一种PSD-95抑制剂、其制备方法及其用途与流程

本发明属于化学药物，具体涉及一种psd-95抑制剂、其制备方法及其用途。

背景技术：

1、突触后密度蛋白质-95(psd-95)是人类中由dlg4(大盘状同系物4(diskslargehomolog4))基因编码的蛋白质。psd-95包括三个pdz(pdz1、pdz2和pdz3)域、一个sh3域和一个经连接子区域连接的鸟苷酸激酶样域(gk)。其几乎仅位于神经元的突触后密度，并且涉及锚定突触蛋白质。其直接和间接结合配偶体(partner)包括神经连接蛋白质、神经元型一氧化氮合酶(nnos)、n-甲基-d-天冬氨酸(nmda)受体、ampa受体和钾通道。

2、psd-95通过pdz域结合nmda受体(主要是glun2a和glun2b亚单位)和nnos。使nmda受体活化产生钙离子内流，其使nnos活化，进而产生一氧化氮(no)。因此，psd-95介导nmda受体活化与no产生之间的特定关联，如果no产生持续长时间，会对细胞有害。目前通过靶向抑制psd-95可阻断nnos/psd-95/nmda受体三元复合物的形成从而减少no的释放已成为研究的热点，例如：专利cn106661126b公开一种psd-95抑制剂na-1，其通过阻断psd-95可用于治疗中风、蛛网膜下腔出血或cns创伤等；

3、专利wo2010/004003描述了通过聚乙二醇连接子(peg)连接的二聚肽配体，其同时结合psd-95的pdz1和pdz2域，以及其用于治疗缺血性脑血管的用途；

4、专利cn103533949b也公开了一种psd-95抑制剂，其公开了一种通过连接子npeg连接的二聚肽配体，用于预防和/或治疗受试者的与兴奋性毒素相关的疾病；

5、尽管现有技术中已经报道了高亲和力的psd-95抑制剂，但是仍需要与pdz1和pdz2域具有更高亲和力的psd-95抑制剂，此外，现有技术中的psd-95抑制剂还存在稳定性差、半衰期短以及活性差等问题。

技术实现思路

1、鉴于现有技术存在的问题，本技术提供一种psd-95抑制剂、其制备方法及其用途。

2、具体而言，本发明提供一种通式(i)所示的化合物：其特征在于，具有如下所示的结构：

3、

4、其中，l1为连接子；

5、l2选自z＝ietdv、ietav或iesdv；

6、所述m选自1-3的整数，所述n选自1-8的整数；所述p选自1-8的整数；所述s选自1-8的整数；与波浪线垂直的直线表示连接位点；

7、所述连接子选自-(ch2)q-、-(ch2)q-nh-(取代或未取代c1-c10烷基)-、或者-(ch2)q-nh-(取代或未取代c1-c10烷基)-c(o)-，所述q选自0-3的整数，所述取代基选自-cooh、-oh、-nh2、-sh、卤素、c1-c8烷基或c1-c8烷氧基；

8、当l2为q不为0。

9、进一步地，本发明提供一种通式(ii)所示的化合物，其特征在于：具有如下所示的结构：

10、ygrkkrrqrrr-l1-l2

11、(式ii)；

12、其中，l1为连接子；

13、l2选自z＝ietdv、ietav或iesdv；

14、所述m选自1-3的整数；n选自1-8的整数；所述p选自1-8的整数；与波浪线垂直的直线表示连接位点；

15、所述连接子选自-(ch2)q-、-(ch2)q-nh-(取代或未取代c1-c10烷基)-、或者-(ch2)q-nh-(取代或未取代c1-c10烷基)-c(o)-，所述q选自0-3的整数，所述取代基选自-cooh、-oh、-nh2、-sh、卤素、c1-c8烷基或c1-c8烷氧基；

16、当l2为q不为0。

17、作为本发明的一种优选方案，穿透肽ygrkkrrqrrr中的任意一个氨基酸均可为d-型氨基酸或者l-型氨基酸，更优选的方案：穿透肽ygrkkrrqrrr中所有的氨基酸均为d型氨基酸或者所有的氨基酸均为l型氨基酸。

18、作为本发明的一种优选方案，所述l1优选为-nh-(ch2)-、-nh-(ch2)2-、-nh-(ch2)3-、-nh-(ch2)4-、-nh-(ch2)5-、-nh-(ch2)6-、-nh-(ch2)7-、-nh-(ch2)8-、-nh-(ch2)9-、-nh-(ch2)10-、-nh-(ch2)-c(o)-、-nh-(ch2)2-c(o)-、-nh-(ch2)3-c(o)-、-nh-ch(cooh)(ch2)2-c(o)-、-nh-(ch2)4-c(o)-、-nh-(ch2)5-c(o)-、-nh-(ch2)6-c(o)-、-nh-(ch2)7-c(o)-、-nh-(ch2)8-c(o)-、-nh-(ch2)9-c(o)-、-nh-(ch2)10-c(o)-。

19、作为本发明的一种优选方案，所述烷优选c1-3烷基、c1-6烷基、c3-6烷基或c1-8烷基，更优选c1-6烷基，所述烷基具体选自甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、仲戊基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、叔戊基、1,2-二甲基丙基、异戊基、新戊基、正己基，异己基，仲己基，叔己基，新己基，2-甲基戊基，1,2-二甲基丁基，1-乙基丁基。

20、作为本发明的一种优选方案，所述烷氧基是指烷基醚自由基，优选c1-3烷氧基、c1-6烷氧基、c3-6烷氧基或c1-8烷氧基，更优选c1-6烷氧基，所述烷氧基具体选自甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、正戊氧基、仲戊氧基、1-乙基丙氧基、2-甲基丁氧基、叔戊氧基、1,2-二甲基丙氧基、异戊氧基、新戊氧基、正己氧基，异己氧基，仲己氧基，叔己氧基，新己氧基，2-甲基戊氧基，1,2-二甲基丁氧基，1-乙基丁氧基。

21、作为本发明的一种优选方案，所述卤素选自氟、氯、溴、碘。

22、作为本发明的一种优选技术方案，所述通式(i)或者通式(ii)所示的化合物选自：

23、

24、本发明进一步提供了一种药物组合物，其特征在于，包括前述通式(i)或者通式(ii)所示的化合物和一种以上药学上可接受的载体。

25、在制备用于预防和/或治疗受试者的与兴奋性毒素相关的疾病的药物中的用途。

26、本发明另一目的在于提供一种通式(i)或者通式(ii)所示的化合物在制备治疗psd-95相关疾病的药物用途，所述疾病选自中风、癫痫、cns的神经退行性疾病和cns的缺血性或创伤性损伤。

27、进一步地，本发明还提供了一种通式(i)或者通式(ii)所示的化合物的制备方法：

28、本发明的化合物可以参照常规的合成方法，例如，专利cn103533949b中公开的方法进行合成，也可采用下述的方法进行合成：

29、1)连接子ns-n[(peg)2-cooh]2的合成：将fmoc-nh-peg2-ch2ch2cooh负载到树脂上，再用含20％哌啶的dmf脱fmoc基团，然后缓加入含有邻硝基苯磺酰氯(nscl)的dcm溶液，搅拌反应，再用含三苯基膦的thf和含ho-peg2-ch2ch2cootbu的thf处理树脂，逐滴滴加偶氮二甲酸二异丙酯，震荡反应，然后用thf和dcm彻底冲洗树脂，真空干燥。用tfa/三异丙基硅烷/水处理树脂，过滤树脂，再用tfa和dcm冲洗树脂，冲洗液和滤液合并浓缩。浓缩残留溶于水/乙腈，冻干得到ns-n[(peg)2-cooh]2，连接子直接用于后续合成。

30、2)ile-glu(otbu)-thr(tbu)-asp(otbu)-val-wang resin的合成：利用预先负载的fmoc-val-wang-树脂，在偶合剂hbtu/dipea的存在下，在无水dmf溶剂中合成含树脂的肽序列ile-glu(otbu)-thr(tbu)-asp(otbu)-val-wang resin(ietdv)。

31、3)基于npeg(4)的二聚体合成：将ns-n[(peg)2-cooh]2连接子用hbtu和dipea活化并加入含ile-glu(otbu)-thr(tbu)-asp(otbu)-val-wang resin的dmf中,震荡反应。加入含dbu的dmf，然后加入含巯基乙醇的dmf，震荡反应，脱除ns保护基。沥干树脂，用dmf冲洗，再利用巯基乙醇/dbu重复处理一次，然后利用dmf、dcm、meoh和dcm连续的冲洗树脂，得到基于npeg(4)的二聚体：

32、

33、4)化合物的合成：利用npeg(4)的二聚体，偶合剂为hbtu/dipea，溶剂为无水dmf，合成含树脂的肽序列：

34、fmoc-tyr(tbu)-gly-arg(pbf)-lys(boc)-lys(boc)-arg(pbf)-arg(pbf)-gln(trt)-arg(pbf)-arg(pbf)-arg(pbf)-gaba-{n,n-di(peg2-ile-glu(otbu)-thr(tbu)-asp(otbu)-val-wang resin)}。脱fmoc保护基使用含20％哌啶的dmf溶液。将树脂中加入裂解试剂，搅拌均匀，室温搅拌反应，过滤，收集滤液，树脂再洗涤，合并滤液后减压浓缩，加入无水乙醚沉淀，减压干燥，得化合物粗品，使用高效液相色谱法对化合物粗品进行纯化。

35、为清楚起见，本文定义了在化合物的描述中所使用的通用术语。

36、除非另有说明，本文所用的下列术语和短语旨在具有下列含义。一个特定的术语或短语在没有特别定义的情况下不应该被认为是不确定的或不清楚的，而应该按照普通的含义去理解。当本文中出现商品名时，意在指代其对应的商品或其活性成分。这里所采用的术语“药学上可接受的”，是针对那些化合物、材料、组合物和/或剂型而言，它们在可靠的医学判断的范围之内，适用于与人类和动物的组织接触使用，而没有过多的毒性、刺激性、过敏性反应或其它问题或并发症，与合理的利益/风险比相称。

37、术语“d-tat”是指穿透肽ygrkkrrqrrr中所有的氨基酸均为d型；

38、术语“药学上可接受的盐”是指本发明化合物的盐，由本发明发现的具有特定取代基的化合物与药学上可接受的酸或碱制备。

39、术语“药学上可接受的载体”是指能够递送本发明有效量活性物质、不干扰活性物质的生物活性并且对宿主或者患者无毒副作用的任何制剂载体或介质，代表性的载体包括水、油、蔬菜和矿物质、膏基、洗剂基质、软膏基质等。这些基质包括悬浮剂、增粘剂、透皮促进剂等。它们的制剂为化妆品领域或局部药物领域的技术人员所周知。关于载体的其他信息，可以参考remington:the science and practice ofpharmacy,21st ed.,lippincott,williams&wilkins(2005)，该文献的内容通过引用的方式并入本文。

40、术语“赋形剂”通常是指配制有效的药物组合物所需要载体、稀释剂和/或介质。

41、针对药物或药理学活性剂而言，术语“有效量”或“治疗有效量”是指无毒的但能达到预期效果的药物或药剂的足够用量。对于本发明中的口服剂型，组合物中一种活性物质的“有效量”是指与该组合物中另一种活性物质联用时为了达到预期效果所需要的用量。有效量的确定因人而异，取决于受体的年龄和一般情况，也取决于具体的活性物质，个案中合适的有效量可以由本领域技术人员根据常规试验确定。

42、术语“活性成分”、“治疗剂”，“活性物质”或“活性剂”是指一种化学实体，它可以有效地治疗目标紊乱、疾病或病症。

43、“任选”或“任选地”指的是随后描述的事件或状况可能但不是必需出现的，并且该描述包括其中所述事件或状况发生的情况以及所述事件或状况不发生的情况。

44、本发明的化合物可以通过本领域技术人员所熟知的多种合成方法来制备，包括下面列举的具体实施方式、其与其他化学合成方法的结合所形成的实施方式以及本领域技术上人员所熟知的等同替换方式，优选的实施方式包括但不限于本发明的实施例。