Bta60SRPL7基因在烟粉虱防治中的应用、防治烟粉虱的试剂及防治方法

本发明属于虫害防控，具体涉及一种bta60srpl7基因在烟粉虱防治中的应用、防治烟粉虱的试剂及防治方法。

背景技术：

1、烟粉虱bemisia tabaci(gennadius)隶属于昆虫纲(insecta)半翅目(hemiptera)粉虱科(aleyrodidae)。该虫最早报道于1889年，在希腊烟草上发现。近40余年来，该虫成为了一种世界性的重要农业害虫，对蔬菜、棉花等造成严重的经济损失。

2、目前，防治烟粉虱的方法主要以化学防治为主，使用化学合成的杀虫剂，如有机磷、氨基甲酸酯等，进行喷洒，能够快速有效地杀灭烟粉虱。操作简单，效果明显，但可能对非靶标生物造成危害，并且长期使用可能导致虫害对药剂的抗药性，造成环境污染，存在安全隐患。生物防治方法对于生态环境友好，不会造成化学残留，成为近年来研究热点。

3、rna干扰(rna interference，rnai)是一种由短片段rnas(sirnas)触发，促进同源mrna的降解或抑制其翻译的作用机制。rnai首先在线虫中被发现，并在大多数生物体中均可发挥作用。使用rnai技术进行基因功能研究、转基因抗虫植物及新型核酸农药逐渐成为植物保护行业中一种重要的绿色生防手段，rnai技术可以特异性抑制基因的表达，高效地靶向沉默害虫基因，从而达到防治害虫的目的，在开发新的害虫治理策略方面显示出巨大的潜力。从基因层面开发适用于防治烟粉虱的外源dsrna产品，使用方便、成本低，更由于基因的特异性，可实现精准的防治效果，对环境友好，在烟粉虱的防治方面具有很大的应用前景。

技术实现思路

1、针对现有技术中存在的问题，本发明的目的在于提供一种bta60srpl7基因在烟粉虱防治中的应用、防治烟粉虱的试剂及防治方法。

2、为了达到上述目的，本发明采用如下技术方案：

3、烟粉虱bta60srpl7基因在烟粉虱防治或制备防治烟粉虱的试剂中的应用，所述烟粉虱bta60srpl7基因的核酸序列如seq id no.1所示。

4、在上述方案的基础上，通过基因沉默的方式，抑制烟粉虱体内bta60srpl7基因的表达，降低烟粉虱对寄主植物的趋向性。

5、在上述方案的基础上，所述的基因沉默的方式为rna干扰。

6、在上述方案的基础上，所述的寄主植物为番茄。

7、一种用于烟粉虱生物防治的dsrna，针对烟粉虱bta60srpl7基因设计引物，合成针对于烟粉虱bta60srpl7基因的dsrna；所述烟粉虱bta60srpl7基因的核酸序列如seq idno.1所示。

8、在上述方案的基础上，所述引物如seq id no.2、seq id no.3所示。

9、在上述方案的基础上，所述dsrna正义链所对应的核酸序列如seq id no.4所示；反义链所对应的核苷酸序列为seq id no.4的反向互补序列。

10、一种防治烟粉虱的试剂，含有上述的dsrna。

11、在上述方案的基础上，所述防治烟粉虱的试剂中dsrna的浓度≥700ng/μl。

12、一种防治烟粉虱的方法，通过基因沉默的方式，抑制烟粉虱体内bta60srpl7基因的表达，降低烟粉虱对寄主植物的趋向性，所述烟粉虱bta60srpl7基因的核酸序列如seqid no.1所示。

13、在上述方案的基础上，所述的基因沉默的方式为rna干扰。

14、在上述方案的基础上，所述的rna干扰是通过饲喂的方式，使烟粉虱摄入bta60srpl7基因的dsrna。

15、在上述方案的基础上，所述bta60srpl7基因的dsrna，由以下方法制得：

16、采用烟粉虱总rna反转录成的cdna为模板，用合成dsrna的引物进行pcr扩增，回收纯化pcr扩增产物并作为体外转录dsrna的模板，经体外转录合成dsrna。

17、在上述方案的基础上，所述合成dsrna的引物如seq id no.2、seq id no.3所示。

18、在上述方案的基础上，所述所述dsrna正义链所对应的核酸序列如seq id no.4所示；反义链所对应的核苷酸序列为seq id no.4的反向互补序列。

19、在上述方案的基础上，所述的烟粉虱为med隐种(mediterranean，即q型烟粉虱)。

20、本发明具有以下有益效果：

21、本发明提供了烟粉虱的bta60srpl7基因及其在烟粉虱防治中的应用，并开发了其高效沉默dsrna，开发了能够高效防治烟粉虱的技术，即通过饲喂法将dsbta60srpl7导入烟粉虱体内，显著降低烟粉虱寄主定位能力和取食行为，从而达到防治目的。该方法操作方便、有效性和特异性强、影响寄主选择性效果明显，且具有环境友好等诸多优点，有很好的应用前景。

技术特征：

1.烟粉虱bta60srpl7基因在烟粉虱防治或制备防治烟粉虱的试剂中的应用，其特征在于，所述烟粉虱bta60srpl7基因的核酸序列如seq id no.1所示。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，通过基因沉默的方式，抑制烟粉虱体内bta60srpl7基因的表达，降低烟粉虱对寄主植物的趋向性。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述的基因沉默的方式为rna干扰。

4.一种用于烟粉虱生物防治的dsrna，其特征在于，针对烟粉虱bta60srpl7基因设计引物，合成针对于烟粉虱bta60srpl7基因的dsrna；所述烟粉虱bta60srpl7基因的核酸序列如seq id no.1所示。

5.根据权利要求4所述用于烟粉虱生物防治的dsrna，其特征在于，所述引物如seq idno.2、seq id no.3所示。

6.根据权利要求5所述用于烟粉虱生物防治的dsrna，其特征在于，所述dsrna正义链所对应的核酸序列如seq id no.4所示；反义链所对应的核苷酸序列为seq id no.4的反向互补序列。

7.一种防治烟粉虱的试剂，其特征在于，含有权利要求4-6任一项所述的dsrna。

8.一种防治烟粉虱的方法，其特征在于，通过基因沉默的方式，抑制烟粉虱体内bta60srpl7基因的表达，降低烟粉虱对寄主植物的趋向性，所述烟粉虱bta60srpl7基因的核酸序列如seq id no.1所示。

9.根据权利要求8所述防治烟粉虱的方法，其特征在于，所述的基因沉默的方式为rna干扰。

10.根据权利要求9所述防治烟粉虱的方法，其特征在于，所述的rna干扰是通过饲喂的方式，使烟粉虱摄入bta60srpl7基因的dsrna。

技术总结本发明公开了一种Bta60SRPL7基因在烟粉虱防治中的应用、防治烟粉虱的试剂及防治方法，属于虫害防控技术领域。本发明烟粉虱Bta60SRPL7基因的核酸序列如SEQ ID NO.1所示，根据Bta60SRPL7基因制备其高效沉默dsBta60SRPL7，通过饲喂法将dsBta60SRPL7导入烟粉虱体内，能显著降低烟粉虱对寄主的定位能力和取食行为，从而达到防治目的。该方法操作方便、有效性和特异性强、影响寄主选择性效果明显，且具有环境友好等诸多优点，有很好的应用前景。技术研发人员：褚栋,王康,许梦泽,杨坤,陶云荔受保护的技术使用者：青岛农业大学技术研发日：技术公布日：2024/9/9