用于提供具有增强功能的免疫细胞的方法与流程

技术特征：
1.用于增强免疫细胞功能的方法，其包括：修饰所述免疫细胞以抑制选自rc3h1、rc3h2、a2ar、fas、tgfbr1和tgfbr2的至少一种基因的功能。2.用于修饰能够分化成免疫细胞的干细胞的方法，其包括：修饰所述干细胞以抑制选自rc3h1、rc3h2、a2ar、fas、tgfbr1和tgfbr2的至少一种基因的功能。3.根据权利要求2所述的方法，其还包括将所述经修饰的干细胞分化成免疫细胞，其中在所述免疫细胞中所述至少一种基因的功能被抑制。4.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其中基因功能的抑制通过基因编辑系统来实现。5.根据权利要求4所述的方法，其中所述基因编辑系统选自crispr/cas、talen和zfn。6.根据权利要求4所述的方法，其中所述基因编辑系统是包含指导rna-核酸酶复合物的crispr/cas系统。7.根据权利要求6所述的方法，其中所述指导rna靶向选自seq id no：2至seq id no：16的核苷酸序列。8.根据权利要求6所述的方法，其中所述crispr/cas系统利用选自下组的指导rna依赖性核酸酶：cpf1、cas1、cas1b、cas2、cas3、cas4、cas5、cas6、cas7、cas8、cas9、cas100、csy1、csy2、csy3、cse1、cse2、csc1、csc2、csa5、csn2、csm2、csm3、csm4、csm5、csm6、cmr1、cmr3、cmr4、cmr5、cmr6、csb1、csb2、csb3、csx17、csx14、csx10、csx16、csax、csx3、csx1、csx15、csf1、csf2、csf3和csf4。9.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述免疫细胞选自t细胞、nk细胞、nkt细胞或巨噬细胞。10.根据权利要求1或2所述的方法，其中基因功能的抑制通过降低mrna的水平或功能，任选地通过小干扰rna(sirna)、短发夹rna(shrna)、微rna(mirna)或反义核酸来实现。11.根据权利要求1或2所述的方法，其中基因功能的抑制通过降低由所述基因编码的蛋白质的水平或活性，任选地通过使用抗体或小分子来实现。12.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中通过所述方法产生的经修饰的细胞还包含编码嵌合抗原受体(car)的核酸。13.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中通过所述方法产生的经修饰的免疫细胞识别一种或更多种靶抗原。14.根据权利要求13所述的方法，其中所述靶抗原选自tag-72、cd19、cd20、cd24、cd30、cd47、叶酸受体α(frα)和bcma。15.根据权利要求1-14中任一项所述的方法，其中所述至少一种基因是rc3h1。16.根据权利要求1-14中任一项所述的方法，其中所述至少一种基因是rc3h2。17.根据权利要求1-14中任一项所述的方法，其中所述至少一种基因是a2ar。18.根据权利要求1-14中任一项所述的方法，其中所述至少一种基因是fas。19.根据权利要求1-14中任一项所述的方法，其中所述至少一种基因是tgfbr1。20.根据权利要求1-14中任一项所述的方法，其中所述至少一种基因是tgfbr2。21.免疫细胞，其通过根据权利要求1或3-20中任一项所述的方法产生，或从通过根据
权利要求2或4-20中任一项所述的方法产生的经修饰的干细胞分化。22.经修饰的免疫细胞，其中在所述经修饰的免疫细胞中至少一种基因的功能被抑制，并且其中所述至少一种基因选自rc3h1、rc3h2、a2ar、fas、tgfbr1和tgfbr2。23.根据权利要求22所述的经修饰的免疫细胞，其中基因功能的抑制是由从所述基因转录的mrna的水平或功能、或由所述基因编码的蛋白质的水平或活性的降低引起的。24.根据权利要求22所述的经修饰的免疫细胞，其中基因功能的抑制是由所述基因的核酸序列的修饰引起的。25.根据权利要求22-24中任一项所述的经修饰的免疫细胞，其中所述经修饰的免疫细胞选自t细胞、nk细胞、nkt细胞或巨噬细胞。26.根据权利要求22-25中任一项所述的经修饰的免疫细胞，其中所述经修饰的免疫细胞表达嵌合抗原受体(car)。27.根据权利要求22-26中任一项所述的经修饰的免疫细胞，其中所述经修饰的免疫细胞识别一种或更多种靶抗原。28.根据权利要求27所述的经修饰的免疫细胞，其中所述靶抗原选自tag-72、cd19、cd20、cd24、cd30、cd47、叶酸受体α(frα)和bcma。29.根据权利要求22-28中任一项所述的经修饰的免疫细胞，其中所述至少一种基因是rc3h1。30.根据权利要求22-28中任一项所述的经修饰的免疫细胞，其中所述至少一种基因是rc3h2。31.根据权利要求22-28中任一项所述的经修饰的免疫细胞，其中所述至少一种基因是a2ar。32.根据权利要求22-28中任一项所述的经修饰的免疫细胞，其中所述至少一种基因是fas。33.根据权利要求22-28中任一项所述的经修饰的免疫细胞，其中所述至少一种基因是tgfbr1。34.根据权利要求22-28中任一项所述的经修饰的免疫细胞，其中所述至少一种基因是tgfbr2。35.能够分化成免疫细胞的经修饰的干细胞，其包含至少一种基因的核酸序列的修饰，其中所述修饰抑制所述至少一种基因的功能，并且其中所述至少一种基因选自rc3h1、rc3h2、a2ar、fas、tgfbr1和tgfbr2。36.根据权利要求35所述的经修饰的干细胞，其是诱导多能干细胞。37.根据权利要求36所述的经修饰的干细胞，其中所述诱导多能干细胞是由对三种hla基因型纯合的供体细胞生成的。38.根据权利要求35-37中任一项所述的经修饰的干细胞，其还包含编码嵌合抗原受体(car)的核酸。39.根据权利要求35-38中任一项所述的经修饰的干细胞，其中所述至少一种基因是rc3h1。40.根据权利要求35-38中任一项所述的经修饰的干细胞，其中所述至少一种基因是rc3h2。
41.根据权利要求35-38中任一项所述的经修饰的干细胞，其中所述至少一种基因是a2ar。42.根据权利要求35-38中任一项所述的经修饰的干细胞，其中所述至少一种基因是fas。43.根据权利要求35-38中任一项所述的经修饰的干细胞，其中所述至少一种基因是tgfbr1。44.根据权利要求35-38中任一项所述的经修饰的干细胞，其中所述至少一种基因是tgfbr2。45.用于增强免疫细胞功能的组合物，其包含：能够编辑靶基因序列的指导rna-核酸酶复合物，其中所述指导rna靶向选自seq id no：2至seq id no：16的核苷酸序列。46.根据权利要求45所述的组合物，其中所述核酸酶包含选自下组的至少一种蛋白质：cpf1、cas1、cas1b、cas2、cas3、cas4、cas5、cas6、cas7、cas8、cas9、cas100、csy1、csy2、csy3、cse1、cse2、csc1、csc2、csa5、csn2、csm2、csm3、csm4、csm5、csm6、cmr1、cmr3、cmr4、cmr5、cmr6、csb1、csb2、csb3、csx17、csx14、csx10、csx16、csax、csx3、csx1、csx15、csf1、csf2、csf3和csf4。47.在受试者中治疗病症的方法，其包括向所述受试者施用根据权利要求21-34中任一项所述的经修饰的免疫细胞。48.根据权利要求47所述的方法，其中所述病症是癌症、感染、自身免疫病、器官纤维化或子宫内膜异位症。

技术总结
本公开内容涉及用于产生具有增强功能的免疫细胞的方法。更具体地，本文公开了一种用于增强免疫细胞功能的方法，其包括修饰免疫细胞以抑制选自RC3H1、RC3H2、A2AR、FAS、TGFBR1和TGFBR2的至少一种基因的功能。本文还公开了一种方法，其包括修饰能够分化成免疫细胞的干细胞或祖细胞以抑制选自RC3H1、RC3H2、A2AR、FAS、TGFBR1和TGFBR2的至少一种基因的功能。本文还公开了通过本发明方法制备的免疫细胞或干细胞以及免疫细胞在治疗性治疗中的用途。胞以及免疫细胞在治疗性治疗中的用途。


技术研发人员：R
受保护的技术使用者：卡瑟里克斯私人有限公司
技术研发日：2020.11.18
技术公布日：2022/7/9