一种治疗靶向异常细胞的新颖方法，及其使用之细胞毒性细胞与流程

【】本发明涉及一种治疗对一成分(ingredient)具有抗性(resistant)、难治性(refractory)、不敏感(insensitive)、无反应性(non-responsive)或反应性不足(inadequately responsive)的靶向异常细胞(targeted abnormal cells)的方法，及其使用之细胞毒性细胞(cytotoxic cells)；更具体地涉及一种治疗对一成分具有抗性、难治性、不敏感、无反应性或反应性不足的靶向异常细胞(包括但不限于抗性细胞(resistantcells))的方法，以及其使用与该成分复合的细胞毒性细胞(cytotoxic cells complexedwith the ingredient)。

背景技术

0、背景技术：

1、细胞毒性细胞在对抗感染或肿瘤侵袭(tumour invasion)过程中发挥作用。有两种类型的细胞毒性细胞：那些参与先天或天然免疫的细胞，例如自然杀手细胞、γδt细胞和nkt细胞；以及那些参与后天性或获得性免疫的细胞，例如细胞毒性t淋巴球(rey et al.,2005。)

2、靶向异常细胞疗法是使用设计为瞄准具有独特生物标志物的异常细胞而不影响其他细胞的成分的治疗。靶向异常细胞疗法，例如癌症靶向疗法在过去的几十年中得到了发展(lupu et al.,2016)。然而，靶向异常细胞疗法仍然面临着许多挑战。第一个主要的挑战是可用于靶向异常细胞疗法的药物很少。事实上，许多成分，诸如钴妥珠单抗(codrituzumab)、索拉珠单抗(solanezumab)、bimagrumab、塔罗金单抗(tralokinumab)和巴可西珠单抗(bococizumab)显示出与异常细胞上表达的生物标志物特异性地交互作用(或结合)的巨大潜力，在第一期临床试验中取得成功，但是它们在第二/三期临床试验中被确定为无效或者没有足够的功效。换句话说，药物开发过程无法完成，并且因此所有的这些众多具有巨大潜力的成分都不能够在业界使用。

3、第二个主要挑战是抗药性。举例来说，美国食品药物管理局批准的药物(fda批准的药物)例如曲妥珠单抗(trastuzumab)或西妥昔单抗(cetuximab)当它首次被施予患者时可能是有效的，杀死靶向异常细胞并且减少靶向异常细胞的数量。然而，一段时间后，同一种药物在杀死靶向异常细胞的效率已经被证实会大幅地降低(lee m.ellis and danielj.hicklin,2009)。

4、为了解决抗药性问题，自2012年以来，人们试图提高他们对抗药性以及疾病的理解，以开发基于其他成分或其他独特的生物特征的新型靶向异常细胞疗法(bottsford-miller et al.,2012)。然而，开发一种新药从最初的想法到一完成品是一个复杂的过程，此过程可能需要长达12-15年和花费超过10亿美元(hughes et al.,2011)，而且大多数显示出巨大潜力的成分在临床试验中往往会失败。此外，即使其中一种潜在成分成功通过药物开发过程并且获得美国食品药品管理局(fda)的批准，异常细胞仍然可能对这种新药产生抗性。

5、因此，仍然迫切需要一种解决市场上几乎没有治疗药物(curative drug)能治疗靶向异常细胞问题以及解决抗药性问题的方法。本发明的发明人认为，细胞毒性细胞有解决这些问题以及被应用在特异性靶向异常细胞的细胞治疗的潜力。

6、此外，目前有效的疗法在大多数患者中受到称为『免疫抑制微环境(theimmunosuppressive microenvironment)』关键障碍的限制(david h.munn and vincenzobronte,2016)。因此，目前仍然迫切需要一种解决几乎没有治疗药物(curative drug)能治疗位于免疫抑制微环境中的异常细胞的问题。

技术实现思路

0、技术实现要素：

1、本发明的目的在于提供一种体外或体内治疗异常细胞的方法，更具体地用于治疗对当前fda批准的药物(fda-approved drugs)具有抗性、难治性、不敏感、无反应性或反应性不足的异常细胞。

2、本发明的第二个目的是提供能够治疗异常细胞的新型(novel)细胞毒性细胞，更具体地用于治疗对当前fda批准的药物(fda-approved drugs)具有抗性、难治性、不敏感、无反应性或反应性不足的异常细胞。

3、本发明的第三个目的是提供一种增加免疫细胞进入包含异常细胞的病灶中的迁移能力的方法；更具体地进入包含对当前fda批准的药物(fda-approved drugs)具有抗性、难治性、不敏感、无反应性或反应性不足的异常细胞的病灶(lesion)。

4、本发明的第四个目的是提供能够增加免疫细胞进入包含异常细胞的病灶中的迁移能力的新型细胞毒性细胞；更具体地进入包含对当前fda批准的药物(fda-approveddrugs)具有抗性、难治性、不敏感、无反应性或反应性不足的异常细胞的病灶(lesion)。

5、本发明的第五个目的是基于化学结合技术(chemical conjugation technology)提供一种与成分(ingredient)缀合(conjugated)的细胞毒性细胞，其中该成分在治疗疾病或在治疗患有疾病的个体上无效或没有足够的功效。

6、本发明的第六个目的是提供一种提高对当前fda批准的药物有抗性、难治性、不敏感、无反应性或反应性不足的个体的治疗效果的方法。

7、本发明的第七个目的是提供一种提高在第一期临床试验中取得成功，但在第二期或第三期临床试验中失败的成分有效性的方法。

8、在第一个方面，本发明提供了一种治疗疾病的方法，包括向患有疾病的个体施用有效量的效应细胞(effector cells)；该效应细胞包含一表面和复合(complexed)到效应细胞表面的靶向单元群体(population of targeting units)；其中群体中的靶向单元包含第一成分(first ingredient)；并且第一成分的特征在于：(a)它与疾病相关的异常细胞所表达的生物标志物(biological marker)表现出特异性交互作用(specificinteraction)；(b)它不是由效应细胞(effector cell)所产生的；以及(c)在临床试验结束时，它被确定为在治疗患有疾病的个体上是无效的或没有足够的功效，或者被断定为在治疗疾病上是无效的或没有足够的功效。

9、在第二个方面，本发明更进一步提供了一种增加免疫细胞进入到疾病病灶的迁移能力的方法，包括对患有疾病的个体施用有效量的效应细胞(effector cells)；该效应细胞包含一表面和复合(complexed)到效应细胞表面的靶向单元群体(population oftargeting units)；其中群体中的靶向单位包含第一成分，并且第一成分的特征在于：(a)它与位于疾病病灶的异常细胞所表达的生物标志物(biological marker)表现出特异性交互作用(specific interaction)；(b)它不是由效应细胞所产生的；(c)在临床试验结束时，它被确定为在治疗患有疾病的个体上是无效的或没有足够的功效，或者被断定为在治疗疾病上是无效的或没有足够的功效。

10、在一些实施例中，该方法系用来增加免疫细胞的迁移能力(migratory capacity)以进入患有疾病个体的病灶。

11、在第三方面，本发明更进一步提供了一种减少与疾病相关的异常细胞数量的体外(in vitro)方法，包括使与疾病相关的多个异常细胞与有效量的效应细胞接触；该效应细胞包含一表面和复合于效应细胞表面的靶向单元群体(population of targetingunits)；其中群体中的靶向单位包含第一成分(first ingredient)；并且所述第一成分的特征在于：(a)它与疾病相关的异常细胞所表达的生物标志物表现出特异性交互作用；(b)它不是由效应细胞所产生的；以及(c)它被确定为在治疗与疾病相关的异常细胞上是无效的或没有足够的功效。

12、在一些实施例中，效应细胞是细胞毒性细胞。

13、在一些实施例中，大约或超过5％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、99％或99.5％被施用于个体的细胞是包含复合到效应细胞表面的靶向单元群体的效应细胞。在一些实施例中，被施用于个体的所有细胞都是包含复合到效应细胞表面的靶向单元群体(population oftargeting units)的效应细胞。

14、在一些实施例中，个体是脊椎动物。较佳地，个体是选自哺乳类动物选自由鼠类、猿猴、人类、农场动物、运动动物、宠物以及其他哺乳类动物所组成的群组。较佳地，个体是人类。

15、在一些实施例中，效应细胞包含多于3000个靶向单元/每个细胞。在一些实施例中，群体中每个靶向单元包含至少一个第一成分。

16、在一些实施例中，效应细胞每个细胞包含至少2000、2500、3000、3500、4000、4500、5000、5500、6000、6500、7000、7500、8000、8500、9000、9500、10000、10500、11000、11500、12000、12500、13000、13500、14000、14500、15000、15500、16000、16500、17000、17500、18000、18500、19000、19500、20000、40000、60000、80000、100000、110000、120000、130000、140000、150000、170000、190000、210000、220000、230000、240000、250000、260000、270000、280000、290000、300000、320000、340000、360000、380000、400000个靶向单元。

17、在一些实施例中，效应细胞是cd16+细胞。

18、在一些实施例中，第一成分包含fc受体识别区(fc receptor recognizedregion)。

19、在一些实施例中，第一成分是抗体。较佳地，第一成分是诱导抗体依赖性细胞毒杀作用(adcc)的igg亚型单克隆抗体(monoclonal antibody of an igg subtype)；或者第一成分是其他抗体；或者第一成分包含抗原结合单元(antigen-binding unit)。

20、在一些实施例中，fc受体识别区是抗体的fc区。

21、在一些实施例中，抗体是her1、her2、her3、her4、上皮生长因子受体(egfr)、cd20、cd19、erbb2、erbb3、cd28、似胰岛素生长因子1受体(igf1r)、imc-1121、met、血管内皮生长因子(vegf)、pdgfrα、pdgfrβ、cd22、cd79b、cd32b、似胰岛素生长因子1(igf-1)、似胰岛素生长因子1受体(igf-1r)、似胰岛素生长因子2(igf-2)、opn、ang-2、血管内皮生长因子受体(vegfr)、上皮细胞粘附分子(epcam)、ror1、程式性细胞死亡-配体1(pd-l1)、血管内皮生长因子受体1(vegfr1)、血管内皮生长因子受体2(vegfr2)或血管内皮生长因子受体3(vegfr3)。在一些实施例中，效应细胞与针对下列的一个、两个或更多个的抗体复合：her1、her2、her3、her4、上皮生长因子受体(egfr)、cd20、cd19、erbb2、erbb3、cd28、似胰岛素生长因子1受体(igf1r)、imc-1121、met、血管内皮生长因子(vegf)、pdgfrα、pdgfrβ、cd22、cd79b、cd32b、似胰岛素生长因子1(igf-1)、似胰岛素生长因子1受体(igf-1r)、似胰岛素生长因子2(igf-2)、opn、ang-2、血管内皮生长因子受体(vegfr)、上皮细胞粘附分子(epcam)、ror1、程式性细胞死亡-配体1(pd-l1)、血管内皮生长因子受体1(vegfr1)、血管内皮生长因子受体2(vegfr2)、血管内皮生长因子受体3(vegfr3)(参见美国专利第10,744,207号)。

22、在一些实施例中，抗体是多克隆抗体、单克隆抗体、嵌合抗体(chimericantibody)、人源化抗体(humanized antibody)或全人类抗体(fully human antibody)。

23、在一些实施例中，第一成分不是核酸(nucleic acid)。

24、在一些实施例中，效应细胞能够介导(mediating)抗体依赖性细胞毒杀作用(antibody-dependent cell cytotoxicity，adcc)反应。

25、在一些实施例中，效应细胞能够诱导cd3+t细胞的迁移(migration)。

26、在一些实施例中，在与表达生物标志物(biological marker)的标靶细胞(targetcells)共同培养后，效应细胞表达cd107a。

27、在一些实施例中，在与表达生物标志物的标靶细胞共同培养后，效应细胞表达干扰素-γ(interferon-γ，ifn-γ)和/或肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α，tnf-α)。

28、在一些实施例中，表面是效应细胞的外表面(outer surface)。在一些实施例中，表面是效应细胞细胞膜的外表面。在一些实施例中，表面是效应细胞的膜结构(membranestructure)的外表面。

29、在一些实施例中，标靶细胞(target cells)是raji、daudi、k562、其他与液体肿瘤相关的标靶细胞、a549、sk-ov-3、bt-474、其他与固体肿瘤相关的标靶细胞，或其他与疾病相关的标靶细胞。

30、在一些实施方式中，该第一成分是fda批准用来治疗疾病的成分。

31、在一些实施方式中，该第一成分是利妥昔单抗(rituximab)、曲妥珠单抗(trastuzumab)、西妥昔单抗(cetuximab)、阿仑单抗(alemtuzumab)、阿维鲁单抗(avelumab)、达雷木单抗(daratumumab)、埃洛妥珠单抗(elotuzumab)、奥妥珠单抗(obinutuzumab)、沃斯妥珠单抗(vorsetuzumab)、库沙珠单抗(cusatuzumab)、德瓦鲁单抗(durvalumab)、帕尼单抗(panitumumab)或阿玛西单抗(amatuzimab)。

32、在一些实施例中，该第一成分已经在第一期临床试验中取得成功但不是fda批准的用来治疗疾病的成分。

33、在一些实施例中，『在第一期临床试验中成功但不是fda批准的用来治疗疾病的成分的第一成分』是一种在第一期临床试验中取得成功但是因为在第二/三期临床试验中被确定为是无效的或没有足够的功效，所以未被fda批准用来治疗该疾病的成分。例如钴妥珠单抗(codrituzumab)是一种在第一期临床试验中取得成功，但不是fda批准的用来治疗疾病的成分的第一成分。

34、在一些实施例中，该第一成分是钴妥珠单抗(codrituzumab)、索拉珠单抗(solanezumab)、bimagrumab、塔罗金单抗(traklokinumab)或巴可西珠单抗(bococizumab)。

35、在一些实施例中，被施用于个体的效应细胞源于自体的(autologous)效应细胞或同种异体的(allogeneic)效应细胞。

36、在一些实施例中，效应细胞是自体的效应细胞。在一些其他实施例中，效应细胞源自同种异体的个体，并且因此是同种异体的效应细胞。在自体的细胞治疗中，患者接受源自他们自己身体的自体效应细胞。在同种异体的细胞治疗中，患者接受源自非该患者的捐赠者(同种异体的个体)的同种异体效应细胞。

37、在一些实施例中，该方法包括(a)取得一群自体效应细胞或同种异体的效应细胞；(b)将一个或更多个第一成分复合(complexing)到自体效应细胞或同种异体的效应细胞；并且(c)将来自步骤(b)经复合的细胞施用于个体，从而治疗该个体的疾病。在一些实施例中，步骤(a)至(c)在24小时内完成。在一些实施例中，来自步骤(b)经复合的细胞(效应细胞)是在施用前未诱导(inducing)细胞扩增(cell expansion)的情况下被施用。

38、在一些实施例中，该疾病选自由过度增生的疾病(hyperproliferativediseases)、末期疾病(advanced stage disease)、hiv或其他病毒感染性疾病、真菌感染性疾病(fungiinfectious diseases)、细菌感染性疾病(bacteria infectious diseases)、原虫感染性疾病(protozoan infectious diseases)、自身免疫性疾病(autoimmunediseases)、神经元疾病(neuronal diseases)、造血细胞相关的疾病(hematopoieticcell-related diseases)、代谢综合症(metabolic syndromes)和致病性疾病(pathogenicdiseases)所组成的群组。

39、在一些实施例中，该疾病是选自由固体肿瘤和液体肿瘤所组成的群组的过度增生的或末期的疾病。

40、在一些实施例中，过度增生的疾病是癌症、固体肿瘤或异体肿瘤的一种包括棘皮瘤(acanthoma)、腺细胞癌(acinic cell carcinoma)、听神经瘤(acousticneuroma)、肢端小痣性黑色素瘤(acral lentiginous melanoma)、汗腺顶端汗腺瘤(acrospiroma)、急性嗜酸性粒细胞白血病(acute eosinophilicleukemia)、急性淋巴母细胞白血病(acutelymphoblastic leukemia)、急性巨核母细胞白血病(acute megakaryoblasticleukemia)、急性单核细胞白血病(acute monocytic leukemia)、急性成熟骨髓芽球性白血病(acutemyeloblastic leukemia with maturation)、急性髓源型树突状细胞白血病(acute myeloid dendritic cell leukemia)、急性骨髓性白血病(acute myeloidleukemia)、急性前髓细胞白血病(acute promyelocytic leukemia)、牙釉母细胞瘤(adamantinoma)、腺癌(adenocarcinoma)、腺样囊状癌(adenoid cysticcarcinoma)、腺瘤(adenoma)、牙源性腺瘤样肿瘤(adenomatoid odontogenictumor)、肾上腺皮质癌(adrenocortical carcinoma)、成人型t细胞白血病(adult t-cell leukemia)、侵略性nk细胞白血病(aggressive nk-cellleukemia)、爱滋病相关癌症(aids-related cancers)、爱滋病相关淋巴瘤(aids-related lymphoma)、肺泡状软组织肉瘤(alveolar soft partsarcoma)、造釉细胞性纤维瘤(ameloblastic fibroma)、肛门癌(anal cancer)、间变性大细胞淋巴瘤(anaplastic large cell lymphoma)、甲状腺未分化癌(anaplasticthyroidcancer)、血管免疫芽细胞性t细胞淋巴瘤(angioimmunoblastic t-celllymphoma)、血管平滑肌脂肪瘤(angiomyolipoma)、血管肉瘤(angiosarcoma)、阑尾癌(appendix cancer)、星状细胞瘤(astrocytoma)、非典型畸胎/类横纹肌细胞瘤(atypical teratoid rhabdoidtumor)、基底细胞癌(basal cell carcinoma)、类基底细胞癌(basal-like carcinoma)、b细胞白血病(b-cell leukemia)、b细胞淋巴瘤(b-cell lymphoma)、bellini集合管癌(belliniduct carcinoma)、胆道癌(biliary tract cancer)、膀胱癌(bladder cancer)、胚细胞瘤(blastoma)、骨癌(bone cancer)、骨肿瘤(bone tumor)、脑干胶质瘤(brain stemglioma)、脑瘤(brain tumor)、乳癌(breast cancer)、布伦内罗氏瘤(brenner tumor)、支气管肿瘤(bronchial tumor)、支气管肺泡腺癌(bronchioloalveolar carcinoma)、棕色瘤(brown tumor)、伯基特氏淋巴瘤(burkitt’s lymphoma)、原发部位不明的癌(cancer ofunknown primarysite)、类癌瘤(carcinoid tumor)、癌(carcinoma)、原位癌(carcinomain situ)、阴茎癌(carcinoma of the penis)、原发部位不明转移癌(carcinoma ofunknown primary site)、癌肉瘤(carcinosarcoma)、castleman氏病(castleman’sdisease)、中枢神经系统胚胎性肿瘤(central nervoussystem embryonal tumor)、小脑星状细胞瘤(cerebellar astrocytoma)、大脑星状细胞瘤(cerebral astrocytoma)、子宫颈癌(cervical cancer)、胆管癌(cholangiocarcinoma)、软骨癌(chondroma)、软骨肉瘤(chondrosarcoma)、脊索瘤(chordoma)、绒毛膜癌(choriocarcinoma)、脉络丛乳头状瘤(choroidplexus papilloma)、慢性淋巴性白血病(chronic lymphocytic leukemia)、慢性单核细胞白血病(chronic monocytic leukemia)、慢性粒细胞性白血病(chronicmyelogenous leukemia)、慢性骨髓增生性疾病(chronicmyeloproliferative disorder)、慢性嗜中性白血病(chronic neutrophilicleukemia)、透明细胞肿瘤(clear-celltumor)、大肠癌(colon cancer)、大肠直肠癌(colorectal cancer)、颅咽管瘤(craniopharyngioma)、皮肤t细胞淋巴瘤(cutaneous t-cell lymphoma)、degos氏病(degos disease)、隆突性皮肤纤维肉瘤(dermatofibrosarcoma protuberans)、皮样囊肿(dermoid cyst)、结缔组织增生性小圆细胞肿瘤(desmoplastic small round celltumor)、弥漫型大b细胞淋巴瘤(diffuse large b cell lymphoma)、胚胎发育不良性神经上皮肿瘤(dysembryoplastic neuroepithelial tumor)、胚胎性癌(embryonalcarcinoma)、内胚窦瘤(endodermal sinus tumor)、子宫内膜癌(endometrial cancer)、子宫内膜癌(endometrial uterine cancer)、子宫内膜样瘤(endometrioid tumor)、肠道t细胞淋巴瘤(enteropathy-associated t-cell lymphoma)、室管膜母细胞瘤(ependymoblastoma)、室管膜瘤(ependymoma)、上皮样肉瘤(epithelioidsarcoma)、红血球性白血病(erythroleukemia)、食道癌(esophageal cancer)、敏感性神经胚细胞瘤(esthesioneuroblastoma)、ewing氏家族肿瘤(ewing family of tumor)、ewing氏家族肉瘤(ewing family sarcoma)、ewing氏肉瘤(ewing’s sarcoma)、生殖细胞瘤(extracranialgerm cell tumor)、性腺外生殖细胞瘤(extragonadal germ cell tumor)、肝外胆管癌(extrahepatic bile duct cancer)、乳房外paget氏病(extramammary paget’sdisease)、输卵管癌(fallopian tube cancer)、胎内胎(fetus in fetu)、纤维瘤(fibroma)、纤维肉瘤(fibrosarcoma)、滤泡性淋巴瘤(follicular lymphoma)、滤泡性甲状腺癌(follicular thyroid cancer)、胆囊癌(gallbladder cancer)、胆囊癌(gallbladdercancer)、神经节胶质细胞瘤(ganglioglioma)、神经节细胞瘤(ganglioneuroma)、胃癌(gastric cancer)、胃淋巴癌(gastric lymphoma)、肠胃道癌(gastrointestinalcancer)、胃肠道类癌肿瘤(gastrointestinal carcinoid tumor)、胃肠道间质肿瘤(gastrointestinal stromal tumor)、胃肠道间质肿瘤(gastrointestinal stromaltumor)、生殖细胞瘤(germ cell tumor)、胚细胞瘤(germinoma)、妊娠性绒毛膜癌(gestational choriocarcinoma)、妊娠性滋养细胞肿瘤(gestational trophoblastictumor)、骨巨细胞瘤(giant cell tumor of bone)、多形性神经胶质母细胞瘤(glioblastoma multiforme)、神经胶质瘤(glioma)、大脑神经胶瘤病(gliomatosiscerebri)、球状血管瘤(glomus tumor)、升糖素瘤(glucagonoma)、性腺胚瘤(gonadoblastoma)、颗粒层细胞瘤(granulosa cell tumor)、毛细胞白血病(hairy cellleukemia)、毛细胞白血病(hairy cell leukemia)、头颈癌(head and neck cancer)、头颈癌(head andneck cancer)、心脏癌(heart cancer)、血管母细胞瘤(hemangioblastoma)、血管外皮细胞瘤(hemangiopericytoma)、血管肉瘤(hemangiosarcoma)、血液恶性肿瘤(hematological malignancy)、肝细胞癌(hepatocellular carcinoma)、肝脾t细胞淋巴癌(hepatosplenic t-cell lymphoma)、遗传性乳癌与卵巢癌症候群(hereditary breast-ovarian cancer syndrome)、何杰金氏淋巴瘤(hodgkinlymphoma)、何杰金氏淋巴瘤(hodgkin’s lymphoma)、下咽癌(hypopharyngeal cancer)、下视丘脑神经胶质瘤(hypothalamic glioma)、炎性乳腺癌(inflammatory breast cancer)、眼球内黑色素瘤(intraocular melanoma)、胰岛细胞癌(islet cell carcinoma)、胰岛细胞瘤(islet celltumor)、少年性骨髓单核球白血病(juvenile myelomonocytic leukemia)、卡波西氏肉瘤(kaposi sarcoma)、卡波西氏肉瘤(kaposi’s sarcoma)、肾癌(kidney cancer)、肝门部胆管肿瘤(klatskin tumor)、卵巢克鲁根勃氏瘤(krukenberg tumor)、喉癌(laryngealcancer)、喉癌(laryngeal cancer)、恶性雀斑样黑色素瘤(lentigo maligna melanoma)、白血病(leukemia)、嘴唇及口腔癌症(lip and oral cavity cancer)、脂肪肉瘤(liposarcoma)、肺癌(lung cancer)、黄体瘤(luteoma)、淋巴管瘤(lymphangioma)、淋巴管肉瘤(lymphangiosarcoma)、淋巴上皮瘤(lymphoepithelioma)、淋巴细胞性白血病(lymphoid leukemia)、淋巴瘤(lymphoma)、巨球蛋白血症(macroglobulinemia)、恶性纤维组织细胞瘤(malignant fibrous histiocytoma)、恶性纤维组织细胞瘤(malignantfibrous histiocytoma)、恶性骨纤维组织细胞瘤(malignant fibrous histiocytoma ofbone)、恶性神经胶质瘤(malignant glioma)、恶性间皮瘤(malignant mesothelioma)、恶性周边神经鞘瘤(malignant peripheral nerve sheath tumor)、恶性横纹肌瘤(malignant rhabdoid tumor)、恶性蝾螈瘤(malignanttriton tumor)、粘膜相关淋巴组织淋巴瘤(malt lymphoma)、被套细胞淋巴瘤(mantle cell lymphoma)、肥胖细胞白血病(mast cell leukemia)、纵隔腔生殖细胞瘤(mediastinal germ cell tumor)、纵隔腔肿瘤(mediastinal tumor)、髓质性甲状腺癌(medullary thyroid cancer)、神经管胚细胞癌(medulloblastoma)、髓上皮瘤(medulloepithelioma)、黑色素瘤(melanoma)、脑脊髓膜瘤(meningioma)、merkel氏细胞瘤(merkel cellcarcinoma)、间皮瘤(mesothelioma)、原发不明鳞状细胞癌之颈部转移(metastatic squamous neck cancer with occult primary)、转移性尿路上皮癌(metastatic urothelial carcinoma)、混合米勒氏肿瘤(mixedmullerian tumor)、单核球白血病(monocytic leukemia)、口癌(mouth cancer)、黏液素癌(mucinous tumor)、多发性内分泌肿瘤症候群(multiple endocrine neoplasiasyndrome)、多发性骨髓瘤(multiple myeloma)、多发性骨髓瘤(multiple myeloma)、蕈状肉芽肿(mycosis fungoides)、蕈状肉芽肿(mycosis fungoides)、骨髓发育不良疾病(myelodysplastic disease)、骨髓发育不良症候群(myelodysplastic syndromes)、骨髓性白血病(myeloidleukemia)、骨髓性肉瘤(myeloid sarcoma)、骨髓增生性疾病(myeloproliferative disease)、黏液瘤(myxoma)、鼻腔癌(nasal cavity cancer)、鼻咽癌(nasopharyngeal cancer)、鼻咽癌(nasopharyngealcarcinoma)、肿瘤(neoplasm)、神经鞘瘤(neurinoma)、神经母细胞瘤(neuroblastoma)、神经母细胞瘤(neuroblastoma)、神经纤维瘤(neurofibroma)、神经瘤(neuroma)、结节性恶性黑色素瘤(nodular melanoma)、非何杰金氏淋巴瘤(non-hodgkin lymphoma)、非何杰金氏淋巴瘤(non-hodgkin lymphoma)、非黑色素瘤的皮肤癌(non melanoma skincancer)、非小细胞肺癌(non-small cell lungcancer)、眼部肿瘤(ocularoncology)、寡星状细胞瘤(oligoastrocytoma)、寡树突神经胶质瘤(oligodendroglioma)、嗜酸细胞瘤(oncocytoma)、视神经鞘脑膜瘤(opticnervesheath meningioma)、口腔癌(oral cancer)、口腔癌(oral cancer)、口咽癌(oropharyngeal cancer)、骨肉瘤(osteosarcoma)、卵巢癌(ovariancancer)、卵巢癌(ovarian cancer)、卵巢上皮癌(ovarian epithelial cancer)、卵巢生殖细胞肿瘤(ovarian germ cell tumor)、卵巢低恶性瘤(ovarian lowmalignant potential tumor)、乳腺博德氏paget疾病(paget’s disease of thebreast)、肺上沟癌(pancoast tumor)、胰脏癌(pancreatic cancer)、胰脏癌(pancreatic cancer)、乳头状甲状腺癌(papillarythyroid cancer)、乳突瘤病(papillomatosis)、副神经节瘤(paraganglioma)、鼻窦癌(paranasal sinuscancer)、副甲状腺癌(parathyroid cancer)、阴茎癌(penile cancer)、血管周围上皮样细胞瘤(perivascular epithelioid cell tumor)、咽癌(pharyngealcancer)、嗜铬细胞瘤(pheochromocytoma)、中分化松果体实质肿瘤(pinealparenchymal tumor of intermediate differentiation)、松果体母细胞瘤(pineoblastoma)、垂体细胞瘤(pituicytoma)、垂体腺瘤(pituitary adenoma)、脑下垂体瘤(pituitary tumor)、浆细胞肿瘤(plasma cell neoplasm)、胸膜肺母细胞瘤(pleuropulmonary blastoma)、多胚瘤(polyembryoma)、前体t淋巴母细胞淋巴瘤(precursor t-lymphoblastic lymphoma)、原发性中枢神经系统淋巴瘤(primary centralnervous system lymphoma)、原发性渗出液淋巴瘤(primary effusion lymphoma)、原发性肝细胞癌(primary hepatocellular cancer)、原发性肝癌(primary liver cancer)、原发性腹膜癌(primary peritoneal cancer)、原始神经外胚层肿瘤(primitiveneuroectodermal tumor)、前列腺癌(prostate cancer)、腹膜假黏液瘤(pseudomyxomaperitonei)、直肠癌(rectal cancer)、肾细胞癌(renal cell carcinoma)、与在第15号染色体上nut基因相关的呼吸道癌(respiratory tract carcinoma involving the nutgene on chromosome15)、视网膜母细胞瘤(retinoblastoma)、横纹肌瘤(rhabdomyoma)、横纹肌肉瘤(rhabdomyosarcoma)、richter转化(richter’s transformation)、荐椎尾骨畸胎瘤(sacrococcygeal teratoma)、唾液腺癌(salivary gland cancer)、肉瘤(sarcoma)、许旺氏细胞瘤(schwannomatosis)、皮脂腺癌(sebaceous glandcarcinoma)、继发性肿瘤(secondary neoplasm)、精原细胞瘤(seminoma)、浆液性肿瘤(serous tumor)、支持间质细胞瘤(sertoli-leydig cell tumor)、性索基质细胞瘤(sex cord-stromal tumor)、sezary症候群(sezary syndrome)、印戒细胞癌(signet ring cell carcinoma)、皮肤癌(skincancer)、小蓝圆细胞肿瘤(small blue round cell tumor)、小细胞癌(small cellcarcinoma)、小细胞肺癌(small cell lung cancer)、小细胞淋巴癌(small celllymphoma)、小肠癌(small intestine cancer)、软组织肉瘤(soft tissue sarcoma)、体抑素瘤(somatostatinoma)、煤烟疣(soot wart)、脊髓肿瘤(spinal cord tumor)、脊髓肿瘤(spinal tumor)、脾脏缘带淋巴瘤(splenic marginal zone lymphoma)、鳞状上皮细胞瘤(squamous cell carcinoma)、胃癌(stomach cancer)、表浅散播型黑色素瘤(superficialspreading melanoma)、小脑幕上原始神经外胚层肿瘤(supratentorial primitiveneuroectodermal tumor)、表面上皮间质肿瘤(surface epithelial-stromal tumor)、滑膜肉瘤(synovial sarcoma)、t细胞急性淋巴性白血病(t-cell acute lymphoblasticleukemia)、t细胞大颗粒淋巴球白血病(t-cell large granular lymphocyte leukemia)、t细胞白血病(t-cellleukemia)、t细胞淋巴瘤(t-cell lymphoma)、t细胞前淋巴球白血病(t-cellprolymphocytic leukemia)、畸胎瘤(teratoma)、末期淋巴癌(terminallymphaticcancer)、睪丸癌(testicular cancer)、鞘细胞瘤(thecoma)、咽喉癌(throat cancer)、胸腺癌(thymic carcinoma)、胸腺瘤(thymoma)、甲状腺癌(thyroid cancer)、肾盂和输尿管的移行上皮细胞癌(transitional cellcancer of renal pelvis and ureter)、移行上皮细胞癌(transitional cellcarcinoma)、脐尿管癌(urachal cancer)、尿道癌(urethralcancer)、泌尿生殖肿瘤(urogenital neoplasm)、子宫肉瘤(uterine sarcoma)、葡萄膜黑色素瘤(uveal melanoma)、阴道癌(vaginal cancer)、瓦-马二氏症(vernermorrisonsyndrome)、疣状癌(verrucous carcinoma)、视觉通路神经胶质瘤(visualpathway glioma)、阴门癌(vulvar cancer)、瓦登斯特隆巨球蛋白血症(waldenstrom’s macroglobulinemia)、沃辛瘤(warthin’stumor)、威尔姆斯肿瘤(wilms’tumor)及其组合中的至少一者。在一些实施例中，所靶向的癌症细胞代表癌症细胞群内的子群体(subpopulation)，例如癌症干细胞。在一些实施例中，癌症属于造血群系(hematopoietic lineage)，例如淋巴瘤(lymphoma)(参见美国专利第10,744,207号)。

41、在一些实施例中，hiv或其他病毒感染性疾病是由病毒感染引起的。需要刺激保护性免疫反应的传染性病毒的实例包括：逆转录病毒科(例如人类免疫缺乏病毒，例如人类免疫缺陷病毒第一型(hiv-1)(也称为第三型人类t细胞白血球病毒(htlv-111)、淋巴腺病相关病毒(lav)或者第三型人类t细胞白血球病毒/淋巴腺病相关病毒(htlv-iii/lav)、或者hiv-iii；以及其他分离株，例如hiv-lp；小核糖核酸病毒科(picornaviridae)(例如小儿麻痹病毒(polio viruses)、a型肝炎病毒(hepatitis a virus)；肠病毒(enteroviruses)、人类柯沙奇病毒(human coxsackie viruses)、鼻病毒(rhinoviruses)、埃可病毒(echoviruses))；杯状病毒科(calciviridae)(例如引起肠胃炎的病毒株)；披衣病毒科(togaviridae)(例如马脑炎病毒(equine encephalitis viruses)、德国麻疹病毒(rubella viruses))；黄热病毒科(flaviridae)(例如登革热病毒(dengue viruses)、脑炎病毒(encephalitis viruses)、黄热病毒)；冠状病毒科(例如冠状病毒)；杆状病毒科(rhabdoviridae)(例如水泡性口炎病毒(vesicular stomatitis viruses)、狂犬病病毒)；丝状病毒科(filoviridae)(例如伊波拉病毒(ebola viruses))；副黏液病毒科(paramyxoviridae)(例如副流行性感冒病毒、腮腺炎病毒、麻疹病毒、呼吸道融合病毒(respiratory syncytial virus))；正黏液病毒科(orthomyxoviridae)(例如流行性感冒病毒)；本扬病毒科(bungaviridae，例如汉他病毒(hantaan viruses)、斑嘎病毒(bungaviruses)、沙蝇病毒(phleboviruses)和奈诺病毒(nairo viruses))；沙粒病毒科(arenaviridae)(出血热病毒)；呼肠孤病毒科(reoviridae)(例如里奥病毒(reoviruses)、环状病毒和轮状病毒)；双核糖核酸病毒科(birnaviridae)、肝去氧核糖核酸病毒科(hepadnaviridae)(b型肝炎病毒)；小dna病毒科(parvoviridae)(小病毒)；乳多瘤病毒科(papovaviridae)(乳突状瘤病毒(papilloma viruses)、多瘤病毒(polyoma viruses))；腺病毒科(adenoviridae)(大多数腺病毒)；疱疹病毒科(herpesviridae)(单纯疱疹病毒(herpes simplex virus，hsv)第一型和第二型、水痘带状疱疹病毒(varicella zostervirus)、巨细胞病毒(cytomegalovirus，cmv)、疱疹病毒)；痘病毒科(poxviridae)(天花病毒(variola viruses)、牛痘病毒(vaccinia viruses)、痘病毒(pox viruses))；以及虹彩病毒科(iridoviridae)(例如非洲猪瘟病毒(african swine fever virus))；以及未分类的病毒(例如，海绵状脑病的致病病原体(the etiological agents of spongiformencephalopathies)、d型肝炎病原体(the agent of delta hepatities)(被认为是b型肝炎的缺陷型卫星病毒)、非a型肝炎、非b型肝炎的病原体(第一类＝内部传播；第二类＝非胃肠地传播(parenterally transmitted)(例如c型肝炎))；诺瓦克(norwalk)和相关的病毒，以及星状病毒(astro viruses))。细菌感染性疾病是由细菌感染引起的。需要保护性免疫反应的刺激的传染性细菌的例子包括：幽门螺旋杆菌(helicobacter pylons)、伯氏疏螺旋体、退伍军人症嗜肺杆菌、分枝杆菌属(例如，结核分枝杆菌、鸟分枝杆菌、细胞内分枝杆菌、堪塞斯分枝杆菌、戈登分枝杆菌(m.gordonae))、金黄色葡萄球菌、淋病双球菌、脑膜炎双球菌、李斯特单胞菌、化脓链球菌(a群链球菌)、无乳链球菌(b群链球菌)、链球菌(草绿色链球菌群)、粪链球菌、牛链球菌、链球菌(厌氧性的物种)、肺炎链球菌、致病的弯曲杆菌、肠球菌、流感嗜血杆菌、炭疽芽孢杆菌、白喉杆菌、棒状杆菌、红斑丹毒丝菌、产气荚膜梭状芽孢杆菌、破伤风芽孢梭菌、产气肠杆菌、克雷伯氏肺炎杆菌、败血性巴氏杆菌、类杆菌、具核梭杆菌(fusobacterium nucleatum)、念珠状链杆菌、梅毒螺旋体、细弱螺旋体、钩端螺旋体属和以色列放线菌。需要保护性免疫反应的刺激的传染性真菌的例子包括：新型隐球酵母孢菌、荚膜组织孢浆菌、小型似球孢菌、皮炎芽生菌、砂眼衣原体、白色念珠菌。其他传染性生物体(即原生生物)包括：恶性疟原虫(plasmodium falciparum)和弓虫(参见美国专利第10,744,207号)。

42、在一些实施例中，第一成分与选自由下列组成的群组的生物标志物表现出特异性的交互作用，癌症抗原、糖脂(glycolipid)、糖蛋白、呈现于一造血群系细胞上的分化簇(cluster of differentiation)抗原、γ-谷酰基转肽酶(gamma-glutamyltranspeptidase)、粘附蛋白质(adhesion protein)、荷尔蒙、生长因子、细胞激素、配体受体(ligand receptor)、离子通道、膜结合形式的一免疫球蛋白μ链、甲型胎儿蛋白(alfa-fetoprotein)、c-反应蛋白、嗜铬血液细胞分泌素a、上皮粘蛋白抗原(epithelialmucin antigen)、人类上皮细胞特异抗原(human epithelium specific antigen)、路易士(a)(lewis(a))抗原、多重抗药性相关蛋白(multidrug resistance related protein)、neu致癌基因蛋白(neu oncogene protein)、神经元特异性烯醇酶(neuron specificenolase)、p型糖蛋白、多重抗药性相关抗原、p170、多重抗药性相关抗原、前列腺特异性抗原(prostate specific antigen)、神经细胞粘附分子(ncam)、神经节苷脂分子(ganglioside molecule)、mart-1、热休克蛋白、唾液酸多糖(sialyltn)、酪氨酸酶(tyrosinase)、黏蛋白-1(muc-1)、her-2/neu、ksa、前列腺特异性膜抗原(psma)、p53、ras、上皮成长因子受体(egf-r)、血管内皮生长因子(vegf)、和黑色素瘤相关抗原(mage)或者其任何组合；或者第一成分与选自由下列组成的群组的癌症抗原表现出特异性的交互作用，her2/neu(erbb2)、人类表皮生长因子受体3(her3(erbb3))、上皮成长因子受体(egfr)、血管内皮生长因子(vegf)、血管内皮生长因子受体2(vegfr2)、gd2、细胞毒性t细胞抗原-4(ctla4)、cd19、cd20、cd22、cd30、cd33(siglec-3)、cd52(campath-1抗原)、cd326(上皮细胞粘附分子(epcam))、ca-125(黏蛋白16(muc16))、基质金属蛋白酶9(mmp9)、dll3、cd274(程式性细胞死亡-配体1(pd-l1))、癌胚抗原(cea)、msln(间皮素(mesothelin))、糖抗原19-9(ca19-9)、cd73、cd205(dec205)、cd51、c-met、trail-r2、胰岛素样生长因子-1受体(igf-1r)、cd3、巨噬细胞移行抑制因子(mif)、聚落刺激因子1(csf1)、ox-40、cd137、运铁蛋白受体(tfr)、黏蛋白1(muc1)、cd25(白介素-2受体(il-2r))、cd115(聚落刺激因子1受体(csf1r))、白介素1b(il1b)、cd105(内皮糖蛋白(endoglin))、杀手细胞免疫球蛋白样受体(kir)、cd47、癌胚抗原(cea)、白介素-17a(il-17a)、dll4、cd51、血管生长素2(angiopoietin2)、神经纤毛蛋白-1(neuropilin-1)、cd37、cd223(淋巴细胞活化基因-3(lag-3))、cd40、liv-1(slc39a6)、cd27(肿瘤坏死因子受体超家族7(tnfrsf7))、cd276(b7-h3)、trop2、密连蛋白1(claudin1，cldn1)、前列腺特异性膜抗原(psma)、tim-1(havcr-1)、癌胚抗原相关细胞粘附分子5(ceacam5)、cd70、ly6e、b细胞成熟抗原(bcma)、cd135(flt3)、april、tf(f3)、nectin-4、fap、gpc3、纤维母细胞生长因子受体3(fgfr3)、一种杀手细胞免疫球蛋白样受体(killer-cell immunoglobulin-like receptors；kirs)、ror1、ror2、程式性细胞死亡-1(pd-1，cd279)、细胞毒性t细胞抗原-4(ctla-4，cd152)、tim-3(havcr2)、一种免疫检查点受体(immune checkpoint receptor)、一种免疫检查点受体配体、一种受体酪氨酸激酶样孤儿受体(receptor tyrosine kinase-like orphan receptor)、一种肿瘤坏死因子(tnf)受体蛋白(tnf receptorprotein)、一种免疫球蛋白、一种细胞激素受体、一种整合素(integrin)和活化自然杀手细胞的受体(activating nk cell receptors)或者其组合。

43、在一些实施例中，靶向单元是通过缀合(conjugated)到第一成分的第一链接器(first linker)和缀合到效应细胞表面的第二链接器(second linker)之间的交互作用，复合到效应细胞的表面。

44、在一些实施例中，第一链接器共价(covalently)或非共价(non-covalently)性地缀合(conjugated)到第一成分；或第二链接器共价或非共价性地缀合到效应细胞的表面；或其组合。

45、在一些实施例中，第一链接器或第二链接器缀合到第一成分的天然官能基团(native functional group)或效应细胞的表面，其中该天然官能基团为氨基酸、糖基(sugar)或一胺基。

46、在一些实施例中，天然官能基团包括糖、胺基或者氨基酸；或者其中天然官能基团不是迭氮修饰(azide-modified)的糖，例如n-a-迭氮基乙酰基唾液酸(n-a-azidoacetylsialic acid，sianaz)；或者，其中天然官能基团包括氨基酸选自由赖氨酸、半胱氨酸、酪氨酸、苏氨酸、丝氨酸、天冬氨酸、谷氨酸和色氨酸所组成的群组(参见美国专利第10,744,207号)。

47、在一些实施例中，第二链接器直接地、共价性地连接(linked)到效应细胞的天然官能基团；其中第二链接器与效应细胞的天然官能基团之间的直接、共价性联接(covalentlink)是通过将效应细胞与第二链接器接触而制备，使得第二链接器直接地、共价性地连接(linked)到天然官能基团(native functional group)(参见美国专利第10,744,207号)。

48、在一些实施例中，第一链接器和第二链接器选自由以下组成的群组：一dna结合结构域(dna binding domain)和一标靶dna；一亮氨酸拉链(leucine zipper)和标靶dna；生物素(biotin)和卵白素(avidin)；生物素和链霉抗生物素蛋白(streptavidin)；携钙素结合蛋白(calmodulin-binding protein)和携钙素(calmodulin)；一荷尔蒙和一荷尔蒙受体；凝集素(lectin)和一碳水化合物；一细胞膜受体和一受体配体(receptor ligand)；一酶和一受质(substrate)；一抗原和一抗体；一激动剂和一拮抗剂；多核苷酸杂交序列(polynucleotide hybridizing sequences)；一适体(aptamer)和一标靶；以及一锌指(zinc finger)和一标靶dna。

49、在一些实施例中，两个链接器中的至少一个包含聚乙二醇区域(pegregion)或nhs酯(nhs ester)；或者其中第一成分通过偶合基团(coupling group)与第一链接器缀合(conjugated)，其中偶合基团是nhs酯或其他经活性化的酯、卤烷(alkyl)或卤酰(acylhalide)、一双功能交联剂(bifunctional crosslinker)或顺丁烯二酰亚胺基团(maleimide group)(参见美国专利第10,744,207号)。

50、在一些实施例中，第一链接器与第二链接器之间的结合亲和力小于250nm。较佳者，第一链接器与第二链接器之间的结合亲和力小于200nm、100nm、50nm、10nm、1nm、500pm、100pm、60pm、50pm、20pm、15pm、10pm、5pm或2pm。

51、在一些实施例中，第一成分和效应细胞被1nm到400nm的长度隔开。较佳者，第一成分和效应细胞被1、2、5、10、15、20、30、32、35、40、45、50、60、62、65、70、75、80、90、100、120、150、180、200、220、250、280、300、320、350或380nm的长度隔开；或者1nm到200nm之间、1nm到100nm之间、1nm到50nm之间、5nm到100nm之间或5nm到50nm之间。

52、在一些实施例中，靶向单元和效应细胞被1nm到20nm或1nm到33nm的长度隔开。较佳者，靶向单元和效应细胞被2、3、4、5、6、7、8、9、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30或32nm的长度隔开。

53、在一些实施例中，第一链接器对生物标志物的结合亲和力(binding affinity)小于250nm。较佳者，第一链接器对生物标志物的结合亲和力小于200nm、100nm、50nm、10nm、1nm、500pm、100pm、60pm、50pm、20pm、15pm、10pm、5pm或2pm。

54、在一些实施例中，第一链接器是第一多核苷酸(polynucleotide)，并且第二链接器是第二多核苷酸。

55、在一些实施例中，第一多核苷酸是由去氧核糖核苷酸、核糖核苷酸，或其类似物，或其任何组合所组成的化合物。较佳者，第二多核苷酸是由去氧核糖核苷酸、核糖核苷酸，或其类似物，或其任何组合所组成的化合物(参见美国专利第10,744,207号)。

56、在一些实施例中，两个多核苷酸中的至少一个是dna、rna或肽核酸(peptidenucleic acid，pna)分子，或其任何组合(参见美国专利第10,744,207号)。

57、在一些实施例中，两个多核苷酸中的至少一个的长度为4nt到500nt。

58、在一些实施例中，两个多核苷酸中的至少一个的长度是5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、100、120、140、160、180、200、300、400或500nt。

59、在一些实施例中，第一多核苷酸包含第一单链区(first single-strandedregion)，并且第二多核苷酸包含与第一单链区互补的第二单链区，其中靶向单元通过第一单链区和与第一单链区互补的第二单链区之间的交互作用复合到效应细胞的表面(参见美国专利第10,744,207号)。

60、在一些实施例中，第一多核苷酸和第二多核苷酸基本上地或完全性地彼此互补。例如两个多核苷酸共享至少约10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或者100％的互补性(参见美国专利第10,744,207号)。

61、在一些实施例中，第一多核苷酸或第二多核苷酸包含一序列选自20个核苷酸的聚ggtt(20-mer poly-ggtt)、seq id no：1、seq id no：2、seq id no：3、seq id no：4、seq idno：5、seq id no：6、seq id no：7、seq id no：8、seq id no：9、seq id no：10、seq id no：11、seq id no：12、seq id no：13、seq id no：14、seq id no：15、seq id no：16、seq idno：17、seq id no：18、seq id no：19、seq id no：20、seq id no：21、seq id no：22、seq idno：23、seq id no：24、23个核苷酸的序列seq id no：25(23-mer seq id no:25)，和seq idno：26。

62、在一些实施例式中，链接器被设计成具有大约或少于约90％、80％、70％、60％、50％、40％、30％、20％、10％，或更低的gc含量。在一些实施例中，链接器被选择为具有大约或多于约10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％，或更多的gc含量。在一些实施例中，链接器被设计成包含或由重复1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、15或者20次或重复直至到达链接器末端的1、2、3、4、5、6、7、8、9或者10个核苷酸的序列组成(例如aaa......或atat......)。在一些实施例中，链接器被选择为具有约或大于约30℃、35℃、40℃、45℃、50℃、55℃、60℃、65℃、70℃、75℃、80℃、85℃或者更高的tm(参见美国专利第10,744,207号)。

63、在一些实施例中，第一链接器包含第一反应基团(first reactive group)，并且第二链接器包含第二反应基团，并且其中靶向单元通过由第二反应基团和第一反应基团之间的反应(reaction)形成的共价键复合到效应细胞的表面。

64、在一些实施例中，细胞毒性细胞是免疫细胞、淋巴球、自然杀手细胞、γδt细胞、其他t淋巴球、巨噬细胞、单核细胞、嗜中性白血球、树突细胞、细胞激素诱导的杀手细胞(cytokine-induced killer cells，cik)、淋巴激素活化的杀手细胞(lymphokine-activated killer cells，lak)、细胞溶解型t细胞(cytolytic t cells，ctl)或肿瘤浸润淋巴球(tumor-infiltrating lymphocytes，til)。

65、在一些实施例中，诸如效应细胞的细胞源自于细胞系(cell line)。细胞系的实例包括但不限于raw264.7、u-937、onk、nk92、nk3.3、khyg-1、nkl，和其基因转殖的变种。细胞系可从本领域的技术人员已知的多种来源取得(参见例如美国典型培养物保藏中心(theamerican type culture collection，atcc)(manassas，维吉尼亚州))(参见美国专利第10,744,207号)。

66、在一些实施例中，诸如效应细胞的细胞是t细胞。t细胞包括表达cd3的所有细胞，包括cd4+t细胞、cd8+t细胞和cd4+cd8+t细胞。t细胞包括初始型(naive)和记忆型细胞(例如tcm、tem和temra)、辅助细胞(例如th1、th2、th3、th9、th7、tfh)、效应细胞(例如ctl或tc细胞)、nkt细胞、肿瘤浸润淋巴球(tils)、调节型细胞(例如treg和tr1细胞)、淋巴球活化的杀手细胞(lymphocyte-activated killer cells，laks)、αβt细胞、γδt细胞(γδt细胞)，和t细胞群系相似的独特类型。在一些实施例中，t细胞是活化的t细胞(参见美国专利第10,744,207号)。

67、在一些实施例中，诸如效应细胞的细胞是富含细胞激素诱导的杀手(cytokineinduced killer，cik)细胞的细胞群。富集(enriching)细胞激素诱导的杀手细胞的方法描述于美国专利第10,744,207号中，该方法通过引用并入本文。在一些实施例中，诸如效应细胞的细胞是胚胎干细胞(embryonic stem cell，esc)，例如来自胚胎干细胞细胞系(参见美国专利第10,744,207号)。

68、在一些实施例中，效应细胞在免疫功能不全的小鼠(immune compromised mouse)中是非致瘤性的(non-tumorigenic)；或该效应细胞在被γ射线照射后在同种异体的个体中是非致瘤性的。

69、在一些实施例中，效应细胞更进一步包含一不活化的肿瘤抑制基因(inactivetumor suppressor gene)或突变且高度表达的致癌基因。

70、在一些实施例中，效应细胞在施用(administration)前被储存在或低于0℃。

71、在一些实施例中，效应细胞在施用前被储存在或低于-20℃、-80℃、-130℃，或者-196℃。

72、在一些实施例中，该疾病为癌症，并且与疾病相关的异常细胞是癌症细胞。较佳者，该疾病为肿瘤，并且与疾病相关的异常细胞是肿瘤细胞。较佳者，该疾病为细菌感染疾病，并且与疾病相关的异常细胞是细菌所感染的细胞。较佳者，该疾病为hiv或其他病毒感染性疾病，并且与疾病相关的异常细胞是hiv或其他病毒所感染的细胞。较佳者，该疾病为真菌感染性疾病，并且与疾病相关的异常细胞为真菌所感染的细胞。较佳者，该疾病为原虫感染性疾病，并且与疾病相关的异常细胞是原虫所感染的细胞。较佳者，与疾病相关的异常细胞是位于与疾病相关的异常位置的健康或异常细胞。较佳者，与疾病相关的异常细胞是位于疾病病灶的健康或异常细胞。较佳者，与疾病相关的异常细胞是位于疾病病灶的处于病理状态的(pathological conditions)细胞。

73、在一些实施例中，细胞毒性细胞是自然杀手细胞，其特性在于：

74、(a)它存放在npmd具有存放编号nite bp-03017；(b)它包含一条染色体，并且该染色体的染色体dna序列与存放在npmd具有存放编号nite bp-03017的自然杀手细胞相应染色体的染色体dna序列是至少80％相同；或者(c)它具有以下特性：

75、i)表达cd16受体；

76、ii)在继代培养至少3个月后保有其增殖的能力；以及

77、iii)x)不包含合成的、基因改造的和/或特意地递送(deliberatelydelivered)的编码cd16受体的多核苷酸，或y)通过使用微滴式数位核酸侦测系统(ddpcr)分析细胞毒性细胞的基因组去氧核糖核酸(genomic dna)，cd16 f176f探针可检测到的去氧核糖核酸分子(dna molecule)与cd16f176v探针可检测到的去氧核糖核酸分子(dna molecule)的比例等于或大于1，其中cd16 f176f探针的序列是seq id no：27，并且cd16 f176v探针的序列是seq id no：28。

78、较佳者，细胞毒性细胞更进一步的特性在于：

79、(1)细胞毒性细胞和自然杀手细胞系nk3.3源自不同的个体；

80、(2)细胞毒性细胞源自患有癌症的个体；

81、(3)细胞毒性细胞源自高加索男性；或

82、(4)细胞毒性细胞和具有存放编号atcc crl-2407的自然杀手细胞源自同一个体；

83、或其任何组合。

84、在一些实施例中，细胞毒性细胞源自存放在npmd具有存放编号nite bp-03017的自然杀手细胞。

85、在一些实施例中，细胞毒性细胞中染色体的染色体dna(chromosomal dna)序列与存放在npmd具有存放编号nite bp-03017的自然杀手细胞相应染色体的染色体dna序列是至少85、90、95、96、97、98、99％、99.99％或99.995％相同的。

86、在一些实施例中，染色体是选自由下列组成的群组：1号染色体、2号染色体、3号染色体、4号染色体、5号染色体、6号染色体、7号染色体、8号染色体、9号染色体、10号染色体、11号染色体、12号染色体、13号染色体、14号染色体、15号染色体、16号染色体、17号染色体、18号染色体、19号染色体、20号染色体、21号染色体、22号染色体、x染色体，以及y染色体。

87、在一些实施例中，染色体是细胞毒性细胞的1号染色体、2号染色体、3号染色体、4号染色体、5号染色体、6号染色体、7号染色体、8号染色体、9号染色体、10号染色体、11号染色体、12号染色体、13号染色体、14号染色体、15号染色体、16号染色体、17号染色体、18号染色体、19号染色体、20号染色体、21号染色体、22号染色体、x染色体或y染色体，并且对应的染色体分别为存放在npmd具有存放编号nite bp-03017的自然杀手细胞的1号染色体、2号染色体、3号染色体、4号染色体、5号染色体、6号染色体、7号染色体、8号染色体、9号染色体、10号染色体、11号染色体、12号染色体、13号染色体、14号染色体、15号染色体、16号染色体、17号染色体、18号染色体、19号染色体、20号染色体、21号染色体、22号染色体、x染色体或y染色体。

88、在一些实施例中，细胞毒性细胞的全基因组与存放在npmd具有存放编号nite bp-03017的自然杀手细胞的全基因组是至少95％、96％、97％、98％、99％、99.5％、99.995％，或99.9995相同的。

89、在一些实施例中，细胞毒性细胞在继代培养至少4个月、5个月、6个月、7个月、8个月、9个月、10个月、11个月、1年、2年、3年、4年、5年、6年、7年，或8年后能够增殖。

90、在一些实施例中，效应细胞更进一步表达cd2、cd45、cd4、cd25、nkp30、nkg2d、nkp44、nkp46、cd27、ox40、cd107a、nkg2a、程式性细胞死亡-1(pd-1)、tigit、sirpα或cd158，或其任何组合。

91、在一些实施例中，cd16受体是cd16a受体或cd16b受体。

92、在一些实施例中，编码cd16受体的所表达的多核苷酸位于一号染色体q臂的第1q23.3位点。

93、在一些实施例中，编码cd16受体的多核苷酸包含seq id no：29、seq id no：30或seq id no：31的核苷酸序列。

94、在一些实施例中，cd16受体包含seq id no：32、seq id no：33或seq id no：34的氨基酸序列。

95、在一些实施例中，细胞毒性细胞是γδt细胞；或细胞毒性细胞是vδ1t细胞、vδ2t细胞、vδ3t细胞、vδ5t细胞，或vγ9vδ2t细胞。

96、在一些实施例中，效应细胞更进一步表达cd3、nkp46、cd56、cd16、nkg2d、nkp44、cd25、cd38、程式性细胞死亡-1(pd-1)、nkp30、cd18、tigit、dnam-1、cd36、cd103、ccr7、cxcr3、干扰素γ(ifnγ)、颗粒酶b(granzyme b)或cd69，或其任何组合。

97、在一些实施例中，在与标靶细胞共同培养后，效应细胞更进一步表达颗粒酶b。

98、在一些实施例中，其中：

99、(1)至少4％的效应细胞每个细胞表达至少400个nkp46分子；

100、(2)至少10％的效应细胞每个细胞表达至少400个cd56分子；

101、(3)至少10％的效应细胞每个细胞表达至少400个cd16分子；

102、(4)至少30％的效应细胞每个细胞表达至少40个nkg2d分子；

103、(5)至少1％的效应细胞每个细胞表达至少400个nkp44分子；

104、(6)至少80％的效应细胞每个细胞表达至少400个cd69分子；或

105、(7)至少40％的效应细胞每个细胞表达至少400个cxcr3分子；

106、或其任何组合。

107、在一些实施例中，其中：

108、(1)至少4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％或50％的效应细胞每个细胞表达至少500、600、700、800、900、1000、1500、2000、2500、3000、3500、4000、4500、5000、5500、6000、6500、7000、7500、8000、8500、9000、9500、10000、15000、20000、25000、30000、35000、40000、45000、50000、55000、60000、65000、70000、75000、80000、85000、90000、95000、100000、110000、120000、130000、140000、150000、160000、170000、180000、190000或者200000个nkp46分子；

109、(2)至少10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％或者50％的效应细胞每个细胞表达至少500、600、700、800、900、1000、1500、2000、2500、3000、3500、4000、4500、5000、5500、6000、6500、7000、7500、8000、8500、9000、9500、10000、15000、20000、25000、30000、35000、40000、45000、50000、55000、60000、65000、70000、75000、80000、85000、90000、95000、100000、110000、120000、130000、140000、150000、160000、170000、180000、190000、或者200000、210000、220000、230000、240000、250000、260000、270000、280000、290000、300000、310000、320000、330000、340000、350000、360000、370000、380000、390000、400000、410000、420000、430000、440000、450000、460000、470000、480000、490000、500000、510000、520000、530000、540000、550000、560000、570000、580000、590000、600000、610000、620000、630000、640000、650000、660000、670000、680000、690000或者700000个cd56分子；

110、(3)至少10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％或者50％的效应细胞每个细胞表达至少500、600、700、800、900、1000、1500、2000、2500、3000、3500、4000、4500、5000、5500、6000、6500、7000、7500、8000、8500、9000、9500、10000、15000、20000、25000、30000、35000、40000、45000、50000、55000、60000、65000、70000、75000、80000、85000、90000、95000、100000、110000、120000、130000、140000、150000、160000、170000、180000、190000、或者200000、210000、220000、230000、240000、250000、260000、270000、280000、290000、300000、310000、320000、330000、340000、350000、360000、370000、380000、390000、400000、410000、420000、430000、440000、450000、460000、470000、480000、490000、500000、510000、520000、530000、540000、550000、560000、570000、580000、590000、600000、610000、620000、630000、640000、650000、660000、670000、680000、690000或者700000个cd16分子；

111、(4)至少30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％或者70％的效应细胞每个细胞表达至少50、60、70、80、90、100、200、300、400、500、600、700、800、900、1000、1500、2000、2500、3000、3500、4000、4500、5000、5500、6000、6500、7000、7500、8000、8500、9000、9500、10000、15000、20000、25000、30000、35000、40000、45000、50000、55000、60000、65000、70000、75000、80000、85000、90000、95000、100000、110000、120000、130000、140000、150000、160000、170000、180000、190000、200000、210000、220000、230000、240000、250000、260000、270000、280000、290000、300000、310000、320000、330000、340000、350000、360000、370000、380000、390000、400000、410000、420000、430000、440000、450000、460000、470000、480000、490000、500000、510000、520000、530000、540000、550000、560000、570000、580000、590000、600000、610000、620000、630000、640000、650000、660000、670000、680000、690000、700000、710000、720000、730000、740000、750000、760000、770000、780000、790000、800000、810000、820000、830000、840000、850000、860000、870000、880000、890000、900000、910000、920000、930000、940000、950000、960000、970000、980000、990000、1000000、1250000、1500000、1750000、2000000、2250000、2500000、2750000、3000000、3250000、3500000、3750000、4000000、4250000、4500000、4750000、5000000、5250000、5500000、5750000、6000000、6250000、6500000、6750000或者7000000个nkg2d分子；

112、(5)至少1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％或者50％的效应细胞每个细胞表达至少500、600、700、800、900、1000、1500、2000、2500、3000、3500、4000、4500、5000、5500、6000、6500、7000、7500、8000、8500、9000、9500、10000、15000、20000、25000、30000、35000、40000、45000、50000、55000、60000、65000、70000、75000、80000、85000、90000、95000、100000、110000、120000、130000、140000、150000、160000、170000、180000、190000或者200000个nkp44分子；

113、(6)至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％或者90％的效应细胞每个细胞表达至少500、600、700、800、900、1000、1500、2000、2500、3000、3500、4000、4500、5000、5500、6000、6500、7000、7500、8000、8500、9000、9500、10000、15000、20000、25000、30000、35000、40000、45000、50000、55000、60000、65000、70000、75000、80000、85000、90000、95000、100000、110000、120000、130000、140000、150000、160000、170000、180000、190000、或者200000、210000、220000、230000、240000、250000、260000、270000、280000、290000、300000、310000、320000、330000、340000、350000、360000、370000、380000、390000、400000、410000、420000、430000、440000、450000、460000、470000、480000、490000、500000、510000、520000、530000、540000、550000、560000、570000、580000、590000、600000、610000、620000、630000、640000、650000、660000、670000、680000、690000或者700000个cd69分子；或者

114、(7)至少50％、55％、60％、63％、67％、70％、73％、77％、80％、83％、87％、90％、93％、97％或者90％的效应细胞每个细胞表达至少6000、6500、7000、7500、8000、8500、9000、9500、10000、15000、20000、25000、30000、35000、40000、45000、50000、55000、60000、65000、70000、75000、80000、85000、90000、95000、100000、110000、120000、130000、140000、150000、160000、170000、180000、190000或者200000、210000、220000、230000、240000、250000、260000、270000、280000、290000、300000、310000、320000、330000、340000、350000、360000、370000、380000、390000、400000、410000、420000、430000、440000、450000、460000、470000、480000、490000、500000、510000、520000、530000、540000、550000、560000、570000、580000、590000、600000、610000、620000、630000、640000、650000、660000、670000、680000、690000或者700000个cxcr3分子；

115、或者其任何组合。

116、在一些实施例中，其中：

117、(1)至少4％的效应细胞表达nkp46，其中表达nkp46的效应细胞平均每个细胞表达至少400个nkp46分子；

118、(2)至少10％的效应细胞表达cd56，其中表达cd56的效应细胞平均每个细胞表达至少400个cd56分子；

119、(3)至少10％的效应细胞表达cd16，其中表达cd16的效应细胞平均每个细胞表达至少400个cd16分子；

120、(4)至少30％的效应细胞表达nkg2d，其中表达nkg2d的效应细胞平均每个细胞表达至少40个nkg2d分子；

121、(5)至少1％的效应细胞表达nkp44，其中表达nkp44的效应细胞平均每个细胞表达至少400个nkp44分子；

122、(6)至少80％的效应细胞表达cd69，其中表达cd69的效应细胞平均每个细胞表达至少400个cd69分子；或者

123、(7)至少40％的效应细胞表达cxcr3，其中表达cxcr3的效应细胞平均每个细胞表达至少400个cxcr3分子；

124、或者其任何组合。

125、在一些实施例中，其中：

126、(1)至少4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％或者50％的效应细胞表达nkp46，其中表达nkp46的效应细胞平均每个细胞表达至少500、600、700、800、900、1000、1500、2000、2500、3000、3500、4000、4500、5000、5500、6000、6500、7000、7500、8000、8500、9000、9500、10000、15000、20000、25000、30000、35000、40000、45000、50000、55000、60000、65000、70000、75000、80000、85000、90000、95000、100000、110000、120000、130000、140000、150000、160000、170000、180000、190000或者200000个nkp46分子；

127、(2)至少10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％或者50％的效应细胞表达cd56，其中表达cd56的效应细胞平均每个细胞表达至少500、600、700、800、900、1000、1500、2000、2500、3000、3500、4000、4500、5000、5500、6000、6500、7000、7500、8000、8500、9000、9500、10000、15000、20000、25000、30000、35000、40000、45000、50000、55000、60000、65000、70000、75000、80000、85000、90000、95000、100000、110000、120000、130000、140000、150000、160000、170000、180000、190000、或者200000、210000、220000、230000、240000、250000、260000、270000、280000、290000、300000、310000、320000、330000、340000、350000、360000、370000、380000、390000、400000、410000、420000、430000、440000、450000、460000、470000、480000、490000、500000、510000、520000、530000、540000、550000、560000、570000、580000、590000、600000、610000、620000、630000、640000、650000、660000、670000、680000、690000或者700000个cd56分子；

128、(3)至少10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％或者50％的效应细胞表达cd16，其中表达cd16的效应细胞平均每个细胞表达至少500、600、700、800、900、1000、1500、2000、2500、3000、3500、4000、4500、5000、5500、6000、6500、7000、7500、8000、8500、9000、9500、10000、15000、20000、25000、30000、35000、40000、45000、50000、55000、60000、65000、70000、75000、80000、85000、90000、95000、100000、110000、120000、130000、140000、150000、160000、170000、180000、190000、或者200000、210000、220000、230000、240000、250000、260000、270000、280000、290000、300000、310000、320000、330000、340000、350000、360000、370000、380000、390000、400000、410000、420000、430000、440000、450000、460000、470000、480000、490000、500000、510000、520000、530000、540000、550000、560000、570000、580000、590000、600000、610000、620000、630000、640000、650000、660000、670000、680000、690000或者700000个cd16分子；

129、(4)至少30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％或者70％的效应细胞表达nkg2d，其中表达nkg2d的效应细胞平均每个细胞表达至少50、60、70、80、90、100、200、300、400、500、600、700、800、900、1000、1500、2000、2500、3000、3500、4000、4500、5000、5500、6000、6500、7000、7500、8000、8500、9000、9500、10000、15000、20000、25000、30000、35000、40000、45000、50000、55000、60000、65000、70000、75000、80000、85000、90000、95000、100000、110000、120000、130000、140000、150000、160000、170000、180000、190000、200000、210000、220000、230000、240000、250000、260000、270000、280000、290000、300000、310000、320000、330000、340000、350000、360000、370000、380000、390000、400000、410000、420000、430000、440000、450000、460000、470000、480000、490000、500000、510000、520000、530000、540000、550000、560000、570000、580000、590000、600000、610000、620000、630000、640000、650000、660000、670000、680000、690000、700000、710000、720000、730000、740000、750000、760000、770000、780000、790000、800000、810000、820000、830000、840000、850000、860000、870000、880000、890000、900000、910000、920000、930000、940000、950000、960000、970000、980000、990000、1000000、1250000、1500000、1750000、2000000、2250000、2500000、2750000、3000000、3250000、3500000、3750000、4000000、4250000、4500000、4750000、5000000、5250000、5500000、5750000、6000000、6250000、6500000、6750000或者7000000个nkg2d分子；

130、(5)至少1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％或者50％的效应细胞表达nkp44，其中表达nkp44的效应细胞平均每个细胞表达至少500、600、700、800、900、1000、1500、2000、2500、3000、3500、4000、4500、5000、5500、6000、6500、7000、7500、8000、8500、9000、9500、10000、15000、20000、25000、30000、35000、40000、45000、50000、55000、60000、65000、70000、75000、80000、85000、90000、95000、100000、110000、120000、130000、140000、150000、160000、170000、180000、190000或者200000个nkp44分子；

131、(6)至少80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％或者90％的效应细胞表达cd69，其中表达cd69的效应细胞平均每个细胞表达至少500、600、700、800、900、1000、1500、2000、2500、3000、3500、4000、4500、5000、5500、6000、6500、7000、7500、8000、8500、9000、9500、10000、15000、20000、25000、30000、35000、40000、45000、50000、55000、60000、65000、70000、75000、80000、85000、90000、95000、100000、110000、120000、130000、140000、150000、160000、170000、180000、190000、或者200000、210000、220000、230000、240000、250000、260000、270000、280000、290000、300000、310000、320000、330000、340000、350000、360000、370000、380000、390000、400000、410000、420000、430000、440000、450000、460000、470000、480000、490000、500000、510000、520000、530000、540000、550000、560000、570000、580000、590000、600000、610000、620000、630000、640000、650000、660000、670000、680000、690000或者700000个cd69分子；或者

132、(7)至少40％、45％、50％、55％、60％、63％、67％、70％、73％、77％、80％、83％、87％、90％、93％、97％或者90％的效应细胞平均每个细胞表达至少6000、6500、7000、7500、8000、8500、9000、9500、10000、15000、20000、25000、30000、35000、40000、45000、50000、55000、60000、65000、70000、75000、80000、85000、90000、95000、100000、110000、120000、130000、140000、150000、160000、170000、180000、190000、或者200000、210000、220000、230000、240000、250000、260000、270000、280000、290000、300000、310000、320000、330000、340000、350000、360000、370000、380000、390000、400000、410000、420000、430000、440000、450000、460000、470000、480000、490000、500000、510000、520000、530000、540000、550000、560000、570000、580000、590000、600000、610000、620000、630000、640000、650000、660000、670000、680000、690000或者700000个cxcr3分子；

133、或者其任何组合。

134、在一些实施例中，10％～90％的效应细胞是效应记忆型t细胞(em细胞)(effectormemory t cells，em cells)。

135、在一些实施例中，15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、86％、87％、88％或者89％的效应细胞是效应记忆型t细胞(em细胞)。

136、在一些实施方式中，90％～10％的效应细胞是终端分化的效应记忆型t细胞(tdem细胞)(terminally differentiated effector memory tcells,tdem cells)。

137、在一些实施例中，85％、80％、75％、70％、65％、60％、55％、50％、45％、40％、35％、30％、25％、20％、15％、14％、13％、12％或者11％的效应细胞是终端分化的效应记忆型t细胞(tdem细胞)。

138、在一些实施例中，靶向单元是第一种类型(first type)的靶向单元，并且效应细胞更进一步包含复合到效应细胞表面的第二种类型靶向单元群体，其中在第二种类型靶向单元群体中的靶向单元包含第二成分，其特征在于(a)它表现出与生物标志物或与疾病相关的异常细胞表达的不同生物标志物的特异性结合(specific binding)；(b)它不是由效应细胞产生的。在一些实施例中，该第二成分为抗体。在一些实施例中，第二成分是诱导抗体依赖性细胞毒杀作用(adcc)的igg亚型单克隆抗体；或者第二成分是其他抗体；或者第二成分包含抗原结合单元(antigen-binding unit)。在一些实施例中，第二成分不是核酸(nucleic acid)。在一些实施例中，第二成分是fda批准的用来治疗疾病的成分。在一些实施例中，第二成分是利妥昔单抗(rituximab)、曲妥珠单抗(trastuzumab)、西妥昔单抗(cetuximab)、阿仑单抗(alemtuzumab)、阿维鲁单抗(avelumab)、达雷木单抗(daratumumab)、妥珠单抗(elotuzumab)、奥妥珠单抗(obinutuzumab)、沃斯妥珠单抗(vorsetuzumab)、库沙珠单抗(cusatuzumab)、德瓦鲁单抗(durvalumab)、paintumumab或者阿玛西单抗(amatuzimab)。在一些实施例中，第二成分已经在第一期临床试验中取得成功但不是fda批准的用来治疗疾病的成分。在一些实施例中，第二成分是钴妥珠单抗(codrituzumab)、索拉珠单抗(solanezumab)、bimagrumab、塔罗金单抗(traklokinumab)或者巴可西珠单抗(bococizumab)。

139、【图式简单说明】

140、图1a是呈现曲妥珠单抗复合的人类cd16+自然杀手细胞(trastuzumab-complexedhuman cd16+natural killer cells)和无复合的人类cd16+自然杀手细胞(non-complexedhuman cd16+natural killer cells)之间杀死曲妥珠单抗反应性的癌细胞(trastuzumab-responsive cancer cells)的细胞毒杀功能比较的长条图。

141、图1b是呈现曲妥珠单抗复合的人类cd16+自然杀手细胞(trastuzumab-complexedhuman cd16+natural killer cells)和无复合的人类cd16+自然杀手细胞(non-complexedhuman cd16+natural killer cells)之间杀死抗曲妥珠单抗的(trastuzumab-resistant)癌细胞的细胞毒杀功能比较的长条图。

142、图2是呈现曲妥珠单抗(trastuzumab)、人类cd16+自然杀手细胞、与曲妥珠单抗共同培养的人类cd16+自然杀手细胞，以及曲妥珠单抗复合的人类cd16+自然杀手细胞对于抗曲妥珠单抗的癌细胞的细胞毒杀效力的长条图。

143、图3a-3b是在第10天收集的γδt细胞的直方图。

144、图4a-4b是在第14天收集的γδt细胞的直方图。

145、图5a是源自quantumtmsimply试剂盒的荧光染料pe缀合小鼠抗人类cd56的标准曲线。

146、图5b是源自quantumtmsimply试剂盒的荧光染料pe-cy7缀合小鼠抗人类cd16的标准曲线。

147、图5c是源自quantumtmsimply试剂盒的荧光染料pe-cy7缀合小鼠抗人类nkg2d的标准曲线。

148、图5d是源自quantumtmsimply试剂盒的荧光染料pe-cy7缀合小鼠抗人类nkp44的标准曲线。

149、图5e是源自quantumtmsimply试剂盒的荧光染料pe-cy7缀合小鼠抗人类nkp46的标准曲线。

150、图6a是呈现曲妥珠单抗复合的人类γδt细胞(trastuzumab-complexed humangamma delta t cells)和无复合的人类γδt细胞(non-complexed human gamma delta tcells)之间杀死正常癌症细胞的细胞毒杀功能比较的长条图。

151、图6b是呈现曲妥珠单抗复合的人类γδt细胞(trastuzumab-complexed humangamma delta t cells)和无复合的人类γδt细胞(non-complexed human gamma delta tcells)之间杀死抗曲妥珠单抗癌细胞(trastuzumab-resistant cancer cells)的细胞毒杀功能比较的长条图。

152、图7a是呈现西妥昔单抗复合的人类γδt细胞(cetuximab-complexed humangamma delta t cells)和无复合的人类γδt细胞(non-complexed human gamma delta tcells)之间杀死正常癌细胞的细胞毒杀功能比较的长条图。

153、图7b是呈现西妥昔单抗复合的人类γδt细胞(cetuximab-complexed humangamma delta t cells)和无复合的人类γδt细胞(non-complexed human gamma delta tcells)之间杀死抗西妥昔单抗(cetuximab-resistant)癌细胞的细胞毒杀功能比较的长条图。

154、图8a是呈现缺氧对成分复合的细胞毒性细胞(ingredient-complexed cytotoxiccells)和无复合的人类细胞毒性细胞(non-complexed human cytotoxic cells)的细胞毒杀功能影响的长条图。

155、图8b是呈现乳酸(一种代谢废物)对成分复合的细胞毒性细胞(ingredient-complexed cytotoxic cells)的细胞毒杀功能影响的长条图。

156、图8c是呈现腹水萃取物(ascites extract)(包含免疫抑制性的细胞激素(immunosuppressive cytokines))对成分复合的人类细胞毒性细胞(ingredient-complexed human cytotoxic cells)的细胞毒杀功能影响的长条图。

157、图9a说明成分复合的细胞毒性细胞(ingredient-complexed cytotoxic cell)迁移研究的检验设计(assay design)。

158、图9b是呈现成分复合的细胞毒性细胞(ingredient-complexed cytotoxiccells)进入到癌细胞所在区域的迁移能力的长条图。

159、图10a说明cd3+t细胞迁移研究的检验设计。

160、图10b是呈现成分复合的细胞毒性细胞(ingredient-complexed cytotoxiccells)对cd3+t细胞进入到癌细胞所在区域的迁移能力影响的长条图。

161、图11是呈现与不同数量的曲妥珠单抗复合的人类γδt细胞(human gamma deltat cells complexed with different number of trastuzumab)之间杀死抗曲妥珠单抗癌细胞(trastuzumab-resistant cancer cells)的细胞毒性功能比较的长条图。

162、图12是呈现与不同数量的利妥昔单抗复合的人类γδt细胞(human gamma deltat cells complexed with different number of rituximab)之间杀死抗利妥昔单抗癌细胞(rituximab-resistant cancer cells)的细胞毒性功能比较的长条图。

163、图13是呈现与不同数量的利妥昔单抗复合的人类γδt细胞(human gamma deltat cells complexed with different number of rituximab)之间进入到癌细胞所在区域的迁移能力比较的长条图。

164、图14是呈现抗gpc3的抗体复合的人类cd16+自然杀手细胞(the anti-gpc3antibody-complexed human cd16+natural killer cells)和无复合的人类cd16+自然杀手细胞(non-complexed human cd16+natural killer cells)之间杀死癌症细胞的细胞毒杀功能比较的长条图。

165、图15是呈现抗gpc3的抗体复合的人类γδt细胞(the anti-gpc3 antibody-complexed human gamma delta t cells)和无复合的人类γδt细胞(non-complexedhuman gamma delta t cells)之间杀死癌症细胞的细胞毒杀功能比较的长条图。