一种绿原酸原位合成抗衰老抗氧化面膜及其制备方法

本发明属于化妆品领域，具体涉及一种绿原酸原位合成抗衰老抗氧化面膜及其制备方法。

背景技术：

1、绿原酸具有广泛的生物活性，现代科学对绿原酸生物活性的研究已深入到食品、保健、医药和日用化工等多个领域。绿原酸是一种重要的生物活性物质，具有抗菌、抗病毒、增高白血球、保肝利胆、抗肿瘤、降血压、降血脂、清除自由基和兴奋中枢神经系统等作用。在对皮肤的作用中，绿原酸表现出抗菌、抗病毒、抗氧化、清除自由基、抗衰老的作用。它能促进成纤维细胞胶原蛋白i的合成。绿原酸还通过抑制胶原蛋白降解和增强胶原蛋白合成来保护成纤维细胞免受uva诱导的光老化。绿原酸可以减少uva诱导的活性氧簇的积累，减轻了dna损伤并促进了细胞修复。

2、但通过对绿原酸代谢途径的研究发现，绿原酸经口服后，在血液及排泄物中检测到的主要是绿原酸的水解产物咖啡酸及其代谢物，而这些代谢物的抗氧化活性明显低于绿原酸，说明绿原酸的口服生物利用率非常低。绿原酸静脉注射后，大量的谷胱甘肽结合物表明绿原酸的烯酮双键结构具有较强的亲电子性，可与蛋白的巯基共价结合，导致过敏反应。此外，绿原酸对人有致敏作用，过量吸入含有本品的植物尘埃后，可发生气喘、皮炎等。因此，绿原酸的生理活性浓度窗口较窄，不易控制。经皮给药可以绕过肝脏的首过效应以及胃肠道的破坏，维持稳定而且相对持久的血药浓度，提高生物利用度，降低药物的毒副作用。

技术实现思路

1、有鉴于此，本发明的目的在于提供一种绿原酸原位合成抗衰老抗氧化面膜及其制备方法，该面膜能持续释放绿原酸经皮透过至真皮组织中，能够促进紫外辐照下的胶原合成，降低ros积累，修复受损细胞，并激活成纤维细胞的活力。

2、为了解决上述技术问题，本发明提供了一种绿原酸原位合成抗衰老抗氧化面膜的制备方法，包括如下步骤：

3、s1.将新鲜烟草叶经液氮研磨后，用磷酸钾缓冲液悬浮后进行超声破碎。离心收集上清液，用截留分子量为50000-70000的超滤膜脱盐，并浓缩至原体积的1/20-1/10，得到酶活为5000-8000u/ml的4-香豆酸:辅酶a连接酶酶液，加入mg-mof-74粉末和甘露醇，充分搅拌后，冻干得到4-香豆酸:辅酶a连接酶纳米颗粒，将得到的4-香豆酸:辅酶a连接酶纳米颗粒与腺苷三磷酸、咖啡酸、辅酶a、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮加入水中，搅拌混匀制得芯层纺丝液。

4、s2.将新鲜采收的金银花花瓣经液氮研磨后，用磷酸钾缓冲液悬浮后进行超声破碎。离心收集上清液，用截留分子量为40000-50000的超滤膜脱盐，并浓缩至原体积的1/5-1/3，得到酶活为2000-4000u/ml的奎尼酸o-羟基肉桂酰基转移酶酶液，加入粒径为100-200nm介孔聚多巴胺纳米粒，充分搅拌后，冻干得到奎尼酸o-羟基肉桂酰基转移酶纳米颗粒；聚多巴胺表面有很多活性位点，包括酚羟基和氨基，一方面能够提高酶的吸附量，另一方面对保持酶的稳定性，激活酶的活性有一定作用。将奎尼酸o-羟基肉桂酰基转移酶纳米颗粒、聚(d,l-丙交酯-co-乙交酯)、乙二胺四乙酸和奎尼酸加入六氟异丙醇中，搅拌混匀制得壳层纺丝液。

5、s3.壳层纺丝液与芯层纺丝液同轴电纺得到芯壳纤维膜，膜的面密度为10-15mg/cm2，即为绿原酸原位合成抗衰老抗氧化面膜。

6、优选的，步骤s1中，所述新鲜烟草叶、磷酸钾缓冲液、mg-mof-74粉末和甘露醇的投料比例为100g:(50-100)ml:(80-200)mg:(35-45)mg。

7、优选的，步骤s2中，所述新鲜金银花花瓣、磷酸钾缓冲液和介孔聚多巴胺纳米粒的投料比例为100g:(50-100)ml:(50-100)mg。

8、优选的，磷酸钾缓冲液的浓度为40-50mmol/l，ph值为6.8-7.2。

9、优选的，所述芯层纺丝液中，4-香豆酸:辅酶a连接酶纳米颗粒、腺苷三磷酸、咖啡酸、辅酶a、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮和水的投料比例为(50-150)mg:(507-760)mg:(180-270)mg:(450-500)mg:(1.6-1.8)g:(0.2-0.4)g:20ml。

10、优选的，所述壳层纺丝液中，奎尼酸o-羟基肉桂酰基转移酶纳米颗粒、聚(d,l-丙交酯-co-乙交酯)、乙二胺四乙酸、奎尼酸和六氟异丙醇的投料比例为(100-200)mg:(2.5-3.0)g:(30-50)mg:(192-288)mg:20ml。

11、优选的，步骤s3中，所述聚乙烯醇的重均分子量为60000-130000，醇解度为72-87％；聚乙烯吡咯烷酮重均分子量范围为8000-20000；聚(d,l-丙交酯-co-乙交酯)的数均分子量为7000-10000，其中乳酸与羟基乙酸的比例为90:10-70:30。

12、优选的，步骤s3中，所述同轴电纺条件为电压12-20kv、接收距离12-15cm，壳层纺丝液注射速率0.9-1.2ml/h，芯层纺丝液注射速率0.9-1.2ml/h。

13、本发明还提供了一种上述制备方法制备得到的绿原酸原位合成抗衰老抗氧化面膜。

14、与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

15、1)烟草4-香豆酸:辅酶a连接酶mg-mof-74粉末吸附固定，奎尼酸o-羟基肉桂酰基转移酶用介孔聚多巴胺纳米粒吸附固定，这些固定化载体不仅能够提高酶的载量，也能稳定酶的结构，激活酶的活性。利用固定化的烟草4-香豆酸:辅酶a连接酶和金银花奎尼酸o-羟基肉桂酰基转移酶，通过同轴电纺实现辅酶a原位再生和绿原酸的原位合成。在纤维芯层利用了mg-mof-74的结构特性，吸附4-香豆酸:辅酶a连接酶，并以mg2+为核心提供腺苷三磷酸的络合位点，提高4-香豆酸:辅酶a连接酶的催化活性，能够不断合成咖啡酰辅酶a。再通过壳层纤维的奎尼酸o-羟基肉桂酰基转移酶催化咖啡酰辅酶a与奎尼酸合成为绿原酸，进而释放出辅酶a，可以继续用于咖啡酸的活化。

16、2)由于酶催化反应的推动，绿原酸不易降解，因此原位合成的绿原酸具有高生物活性，绿原酸的产生和消耗及有效浓度更易控制。

技术特征：

1.一种绿原酸原位合成抗衰老抗氧化面膜的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤s1中，所述新鲜烟草叶、磷酸钾缓冲液、mg-mof-74粉末和甘露醇的投料比例为100g:(50-100)ml:(80-200)mg:(35-45)mg。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤s2中，所述新鲜金银花花瓣、磷酸钾缓冲液和介孔聚多巴胺纳米粒的投料比例为100g:(50-100)ml:(50-100)mg。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述磷酸钾缓冲液的浓度为40-50mmol/l，ph值为6.8-7.2。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述芯层纺丝液中，4-香豆酸:辅酶a连接酶纳米颗粒、腺苷三磷酸、咖啡酸、辅酶a、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮和水的投料比例为(50-150)mg:(507-760)mg:(180-270)mg:(450-500)mg:(1.6-1.8)g:(0.2-0.4)g:20ml。

6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述壳层纺丝液中，奎尼酸o-羟基肉桂酰基转移酶纳米颗粒、聚(d,l-丙交酯-co-乙交酯)、乙二胺四乙酸、奎尼酸和六氟异丙醇的投料比例为(100-200)mg:(2.5-3.0)g:(30-50)mg:(192-288)mg:20ml。

7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述聚乙烯醇的重均分子量为60000-130000，醇解度为72-87％；聚乙烯吡咯烷酮重均分子量范围为8000-20000；聚(d,l-丙交酯-co-乙交酯)的数均分子量为7000-10000，其中乳酸与羟基乙酸的比例为90:10-70:30。

8.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述同轴电纺的条件为：电压12-20kv，接收距离12-15cm，壳层纺丝液注射速率0.9-1.2ml/h，芯层纺丝液注射速率0.9-1.2ml/h。

9.根据权利要求1～8任一项所述制备方法制备得到绿原酸原位合成抗衰老抗氧化面膜。

技术总结本发明属于化妆品领域，公开了一种绿原酸原位合成抗衰老抗氧化面膜及其制备方法。该制备方法将来源于烟草和金银花的4‑香豆酸:辅酶A连接酶(4CL)和奎尼酸O‑羟基肉桂酰基转移酶(HCT)分别固定包埋在两种纳米颗粒上，利用芯壳纤维实现绿原酸原位合成，最终制得绿原酸原位合成抗衰老抗氧化面膜。该面膜能持续释放绿原酸经皮透过至真皮组织中，能够促进紫外辐照下的胶原合成，降低ROS积累，修复受损细胞，并激活成纤维细胞的活力。技术研发人员：李小蒙,葛彦,张玮,傅海洪,汤佳鹏受保护的技术使用者：南通大学技术研发日：技术公布日：2024/8/1