一种出芽短梗霉利用无氮培养基生产黑色素的方法与流程

技术特征：
1.一种出芽短梗霉利用无氮培养基生产黑色素的方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）菌种活化将出芽短梗霉（aureobasidium pullulans）gxz-6接种于pda固体斜面培养基，所述的pda固体斜面培养基的组成为：马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂20g，蒸馏水定容至1l，自然ph，25~30℃培养36~48h；所述出芽短梗霉（aureobasidium pullulans）gxz-6的保藏编号为cctcc m 2017517，保藏日期为2017年9月20日，保藏单位：中国典型培养物保藏中心，保藏地址：中国武汉武汉大学；（2）种子液制备将整个pda固体斜面培养基上的菌落接入装有50ml液体种子培养基的250ml三角瓶中，摇床转速180~220rpm，25~30℃培养36~48h至菌株对数生长中期，以此作为一级种子液；将50ml一级种子液接入装有250ml液体种子培养基的3l三角瓶中，摇床转速180~220rpm，25~30℃培养36~48h至菌株对数生长中期，以此作为二级种子液；所述液体种子培养基浓度组成为：葡萄糖80~100g/l，kcl 0.1~1g/l，mgso4·
7h2o 0.1~1g/l，自然ph，蒸馏水配制；（3）液体发酵将二级种子液按接种量5~15%，v/v，接入装有液体发酵培养基的5l发酵罐中，发酵罐装液量为3.5~4l，转速200~400rpm，通气量0.5~1vvm，25~30℃发酵4~7天；所述液体发酵培养基浓度组成为：葡萄糖100~140g/l，kcl 0.2~2g/l，mgso4·
7h2o 0.2~2g/l，自然ph，蒸馏水配制；（4）黑色素产量测定将发酵液离心弃上清，收集沉淀，沉淀物包含菌体和胞外黑色素；将沉淀物均匀分散于0.5 m naoh溶液中，经超声波细胞破碎仪破壁处理后，沸水浴20min，冷却后离心去除沉淀物，收集上清液；将上清液与6 m hcl按体积比2：1混合，静置2h后，离心收集沉淀，冷冻干燥后得到黑色素；利用称重法测定黑色素产量。

技术总结
本发明公开了一种出芽短梗霉（Aureobasidium pullulans）GXZ-6，保藏编号为CCTCC NO：M 2017517，发酵生产黑色素的方法，属于微生物发酵技术领域。该方法以出芽短梗霉为生产菌种，以葡萄糖为底物，辅以KCl和MgSO4·


技术研发人员：曾伟 马兰 周然 梁智群 陈桂光
受保护的技术使用者：广西大学
技术研发日：2021.11.17
技术公布日：2022/3/3