检测人间充质干细胞影响T细胞增殖活性试剂盒及方法与流程

技术特征：
1.检测人间充质干细胞影响t细胞增殖活性的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括：整合了荧光素酶基因的t淋巴细胞、荧光底物和人间充质干细胞。2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述荧光素酶基因的核苷酸序列如seq id no.1所示。3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括整合了荧光素酶基因的t淋巴细胞的培养基和人间充质干细胞培养基。4.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括酶标板。5.一种检测人间充质干细胞抑制t细胞增殖能力的方法，包括以下步骤：制备携带荧光素酶基因的慢病毒，将所述携带荧光素酶基因的慢病毒感染t淋巴细胞，得到整合了荧光素酶基因的t淋巴细胞；将整合了荧光素酶基因的t淋巴细胞与人间充质干细胞共培养，加入荧光底物，测定荧光值，计算人间充质干细胞对t淋巴细胞的抑制率。6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述慢病毒包括携带荧光素酶基因的lenti-ef1a-luciferase-puro慢病毒载体。7.根据权利要求5或6所述的方法，其特征在于，所述慢病毒中还含有pgk启动子和嘌呤霉素抗性基因。8.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述整合了荧光素酶基因的t淋巴细胞与人间充质干细胞共培养的数量比为(1～10)：1。9.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述共培养包括：培养人间充质干细胞贴壁并增殖至55～65％，加入整合了荧光素酶基因的t淋巴细胞共培养96h。10.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，按照以下公式计算人间充质干细胞对t淋巴细胞的抑制率：抑制率＝[(c-a)-(d-b)]/(c-a)
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100％；其中，a为整合了荧光素酶基因的t淋巴细胞的培养基组的荧光值平均值，b为人间充质干细胞组的荧光值平均值，c为整合了荧光素酶基因的t淋巴细胞组的荧光值平均值，d为整合了荧光素酶基因的t淋巴细胞与人间充质干细胞共培养组的荧光值平均值。

技术总结
本发明涉及检测人间充质干细胞影响T细胞增殖活性试剂盒及方法，属于细胞增殖检测技术领域。本发明提供了检测人间充质干细胞影响T细胞增殖活性的试剂盒，所述试剂盒包括：整合了荧光素酶基因的T淋巴细胞、荧光底物和人间充质干细胞。本发明所述试剂盒能够更加敏感的测出MSC细胞对T细胞的增殖活性影响。测出MSC细胞对T细胞的增殖活性影响。测出MSC细胞对T细胞的增殖活性影响。


技术研发人员：王立生 孙慧燕 岳鹏升
受保护的技术使用者：北京三有利康细胞科技有限公司
技术研发日：2021.11.24
技术公布日：2022/1/21