人内源性逆转录病毒包膜蛋白突变体、截短体及其用途

本发明属于生物，具体涉及人内源性逆转录病毒包膜蛋白突变体、截短体及其用途。

背景技术：

1、人内源性逆转录病毒(hervs)是逆转录病毒在几百万年前感染人类并整合到人类基因组中，以孟德尔方式遗传至今的残余物，约占人类基因组8％。其中，大部分hervs由于突变、缺失和编码序列中存在终止密码等原因，已失去编码能力，以往被认为是垃圾dna。但近年来随着对hervs生物学功能研究深入，发现一些hervs不仅在一些特定组织和器官中具有重要生理功能，而且，可能还与血液和实体肿瘤、自身免疫性疾病、神经退行性疾病等发生发展密切相关。已知，hervs包膜蛋白(envelope，env)c端跨膜区(tm)具有多个免疫抑制结构域，如融合肽区(fusion peptide，fp)，免疫抑制区(immunosuppressive domains，isd)，跨膜区(transmembrane domain，tmd)，具有强大免疫抑制功能，是肿瘤免疫耐受的重要病因。包膜蛋白n端(su)参与多种炎症反应。

2、因此，研究hervs包膜蛋白是否具有人类可利用和改造的重要生理功能，从而将其应用于疾病的诊断、预防和治疗是目前行业研究的痛点和热点。

技术实现思路

1、本发明涉及针对herv-k、herv-h和herv-f包膜蛋白突变体和截短体及其在制备用于疾病诊断和/或治疗的药物中的用途，所述包膜蛋白突变体的突变位点，截短体的截短结构域为不受不同亚型(herv-k、herv-h和herv-f)影响的保守区。

2、人内源性逆转录病毒包膜蛋白突变体或截短体，所述的突变体或截短体免疫抑制结构域中的单个或多个氨基酸进行突变。

3、优选的，所述的免疫抑制结构域为免疫抑制区。

4、优选的，所述的人内源性逆转录病毒为herv-k、herv-h或herv-f中的任意一种。

5、优选的，所述的herv-k为herv-k108或herv-k102中的任意一种，每种人内源性逆转录病毒分型对应的氨基酸序列为：

6、herv-k108包膜蛋白突变体的序列如seq id no:1所示，

7、herv-k108包膜蛋白截短体的序列如seq id no:5所示，

8、herv-k102包膜蛋白突变体的序列如seq id no:3所示，

9、herv-k102包膜蛋白截短体的序列如seq id no:7所示，

10、herv-f包膜蛋白突变体的序列如seq id no:9所示，

11、herv-f包膜蛋白截短体的序列如seq id no:11所示，

12、herv-h包膜蛋白突变体的序列如seq id no:13所示，

13、herv-h包膜蛋白截短体的序列如seq id no:15所示。

14、优选的，所述的突变体或截短体是人内源性逆转录病毒包膜蛋白经弗林蛋白酶水解后形成的跨膜蛋白，其对应的氨基酸序列为：

15、herv-k108跨膜蛋白突变体的序列如seq id no:2所示，

16、herv-k108跨膜蛋白截短体的序列如seq id no:6所示，

17、herv-k102跨膜蛋白突变体的序列如seq id no:4所示，

18、herv-k102跨膜蛋白截短体的序列如seq id no:8所示，

19、herv-f跨膜蛋白突变体的序列如seq id no:10所示，

20、herv-f跨膜蛋白截短体的序列如seq id no:12所示，

21、herv-h跨膜蛋白突变体的序列如seq id no:14所示，

22、herv-h跨膜蛋白截短体的序列如seq id no:16所示。

23、包膜蛋白突变体或截短体的用途，包括前述任一所述的人内源性逆转录病毒包膜蛋白突变体或截短体，在制备用于诱导免疫系统产生强力免疫反应的诊断和/或治疗的药物中的应用。

24、优选的，所述的诱导免疫系统产生强力免疫反应的诊断和/或治疗的药物为mrna疫苗、蛋白亚单位疫苗、重组基因疫苗、动物源性抗体、包膜蛋白特异性细胞中的任意一种。

25、优选的，所述的重组基因疫苗为质粒载体疫苗、病毒载体疫苗或活细胞载体疫苗中的任意一种。

26、优选的，动物源性抗体为小鼠、大鼠、兔子或羊驼动物源性抗体中的任意一种。

27、优选的，所述的羊驼动物源性抗体为羊驼纳米抗体。

28、优选的，所述的包膜蛋白特异性细胞为细胞毒性t细胞、nk细胞、浆细胞、b细胞中的任意一种。

29、优选的，所述的细胞毒性t细胞为cd8+或cd4+中的任意一种。

30、根据前述任一所述的包膜蛋白突变体或截短体抗原制备的抗体的用途，在制备特异性细胞药物中的应用。

31、优选的，所述的特异性细胞药物为car-t、car-nk,或car-vac细胞药物中的任意一种。

32、本发明的有益效果主要在于：

33、本发明人基于hervs设计的包膜蛋白突变体和截短体能诱导免疫系统产生强力免疫反应，不仅可以用于各种治疗性和预防性疫苗如mrna疫苗、蛋白亚单位疫苗、多肽疫苗等，治疗性和诊断用抗体的设计，特异性治疗性细胞产品的设计，如car-t细胞、特异性细胞毒t细胞、car-nk细胞、特异性nk细胞等，用于疾病的诊断、预防和治疗。

技术特征：

1.人内源性逆转录病毒包膜蛋白突变体或截短体，其特征在于，所述的突变体或截短体免疫抑制结构域中的单个或多个氨基酸进行突变。

2.根据权利要求1所述的人内源性逆转录病毒包膜蛋白突变体或截短体，其特征在于，所述的免疫抑制结构域为免疫抑制区。

3.根据权利要求1所述的人内源性逆转录病毒包膜蛋白突变体或截短体，其特征在于，所述的人内源性逆转录病毒为herv-k、herv-h或herv-f中的任意一种。

4.根据权利要求3所述的人内源性逆转录病毒包膜蛋白突变体或截短体，其特征在于，所述的herv-k为herv-k108或herv-k102中的任意一种，每种人内源性逆转录病毒分型对应的氨基酸序列为：

5.根据权利要求4所述的人内源性逆转录病毒包膜蛋白突变体或截短体，其特征在于，所述的突变体或截短体是人内源性逆转录病毒包膜蛋白经弗林蛋白酶水解后形成的跨膜蛋白，其对应的氨基酸序列为：

6.包膜蛋白突变体或截短体的用途，其特征在于，包括权利要求1～5任一所述的人内源性逆转录病毒包膜蛋白突变体或截短体，在制备用于诱导免疫系统产生强力免疫反应的诊断和/或治疗的药物中的应用。

7.根据权利要求6所述的包膜蛋白突变体或截短体的用途，其特征在于，所述的诱导免疫系统产生强力免疫反应的诊断和/或治疗的药物为mrna疫苗、蛋白亚单位疫苗、重组基因疫苗、动物源性抗体、包膜蛋白特异性细胞中的任意一种。

8.根据权利要求7所述的包膜蛋白突变体或截短体的用途，其特征在于，所述的重组基因疫苗为质粒载体疫苗、病毒载体疫苗或活细胞载体疫苗中的任意一种。

9.根据权利要求7所述的包膜蛋白突变体或截短体的用途，其特征在于，动物源性抗体为小鼠、大鼠、兔子或羊驼动物源性抗体中的任意一种。

10.根据权利要求9所述的包膜蛋白突变体或截短体的用途，其特征在于，所述的羊驼动物源性抗体为羊驼纳米抗体。

11.根据权利要求7所述的包膜蛋白突变体或截短体的用途，其特征在于，所述的包膜蛋白特异性细胞为细胞毒性t细胞、nk细胞、浆细胞、b细胞中的任意一种。

12.根据权利要求11所述的包膜蛋白突变体或截短体的用途，其特征在于，所述的细胞毒性t细胞为cd8+或cd4+中的任意一种。

13.根据权利要求1～5任一所述的包膜蛋白突变体或截短体抗原制备的抗体的用途，其特征在于，在制备特异性细胞药物中的应用。

14.根据权利要求13所述的抗体的用途，其特征在于，所述的特异性细胞药物为car-t、car-nk,或car-vac细胞药物中的任意一种。

技术总结本发明属于生物技术领域，具体涉及人内源性逆转录病毒包膜蛋白突变体、截短体及其用途。本发明人基于HERVs设计的包膜蛋白突变体和截短体能诱导免疫系统产生强力免疫反应，不仅可以用于各种治疗性和预防性疫苗如mRNA疫苗、蛋白亚单位疫苗、多肽疫苗等，治疗性和诊断用抗体的设计，特异性治疗性细胞产品的设计，如CAR‑T细胞、特异性细胞毒T细胞、CAR‑NK细胞、特异性NK细胞等，用于疾病的诊断、预防和治疗。技术研发人员：徐荣臻,李梦圆受保护的技术使用者：浙江大学技术研发日：技术公布日：2024/9/2