一种提高畜禽抗应激能力的饲料添加剂及其制备方法与流程

本发明涉及饲料添加剂领域，尤其是涉及一种提高畜禽抗应激能力的饲料添加剂及其制备方法。

背景技术：

1、随着畜禽动物养殖业的规模化、集约化发展，养殖过程中不可避免的产生很多应激的因素，导致畜禽动物的应激反应变得十分普遍；有研究表明，外界环境因素（如高温、低氧状态等）、物理化学因素（如长途运输、噪音、有毒物质等）、生产活动因素（如妊娠、哺乳、断奶等）以及病原体（如致病菌、病毒等）都会造成畜禽动物机体的应激反应。应激反应是畜禽动物机体在前述因素作用下产生的非特异性应答反应，主要反应包括：热喘息、心率加快、体内氧化代谢增加、物质代谢加快、电解质平衡紊乱，直接导致畜禽动物采食量降低而导致营养物质摄入量不足，并通过改变畜禽动物肠道形态，影响紧密连接蛋白表达等途径破坏畜禽动物机体原有屏障功能，破坏畜禽动物的肠道结构和功能完整性，最终导致畜禽动物生产性能、繁殖性能等的下降，动物自身免疫力降低，最终导致畜禽动物机体产生各种疾病，如黏膜损伤、心血管疾病、组织器官炎症、代谢紊乱、繁殖性能降低、肠道屏障损伤等。目前，养殖过程中应激反应所导致畜禽动物的生产力、免疫力、繁殖能力等的降低已经成为阻碍畜禽动物养殖高质量发展的重要因素。

2、针对于提高畜禽抗应激能力，现有技术采用有抗生素法、复合中药调节法。其中，抗生素法是通过向畜禽动物饲料中添加抗生素成分，通过抗生素成分的直接作用改善畜禽动物的抗应激能力。但畜禽动物长期摄入抗生素成分，易于导致体内菌群失衡，抑制免疫系统的正常功能，会增加畜禽动物对其他疾病的易感性；并且，抗生素成分还存在剂量不易控制、药物残留、环境污染、生态破坏等不利影响。复合中药调节法是通过向畜禽动物饲料中添加复合中药粉或复合中药提取物等，通过复合中药对动物机体的调节作用，间接改善畜禽动物的抗应激能力。但复合中药成分对畜禽动物的作用机理并不明确，且需要大量摄入才能够获得一定的抗应激改善作用，作用效果不稳定；同时，复合中药成分的大量添加，对畜禽动物肠胃刺激性大，易于导致过敏反应，还存在潜在毒性，影响畜禽动物的正常生产、繁殖性能。并且，现有的提高畜禽动物抗应激能力的饲料添加剂的整体稳定性不佳，施用过程中容易与饲料中的其他成分相互影响，且不耐储存，直接导致饲料添加剂中抗应激有效成分活性降低，进而影响施用效果。

技术实现思路

1、为解决现有技术中存在的技术问题，本发明提供一种提高畜禽抗应激能力的饲料添加剂及其制备方法，能够克服抗生素类、复合中药类饲料添加剂对畜禽动物的不利影响，能够在降低饲料添加剂用量的同时，提高对畜禽动物抗应激能力的改善效果；并同时提高畜禽动物抗应激能力的饲料添加剂的整体稳定性，避免施用或长期存储过程中抗应激有效成分活性降低。

2、为解决以上技术问题，本发明采取的技术方案如下：

3、一种提高畜禽抗应激能力的饲料添加剂的制备方法，由以下步骤组成：制备基础活性成分、制备复合提取液、制备复合活性成分、制备包覆物、表面处理。

4、所述制备基础活性成分的方法为，将六水合硝酸锌、三水合硝酸铜、聚乙烯吡咯烷酮、煅烧贝壳粉投入至n,n-二甲基甲酰胺中，搅拌10-20min后，继续投入对苯二甲酸，搅拌均匀后，转入至高压反应釜内，密封高压反应釜后，将高压反应釜置于恒温箱内，115-125℃保温反应20-24h后，自然冷却至室温，10000-12000rpm离心分离获得固体物，采用3-4倍重量的n,n-二甲基甲酰胺洗涤固体物后，再采用5-6倍重量的无水乙醇洗涤固体物后，干燥，制得基础活性成分。

5、所述制备基础活性成分中，六水合硝酸锌、三水合硝酸铜、聚乙烯吡咯烷酮、煅烧贝壳粉、对苯二甲酸、n,n-二甲基甲酰胺的重量比为1.1-1.2:0.2-0.25:3-3.3:12-12.5:0.4-0.45:70-75；

6、煅烧贝壳粉的粒径为55-60μm。

7、所述制备复合提取液的方法为，分别采用去离子水清洗橙皮、核桃分心木、金银花，沥除水分后，分别置于温度为-35℃至-30℃的环境中，预冷冻30-36h后，采用冷冻干燥机进行冻干处理，获得冻干橙皮、冻干核桃分心木、冻干金银花；将冻干橙皮、冻干核桃分心木、冻干金银花混合粉碎至1200-1300目，获得混合植物粉末；然后将混合植物粉末投入至14-15倍重量的乙醇溶液（体积浓度60-65%）中，在40-45℃温度条件下，超声提取20-30min，过滤分离出固体物，获得第一份提取液；然后将固体物投入至9-11倍重量的乙醇溶液（体积浓度60-65%）中，在40-45℃温度条件下，超声提取15-20min，过滤去除固体物，获得第二份提取液；合并第一份提取液和第二份提取液，搅拌均匀后，真空浓缩至原有体积的45-50%，制得复合提取液。

8、所述制备复合提取液中，冻干橙皮、冻干核桃分心木、冻干金银花的重量比为10-11:7-8:3-3.5；

9、超声提取的频率为35-40khz，超声提取的功率为300-350w。

10、橙皮，又名黄果皮，是芸香科植物甜橙的果皮。橙皮中包括有橙皮苷、柚皮苷等黄酮类化合物，具有抗氧化功能。同时，橙皮还具有健脾、开胃、抗菌等功效。

11、核桃分心木，又名核桃隔膜，是胡桃科核桃属植物果核内部的木质隔膜，呈弯曲不规则的薄片状，且质地脆。核桃分心木中包括有黄酮类化合物、多酚类化合物、皂苷类化合物等抗氧化成分，前述抗氧化成分能够通过不同机制展现出好的抗氧化性能。同时，核桃分心木还具有抗菌、清热、镇定等功效。

12、金银花，又名忍冬，为忍冬科忍冬属植物忍冬的干燥花蕾或待开放的花。金银花中包括有黄酮类化合物等抗氧化成分。同时，金银花还具有清热、解毒、凉血、抗菌等功效。

13、所述制备复合活性成分的方法为，将基础活性成分投入至6-7倍重量的乙醇溶液（体积浓度70-75%）中，搅拌10-20min后，搅拌条件下，升温至45-50℃，保温搅拌滴入硅烷偶联剂a-172；硅烷偶联剂a-172在40-60min内滴加完毕后，继续保温搅拌8-10h，分离出固体物，干燥，获得预改性物；将预改性物投入至9-10倍重量的复合提取液中，室温搅拌10-12h后，分离出固体物，固体物经去离子水淋洗后，置于真空干燥器内，在真空度0.05-0.06mpa，65-70℃温度下干燥至恒重，制得复合活性成分。

14、所述制备复合活性成分中，基础活性成分、硅烷偶联剂a-172的重量比为10:1.2-1.6。

15、所述制备包覆物的方法为，将β-环糊精、麦芽糊精投入至去离子中，升温至45-50℃，保温搅拌40-50min，制得包被液；将复合活性成分、羧甲基纤维素投入至去离子水中，搅拌20-30min，制得活性液；按1.8-2:1的重量比，将包被液与活性液混合均匀后，喷雾干燥，制得包覆物。

16、所述包被液中β-环糊精、麦芽糊精、去离子水的重量比为12-13:5-5.5:100；

17、所述活性液中复合活性成分、羧甲基纤维素、去离子水的重量比为10-11:1.2-1.5:100。

18、所述表面处理的方法为，将包覆物投入至24-25倍重量的去离子水中，搅拌5-10min后，继续投入谷胱甘肽，搅拌10-20min后，转入至反应釜内，采用氮气完全置换反应釜内的空气，然后以0.5-0.7℃/min的升温速率，搅拌升温至50-55℃，保温搅拌5-6h后，分离出固体物；采用5-6倍重量的去离子水洗涤固体物后，置于真空干燥器内，在真空度0.05-0.06mpa，65-70℃温度下干燥至恒重，制得提高畜禽抗应激能力的饲料添加剂。

19、所述表面处理中，包覆物与谷胱甘肽的重量比为9-10:1。

20、一种提高畜禽抗应激能力的饲料添加剂，采用前述的制备方法制得。

21、与现有技术相比，本发明的有益效果为：

22、（1）本发明的提高畜禽抗应激能力的饲料添加剂的制备方法，在制备基础活性成分步骤中，采用六水合硝酸锌与三水合硝酸铜配合，在煅烧贝壳粉存在下，通过原位生成的方式，制得与贝壳粉复合的cu修饰mof-5（即基础活性成分），一方面针对畜禽动物应激产生的过量有害自由基，通过zn/cu金属有机框架的抗氧化性能进行清除，激活应激畜禽动物的抗氧化防御系统，降低应激反应对畜禽动物机体的损伤；另一方面增加基础活性成分的活性位点，提高基础活性成分与后续复合提取液中植物活性成分的结合性能，以及提高基础活性成分的整体稳定性。然后在制备复合提取液步骤中，针对性选取橙皮、核桃分心木、金银花作为植物源材料，提取其中的活性成分，制成复合提取液；通过橙皮、核桃分心木、金银花的抗氧化活性成分，以及针对畜禽动物应激反应具有调节功能的抗应激活性成分，各有效成分配合，对畜禽动物机体进行抗应激调节。然后在制备复合活性成分步骤中，先采用具有乙烯基及可水解烷氧基的硅烷偶联剂对基础活性成分进行改性处理，进一步提高基础活性成分与复合提取液中有效成分的结合性能及整体稳定性，然后将预改性物投入至复合提取液中进行键合吸附，制得复合活性成分。然后在制备包覆物步骤中，对前述制得的复合活性成分进行包覆处理，制得包覆物，进一步提高饲料添加剂的整体稳定性，避免施用或长期存储过程中抗应激有效成分活性降低；然后在表面处理中，采用谷胱甘肽对包覆物进行进一步的改性处理，在改善包覆物结构稳定性，提高微胶囊与畜禽动物机体相容性的同时，进一步提高饲料添加剂的抗氧化性能及抗应激调节性能，提高饲料添加剂的整体稳定性，并强化饲料添加剂对畜禽动物抗应激能力的改善效果，进一步调节畜禽动物机体生长性能及免疫力；前述各技术手段相互配合，协同作用，能够克服抗生素类、复合中药类饲料添加剂对畜禽动物的不利影响，能够在降低饲料添加剂用量的同时，提高对畜禽动物抗应激能力的改善效果；并同时提高畜禽动物抗应激能力的饲料添加剂的整体稳定性，避免施用或长期存储过程中抗应激有效成分活性降低。

23、（2）本发明的提高畜禽抗应激能力的饲料添加剂，用于肉鸡饲喂试验中，在添加量为0.6%前提下，肉鸡在温度32℃、相对湿度85%环境中的第14天平均体重为777.8-779.5g，t淋巴细胞转化率为57.2-57.9%，b淋巴细胞转化率为71.0-71.6%，血浆皮质酮含量为2.69-2.80ng/ml，存活率100%；在解除热应激环境2天后，t淋巴细胞转化率为61.9-62.5%，b淋巴细胞转化率为83.2-83.7%，血浆皮质酮含量为1.31-1.38ng/ml，第21天平均体重为1280.9-1283.6g。

24、（3）本发明的提高畜禽抗应激能力的饲料添加剂，用于蛋鸡饲喂试验中，在添加量为0.8%前提下，蛋鸡在温度32℃、相对湿度85%环境中饲喂的第8至第21天内，蛋鸡产蛋率为90.4-90.5%，平均日采食量为121.9-122.5g/只，料蛋比为2.20-2.23，合格蛋率为95.0-95.1%，总抗氧化能力为1.81-1.84u/ml，超氧化物岐化酶含量为41.9-42.2u/ml，丙二醛含量为4.26-4.31nmol/ml。

25、（4）本发明的提高畜禽抗应激能力的饲料添加剂，在温度32℃、相对湿度70%环境中，静置储存90天后用于蛋鸡饲喂中，蛋鸡产蛋率为90.1%，平均日采食量为120.6g/只，料蛋比为2.22，合格蛋率为95.0%，总抗氧化能力为1.80u/ml，超氧化物岐化酶含量为41.2u/ml，丙二醛含量为4.35nmol/ml。