一种生物素标记莪术醇的合成方法

技术特征：
1.一种生物素标记莪术醇的合成方法，其特征在于，具体包括以下步骤：(1)将化合物1溶于四氢呋喃中，冰浴条件下加入氢化钠，加热回流，冷却至室温，加入化合物2，再次加热回流，冷却至室温，浓缩，纯化，得到化合物3；所述化合物1的结构式为所述化合物2为溴乙酸甲酯，结构式为所述化合物3的结构式为(2)将化合物3溶于四氢呋喃和甲醇中，室温下加入氢氧化锂水溶液，搅拌反应，调节反应液ph，萃取有机相，干燥，过滤，浓缩，得到化合物4；所述化合物4的结构式为(3)将化合物4和叔丁氧羰基乙二胺溶于二氯甲烷中，加入4-二甲氨基吡啶和1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐，搅拌反应，淬灭反应，萃取有机相，水洗，酸洗，干燥，过滤，浓缩，得到化合物5；所述化合物5的结构式为(4)将化合物5溶于二氯甲烷中，加入盐酸二氧六环溶液，搅拌反应，浓缩，得到化合物6；所述化合物6的结构式为
(5)将化合物6和生物素溶于n,n-二甲基甲酰胺中，加入4-二甲氨基吡啶和1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐，搅拌反应，纯化，得到化合物7，即为所述生物素标记莪术醇；所述化合物7的结构式为2.根据权利要求1所述的一种生物素标记莪术醇的合成方法，其特征在于，步骤(1)中，所述化合物1、四氢呋喃、氢化钠和化合物2的质量体积比为1g：50ml：508mg：1.3g。3.根据权利要求1所述的一种生物素标记莪术醇的合成方法，其特征在于，步骤(1)中，所述加热回流的时间为2h；所述再次加热回流的时间为12h；所述纯化的方法为硅胶柱；所述纯化的溶剂为石油醚和乙酸乙酯；所述石油醚和乙酸乙酯的体积比为10:1。4.根据权利要求1所述的一种生物素标记莪术醇的合成方法，其特征在于，步骤(2)中，所述化合物3、四氢呋喃、甲醇和氢氧化锂水溶液的质量体积比为500mg：10ml：10ml：2.5ml；所述氢氧化锂水溶液的浓度为2mol/l。5.根据权利要求1所述的一种生物素标记莪术醇的合成方法，其特征在于，步骤(2)中，所述搅拌反应的时间为2h；所述调节反应液ph的试剂为稀盐酸，所述稀盐酸的浓度为1mol/l，调节反应液ph＝6；所述萃取有机相的试剂为乙酸乙酯；所述干燥的试剂为无水硫酸钠。6.根据权利要求1所述的一种生物素标记莪术醇的合成方法，其特征在于，步骤(3)中，所述化合物4、叔丁氧羰基乙二胺、二氯甲烷、4-二甲氨基吡啶和1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐的质量体积比为475mg：284mg：30ml：20mg：465mg。7.根据权利要求1所述的一种生物素标记莪术醇的合成方法，其特征在于，步骤(3)中，所述搅拌反应的时间为12h；所述淬灭反应的试剂为饱和食盐水；所述萃取有机相的试剂为乙酸乙酯；所述酸洗的试剂为稀盐酸，所述稀盐酸的浓度为0.5mol/l；所述干燥的试剂为无水硫酸钠。8.根据权利要求1所述的一种生物素标记莪术醇的合成方法，其特征在于，步骤(4)中，所述化合物5、二氯甲烷和盐酸二氧六环溶液的质量体积比为350mg：10ml：10ml；所述盐酸二氧六环溶液的浓度为4mol/l；所述搅拌反应的时间为5h。9.根据权利要求1所述的一种生物素标记莪术醇的合成方法，其特征在于，步骤(5)中，所述化合物6、生物素、n,n-二甲基甲酰胺、4-二甲氨基吡啶和1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐的质量体积比为270mg：200mg：10ml：10mg：230mg。10.根据权利要求1所述的一种生物素标记莪术醇的合成方法，其特征在于，步骤(5)中，所述搅拌反应的时间为12h；所述纯化的方法为制备色谱hplc，20％-95％，流速20ml/min，0.1％tfa体系，室温。

技术总结
本发明公开了一种生物素标记莪术醇的合成方法：(1)将化合物1溶于THF中，加入NaH，加热回流，冷却后加入化合物2，加热回流，冷却，浓缩，纯化；(2)溶于THF和甲醇中，加入氢氧化锂水溶液，搅拌反应，调节反应液pH，萃取有机相，干燥，过滤，浓缩；(3)和叔丁氧羰基乙二胺溶于二氯甲烷中，加入DMAP和EDCI，搅拌反应，淬灭反应，萃取有机相，水洗，稀盐酸洗，干燥，过滤，浓缩；(4)溶于二氯甲烷中，加入盐酸二氧六环溶液，搅拌反应，浓缩；(5)和生物素溶于DMF中，加入DMAP和EDCI，搅拌反应，纯化，即得。本发明可以快速且方便的富集、纯化、检测被活性小分子标记的蛋白质，便于莪术醇后续靶点的研究。便于莪术醇后续靶点的研究。便于莪术醇后续靶点的研究。


技术研发人员：孙盼盼 孙娜 李宏全 孙耀贵 范阔海 尹伟 郑剑纲
受保护的技术使用者：山西农业大学
技术研发日：2022.02.18
技术公布日：2022/6/1