一种脐带间充质干细胞无血清培养设备及其培养方法与流程

技术特征：
1.一种脐带间充质干细胞无血清培养设备，其特征在于，包括；无菌培养箱(1)，所述无菌培养箱(1)的外表面固定安装有玻璃板(2)，所述玻璃板(2)的侧壁上固定连接有乳胶手套(10)，所述无菌培养箱(1)的侧面活动铰接有侧开箱门(3)，所述侧开箱门(3)的内侧壁上固定安装有储物盒(21)，所述无菌培养箱(1)的顶部固定安装有显微镜(4)，所述无菌培养箱(1)的内底部固定安装有离心机(16)，所述无菌培养箱(1)的内部设有支撑杆(30)，所述支撑杆(30)的下表面活动卡接有固定盘(31)，所述固定盘(31)的内部活动插接有培养试管(15)；抽吸泵(5)，所述抽吸泵(5)的一端延伸至无菌培养箱(1)的内部活动安装有抽吸管(19)，所述抽吸泵(5)的另一端设有污水筒(6)，所述无菌培养箱(1)的内侧壁上活动安装有抽拉喷头(18)，所述无菌培养箱(1)的内侧壁上活动卡接有清洗盘(11)。2.根据权利要求1所述的一种脐带间充质干细胞无血清培养设备，其特征在于：所述抽吸管(19)和抽吸泵(5)之间固定连接有抽拉软管，所述无菌培养箱(1)的背面固定连接有进水管(7)，所述抽拉喷头(18)的末端通过抽拉软管与进水管(7)相连接，所述无菌培养箱(1)的背面开设有卡槽(8)，所述污水筒(6)的外表面固定连接有卡块(9)，所述卡块(9)活动卡接在卡槽(8)的内部。3.根据权利要求1所述的一种脐带间充质干细胞无血清培养设备，其特征在于：所述无菌培养箱(1)的内侧壁上开设有第一滑槽(14)，所述清洗盘(11)的顶端侧面固定连接有限位轴，所述限位轴滑动连接在第一滑槽(14)的内部，所述清洗盘(11)的底端内部设有卡接组件(23)，所述卡接组件(23)与无菌培养箱(1)的内侧壁活动卡接。4.根据权利要求3所述的一种脐带间充质干细胞无血清培养设备，其特征在于：所述卡接组件(23)包括转动头(231)、齿轮(232)、齿条(233)、第一弹簧(234)、固定轴(235)和卡条(236)，所述转动头(231)转动连接在清洗盘(11)的外表面，所述齿轮(232)固定连接在转动头(231)的端部，所述齿条(233)滑动连接在清洗盘(11)的内部，所述齿轮(232)与齿条(233)相啮合，所述第一弹簧(234)活动卡接在齿条(233)的一端内部，所述卡条(236)固定连接在齿条(233)的另一端，所述固定轴(235)的一端固定连接在清洗盘(11)的内部，所述固定轴(235)的另一端与第一弹簧(234)相抵。5.根据权利要求1所述的一种脐带间充质干细胞无血清培养设备，其特征在于：所述无菌培养箱(1)的侧壁上开设有第二滑槽(12)，所述侧开箱门(3)的两侧均活动铰接有连接条(13)，所述连接条(13)的另一端滑动连接在第二滑槽(12)的内部，所述侧开箱门(3)的内侧壁上固定连接有密封橡胶板(20)，所述储物盒(21)固定连接在密封橡胶板(20)的外表面，所述侧开箱门(3)的顶部转动连接有固定螺栓(22)，所述固定螺栓(22)的端部螺纹连接在无菌培养箱(1)的外表面。6.根据权利要求1所述的一种脐带间充质干细胞无血清培养设备，其特征在于：所述离心机(16)的顶部活动铰接有转动盖板(24)，所述转动盖板(24)的下表面设有圆形挡片(25)，所述离心机(16)的上表面开设有方形槽(17)，所述固定盘(31)的下表面固定连接有与方形槽(17)相适配的方形条(32)。7.根据权利要求6所述的一种脐带间充质干细胞无血清培养设备，其特征在于：所述转动盖板(24)的上表面开设有活动槽(26)，所述活动槽(26)的内部滑动连接有插销(27)，所述插销(27)与离心机(16)活动插接，所述转动盖板(24)的下表面固定连接有固定套筒
(28)，所述固定套筒(28)的内部活动卡接有第二弹簧(29)，所述圆形挡片(25)的顶端转动连接有插杆，所述插杆的顶端活动插接在固定套筒(28)的内底部。8.根据权利要求1所述的一种脐带间充质干细胞无血清培养设备，其特征在于：所述无菌培养箱(1)的内侧壁上固定连接有固定座(33)，所述支撑杆(30)的一端活动铰接在固定座(33)的下表面，所述支撑杆(30)的外表面开设有观测孔(34)，所述观测孔(34)正对显微镜(4)的底端，所述支撑杆(30)的另一端转动连接有卡座(35)，所述固定盘(31)的上表面中部开设有固定槽(36)，所述固定盘(31)的外表面四周开设有插槽(37)，所述卡座(35)的底端活动卡接在固定槽(36)的内部，所述培养试管(15)活动插接在插槽(37)的内部。9.根据权利要求8所述的一种脐带间充质干细胞无血清培养设备，其特征在于：所述卡座(35)的上表面活动插接有活动杆(39)，所述活动杆(39)的外表面活动套接有第三弹簧(40)，所述活动杆(39)的底端固定连接有固定板(41)，所述固定板(41)的底端固定连接有三角推块(42)，所述卡座(35)的底部固定连接有固定块(38)，所述固定块(38)的内部两侧均活动卡接有限位连接块(43)，两组所述限位连接块(43)相对的一侧活动卡接有第四弹簧(44)，所述三角推块(42)的底端与两组限位连接块(43)相背的一侧外表面相抵。10.根据权利要求1
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9任意项所述的一种脐带间充质干细胞无血清培养培养方法，其特征在于：首先取新鲜脐带一条将其充分冲洗，去除脐带中残留血，然后将脐带剪碎加入到培养试管(15)中，然后向内部添加千分之一浓度的胶原酶ⅳ，然后静置三十分钟等待细胞组织消化，然后向其中加入十分之一浓度的fbs终止消化，然后对其进行过滤，将获得的细胞滤液进行离心；然后向培养试管(15)中加入含有lg
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dmem培养液，培养三四天后更换培养液，然后再向培养试管(15)中加入终浓度为千分之一的胰酶，进行搅拌三十分钟，等待组织进一步消化，然后再加入十分之一浓度的pbs终止消化，然后再一次过滤，再次对滤液进行离心，离心后的细胞滤液中加入含有lg
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dmem培养液，培养三至四天后进行过滤，然后更换培养液，并去除其中未贴壁细胞，之后每隔三天进行一次过滤和换液，直到细胞充分融合传代；最后，等到细胞融合生长至70％
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80％成后，再次向培养试管(15)内部加入加入浓度为千分之二浓度的的edta进行消化，此时轻轻摇动培养试管(15)，使得消化液能够覆盖全部细胞表面，然后过滤掉细胞培养液后，再加上三至五毫升的消化液，此时在光学显微镜下观察脐带间充质干细胞的生长情况。

技术总结
本发明公开一种脐带间充质干细胞无血清培养设备及其培养方法，涉及细胞培养领域。无菌培养箱的外表面固定安装有玻璃板，玻璃板的侧壁上固定连接有乳胶手套，无菌培养箱的顶部固定安装有显微镜，无菌培养箱的内底部固定安装有离心机，无菌培养箱的内部设有支撑杆，支撑杆的下表面活动卡接有固定盘，固定盘的内部活动插接有培养试管。该脐带间充质干细胞无血清培养设备及其培养方法，方便在无菌环境下完成对脐带间充质干细胞的分离、处理和培养，减少外部污染。少外部污染。少外部污染。


技术研发人员：沈健 刘正明 欧阳效晴 杨淑青
受保护的技术使用者：江苏蒙彼利生物科技有限公司
技术研发日：2021.07.22
技术公布日：2021/11/8