抑制或者敲除COMP基因的试剂的应用及治疗口腔黏膜下纤维性变药物

本发明涉及生物医药，特别是涉及抑制或者敲除comp基因的试剂的应用及治疗口腔黏膜下纤维性变药物。

背景技术：

1、口腔黏膜下纤维性变(oral submucous fibrosis,osf)是因长期咀嚼槟榔导致的一种慢性、隐匿性的口腔黏膜病。osf是公认的癌前病变，在不同的病变期，未经治疗的osf的恶变率为4.2％。以ⅰ型胶原为主要成分的细胞外基质的合成与降解失衡而导致的口腔黏膜固有层及黏膜下层胶原堆积和玻璃样变是osf最重要的病理特征之一。由此造成的口腔黏膜质地变韧及苍白色改变，更甚者可扪及纤维条索的形成及逐步加重的张口受限是osf最主要的临床症状之一。黏膜下注射糖皮质激素或者丹参溶液可部分逆转早中期患者的临床症状，但只能起到缓解作用；对于严重张口困难的患者，手术在一定程度上能改善张口，但手术创伤大术后恢复困难及可能面临瘢痕形成疗效不确定，所以osf的手术治疗较少应用于临床。

2、软骨寡聚基质蛋白(cartilage oligomeric matrix protein，comp)是一种五聚体多结构域蛋白，每个单体由一个n端结构域、4个2型表皮生长因子样重复序列、7个3型钙结合重复序列和一个c端结构域组成。

3、本发明前期通过rna高通量测序筛选出comp是介导胶原异常沉积的重要致病因子，osf患者的颊粘膜中comp、ⅰ型胶原均表达上调，并筛选出xiv型胶原作为ⅰ型胶原的伴侣胶原也随着osf的发展而上调。功能实验显示，野生型小鼠及口腔颊粘膜成纤维细胞在槟榔碱的刺激下comp、ⅰ型胶原、xiv胶原表达均上调。这些结果提示comp通过与xiv胶原促进ⅰ型胶原的异常沉积从而促进osf的进展。靶向comp可抑制成纤维细胞激活和组织纤维化，抑制comp是治疗口腔黏膜下纤维化的一个潜在靶点。因此，研究和开发抑制comp表达的物质，具有很好的治疗口腔黏膜下纤维化的成药前景。

技术实现思路

1、osf发病机制复杂，目前缺乏有效的治疗药物，本发明的首要目的是提供抑制或者敲除comp基因的试剂在制备治疗口腔黏膜下纤维性变制剂中的应用。降低或者完全抑制comp基因的表达，进而减轻甚至逆转胶原的异常沉积，有效治疗osf。

2、进一步地，所述的抑制comp基因的试剂包括：shrna。

3、所述的敲除comp基因的试剂包括利用crisper cas9技术，在mrna水平降低comp基因的表达的试剂。

4、本发明的第二个目的是提供一种治疗口腔黏膜下纤维性变药物，为所述的抑制或者敲除comp基因的试剂。

5、所述的药物还包括药学上可接受的载体或赋形剂。

6、在治疗osf时，本发明所述的药物可以单独使用或者和其他药物联合使用

7、本发明的第三个目的是提供抑制或者敲除comp基因的试剂在制备减少ⅰ型胶原沉积制剂中的应用。

8、所述的抑制comp基因的试剂包括：shrna。

9、所述的敲除comp基因的试剂包括利用crisper cas9技术，在mrna水平降低comp基因的表达的试剂。

10、本发明的第四个目的是提供检测comp基因的试剂在制备口腔黏膜下纤维性变检测制剂中的应用。

11、所述的检测comp基因的试剂包括pcr检测试剂。

12、本发明所述的osf是指人或动物的口腔下黏膜纤维性变，所述osf的症状包括：由口腔黏膜中胶原异常沉积引起的黏膜苍白色改变，瘢痕条索样改变及张口受限。所述的osf的病因为：长期咀嚼槟榔。其中所述的药物为槟榔中主要的化学物质，即槟榔碱。

13、本发明所述的治疗osf的程度，或者治愈osf使之正常化，或者减缓口腔粘膜下纤维性变的进程。

14、本发明有益技术效果：本发明提供了可特异性抑制comp表达的shrna，该shrna能够靶向降低comp表达，还提供了crisper cas9基因编辑方案用于敲除comp基因，进一步减少ⅰ型胶原和xiv型胶原的表达，从而应用于抗osf的药物的制备中。利用上述shrna所制备的药物在治疗osf疾病中，具有疗效显著，毒副作用小，使用安全的优点。

技术特征：

1.抑制或者敲除comp基因的试剂在制备治疗口腔黏膜下纤维性变制剂中的应用。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的抑制comp基因的试剂包括：shrna。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的敲除comp基因的试剂包括利用crisper cas9技术，在mrna水平降低comp基因的表达的试剂。

4.一种治疗口腔黏膜下纤维性变药物，为权利要求1-3任一项所述的抑制或者敲除comp基因的试剂。

5.抑制或者敲除comp基因的试剂在制备减少ⅰ型胶原沉积制剂中的应用。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述的抑制comp基因的试剂包括：shrna。

7.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述的敲除comp基因的试剂包括利用crisper cas9技术，在mrna水平降低comp基因的表达的试剂。

8.检测comp基因的试剂在制备口腔黏膜下纤维性变检测制剂中的应用。

9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述的检测comp基因的试剂包括pcr检测试剂。

技术总结本发明公开了一种抑制或者敲除COMP基因的试剂的应用及治疗口腔黏膜下纤维性变药物，属于生物医药领域，shRNA及crisper cas9基因编辑方案能够特异性地抑制COMP靶基因表达，从而减少Ⅰ型胶原的沉积，减轻甚至逆转口腔黏膜下纤维性变；通过抑制COMP表达治疗口腔黏膜下纤维性变疗效显著，毒副作用小，使用安全。技术研发人员：郭峰,吴晓珊,熊亚菲受保护的技术使用者：中南大学技术研发日：技术公布日：2024/11/14