一种平卧菊三七提取物、防治急性肾损伤制剂及其制备和使用方法与流程

1.本发明涉及医药技术，尤其涉及一种平卧菊三七提取物、防治急性肾损伤制剂及其制备和使用方法。


背景技术：

2.平卧菊三七(gynuraprocumbens(lour.)merr)是菊科菊三七属的植物，分布于越南、泰国、印度尼西亚和非洲以及中国的广东、海南、贵州、云南、江西等地，是一种传统食物和药物，用于治疗糖尿病、癌症和高血压，具有清热解毒、止血止咳、活血通络、提高人体免疫力和抗病毒能力、补钙、抗感冒、降三高、提高免疫力等功效，是一种无毒级的药食兼可的植物。
3.本发明的发明人发现的，现有平卧菊三七应用具有以下问题：1.需要进一步拓展应用领域充分发挥中草药毒副作用小、价格便宜、对环境污染小的作用；2平卧菊三七叶是传统的药用和使用部位，其茎在习惯上常被扔弃，而没有被用作食物或药物，造成较大的资源浪费。


技术实现要素：

4.为解决背景技术中提及的至少一个问题，本发明实施方式的目的在于提供一种平卧菊三七提取物、防治急性肾损伤制剂及其制备和使用方法，将平卧菊三七用于急性肾损伤治疗，开发了平卧菊三七的新用途，并且在取得良好效，平卧菊三七可以用来预防治疗急性肾损伤，产生较好的经济效益和社会效益；并同时对茎等部位进行处理同样可以作为原料，拓展了原料选用范围。
5.一种防治急性肾损伤制剂，包含化合物1、化合物2、化合物3和正三十二烷醇；
6.所述化合物1为
7.[0008][0009]
所述化合物2为
[0010][0011]
所述r2包括
‑
coch3和
‑
coch2ch3；
[0012]
所述化合物3为
[0013][0014]
一种平卧菊三七提取物，包含化合物4、化合物5、化合物6和正三十二烷醇；
[0015]
所述化合物4为
[0016][0017]
所述化合物5为
[0018][0019]
所述化合物6为
[0020][0021]
一种平卧菊三七提取物的制备方法，包括以下步骤：
[0022]
(1)取合适平卧菊三七样品洗净、除杂、干燥和破碎加后加8～10倍量70％v/v乙醇浸泡10
‑
60min得混合物一；
[0023]
(2)将所述混合物一在80～100℃回流提取1
‑
10次，每次提取0.5
‑
3h，并将提取后所述混合物一用100
‑
500目滤布滤过，得溶液一；
[0024]
(3)将所述溶液一在真空下浓缩至相对密度1.05～1.10得溶液二；
[0025]
(4)将所述溶液二在进液物料温度30～40℃，进风温度105～110℃，空气压缩比80
‑
150，进液速度10
‑
60ml/min时喷雾干燥得最终产品。
[0026]
优选的，所述平卧菊三七取茎或叶进行提取。
[0027]
一种防治急性肾损伤制剂的制备方法，包含上述平卧菊三七提取物的制备步骤。
[0028]
一种防治急性肾损伤制剂的使用方法，使用上述的防治急性肾损伤制剂或上述方
法制备的防治急性肾损伤制剂。
[0029]
优选的，所述肾损伤为外界感染引起的急性肾损伤。
[0030]
优选的，所述肾损伤为治疗不当引起的肾损伤。
[0031]
优选的，所述肾损伤为药物副作用引起的肾损伤。
[0032]
为更好的验证平卧菊三七提取物、防治急性肾损伤制剂的治疗效果，以180
‑
220g雄性wistar大鼠进行功效验证试验取得了显著的效果，平卧菊三七提取物疗效明确，无毒副作用，应用前景广阔。
[0033]
有益效果
[0034]
本发明提出提供一种平卧菊三七提取物、防治急性肾损伤制剂及其制备和使用方法，具有以下特点：1.将平卧菊三七用于急性肾损伤治疗，开发了平卧菊三七的新用途，并且在降低大鼠血尿素水平及降低肌酐水平达到保护肾脏作用，且没有明显的毒副作用；2.采用提纯方法对不利于直接食用和使用的茎等部位进行处理，使其同样可以作为原料，拓展了原料选用范围。
附图说明
[0035]
图1为一种平卧菊三七提取物制备流程图。
具体实施方式
[0036]
下面对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本发明保护范围。
[0037]
一种防治急性肾损伤制剂，包含化合物1、化合物2、化合物3和正三十二烷醇；
[0038]
所述化合物1为
[0039]
[0040][0041]
所述化合物2为
[0042][0043]
所述r2包括
‑
coch3；
[0044]
所述化合物3为
[0045][0046]
一种平卧菊三七提取物，包含化合物4、化合物5、化合物6和正三十二烷醇；
[0047]
所述化合物4为
[0048][0049]
所述化合物5为
[0050][0051]
所述化合物6为
[0052][0053]
一种平卧菊三七提取物的制备方法，包括以下步骤：
[0054]
(1)取合适平卧菊三七样品洗净、除杂、干燥和破碎加后加8～10倍量70％v/v乙醇浸泡10
‑
60min得混合物一；
[0055]
(2)将所述混合物一在80～100℃回流提取1
‑
10次，每次提取0.5
‑
3h，并将提取后所述混合物一用100
‑
500目滤布滤过，得溶液一；
[0056]
(3)将所述溶液一在真空下浓缩至相对密度1.05～1.10得溶液二；
[0057]
(4)将所述溶液二在进液物料温度30～40℃，进风温度105～110℃，空气压缩比80
‑
150，进液速度10
‑
60ml/min时喷雾干燥得最终产品。
[0058]
优选的，所述平卧菊三七取茎或叶进行提取。
[0059]
一种防治急性肾损伤制剂的制备方法，包含上述平卧菊三七提取物的制备步骤。
[0060]
一种防治急性肾损伤制剂的使用方法，使用上述的防治急性肾损伤制剂或上述方
法制备的防治急性肾损伤制剂。
[0061]
优选的，所述肾损伤为外界感染引起的急性肾损伤。
[0062]
优选的，所述肾损伤为治疗不当引起的肾损伤。
[0063]
优选的，所述肾损伤为药物副作用引起的肾损伤。
[0064]
在一些可选的实施例，将平卧菊三七用于急性肾损伤治疗，开发了平卧菊三七的新用途，并且在降低大鼠血尿素水平及降低肌酐水平达到保护肾脏作用，且没有明显的毒副作用；
[0065]
在一些可选的实施例，采用提纯方法对不利于直接食用和使用的茎等部位进行处理，使其同样可以作为原料，拓展了原料选用范围。
[0066]
平卧菊三七治疗急性肾损伤功效性研究
[0067]
表1血尿素氮(bun,u/l)数据结果
[0068][0069]
注：检验t值小于0.05，具有显著性差异
[0070]
表2肌酐(cre,μmol/l)数据结果
[0071][0072]
注：检验t值小于0.05，具有显著性差异
[0073]
结果：由表1可见，与模型对照组比较，平卧菊三七醇提物低剂量组、中剂量组、高剂量组均能降低大鼠血尿素水平且具有显著性差异(t<0.05)；由表2可见，与模型对照组比较，平卧菊三七醇提物低剂量组、中剂量组、高剂量组均能一定程度降低大鼠肌酐水平，且中剂量组在降低肌酐水平方面具有显著性差异(t<0.05)；综上所述，通过实验研究，在降低大鼠血尿素水平及降低大鼠肌酐水平两项实验结果为阳性，提示平卧菊三七醇提物及其制剂在治疗急性肾损伤方面具有一定的作用。
[0074]
平卧菊三七提取物核磁共振分析
[0075]
在已公开实施方式基础上按照以下步骤制备：干燥平卧菊三七叶子3.0kg，用甲醇
回流提取，提取液经减压浓缩后分散于水中，依次用石油醚和三氯甲烷萃取。得三氯甲烷萃取部分30.5g，经硅胶柱色谱，以石油醚
‑
丙酮系统和三氯甲烷
‑
甲醇系统(体积比100:1～1:1)梯度洗脱，并进一步采用sephadex lh
‑
20柱色谱、半制备高效液相色谱法等方法分离纯化，得到以下4种化合物。
[0076]
化合物4：白色粉末(ch3oh)，易溶于甲醇，硫酸香兰素溶液显紫色，紫外254nm下无暗斑。1h
‑
nmr(400mhz，cd3od)谱中，存在δ4.38(1h，d，j＝7.8hz，h
‑1″
)、4.33(1h，d，j＝7.6hz、h
‑
1')、1.03(3h，s，19
‑
ch3)、0.95(3h，d，j＝6.5hz，27
‑
ch3)、0.87(3h，t，j＝8.2hz，29
‑
ch3)、0.87(3h，s，18
‑
ch3)、0.86(3h，d，j＝8.0hz，21
‑
ch3)、0.84(3h，d，j＝8.0hz，26
‑
ch3)质子信号。其中，δ4.33(1h，d，j＝7.6hz、h
‑
1')、4.38(1h，d，j＝7.8hz，h
‑1″
)为糖端基质子信号，且提示该糖为β
‑
d构型。13c
‑
nmr(100mhz，cd3od)谱中，存在δ142.0(c
‑
5)、122.9(c
‑
6)、105.4(c
‑1″
)、102.7(c
‑
1')、80.2(c
‑
3)、69.7(c
‑
6')、62.6(c
‑6″
)、58.3(c
‑
14)、57.6(c
‑
17)、51.8(c
‑
9)、47.4(c
‑
24)、43.6(c
‑
13)、41.3(c
‑
12)、39.9(c
‑
4)、38.6(c
‑
1)、37.9(c
‑
10)、37.5(c
‑
20)、35.2(c
‑
22)、33.3(c
‑
8)、33.2(c
‑
7)、30.9(c
‑
2)、30.5(c
‑
25)、29.5(c
‑
16)、27.2(c
‑
23)、25.4(c
‑
15)、24.2(c
‑
28)、22.3(c
‑
11)、20.0(c
‑
27)、19.9(c
‑
19)、19.5(c
‑
26)、19.4(c
‑
21)、12.4(c
‑
29)、12.4(c
‑
18)碳信号。δ78.0、77.0、76.9、75.2、75.1、72.6、71.6、70.4分别为2个葡萄糖上的其他碳信号；δ105.4、102.7为糖端基碳信号；δ69.7、62.6为糖6位碳信号，并提示2个葡萄糖1
‑
6位相连。根据以上数据推断化合物4为β
‑
谷甾醇
‑3‑
o
‑
龙胆二糖苷(β
‑
sitosterol
‑3‑
o
‑
gentiobioside)。化合物1包含化合物4及其手性异构体。
[0077]
化合物5：白色固体(ch3oh)，硫酸香兰素溶液显蓝紫色。1h
‑
nmr(400mhz，cd3od)谱中，存在δ3.69(1h，d，j＝7.0hz，h
‑
7a)、3.45(1h，d，j＝7.0hz，h
‑
7b)、3.07(1h，m，h
‑
2')、2.22(3h，s，3'
‑
ch3)、2.08(1h，dd，j＝14.0、6.1hz，h
‑
4a)、1.97(1h，dd，j＝13.7、2.4hz，h
‑
2a)、1.85(2h，m，h
‑
1'a，1'b)、1.77(1h，dd，j＝13.9、10.9hz，h
‑
2b)、1.53(1h，dd，j＝13.8、1.7hz，h
‑
4b)、1.23(3h，s，5
‑
ch3)、1.04(3h，s，1
‑
ch3)质子信号。13c
‑
nmr(100mhz，cd3od)谱中，存在δ213.1(s，c
‑
3')、85.6(s，c
‑
8)、80.1(t，c
‑
7)、77.9(t，c
‑
5)、69.4(s，c
‑
3)、56.6(d，c
‑
2')、54.6(t，c
‑
2)、47.0(t，c
‑
4)、45.4(s，c
‑
1)、33.4(q，3
‑
ch3)、26.7(t，c
‑
1')、20.2(q，5
‑
ch3)、17.8(q，1
‑
ch3)碳信号。根据以上数据推断化合物5为毒豆甲酮(drummondonea)。化合物2包含化合物5及其手性异构体。
[0078]
化合物6：白色粉末(ch3oh)，硫酸香兰素溶液显橙黄色。1h
‑
nmr(400mhz，cd3od)谱中，存在δ8.07(1h，dd，j＝7.7、1.3hz，h
‑
4)、7.95(1h，s，h
‑
2)、7.43(1h，dd，j＝7.7、1.3hz，h
‑
7)、7.20(1h，ddd，j＝7.6、7.5、1.5hz，h
‑
6)、7.17(1h，ddd，j＝7.6、7.5、1.4hz，h
‑
5)质子信号。13c
‑
nmr(100mhz，cd3od)谱中，存在δ169.3(cooh)、138.2(c
‑
9)、133.4(c
‑
2)、127.5(c
‑
8)、123.6(c
‑
4)、122.4(c
‑
6)、122.0(c
‑
5)、112.9(c
‑
7)、108.8(c
‑
3)碳信号。根据以上数据推断化合物6和化合物3同为3
‑
吲哚甲酸(indole
‑3‑
carboxylic acid)。
[0079]
化合物7：白色粉末，硫酸香兰素溶液显灰紫色。1h
‑
nmr(400mhz，cdcl3)谱中，存在δ0.86(3h，t，j＝6.12hz，ch3)、1.25(brs，58h)、1.58(2h，m，h
‑
2)、3.62(2h，t，ch2oh)质子信号。13c
‑
nmr(100mhz，cdcl3)谱中，存在δ14.07(ch3)、32.84～25.75(ch2)、63.10(ch2oh)碳信号。ei
‑
msm/z(rel.int.):448([m]
‑
18，36)、421(8)、365(5)、153(18)、71(80)、57(100)。根据以上数据推断化合物7为正三十二烷醇(n
‑
dotriacontanol)。