液。另外，6倍浓厚液20ml和灭菌纯化水20ml混合，然后，将pvp k30(2.4g)、氯化钠(0.54g)溶解，适当添加ph调节剂，将ph调节为7，加入灭菌纯化水而制成60ml，得到2倍浓厚液。将羟乙基纤维素
(15g)溶解于灭菌纯化水，使总量成为1500g，然后进行高压蒸汽灭菌(121℃，20分钟)，得到1.00％(w/w)羟乙基纤维素溶液。在1.00％(w/w)羟乙基纤维素溶液25g中添加2倍浓厚液50ml，加入灭菌纯化水将总量调节为100ml，然后，适当添加ph调节剂将ph调节为7，由此制备滴眼液7。
[0119]
滴眼液8：
[0120]
根据表2所示的处方表，制备滴眼液8。即，将地夸磷索钠(18g)、磷酸氢钠水合物(1.2g)、依地酸钠水合物(0.06g)溶解于灭菌纯化水，得到100ml的6倍浓厚液。另外，将6倍浓厚液2.5ml和灭菌纯化水5ml混合，然后，将pvp k60 45％水溶液(0.67g)和氯化钠(0.068g)溶解后，适当添加ph调节剂将ph调节为7，加入灭菌纯化水而制成15ml，由此制备滴眼液8。
[0121]
滴眼液9～11：
[0122]
按照表3所示的处方表，制备滴眼液9(表3中，单位为g/100ml)。即，将地夸磷索钠(9g)、磷酸氢钠水合物(0.6g)、依地酸钠水合物(0.03g)及氯化钠(1.35g)溶解于灭菌纯化水，得到50ml的6倍浓厚液。另外，将6倍浓厚液10ml和灭菌纯化水5ml混合，然后，将pvp k30(1.2g)溶解后，适当添加ph调节剂，将ph调节为7，加入灭菌纯化水而制成20ml，得到3倍浓厚液。将甲基纤维素(2g)溶解于灭菌纯化水，使总量成为100g，然后进行高压蒸汽灭菌(121℃，20分钟)，得到2.00％(w/w)甲基纤维素溶液。在2.00％(w/w)甲基纤维素溶液3.0g中添加3倍浓厚液4ml，加入灭菌纯化水将总量调节为12ml，然后适当添加ph调节剂，将ph调节为7，由此制备滴眼液9。
[0123]
滴眼液10、11利用与滴眼液9同样的方法制备。
[0124]
需要说明的是，就所制备的滴眼液1～11的粘度而言，使用旋转粘度计kinexus pro ，以温度25℃、剪切速度50s
‑1进行测定。
[0125]
(试验方法及药物施予方法)
[0126]
对正常雄性白色家兔(合计23只46眼)滴加benoxil
(注册商标)
滴眼液0.4％(参天制药株式会社制)，实施局部麻醉。在3分钟后向下眼睑插入schirmer试纸(ayumi pharmaceutical corporation制)，在插入1分钟后将其抽出，读取所润湿的部分的长度(泪液量)。将其作为前值。接着，将各滴眼液1～11进行1次滴眼(一组4只8眼。其中，只有滴眼液5是16只32眼)。在向下眼睑插入schirmer试纸(ayumi pharmaceutical corporation制)的3分钟前，滴加benoxil
(注册商标)
滴眼液0.4％(参天制药株式会社制)，实施局部麻醉。在各滴眼液滴眼60分钟后，向下眼睑插入schirmer试纸(ayumi pharmaceutical corporation制)，在插入1分钟后将其抽出，读取所润湿的部分的长度(泪液量)。
[0127]
(评价方法)
[0128]
滴眼液滴眼前后泪液量的变化以δ泪液量(mm/分钟)算出。
[0129]
(试验结果)
[0130]
滴眼后60分钟的δ泪液量(mm/分钟)如表1～3所示(各值为8眼的平均值。其中，只有滴眼液5为32眼的平均值)。另外，本组合物的泪液量增加作用按照以下的基准进行评价。
[0131]
：滴眼后60分钟的δ泪液量(mm/分钟)为4mm/分钟以上
[0132]
：滴眼后60分钟的δ泪液量(mm/分钟)为1mm/分钟以上，低于4mm/分钟
[0133]
：滴眼后60分钟的δ泪液量(mm/分钟)超过0mm/分钟～低于1mm/分钟
[0134]
‑
：滴眼后60分钟的δ泪液量(mm/分钟)为0mm/分钟以下
[0135]
[表1]
[0136]
滴眼液12345地夸磷索钠33333pvp k302
‑2‑‑
pvp k90
‑2‑‑‑
hec0.3
‑‑
0.3
‑
磷酸氢钠水合物0.20.20.20.20.2依地酸钠水合物0.010.010.010.010.01氯化钠0.450.450.450.450.45ph调节剂q.s.q.s.q.s.q.s.q.s.ph7.07.07.07.07.0粘度(mpa
·
s)37.87.41.426.91.0滴眼后60分钟的δ泪液量(mm/分钟)4.94.40.4
‑
0.60.3评价
‑

[0137]
如上述表1的结果所示，就含有pvp k30的滴眼液(滴眼液3)而言，与不含pvp k30的滴眼液(滴眼液5)同样地未发现滴眼后60分钟泪液量增加作用。另外，通常hec也作为增稠剂使用，含有hec的滴眼液(滴眼液4)尽管具有相对高的粘度，但与滴眼液5同样地未发现滴眼后60分钟泪液量增加作用。与之相对，含有pvp k30及hec的滴眼液(滴眼液1)，令人震惊地显示出了较之滴眼液3～5而言极高的泪液量增加作用。
[0138]
[表2]
[0139]
滴眼液678地夸磷索钠333pvp k253
‑‑
pvp k30
‑2‑
pvp k60
‑‑
2hec0.250.25
‑
磷酸氢钠水合物0.20.20.2依地酸钠水合物0.010.010.01氯化钠0.450.450.45ph调节剂q.s.q.s.q.s.ph7.07.07.0粘度(mpa
·
s)23.422.43.0滴眼后60分钟的δ泪液量(mm/分钟)2.84.34.4评价
[0140]
如上述表2的结果所示，pvp的k值即使是30、以及25，含有pvp及hec的滴眼液(滴眼液6、7)也有高泪液量增加作用。
[0141]
[表3]
[0142]
滴眼液91011地夸磷索钠333pvp k30222hec
‑‑‑
mc0.5
‑‑
hpmc
‑
0.5
‑
cmc
‑
na
‑‑
0.5磷酸氢钠水合物0.20.20.2依地酸钠水合物0.010.010.01氯化钠0.450.450.45ph调节剂q.s.q.s.q.s.ph7.07.07.0粘度(mpa
·
s)10.210.56.4滴眼后60分钟的δ泪液量(mm/分钟)1.80.3
‑
0.1评价
‑
[0143]
如上述表3的结果所示，含有pvp k30及mc滴眼液(滴眼液9)具有高泪液量增加作用。另一方面，含有pvp k30及hpmc的滴眼液(滴眼液10)、含有pvp k30及cmc
‑
na的滴眼液(滴眼液11)未发现泪液量增加作用。
[0144]
[试验2]
[0145]
大鼠眼眶外泪腺切除模型作为评价由干眼症导致的角膜上皮损伤的治疗效果的模型而被广泛使用，另外，作为评价p2y2受体激动剂的治疗效果的模型也被利用(invest.ophthalmol.mis.sci.，42(1)，96
‑
100(2001))。使用该干眼症模型，研究了通过滴眼施予本组合物是否可以得到角膜上皮损伤的改善效果。
[0146]
(干眼症模型制作方法)
[0147]
使用雄性sd大鼠，按照fujihara等的方法(invest.ophthalmol.mis.sci.，42(1)，96
‑
100(2001))制作了大鼠眼眶外泪腺切除模型。即，施予戊巴比妥钠来实施全身麻醉，然后，摘除眼眶外泪腺，诱发角膜上皮损伤。
[0148]
(样品制备方法)
[0149]
滴眼液a：
[0150]
按照表4所示的处方表，制备滴眼液a(表4中，单位为g/100ml)。即，将磷酸氢钠水合物(4g)，氯化钠(9g)溶解于灭菌纯化水，使总量成为200ml，得到10倍缓冲液。另外，将地夸磷索钠(15g)溶解于灭菌纯化水，使总量成为50g，得到30％地夸磷索钠水溶液。将羟乙基纤维素(2g)溶解于灭菌纯化水，使总量成为200g，然后进行高压蒸汽灭菌(121℃，40分钟)，得到1.00％(w/w)羟乙基纤维素溶液。将灭菌纯化水50ml、10倍缓冲液20ml、30％地夸磷索钠水溶液20ml、pvp k30(4g)混合
·
溶解，使用ph调节剂将ph调节为7，然后，得到总量为100ml的2倍浓厚液。在1.00％(w/w)羟乙基纤维素溶液25g中添加2倍浓厚液50ml，加入灭菌纯化水将总量调节为100ml，然后，适当添加ph调节剂，将ph调节为7，由此制备滴眼液a。
[0151]
滴眼液b：
[0152]
按照表4所示的处方表，制备滴眼液b。即，将磷酸氢钠水合物(4g)、氯化钠(9g)溶
解于灭菌纯化水，使总量成为200ml，得到10倍缓冲液。将羟乙基纤维素(2g)溶解于灭菌纯化水，使总量成为200g，然后进行高压蒸汽灭菌(121℃，40分钟)，得到1.00％(w/w)羟乙基纤维素溶液。将灭菌纯化水50ml、10倍缓冲液20ml、氯化钠(0.76g)、pvp k30(4g)混合
·
溶解，使用ph调节剂将ph调节为7，然后，得到总量为100ml的2倍浓厚液。在1.00％(w/w)羟乙基纤维素溶液25g中添加2倍浓厚液50ml，加入灭菌纯化水将总量调节为100ml，然后，适当添加ph调节剂将调节ph为7，由此制备滴眼液b。需要说明的是，滴眼液b为滴眼液a的基剂。
[0153]
滴眼液x：
[0154]
作为滴眼液x，使用作为干眼症治疗药而使用的“diquas
(注册商标)
滴眼液3％”(参天制药株式会社制)。就滴眼液x而言，在水1ml中，作为有效成分，含有地夸磷索钠30mg，作为添加剂，含有氯化钾、氯化钠、葡萄糖酸氯己定液、磷酸氢钠水合物、依地酸钠水合物、ph调节剂。
[0155]
[表4]
[0156]
滴眼液ab地夸磷索钠3
‑
pvp k3022hec0.250.25磷酸氢钠水合物0.20.2氯化钠0.450.45ph调节剂q.s.q.s.ph77
[0157]
(试验方法及药物施予方法)
[0158]
针对诱发了上述角膜上皮损伤的大鼠，以下述方式施予滴眼液a、滴眼液b、滴眼液x。
[0159]
·
滴眼液a，1天2次施予组：将滴眼液a以两眼中1天2次滴眼4周(一组6只12眼)，
[0160]
·
滴眼液a，1天3次施予组：将滴眼液a以两眼中1天3次滴眼4周(一组6只12眼)，
[0161]
·
滴眼液a，1天4次施予组：将滴眼液a以两眼中1天4次滴眼4周(一组6只12眼)，
[0162]
·
滴眼液x，1天6次施予组：将滴眼液a以两眼中1天6次滴眼4周(一组6只12眼)，
[0163]
·
滴眼液b，1天4次施予组(基剂施予组)：将滴眼液b以两眼中1天4次滴眼4周(一组6只12眼)。
[0164]
需要说明的是，将诱发上述角膜上皮损伤的大鼠中的、4周无滴眼的大鼠作为无滴眼组(一组4只8眼)。
[0165]
滴眼开始4周后，角膜的损伤部分用荧光素染色，按照村上等的方法(新的眼科(日文：
あたらしい
眼科)，21(1)，87
‑
90(2004))来判定角膜上皮损伤。即，针对角膜的上部、中间部及下部各自，将基于荧光素染色的程度根据下述的基准进行分数判定，算出这些分数的合计平均值。需要说明的是，在0、1、2及3的各分数间设置0.5作为中间值。
[0166]
(判定基准)
[0167]
0：未被染色，
[0168]
1：染色稀疏，各点状的染色部分远离，
[0169]
2：染色为中等程度，点状的染色部分的一部分相邻，
[0170]
3：染色密集，各点状的染色部分相邻。
[0171]
(结果)
[0172]
将算出的各组的荧光素染色分数制图而示于图1。需要说明的是，分数为各8或12例的平均值 标准误差。
[0173]
由图1可知，滴眼液a的1天3次及1天4次施予组中，发现与基剂施予组(滴眼液b，1天4次施予)相比，荧光素染色分数的改善，且发现与滴眼液x的1天6次施予组同等的荧光素染色分数的改善。滴眼液x作为diquas
(注册商标)
滴眼液3％被用于干眼症的治疗，其滴眼次数为1天6次。因此，虽然存在因滴眼依从性不良而导致无法得到预期效果的患者，本组合物被期待对于干眼症有充分的治疗效果并且滴眼次数减少到1天3次或1天4次从而滴眼依从性提高。
[0174]
[试验3]
[0175]
研究了pvp共存下的地夸磷索钠对末梢神经的刺激性。
[0176]
(样品制备方法)
[0177]
处方液1：
[0178]
按照表5所示的处方表，制备处方液1(表5中，单位为g/100ml)。即，将氯化钠(8.5g)、磷酸氢钠水合物(2g)溶解于灭菌纯化水，添加ph调节剂，将ph调节为7.5，然后将总量调节为100ml，得到10倍缓冲液。将pvp k30(16g)溶解于灭菌纯化水，将总量调节为200ml，得到8％pvp k30水溶液。量取10倍缓冲液2ml、8％pvp k30水溶液5ml，使用灭菌纯化水将总量调节为20ml，使用ph调节剂将ph调节为7.5，得到处方液1。
[0179]
处方液2：
[0180]
按照表5所示的处方表，制备处方液2。即，将氯化钠(8.5g)、磷酸氢钠水合物(2g)溶解于灭菌纯化水，添加ph调节剂，将ph调节为7.5，然后将总量调节为100ml，得到10倍缓冲液。将10倍缓冲液2ml、pvp k90(0.4g)溶解于灭菌纯化水，使用ph调节剂将ph调节为7.5，得到总量为20ml的处方液2。
[0181]
处方液3：
[0182]
按照表5所示的处方表，制备处方液3。即，将氯化钠(8.5g)、磷酸氢钠水合物(2g)溶解于灭菌纯化水，添加ph调节剂，将ph调节为7.5，然后，将总量调节为100ml，得到10倍缓冲液。将pvp k30(16g)溶解于灭菌纯化水，将总量调节为200ml，得到8％pvp k30水溶液。量取10倍缓冲液4ml、8％pvp k30水溶液10ml，使用灭菌纯化水将总量调节为20ml，使用ph调节剂将ph调节为7.5，得到处方液3的2倍浓厚液。将羟乙基纤维素(1g)溶解于灭菌纯化水，使总量成为100g，然后进行高压蒸汽灭菌(121℃，25分钟)，得到1.00％(w/w)羟乙基纤维素溶液。在1.00％(w/w)羟乙基纤维素溶液6g、处方液3的2倍浓厚液10ml中加入灭菌纯化水，将总量调节为20ml。
[0183]
处方液4：
[0184]
按照表5所示的处方表，制备处方液4。即，将氯化钠(8.5g)、磷酸氢钠水合物(2g)溶解于灭菌纯化水，添加ph调节剂，将ph调节为7.5，然后将总量调节为100ml，得到10倍缓冲液。在10倍缓冲液2ml、硫酸软骨素钠(0.06g)中添加灭菌纯化水，使用ph调节剂将ph调节为7.5，确认溶解后将总量调节为20ml，得到处方液4。
[0185]
处方液5～7：
[0186]
按照表5所示的处方表，与处方液4同样地制备处方液5～7。
[0187]
[表5]
[0188] 1234567氯化钠0.850.850.850.850.850.800.85磷酸氢钠水合物0.200.200.200.200.200.200.20pvp k302.00
‑
2.00
‑‑‑‑
pvp k90
‑
2.00
‑‑‑‑‑
hec
‑‑
0.30
‑‑‑‑
硫酸软骨素钠
‑‑‑
0.30
‑‑‑
hpmc
‑‑‑‑
0.30
‑‑
cvp
‑‑‑‑‑
0.30
‑
cmc
‑
na
‑‑‑‑‑‑
0.30ph调节剂q.s.q.s.q.s.q.s.q.s.q.s.q.s.ph7.57.57.57.57.57.57.5
[0189]
(试验方法)
[0190]
将所培养的末梢神经细胞(大鼠背根神经节神经元，自lonza japan购入)在包含细胞内钙荧光指示色素的缓冲液(flipr calcium 6assay kit，molecular devices公司)中进行孵育。将缓冲液总量的40％置换成上述的各处方液。需要说明的是，在无刺激组及刺激对照组中，代替处方液而对缓冲液进行了同样地处置。在室温下静置后，使用荧光读板机(fluorescence plate reader)，开始进行钙指示色素的经时荧光测定。在开始起60秒后添加地夸磷索钠(终浓度：0.3％)，继续进行荧光强度的测定。
[0191]
(评价方法)
[0192]
将马上添加地夸磷索钠添之前的荧光强度(rfu)设为100％，算出添加后的最大荧光强度(rfumax)。
[0193]
(试验结果)
[0194]
将结果示于图2中。在刺激对照组及处方液4～7中，在添加地夸磷索钠后，rfu上升，记录到103.5％以上的rfumax。另一方面，在含有pvp的处方液1～3的各组中，rfumax均小于101％。
[0195]
(考察)
[0196]
接受了某些刺激的末梢神经细胞产生活动电位而成为兴奋状态，转化为活动电位的刺激的信号随后向中枢神经系传达。所谓活动电位，是指包含钙离子的阳离子向细胞内流入而产生的细胞膜电位变化。因此，神经细胞内钙离子浓度的上升在实验上被广泛地用作表示神经细胞的兴奋状态的指标。显示为：若使地夸磷索钠暴露于末梢神经细胞，则可观察到细胞内钙离子的荧光强度快速上升，神经细胞接受作为刺激的地夸磷索钠，变成兴奋状态。在作为比较例的不包含pvp的聚合物处方液4～7的各组中，也确认到同样的刺激应答，硫酸软骨素钠、hpmc、cvp及cmc
‑
na的各聚合物对地夸磷索钠的神经刺激性未产生任何影响。相对于此，在包含pvp的处方液1～3中，未显示出添加地夸磷索钠后的神经细胞内钙离子信号的上升。即，提示与pvp共存下的地夸磷索钠不显示神经刺激性，通过pvp的添加、pvp及hec的添加而改善了地夸磷索钠滴眼剂的舒适感。
[0197]
[制剂例]
[0198]
尽管列举制剂例来更加具体的说明本发明的药剂，本发明并非仅限定于制剂例。
[0199]
(处方例1：滴眼剂(3％(w/v))
[0200]
100ml中
[0201][0202]
在灭菌纯化水中加入地夸磷索钠及其以外的上述成分并将它们充分混合，由此可制备上述滴眼剂。
[0203]
产业上的可利用性
[0204]
本组合物具有高泪液量增加作用。因此，本组合物与将现有的diquas
(注册商标)
滴眼液进行滴眼施予的情况相比，可期待更强的干眼症治疗效果。另外，现有的diquas
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滴眼液需要1天6次滴眼，存在因滴眼依从性不良而导致无法得到预期效果的患者，而本组合物可期待对于干眼症有充分的治疗效果并且滴眼次数减少、滴眼依从性提高。此外，现有的diquas
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滴眼液虽然含有3％(w/v)浓度的地夸磷索四钠盐，而本组合物可期待能够以更低浓度来发挥同等程度或其以上的干眼症治疗效果。另外，本组合物不显示神经刺激性，可以改善滴眼液的舒适感。