一种调节肠道细胞发育的发酵粘液乳杆菌TG017后生元及应用的制作方法

本发明涉及一种调节肠道细胞发育的发酵粘液乳杆菌tg017后生元及应用，属于后生元。

背景技术：

1、益生菌主要存在于人体肠道中，通过维持肠道微生物的平衡，在宿主体内发挥有益作用。近年来，有研究表明，益生菌可以增强免疫力，保持健康。益生菌是肠道菌群的关键成员，影响着肠道健康，在日常生活中，商业益生菌相关产品逐渐增加。了解益生菌的功效可以更好的将其转化为健康产品。随着科学研究的不断深入，益生菌的领域和功能得到了广泛拓展。研究发现，不仅活菌能够发挥益生作用，一些“非活菌”组分也展现出显著的益生效果。这些组分包括但不限于益生菌的代谢产物，它们含有多种活性物质，如酶类、多肽、短链脂肪酸以及多糖类物质(例如胞外多糖)。这些代谢产物在调节肠道健康、增强免疫功能以及促进营养吸收等方面均显示出潜在的健康益处。这一发现为益生菌的应用提供了新的研究方向，表明即便在益生菌失活的情况下，其代谢产物仍然可能具有维护和改善人类健康的潜在价值。后生元是益生菌经加工处理后的益生菌代谢物成分统称，包括菌体与代谢产物。有研究表明益生菌代谢产物具有相近于益生菌的功效，并且相较于益生菌具有更高的胃酸耐受性且更易于保存。但是，现有技术中具有良好调节肠道细胞发育功效的后生元较少。

技术实现思路

1、本发明提供了一种调节肠道细胞发育的发酵粘液乳杆菌tg017后生元及应用，可以有效解决上述问题。

2、本发明是这样实现的：

3、一种发酵粘液乳杆菌tg017后生元的制备方法，将发酵粘液乳杆菌tg017接种于脑心浸出液肉汤培养基bhis，进行培养并收集代谢产物，即得所述后生元；所述培养的条件为在36.5-37.5℃条件下，厌氧培养22-26h；所述发酵粘液乳杆菌tg017的保藏号为cctcc m2023513。

4、在一些实施例中，所述发酵粘液乳杆菌tg017的16srdna的序列如seq id no:1所示。

5、在一些实施例中，脑心浸出液肉汤培养基bhis的配方为：幼牛脑提取粉20g/l；牛心提取粉25g/l；葡萄糖2.0g/l；蛋白胨10g/l；磷酸氢二钾2.5g/l；酵母提取物5g/l；l-半胱氨酸0.5g/l；刃天青母液0.1mg/l；血晶素母液2.5μg/l；维生素k1母液0.05mg/l；最终ph为6.8-7.0。

6、一种上述的制备方法制备的发酵粘液乳杆菌tg017后生元。

7、一种上述的发酵粘液乳杆菌tg017的后生元在制备降脂药物中的应用。

8、一种上述的发酵粘液乳杆菌tg017的后生元在制备调节肠道发育的药物中的应用。

9、一种小鼠小肠类器官培养方法，包括以下步骤：

10、s1，将小鼠处死后取出小肠组织段8-10cm，用冰上预冷的pbs将小肠内容物冲洗干净，剪成肠段，将其沿纵轴剪开，用无菌的盖玻片刮去小肠绒毛，弃去绒毛，剩下组织置于冷pbs备用；

11、s2，加入edta溶液消化，进行肠隐窝解离与收集；

12、s3，制备基质胶与肠隐窝混悬液，将其接种在提前预热的培养器中，之后置于37℃细胞培养箱中孵育凝固，加入mio cm进行培养；在mio cm中加入上述的发酵粘液乳杆菌tg017的后生元。

13、在一些实施例中，所述发酵粘液乳杆菌tg017的后生元的加入量为0.5-1.5v/v％。

14、一种上述的方法培养的小鼠小肠类器官系统。

15、一种上述的小鼠小肠类器官系统在评价后生元调节肠道发育的功效中的应用。

16、本发明的有益效果是：

17、本发明所述发酵粘液乳杆菌tg017的后生元，可显著地同时提高小肠器官扩增倍数和出芽率，促进小肠类器官的增殖与分化，具有良好的调节肠道细胞发育的功效。

18、本发明培养了小鼠小肠类器官系统，统构建了肠道类器官-后生元共培养平台，缩短了后生元调节肠道功效的评价周期。

技术特征：

1.一种发酵粘液乳杆菌tg017后生元的制备方法，其特征在于，将发酵粘液乳杆菌tg017接种于脑心浸出液肉汤培养基，进行培养并收集代谢产物，即得所述后生元；所述培养的条件为在36.5-37.5℃条件下，厌氧培养22-26h；所述发酵粘液乳杆菌tg017的保藏号为cctcc no：m 2023513。

2.根据权利要求1所述的发酵粘液乳杆菌tg017后生元的制备方法，其特征在于，所述发酵粘液乳杆菌tg017的16srdna的序列如seq id no:1所示。

3.根据权利要求1所述的发酵粘液乳杆菌tg017后生元的制备方法，其特征在于，所述脑心浸出液肉汤培养基bhis的配方为：幼牛脑提取粉20g/l；牛心提取粉25g/l；葡萄糖2.0g/l；蛋白胨10g/l；磷酸氢二钾2.5g/l；酵母提取物5g/l；l-半胱氨酸0.5g/l；刃天青母液0.1mg/l；血晶素母液2.5μg/l；维生素k1母液0.05mg/l；最终ph为6.8-7.0。

4.一种权利要求1至3任一项所述的制备方法制备的发酵粘液乳杆菌tg017后生元。

5.一种权利要求4所述的发酵粘液乳杆菌tg017的后生元在制备降脂药物中的应用。

6.一种权利要求4所述的发酵粘液乳杆菌tg017的后生元在制备调节肠道发育的药物中的应用。

7.一种小鼠小肠类器官培养方法，其特征在于，包括以下步骤：

8.根据权利要求7所述的小鼠小肠类器官培养方法，其特征在于，所述发酵粘液乳杆菌tg017的后生元的加入量为0.5-1.5v/v％。

9.一种权利要求7至8任一项所述的方法培养的小鼠小肠类器官系统。

10.一种权利要求9所述的小鼠小肠类器官系统在评价后生元调节肠道发育的功效中的应用。

技术总结本发明提供一种发酵粘液乳杆菌TG017后生元及应用，其制备方法为将发酵粘液乳杆菌TG017接种于脑心浸出液肉汤培养基，进行培养并收集代谢产物，即得所述后生元；所述培养的条件为在37℃条件下，厌氧培养22‑26h；所述发酵粘液乳杆菌TG017的保藏号为CCTCC NO：M 2023513。该后生元可显著地提高小肠器官扩增倍数和出芽率，促进小肠类器官的增殖与分化。技术研发人员：肖传兴,张帮周,陈淑婷,李源涛,徐炜,何剑全受保护的技术使用者：厦门承葛生物科技有限公司技术研发日：技术公布日：2024/11/18