一种调控小麦真菌病害抗性的TaMYB1基因、TaMYB1蛋白及其应用和获取方法
- 国知局
- 2024-09-11 15:11:15
本发明涉及基因工程,特别是涉及一种调控小麦真菌病害抗性的 tamyb1基因、tamyb1蛋白及其应用和获取方法。
背景技术:
1、小麦是一种禾本科谷物,其为世界上仅次于水稻的第二大粮食作物。我国是世界上小麦生产与消费大国,常年种植面积为2400万公顷左右,年产量近1.3亿吨。作为气传性病害可以远距离传播,一旦气候条件适宜,又有充足的菌种量,会造成病害大流行,严重威胁我国小麦生产和粮食安全。小麦条锈病因其潜在危害性被列入了农业农村部《一类农作物病虫害名录》(2023年)。选育抗病品种是防治小麦条锈病最经济、安全、有效的方法。当前,通过基因工程育种获得具有抗病性的作物品种是一种行之有效的方法。而该方法中最关键的技术瓶颈问题是有效抗病基因的筛选与功能发现。
2、myb转录因子由转录激活区、负调控区以及dna 结合区3部分组成,每个区域的保守性和功能各不相同,dna结合区的myb domain重复序列为myb的特征识别区。根据mybdomain 中重复序列的位置和数量,myb 转录因子可分为1r-myb(mybrelated)、2r-myb(r2r3-myb)、3r-myb、4r-myb 4 个亚家族,myb domain 重复数量的差异影响了各亚家族成员的功能,并且各亚家族的功能具有差异。1r-myb 能调控昼夜节律等过程,2r-myb 在响应非生物胁迫、花青素生物合成等过程中能发挥调控作用,3r-myb 能控制细胞有丝分裂的过程,4r-myb 对配子体发育等过程一定影响。目前该家族成员在小麦多重病害的功能尚未见报道。
技术实现思路
1、为了解决上述问题,本发明提供了一种调控小麦真菌病害抗性的 tamyb1基因、tamyb1蛋白及其应用和获取方法。
2、为了实现上述目的,本发明提供如下技术方案:
3、本发明提供了一种调控小麦真菌病害抗性的 tamyb1基因,所述 tamyb1基因的cnda核苷酸序列如seq id no.1所示。
4、本发明还提供了一种调控小麦真菌病害抗性的tamyb1蛋白,所述tamyb1蛋白的氨基酸序列如seq id no.2所示。
5、优选的,所述小麦真菌病害包括小麦条锈病和/或小麦白粉病。
6、本发明还提供了上述技术方案所述的 tamyb1基因或上述技术方案所述的tamyb1蛋白在调控小麦真菌病害抗性中的应用。
7、优选的,抑制 tamyb1基因表达提高小麦真菌病害抗性。
8、优选的,所述小麦真菌病害包括小麦条锈病和/或小麦白粉病。
9、本发明还提供了一种感病性小麦植株的获取方法,包括以下步骤:
10、1)将myb1vigs片段连接到pcabs-γ载体中,得到pcabs-γ-myb1vigs重组载体;
11、所述myb1vigs片段的核苷酸序列如seq id no.3所示;
12、2)将pcabs-α载体、pcabs-β载体和步骤1)得到的pcabs-γ-myb1vigs重组载体分别导入到农杆菌中,得到pcabs-α重组菌、pcabs-β重组菌和pcabs-γ-myb1vigs重组菌;
13、3)将所述步骤2)得到的pcabs-α重组菌、pcabs-β重组菌和pcabs-γ-myb1vigs重组菌等浓度混合后注射到本生烟,7~10d后,获取本生烟的注射叶的汁液;
14、4)将所述步骤3)得到的汁液接种小麦植株,得到感病性小麦植株。
15、优选的,所述步骤1)myb1vigs片段和pcabs-γ载体都经apai限制性内切酶酶切后再连接。
16、优选的,所述步骤1)获取myb1vigs片段使用的上游引物的核苷酸序列如seq idno.4所示,下游引物的核苷酸序列如seq id no.5所示。
17、优选的,所述pcabs-α重组菌、pcabs-β重组菌和pcabs-γ-myb1vigs重组菌的浓度都为4×107 cfu/ml,注射量为2 μl/叶片。
18、本发明的有益效果:
19、将本发明的抗条锈病相关蛋白的编码基因干涉(即抑制基因的表达)后可以降低植物对条锈病、白粉病的感病性,如条锈病的侵染型显著降低,可获得对条锈病抗性提高的转基因植株,以作为筛选的防治小麦病害的药物。因此,本发明多重病害抗性的相关蛋白及其基因对培育抗条锈病、白粉病的作物具有重要的意义,适合于推广应用。
技术特征:1.一种调控小麦真菌病害抗性的tamyb1基因,其特征在于,所述tamyb1基因的cnda核苷酸序列如seq id no.1所示。
2.一种调控小麦真菌病害抗性的tamyb1蛋白,其特征在于,所述tamyb1蛋白的氨基酸序列如seq id no.2所示。
3.根据权利要求1所述的tamyb1基因或权利要求2所述的tamyb1蛋白,其特征在于,所述小麦真菌病害包括小麦条锈病和/或小麦白粉病。
4.权利要求1所述的tamyb1基因或权利要求2所述的tamyb1蛋白在调控小麦真菌病害抗性中的应用。
5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,抑制tamyb1基因表达提高小麦真菌病害抗性。
6.根据权利要求4或5所述的应用,其特征在于,所述小麦真菌病害包括小麦条锈病和/或小麦白粉病。
7.一种感病性小麦植株的获取方法,其特征在于,包括以下步骤:
8.根据权利要求7所述的获取方法,其特征在于,所述步骤1)myb1vigs片段和pcabs-γ载体都经apai限制性内切酶酶切后再连接。
9.根据权利要求7所述的获取方法,其特征在于,所述步骤1)获取myb1vigs片段使用的上游引物的核苷酸序列如seq id no.4所示,下游引物的核苷酸序列如seq id no.5所示。
10.根据权利要求7所述的获取方法,其特征在于,所述pcabs-α重组菌、pcabs-β重组菌和pcabs-γ-myb1vigs重组菌的浓度都为4×107 cfu/ml,注射量为2 μl/叶片。
技术总结本发明涉及基因工程技术领域,特别是涉及一种调控小麦真菌病害抗性的TaMYB1基因、TaMYB1蛋白及其应用和获取方法。所述TaMYB1基因的cNDA核苷酸序列如SEQ ID No.1所示,所述TaMYB1蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。将本发明的抗条锈病相关蛋白的编码基因干涉(即抑制基因的表达)后可以降低植物对条锈病、白粉病的感病性,如条锈病的侵染型显著降低,可获得对条锈病抗性提高的转基因植株,以作为筛选的防治小麦病害的药物。因此,本发明多重病害抗性的相关蛋白及其基因对培育抗条锈病、白粉病的作物具有重要的意义,适合于推广应用。技术研发人员:王凤涛,蔺瑞明,冯晶受保护的技术使用者:中国农业科学院植物保护研究所技术研发日:技术公布日:2024/9/9本文地址:https://www.jishuxx.com/zhuanli/20240911/293482.html
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