分离的微生物植物乳植杆菌SNI3菌株，基于SNI3菌株的制剂，制剂在雄性脊椎动物、繁殖雄性和人类男性上的应用以有利地改变他们的行为，以降低体脂含量及提高精子数量和睾酮水平以及生产基于SNI3的制剂：粉

减少生育问题/病症。维持雄性脊椎动物和男性正常、健康的生育能力。恢复由于老化、各种环境毒物、营养不良和/或过度压力而被破坏的正常精子计数和精子品质。提升男性更年期时下降的睾酮水平。向平静、平和的方向改变雄性繁殖动物的攻击性行为。减少焦虑。减少肥胖，增加人类和脊椎动物的肌肉量。本发明的生物学背景雄性脊椎动物的生殖能力取决于雄配子(即精子)的数量，以及它们的生理特征，特别是它们的活力和受精能力。在塞尔托利氏(sertoli)细胞的帮助下，精子形成发生在睾丸的生精小管(seminiferous tubules)中。整个过程大约需要5-8周。精子的活性是由沿尿路的额外腺体的分泌物辅助的。精液的量和精子的数量根据物种的不同而不同：小鼠：950万pcs/ml；大鼠：4800万33pcs/ml；公猪：154-500ml，(100,000pcs/ml)；成年公马：30-200ml，(100,000pcs/ml)；公鸡：0.3至0.8ml(200万至350万/ml)；火鸡0.3-0.5ml((300万-600万pcs/ml)。健康的年轻人：1.5-2ml，(3,300万-3,600万pcs/ml)。在老年动物和男性中，与年轻群体相比，精子计数减少的可能性随着时间的推移而增加。研究示出，在过去的50年中，男性的精子计数减少了40％。尽管农场动物中没有发生这种剧烈减少，但用于人工授精的供体雄性动物的精液的品质和数量在动物饲养业中也很重要。提高精子计数和品质可能会减少精子供体的数量，从而增加动物维持的成本。维持和提高生育能力是宠物繁育的一个同样重要的方面。为了获得足够的后代，提高精子计数，从而提高生殖能力，对于拯救濒危物种也是至关重要的。睾酮水平(血浆/血清)：最重要的雄性激素(睾酮)是由睾丸的(间质的)莱氏细胞(leydig cell)合成的。通过作用于塞尔托利氏细胞，睾酮有助于区分正常精子和精原细胞，并参与调节男性特有的行为。实验啮齿动物的血浆睾酮水平：小鼠：1-2ng/ml；大鼠：2-2.5ng/ml；在其他物种中：公猪：4.5-815ng/ml，成年公马：1.9-2.1ng/ml，健康年轻男性：2.5-8.6ng/ml，老年男性：1.9-7.3ng/ml。在衰老的身体中维持健康的睾酮水平不仅对生殖，而且对心血管和新陈代谢健康都很重要。睾酮通过中枢神经系统对行为具有影响。普遍认为，睾酮是人类和动物体两者的主导激素。在群居生活的物种中，能够观察到亲社会(相互支持)和反社会的攻击性睾酮依赖行为。在人类和兽医学中，各种维生素制剂(维生素a、b、c、d、e)、抗氧化剂(阿魏酸、辅酶q、肉毒碱、绿茶)、微量和常量元素(fe、zn、se、cu、mn、cr)被用于提高精子计数、生存能力和生育能力。在草药中，使用了铁蒺黎(crows foot)(刺蒺藜(tribulus terrestris))、南非醉茄(aswagandha)(印度参(withan ia somnifera))和胡芦巴(fenugreek)(胡芦巴(trigonella foenum-graecum))。尽管一些制剂包含几种列出的组分，不幸的是，这种治疗不是特效的，并且不足够有效。在本发明的过程中，已经发现植物乳植杆菌sni3的组合物在提高男性生育能力/生殖表现方面有效。

背景技术：

0、现有技术

1、美国专利us2021023147(a1)描述了一种乳杆菌属菌株，它降低高血糖水平，并具有抗氧化活性。

2、加拿大出版物ca3105723(a1)，用于使用罗伊特环素(reutericycline)或其类似物来减少体重增加或诱导体重减轻。

3、wo2017223364(a1)的发明涉及从犬唾液中分离的罗伊氏乳杆菌细菌(lactobacillus reuteri bacteria)来改变受试者的体重的用途。

4、称为probio24(nutreutics有限公司)的食品补充剂(https：//probio24.nutraceutics.hu/)是一种商业上可获得的益生菌复合体，包含11种不同的益生菌菌株：嗜酸乳杆菌(lactobacillus acidophilus)、乳酸双歧杆菌(bifidobacteriumlactis)、鼠李糖乳杆菌(lactobacillus rhamnosus)、短双歧杆菌(bifidobacteriumbreve)、保加利亚乳杆菌(lactobacillus bulgaricus)、植物乳杆菌(lactobacillusplantarum)、干酪乳杆菌(lactobacillus casei)和乳酸乳杆菌(lactobacillus lactis)。

5、称为bio-kult的膳食补充剂的胶囊(https：//bio-kult.hu/)(由vitaminkosárgmbh分销)包含14种细菌菌株：(副干酪乳杆菌(lactobacillus paracasei)、植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、枯草芽孢杆菌(bacillus subtilis)、双歧双歧杆菌(bifidobacteriumbifidum)、短双歧杆菌、长双歧杆菌(bifidobacterium longum)、嗜酸乳杆菌、乳酸乳杆菌、嗜热链球菌(streptococcus thermophilus)、婴儿双歧杆菌(bifidobacteriuminfantis)、保加利亚乳杆菌、瑞士乳杆菌(lactobacillus helveticus)和唾液乳杆菌(lactobacillus salivarius)。

6、borre等人和codagone等人的出版物，微生物组是原核生物和真核生物的共生群落，它们对宿主生理具有显著效果(1，2)。

7、palleja等人报道，微生物组发现于身体-环境的界面上，构成微生物组的物种数量估计有数千种。微生物组中研究最多的部分是存在于肠道中的群落(肠道微生物组)(3)。

8、根据ghosh等人和saeedi等人的出版物，虽然乳酸杆菌只代表肠道微生物组的一小部分，但它们对宿主功能具有显著的有益影响(4，5)。

9、poutahidis等人、warda等人、thomas等人和prete等人的出版物揭示，在对宿主具有有益效果的益生菌中，最重要的属是乳杆菌属。乳酸菌通过取代有害物种对肠道功能具有深远影响。它们刺激免疫功能、粘膜免疫、具有抗肥胖作用、并产生抗炎和抗氧化代谢物(6-9)。

10、poutahidis等人、fadda等人、sheikh等人、varian等人的出版物，从过去几年来看，指出某些乳酸菌可能对男性生殖功能具有有益效果(10-13)。

11、认可

12、在我们的发明开发期间，我们的实验结果揭示，我们的细菌分离株(保藏号为ncaim(p)b110482)被称为植物乳植杆菌sni3，其具有：

13、·促进生殖(增加精子数量和睾酮水平)效果

14、·精神益生菌(psychobiotic)(抗焦虑和抗攻击性)效果

15、·以及减少体脂。

16、这种新的、复杂的并且有益的身体和行为效果已经在实验室啮齿动物模型中进行了测试。

17、根据主要权利要求的一般解决方法的描述

18、本发明涵盖了我们的细菌分离株植物乳植杆菌sni3菌株，该菌株保藏号为ncaim(p)b110482，包含植物乳植杆菌sni3菌株的制剂，以及该制剂在雄性脊椎动物、繁殖动物和男性上的应用，以改变他们的行为，将瘦体重向有利的方向改变，以减少他们的体脂、提高生殖能力、精子计数和品质，以及提高睾酮水平。

19、根据本发明的制剂的一个优选实施方案，每毫升或每克食品补充剂、饮用水、饮用果汁、饲料、食品、饲料/食品补充剂包含1×101-1011cfu(菌落形成单位)的sni3细菌。

20、该制剂优选包含活细菌菌株、热灭活细菌(heat inactivated bacterium)、细菌溶菌产物、任何细菌组分和/或代谢物。

21、本发明甚至涉及包括snl3细菌菌株的制剂/组合物的用途。该组合物的应用是为了改善雄性脊椎动物和人类男性的生殖状态，增加精子计数，减少攻击性和焦虑。

22、该组合物还可以包含草药、甘露糖或甘露低聚糖。

23、在本发明的实施方案中，组合物是作为饲料或食品补充剂的液体制剂或固体制剂，其中，固体制剂选自由粉末、片剂、咀嚼片、胶囊构成的组，以及液体制剂选自由口服液、乳剂、糖浆和乳制品构成的组。

24、在本发明的进一步的实施方案中，组合物包括以已知方式制备的、并且如果需要用加热或超声进行预处理的细菌植物乳植杆菌sni3，该组合物将利用从制药技术中常用的载体和赋形剂中选择的载体和赋形剂一起制备成药物制剂或食品补充剂。

25、我们的实验在2018-2021年之间在成年雄性c57bl6小鼠和wistar大鼠上进行。动物保持在标准的实验室条件下(温度：21±1℃；湿度：50％；光暗循环：12h黑暗和12h光照)，在实验医学研究所的动物设施的最低疾病(minimal disease，md)水平上，(lorámd研究网，匈牙利布达佩斯)。动物们自由地接受标准的啮齿动物食物。

26、植物乳植杆菌sni3菌株在37℃下在mrs(deman、rogosa和sharpe培养基)的密闭瓶中生长48h，然后将细菌培养物离心，以及将细菌在无菌饮用水中重悬浮。动物接受植物乳植杆菌sni3混悬剂四周，每天更换包含细菌溶液的瓶子。植物乳植杆菌sni3的浓度为1-5×106cfu/ml。对照组动物饮用无菌水。

27、在某些情况下，当动物饮用植物乳植杆菌sni3培养物的无细胞上清液4周后，对照组动物饮用mrs培养液。

28、在其他情况下，将植物乳植杆菌sni3细胞悬浮于生理盐水中，并且然后暴露于80℃加热1h。将热处理的细菌混合到无菌饮用水中，作为饮用流体给予动物4周。

29、在另一种情况下，植物乳植杆菌sni3细胞悬浮于生理盐水中并进行超声处理。然后细胞溶菌产物通过0.2um过滤器，并给动物饮用4周。

30、每周测量动物的体重，在处理开始前和实验结束时用echomritm对身体组成进行分析。

31、在实验结束时，执行了社会互动测试和大理石埋藏测试。动物被斩首，采集躯干血液，离心，并用elisa测定血清中的睾酮浓度。精子从附睾尾部分离并在bürker腔室中计数。测量解剖的胸腺、肾上腺、脾脏和睾丸的重量。肝脏左叶、结肠以及一个睾丸冷冻在液体n2中，结肠内容物样本冷冻在干冰中。另一个睾丸固定在福尔马林中，包埋在石蜡中以制备组织切片，用苏木精-伊红染色。

32、通过下面的实施例和与实施例相关的附图说明了活性成分的用途。

技术实现思路