黄曲霉致病基因cdc48在筛选防治黄曲霉污染药物中的应用的制作方法

技术特征：
1.黄曲霉致病基因cdc48在筛选防治黄曲霉污染药物中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述应用具体包括：s1：构建检测组黄曲霉菌培养体系和对照组黄曲霉菌培养体系，其中，检测组中添加待筛选药物；s2：将检测组和对照组在相同条件下培养一段时间后，对比检测组和对照组中黄曲霉菌内的cdc48基因或cdc48蛋白的表达水平，若检测组中黄曲霉菌内的cdc48基因或cdc48蛋白的表达水平在一定程度上低于对照组，则待筛选药物为潜在抑制黄曲霉致病性药物。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述步骤s2中，通过荧光定量qpcr或northern blot杂交分析分析检测检测组和对照组中的黄曲霉菌内cdc48基因mrna表达水平。4.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述步骤s2中，通过western blot免疫印迹杂交分析或酶联免疫吸附法分析检测检测组和对照组中的黄曲霉菌内cdc48蛋白表达水平。5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，用于分析检测cdc48蛋白表达水平的相应抗体是针对cdc48蛋白或蛋白片段的抗体或是在cdc48蛋白c端与小分子多肽标签进行融合表达后针对小分子多肽标签的抗体。6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述小分子多肽标签为gfp标签、rfp标签、his标签、ha标签、flag标签或gst标签。7.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，还包括步骤s3：使用筛选出的所述潜在抑制黄曲霉致病性药物进行黄曲霉生长、产孢、产毒抑制测试或黄曲霉种子侵染抑制测试确认所述潜在抑制黄曲霉致病性药物是否为抑制黄曲霉致病性药物。

技术总结
黄曲霉致病基因cdc48在筛选防治黄曲霉污染药物中的应用，包括：构建检测组黄曲霉菌培养体系和对照组黄曲霉菌培养体系，其中，检测组中添加待筛选药物；将检测组和对照组在相同条件下培养一段时间后，对比检测组和对照组中黄曲霉菌内的cdc48基因或Cdc48蛋白的表达水平，若检测组中黄曲霉菌内的cdc48基因或Cdc48蛋白的表达水平在一定程度上低于对照组，则待筛选药物为潜在抑制黄曲霉致病性药物。本发明的筛选方法，只需要在转录水平或者蛋白水平检测鉴定药物对黄曲霉的抑制效果，而不需要检测对黄曲霉毒素的含量，缩短了实验周期和时间，减少各种有机化学试剂的是用，减少对环境的污染，同时也大大减少可能对实验操作人员产生的毒害。毒害。


技术研发人员：杨坤龙 高晓庆 罗越 耿青如 贺晓娜 孙文 吴佳雯 田俊
受保护的技术使用者：江苏师范大学
技术研发日：2021.04.23
技术公布日：2021/10/14