一种PCR冻干试剂及其制备方法与流程

技术特征：
1.一种pcr冻干试剂，其特征在于，所述pcr冻干试剂由pcr试剂经过真空冷冻干燥步骤所得，所述pcr试剂的组分包括：普鲁兰多糖0.01％～20％、dna聚合酶0.01u/ul～0.4u/ul、反应缓冲液5mmol/l～500mmol/l、阳离子1.5mmol/l～80mmol/l、脱氧核糖核苷酸20umol/l～500umol/l、冻干保护剂2％～20％，其中％是质量百分比。2.根据权利要求1所述的一种pcr冻干试剂，其特征在于，所述dna聚合酶包括taq、phanta、pfu、kod、primerstar、klenow、bst和phi29中的至少一种。3.根据权利要求1所述的一种pcr冻干试剂，其特征在于，所述反应缓冲液包括tris
‑
hcl、hepes、mops、kcl和硫酸铵中的至少一种。4.根据权利要求1所述的一种pcr冻干试剂，其特征在于，所述阳离子包括单价阳离子和二价阳离子中的至少一种，所述单价阳离子包括k

和/或nh
4
，所述二价阳离子包括mg
2
和/或mn
2
。5.根据权利要求1所述的一种pcr冻干试剂，其特征在于，所述冻干保护剂包括海藻糖、乳糖、半乳糖、蔗糖、山梨醇、甘露醇、棉子糖、松三糖、羟丙基淀粉、葡聚糖、peg、pvp至少一种。6.根据权利要求1所述的一种pcr冻干试剂，其特征在于，所述pcr试剂的组分还包括逆转录酶0.01u/ul～8u/ul、标记物0.3μmol/l～1.0μmol/l、pcr添加剂0.05mg/ml～10mg/ml、上下游引物0.3μmol/l～1.0μmol/l的至少一种。7.根据权利要求6所述的一种pcr冻干试剂，其特征在于，所述标记物为荧光染料和/或荧光探针。8.根据权利要求6所述的一种pcr冻干试剂，其特征在于，所述pcr添加剂包括海藻糖、甜菜碱、bsa和明胶的至少一种。9.根据权利要求6所述的一种pcr冻干试剂，其特征在于，所述逆转录酶优选包括amv逆转录酶和/或m
‑
mlv逆转录酶。10.一种pcr冻干试剂的制备方法，其特征在于，其包括如下步骤：a)预冷冻:取权利要求1
‑
9中任一项所述的pcr试剂，用连续分液器按照24
‑
26微升/滴滴入液氮中，将液氮预冷冻的小珠迅速转移到预冷的真空冷冻干燥机中；b)初级干燥：分为三个阶段，第一阶段，真空冷冻干燥机设定预冷冻温度为
‑
45
±
2℃，持续时间160
‑
200min；第二阶段设定为0.5
±
0.1℃/分钟的升温，升至
‑
40
±
2℃，达到温度后自动进入第三阶段；第三阶段设定温度为
‑
40
±
2℃，持续时间为700
‑
750min；c)次级干燥：分为两个阶段，第一阶段设定为0.5
±
0.1℃/分钟的升温，升至25
±
2℃，达到温度后自动进入第二阶段；第二阶段设定温度为25
±
2℃，持续220
‑
150min。

技术总结
本发明涉及分子生物技术领域，具体涉及一种PCR冻干试剂及其制备方法。所述PCR冻干试剂由PCR试剂经过真空冷冻干燥所得，所述PCR试剂的组分包括：普鲁兰多糖0.01％～20％、DNA聚合酶0.01U/uL～0.4U/uL、反应缓冲液5mmol/L～500mmol/L、阳离子1.5mmol/L～80mmol/L、脱氧核糖核苷酸20umol/L～500umol/L、冻干保护剂2％～20％，其中％是质量百分比。所述PCR冻干试剂暴露在环境中吸水量显著降低。所述PCR冻干试剂可以在普通低湿环境中进行分装、加盖等操作，而不影响生物制品的含水量和活性，从而极大的降低了生产能耗，提高了生产效率。提高了生产效率。提高了生产效率。


技术研发人员：金雅康 李明 李文萍 徐明
受保护的技术使用者：苏州天隆生物科技有限公司
技术研发日：2021.06.15
技术公布日：2021/10/15