测量复合物溶液中分析物的结合动力学的系统和方法与流程

技术特征：
1.一种定量测定分子结合相互作用的结合动力学参数的方法，所述方法包含：产生包含磁性传感器的磁性传感器装置，所述磁性传感器与包含按质量计1％或更多的包含磁性标记分子的复合物样品的分析混合物接触，以产生可检测的分子结合相互作用；从所述磁性传感器获得实时信号；以及根据所述实时信号定量测定所述分子结合相互作用的结合动力学参数。2.根据权利要求1所述的方法，其中所述复合物样品是血液样品。3.根据权利要求2所述的方法，其中所述复合物样品是全血。4.根据权利要求2所述的方法，其中所述血液样品是血浆。5.根据权利要求2所述的方法，其中所述血液样品是血清。6.根据权利要求1所述的方法，其中所述复合物样品是来自生物体的非血液流体。7.根据权利要求6所述的方法，其中来自生物体的所述非血液流体是脑脊髓液、尿液或唾液。8.根据权利要求1所述的方法，其中所述复合物样品是细胞培养物或组织样品。9.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述复合物样品从人类、灵长类动物、猴子、果蝇、大鼠、小鼠、猪或犬获得或提取。10.根据权利要求9所述的方法，其中所述复合物样品从人类获得或提取。11.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述分析混合物包含按质量计10％或更多的所述复合物样品。12.根据权利要求11所述的方法，其中所述分析混合物包含按质量计50％或更多的所述复合物样品。13.根据权利要求12所述的方法，其中所述分析混合物包含按质量计95％或更多的所述复合物样品。14.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述分析混合物包含选自以下项的一种或多种额外组分：清洗剂、防腐剂、缓冲剂、表面活性剂、乳化剂、洗涤剂、增溶剂、溶解剂和稳定剂。15.根据权利要求14所述的方法，其中所述分析混合物包含按质量计0.1％或更多的所述表面活性剂。16.根据权利要求15所述的方法，其中分析混合物包含按质量计1％或更多的所述表面活性剂。17.根据权利要求14至16中任一项所述的方法，其中所述表面活性剂是聚山梨醇酯20。18.根据权利要求14至17中任一项所述的方法，其中所述分析混合物包含缓冲剂。19.根据权利要求18所述的方法，其中所述缓冲剂包含牛血清白蛋白。20.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中根据所述实时信号测定的所述结合动力学参数与根据对照物测定的所述结合动力学参数之间的差为20倍或更少倍。21.根据权利要求20所述的方法，其中所述对照物由表面等离子体共振测定。22.根据权利要求20至21中任一项所述的方法，其中根据所述实时信号测定的所述结合动力学参数与根据所述对照物测定的所述结合动力学参数之间的差为5倍或更少倍。23.根据权利要求22所述的方法，其中根据所述实时信号测定的所述结合动力学参数
与根据所述对照物测定的所述结合动力学参数之间的差为2倍或更少倍。24.根据前述权利要求中任一项所述的方法，还包含：产生包含磁性传感器的第二磁性传感器装置，所述磁性传感器与包含按质量计1％或更少的包含所述磁性标记分子的所述复合物样品的第二分析混合物接触，以产生所述可检测的分子结合相互作用；从所述第二磁性传感器获得第二实时信号；以及根据所述第二实时信号定量测定所述分子结合相互作用的第二结合动力学参数，其中所述结合动力学参数与所述第二结合动力学参数之间的差为10倍或更少倍。25.根据权利要求24所述的方法，其中所述结合动力学参数与所述第二结合动力学参数之间的差为2倍或更少倍。26.根据前述权利要求中任一项所述的方法，还包含根据所述实时信号产生所述实时信号的平滑导数。27.根据权利要求26所述的方法，其中所述实时信号的所述平滑导数仅包含单次正负号变化。28.根据前述权利要求中任一项所述的方法，还包含根据所述实时信号产生所述实时信号的所述平滑导数的绝对值和平滑实时信号。29.根据权利要求28所述的方法，其中所述平滑实时信号不包含不连续性，其中所述不连续性位于所述实时信号的所述平滑导数的所述绝对值是所述实时信号的所述平滑导数的平均绝对值的5倍或更多倍的位置。30.根据权利要求29所述的方法，其中所述不连续性位于所述实时信号的所述平滑导数的所述绝对值是所述实时信号的所述平滑导数的所述平均绝对值的25倍或更多倍的位置。31.根据权利要求30所述的方法，其中所述不连续性位于平滑导数实时信号的所述绝对值是所述实时信号的所述平滑导数的所述平均绝对值的100倍或更多倍的位置。32.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述结合动力学参数是缔合速率常数(k
a
)。33.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述结合动力学参数是解离速率常数(k
d
)。34.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述结合动力学参数是扩散限制速率常数(k
m
)。35.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述磁性传感器包含被所述磁性标记分子特异性结合的分子，且所述产生包含将所述磁性标记分子施用于所述磁性传感器。36.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述磁性传感器包含捕获探针，其中所述捕获探针和所述磁性标记分子各自特异性结合到所述分子，并且其中所述产生包含依次将所述分子接着所述磁性标记分子施用于所述磁性传感器。37.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述磁性传感器包含捕获探针，其中所述捕获探针和所述磁性标记分子各自特异性结合到分子，并且所述产生包含产生包含所述分子和所述磁性标记分子的反应混合物，接着将所述反应混合物施用于所述磁性传感器。
38.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述磁性传感器是自旋阀传感器。39.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述磁性传感器是磁性隧道结传感器。40.一种定量测定两个或更多个相异分子结合相互作用的结合动力学参数的方法，其中每个相异分子结合相互作用包括不同磁性标记分子，所述方法包含：产生包含两个或更多个相异磁性传感器的磁性传感器装置，所述两个或更多个相异磁性传感器各自与包含按质量计1％或更多的包含磁性标记分子的复合物样品的分析混合物接触，以产生两个或更多个相异分子结合相互作用；从每个磁性传感器获得实时信号；以及根据所述实时信号定量测定所述两个或更多个相异分子结合相互作用中的每一个的结合动力学参数。41.根据权利要求40所述的方法，其中所述结合动力学参数是缔合速率常数(k
a
)。42.根据权利要求40所述的方法，其中所述结合动力学参数是解离速率常数(k
d
)。43.根据权利要求40所述的方法，其中所述结合动力学参数是扩散限制速率常数(k
m
)。44.根据权利要求40所述的方法，其中所述结合相互作用是选自由以下组成的群组的结合相互作用：核酸杂交相互作用、蛋白质-蛋白质相互作用、受体-配体相互作用、酶-底物相互作用，以及蛋白质-核酸相互作用。

技术总结
提供用于定量测定分子结合相互作用的结合动力学参数的方法，例如，其中所述测定涉及复合物样品。所述方法的实施例的方面包括：产生包括复合物样品的磁性传感器装置，包括磁性传感器，所述磁性传感器与包括磁性标记分子的分析混合物接触以产生可检测的分子结合相互作用；从所述磁性传感器获得实时信号；以及根据所述实时信号定量测定所述分子结合相互作用的结合动力学参数。还提供配置用于所述方法的系统和试剂盒。的系统和试剂盒。的系统和试剂盒。


技术研发人员：余珩 塞巴斯蒂安
受保护的技术使用者：马格雷股份有限公司
技术研发日：2020.08.05
技术公布日：2022/5/10