一种美阿沙坦钾中间体有关物质的超高效液相色谱检测方法与流程

本发明属于药物分析，具体涉及一种分离并检测美阿沙坦钾中间体有关物质的超高效液相色谱法。

背景技术：

1、美阿沙坦钾（前药）及其活性代谢物阿齐沙坦为苯并咪唑-7-羧酸衍生物，系血管紧张素ⅱ（atⅱ）受体拮抗剂（arb）类抗高血压药，对at1受体具有选择性。可以单独或与其他抗高血压药物联合使用。

2、中间体化合物（ⅲ）（cas号：1449029-77-9）为制备美阿沙坦钾原料药的关键中间体，结构式如下：

3、

4、美阿沙坦钾中间体化合物（ⅲ）的多个结构相似杂质，在合成工艺过程中均会直接参与反应，产生美阿沙坦钾对应的工艺副产物杂质。由于其结构与美阿沙坦钾相似，性质相近，故在合成工艺过程中很难去除，从而可能影响终产品美阿沙坦钾的质量。

5、部分杂质及化合物（ⅲ）在结构上非常相似，但从极性角度考虑，部分杂质却存在着较大的极性差异，因此，建立一种在同一色谱柱上稳定高效的测定美阿沙坦钾中间体化合物（ⅲ）有关物质的检测方法，完善对该中间体的质量控制，是非常必要的。目前尚未检索到美阿沙坦钾中间体化合物（ⅲ）有关物质的检测方法。

技术实现思路

1、本发明解决了现有技术中存在的问题，提供了一种高效率测定美阿沙坦钾中间体化合物（ⅲ）有关物质的反相uplc测定方法，操作简便，专属性、线性、精密度均良好，且灵敏度高、方法耐用性好，可用于美阿沙坦钾中间体化合物（ⅲ）的质量控制，满足现有需要。

2、本发明提供了一种美阿沙坦钾中间体有关物质的超高效液相色谱检测方法，包括以下步骤：分别取分离度溶液、供试品溶液进样，按超高效液相色谱条件进行检测，记录色谱图；所述色谱条件为：色谱柱：十八烷基键合表面带电杂化颗粒硅胶为填充剂的色谱柱；流动相：流动相a为缓冲溶液，流动相b为有机溶剂，按下表进行梯度洗脱：

3、；

4、优选的，梯度洗脱条件为：

5、；

6、其中，所述有关物质包括杂质ⅲ-3、杂质ⅵa-5，其结构如下所示：

7、；

8、所述有关物质还可进一步包括如下所示的杂质：

9、。

10、所述色谱条件还包括：

11、检测器：pda检测器；

12、流速：0.4ml/min；

13、柱温：30~40℃，优选35℃；

14、检测波长：210nm；

15、进样量：2μl。

16、所述的色谱柱优选waters acquity uplc csh c18，100mm×2.1mm, 1.7μm。

17、所述的流动相a，缓冲溶液为磷酸盐缓冲液，可选自磷酸二氢铵溶液、磷酸二氢钾溶液、磷酸二氢钠溶液、磷酸二氢钙溶液中的一种或几种，优选磷酸二氢铵溶液。其中，所述磷酸二氢铵溶液用酸性试剂调节ph值至2.3～2.7，优选2.5，其浓度为10~50 mmol/l，优选10 mmol/l。所述酸性试剂为选自冰醋酸、磷酸、甲酸中的一种或多种，优选磷酸。

18、所述的流动相b，有机溶剂选自乙腈、甲醇、四氢呋喃中的一种或几种，优选乙腈。

19、所述分离度溶液通过以下过程配制：取各杂质对照品各适量，加溶剂使溶解并稀释，摇匀，作为各杂质贮备液；取化合物（iii）适量，加溶剂使溶解，再加各杂质贮备液适量，用溶剂稀释摇匀即得。

20、所述供试品溶液通过以下过程配制：取化合物（iii）适量，加溶剂溶解并稀释摇匀即得。

21、其中所述溶剂为流动相a：流动相b=40~60∶60~40，优选50∶50。

22、本发明进一步提供了一种美阿沙坦钾中间体有关物质的超高效液相色谱检测方法，包括以下步骤：分别取分离度溶液、供试品溶液进样，按超高效液相色谱条件进行检测，记录色谱图；所述色谱条件为：色谱柱：waters acquity uplc csh c18，100mm×2.1mm,1.7μm；流动相：流动相a为磷酸二氢铵溶液，流动相b为乙腈，按下表进行梯度洗脱：

23、；

24、优选的，梯度洗脱条件为：

25、；

26、其中，所述有关物质包括杂质ⅲ-3、杂质ⅵa-5，其结构如下所示：

27、；

28、所述有关物质还可进一步包括如下所示的杂质：

29、。

30、所述色谱条件还包括：

31、检测器：pda检测器；

32、流速：0.4ml/min；

33、柱温：35℃；

34、检测波长：210nm；

35、进样量：2μl。

36、所述的流动相a磷酸二氢铵溶液用磷酸调节ph值至2.5，其浓度为20mmol/l。

37、所述分离度溶液通过以下过程配制：杂质贮备液：（1）分别取杂质ⅶa-6对照品、化合物（ⅵa）对照品、杂质ⅵa-6对照品、化合物（5a）对照品、杂质ⅲ-3对照品各约2mg，置不同10ml量瓶中，加四氢呋喃约2ml使溶解，用溶剂稀释至刻度。（2）分别取杂质ⅶa-11对照品、化合物（ⅶa）对照品、化合物（ⅴb）对照品、化合物（ⅳ）对照品、杂质ⅲ-1对照品、杂质ⅲ-4对照品各约2mg，置10ml量瓶中，加溶剂使溶解并稀释至刻度。（3）取杂质ⅵa-5对照品约2mg，置10ml量瓶中，加四氢呋喃使溶解并稀释至刻度。分离度溶液：取化合物（ⅲ）约10mg，置50ml量瓶中，加溶剂适量使溶解，分别取各杂质贮备液适量，制成每1ml中含主成分和各杂质分别约为0.2mg和2μg的溶液。

38、所述供试品溶液通过以下过程配制：取化合物（ⅲ）约10mg，置50ml量瓶中，加四氢呋喃约5ml使溶解，用溶剂稀释至刻度，摇匀滤过即得。

39、其中所述溶剂为流动相a：流动相b=50∶50。

40、本发明进一步提供了一种美阿沙坦钾中间体有关物质的超高效液相色谱检测方法在美阿沙坦钾质量控制中的用途。

41、本发明的有益技术效果为：

42、（1）本发明可实现同一方法对极性差异较大杂质（如杂质ⅲ-3与杂质ⅵa-5）的控制，避免了分析检测时间较长或开发多个色谱方法进行样品检测，大幅度减少了相关人力物力的投入，节约了成本，提升了检测效率。

43、（2）本发明可实现美阿沙坦钾中间体化合物（ⅲ）与相邻杂质的有效分离，操作简便，专属性、线性、精密度均良好，且灵敏度高、方法耐用性好，可用于美阿沙坦钾中间体化合物（ⅲ）的质量控制，满足现有需要。

技术特征：

1.一种美阿沙坦钾中间体有关物质的超高效液相色谱检测方法，包括以下步骤：分别取分离度溶液、供试品溶液进样，按超高效液相色谱条件进行检测，记录色谱图；所述色谱条件为：色谱柱：十八烷基键合表面带电杂化颗粒硅胶为填充剂的色谱柱；流动相：流动相a为缓冲溶液，流动相b为有机溶剂，按下表进行梯度洗脱：

2.根据权利要求1所述的美阿沙坦钾中间体有关物质的超高效液相色谱检测方法，其特征在于，所述有关物质还包括如下所示：

3.根据权利要求1所述的美阿沙坦钾中间体有关物质的超高效液相色谱检测方法，其特征在于，所述色谱条件还包括：

4.根据权利要求1所述的美阿沙坦钾中间体有关物质的超高效液相色谱检测方法，其特征在于，所述色谱柱为waters acquity uplc csh c18， 100mm×2.1mm，1.7μm。

5.根据权利要求1所述的美阿沙坦钾中间体有关物质的超高效液相色谱检测方法，其特征在于，所述流动相a，缓冲溶液为磷酸盐缓冲液，可选自磷酸二氢铵溶液、磷酸二氢钾溶液、磷酸二氢钠溶液、磷酸二氢钙溶液中的一种或几种。

6.根据权利要求5所述的美阿沙坦钾中间体有关物质的超高效液相色谱检测方法，其特征在于，所述磷酸盐缓冲液用酸性试剂调节ph值至2.3～2.7，其浓度为10~50 mmol/l。

7.根据权利要求6所述的美阿沙坦钾中间体有关物质的超高效液相色谱检测方法，其特征在于，所述酸性试剂选自冰醋酸、磷酸、甲酸中的一种或多种。

8.根据权利要求1所述的美阿沙坦钾中间体有关物质的超高效液相色谱检测方法，其特征在于，所述流动相b选自乙腈、甲醇、四氢呋喃中的一种或几种。

9.根据权利要求1所述的美阿沙坦钾中间体有关物质的超高效液相色谱检测方法，其特征在于，所述梯度洗脱条件为：

10.根据权利要求1所述的美阿沙坦钾中间体有关物质的超高效液相色谱检测方法在美阿沙坦钾质量控制中的用途。

技术总结本发明解决了现有技术中存在的问题，提供了一种美阿沙坦钾中间体有关物质的超高效液相色谱检测方法，操作简便，专属性、线性、精密度均良好，且灵敏度高、方法耐用性好，可用于美阿沙坦钾中间体化合物（ⅲ）的质量控制，满足现有需要。技术研发人员：房娟娟,蒲静,李英杰,陈晓荔,张铁成,王丽美,周金辉受保护的技术使用者：山东百诺医药股份有限公司技术研发日：技术公布日：2024/10/17