1.本发明涉及可用于预防、缓解、治疗和/或诊断与α-突触核蛋白(α-突触核蛋白、a-突触核蛋白、a突触核蛋白、a-syn、α-syn、asyn、a-syn)聚集体相关的疾病、病症和异常的新分子，所述疾病、病症和异常包括但不限于：路易体和/或路易神经突，例如帕金森病(parkinson’s disease)、多系统萎缩、路易体痴呆(lewy body dementia，lbd；路易体痴呆(dementia with lewy body，dlb)(“纯”路易体痴呆)、帕金森病痴呆(parkinson’s disease dementia，pdd))或弥漫性路易体病。本发明涉及α-突触核蛋白结合分子，特别是α-突触核蛋白抗体或其抗原结合片段或其衍生物及其用途。本发明的分子还可用于确定易患这样的病症、疾病或异常的倾向性(predisposition)，监测残留病症、疾病或异常，或者预测患有这样的病症、疾病或异常的患者对用某种药物进行的治疗的响应性。
背景技术：
2.许多退行性疾病与淀粉样蛋白(amyloid)或淀粉样蛋白样蛋白质(amyloid-like protein)的胞外或胞内沉积有关，其促进疾病的发病机制以及进展。形成胞外聚集体的最佳表征的淀粉样蛋白(amyloid protein)是β淀粉样蛋白(amyloid beta，aβ)。
3.主要形成胞内聚集体的淀粉样蛋白样蛋白质包括但不限于α-突触核蛋白、tau和亨廷顿蛋白(huntingtin，htt)。涉及α-突触核蛋白聚集体的疾病通常被列为突触核蛋白病(synucleinopathy)(或α-突触核蛋白病)，并且这些包括但不限于帕金森病(pd)。突触核蛋白病包括：帕金森病(散发性、家族性伴α-突触核蛋白突变、家族性伴除α-突触核蛋白之外的突变、纯自主神经衰竭和路易体吞咽困难)、路易体痴呆(lbd；路易体痴呆(dlb)(“纯”路易体痴呆)、帕金森病痴呆(pdd))、弥漫性路易体病(diffuse lewy body disease，dlbd)、散发性阿尔茨海默病、家族性阿尔茨海默病伴app突变、家族性阿尔茨海默病伴ps-1、ps-2或其他突变、家族性英国型痴呆、阿尔茨海默病路易体变体和唐氏综合征。具有α-突触核蛋白的神经元聚集体和胶质细胞聚集体的突触核蛋白病包括但不限于：多系统萎缩(夏-德综合征(shy-drager syndrome)、纹状体黑质变性和橄榄体脑桥小脑萎缩)。其他可能具有α-突触核蛋白免疫反应性病灶的疾病包括：创伤性脑损伤、慢性创伤性脑病、拳击性痴呆、tau蛋白病(tauopathy)(皮克病(pick’s disease)、额颞痴呆、进行性核上性麻痹、皮质基底节变性和尼曼-皮克c1型病(niemann-pick type c1 disease)、17号染色体连锁额颞痴呆伴帕金森综合征(frontotemporal dementia with parkinsonism linked to chromosome 17))、运动神经元病、亨廷顿病(huntington’s disease)、肌萎缩侧索硬化(散发性、家族性和关岛型als-痴呆复合征(als-dementia complex of guam))、神经轴索营养不良、神经退行性病变伴脑铁沉积1型(哈勒沃登-施帕茨综合征(hallervorden-spatz syndrome))、朊病毒病、克罗伊茨费尔特-雅各布病(creutzfeldt-jakob disease)、共济失调毛细血管扩张症、梅热综合征(meige’s syndrome)、亚急性硬化性全脑炎、格斯特曼-施特劳斯勒尔-沙因克尔病(gerstmann-straussler-scheinker disease)、包涵体肌炎、戈谢病、克拉伯病(krabbe disease)以及其他的溶酶体贮积症(包括kufor-rakeb综合征和sanfilippo综合
征)以及快速眼动(rapid eye movement，rem)睡眠行为障碍(jellinger，mov disord 2003，18 suppl.6，s2-12；galvin et al.，jama neurology 2001，58(2)，186-190；kovari et al.，acta neuropathol.2007，114(3)，295-8；saito et al.，j neuropathol exp neurol.2004，63(4)，323-328；mckee et al.，brain，2013，136(pt 1)，43-64；puschmann et al.，parkinsonism relat disord 2012，18s1，s24-s27；usenovic et al.，j neurosci.2012，32(12)，4240-4246；winder-rhodes et al.，mov disord.2012，27(2)，312-315；ferman et al.，j int neuropsychol soc.2002，8(7)，907-914；smith et al.，j pathol.2014；232：509-521，lippa et al.，ann neurol.1999 mar；45(3)：353-7；schmitz et al.，mol neurobiol.2018 aug 22；charles et al.，neurosci lett.2000 jul 28；289(1)：29-32；wilhelmsen et al.，arch neurol.2004 mar；61(3)：398-406；yamaguchi et al.，j neuropathol exp neurol.2004，80
th annual meeting，vol.63；askanas et al.，j neuropathol exp neurol.2000 jul；59(7)：592-8)。
4.α-突触核蛋白是一种140个氨基酸长的胞质蛋白，大量且主要地在cns中表达并定位于突触前末端(burr
é
j.，j parkinsons dis.2015；5(4)：699-713)。α-突触核蛋白是天然未折叠的蛋白质，但在与脂质囊泡或膜缔合之后采用主要为螺旋性质的二级结构(iwai et al.，biochemistry 1995，34(32)，10139-10145)。α-突触核蛋白的生理功能仍然难以捉摸。由于α-突触核蛋白与突触囊泡的缔合及其突触前定位，表明了α-突触核蛋白调节突触活性和可塑性、神经递质释放、多巴胺产生和代谢、囊泡转运、突触囊泡库(synaptic vesicle pool)维持和分子伴侣样活性(cabin et al.，j neurosci.2002；22：8797-8807；chandra et al.，cell.2005；123：383-396)。
5.α-突触核蛋白的序列可分为三个主要结构域：1)由第1至60位残基构成的n端区域，其包含具有高度保守的六聚体(ktkegv)的11聚体两亲性不完全重复残基。该区域与调节α-突触核蛋白与脂质膜的缔合及其内化有关；2)跨越第61至95位残基的疏水性非β淀粉样蛋白组分(non-amyloid beta component，nac)结构域；其对于α-突触核蛋白纤维化至关重要；和3)跨越第96至140位残基的c端区域，其是高度酸性和富含脯氨酸的，没有明显的结构倾向。
6.已经表明α-突触核蛋白经历数种翻译后修饰，包括截短、磷酸化、泛素化、苏素化(sumoylation)、氧化、硝化、乙酰化、糖化、糖基化和/或转谷氨酰胺酶共价交联(fujiwara et al.，nat cell biol 2002，4(2)，160-164；hasegawa et al.，j biol chem 2002，277(50)，49071-49076；li et al.，proc natl acad sci u s a 2005，102(6)，2162-2167；oueslati et al.，prog brain res 2010，183，115-145；schmid et al.，j biol chem 2009，284(19)，13128-13142；dorval et al.，j biol chem.2006，281(15)：9919-24；ruzafa et al.，plosone 2017 12(5)：e0178576；ischiropoulos et al.，ann n y acad sci.2003，991，93-100；munch et al.，j chem neuroanat.2000；20：253-257；marotta et al.，chembiochem.2012；13：2665-2670)。这些修饰中的大多数涉及c端区域内的残基。
7.在tyr-125、-133和-136以及ser-129上的羧基端区域中检测到数个磷酸化位点(negro et al.，faseb j 2002，16(2)，210-212)。α-突触核蛋白的广泛磷酸化和在ser-129处的选择性磷酸化在突触核蛋白病病灶(包括路易体)中是明显的(fujiwara et al.，nat cell biol 2002，4(2)；160-164)。羧基端的其他翻译后修饰，包括ser-129上的糖基化
(mclean et al.，neurosci lett 2002，323(3)，219-223)和tyr-125、-133和-136上的硝化(takahashi et al.，brain res 2002，938(1-2)，73-80)可影响α-突触核蛋白的聚集。已经报道了通过蛋白酶解截短羧基端区域在多种神经退行性疾病中的α-突触核蛋白原纤维生成中发挥作用(rochet et al.，biochemistry 2000，39(35)，10619-10626)。已经在高度纯化的路易体中检测到全长以及部分截短的α-突触核蛋白，以及不溶性的α-突触核蛋白聚集体(crowther et al.，febs lett 1998，436(3)，309-312)。
8.异常的蛋白质聚集是大脑衰老和数种神经退行性疾病的共同特征，尽管在疾病过程中的明确作用仍有待确定。在体外模型中，α-突触核蛋白容易地组装成类似于从患有路易体痴呆和家族性pd的患者的脑中分离的那些的丝状物(filament)(crowther et al.，febs lett 1998，436(3)，309-312)。α-突触核蛋白及其突变形式(例如a53t和a30p)具有无规卷曲构象，并且在低浓度的情况下在水溶液中不形成明显的二级结构；然而，在较高浓度下，它们有自聚集从而产生淀粉样蛋白原纤维的倾向(wood et al.，j biol chem 1999，274(28)，19509-19512)。已经记录了pd相关突变体和野生型蛋白质在聚集行为方面的一些差异。单体α-突触核蛋白聚集体在体外通过亚稳态寡聚体(即初原纤维)状态形成稳定的原纤维(volles et al.，biochemistry 2002，41(14)，4595-4602)。
9.帕金森病(pd)是最常见的神经退行性运动障碍。pd主要是一种特发性疾病，尽管在至少5％的pd患者中，病理学与一个或数个特定基因中的突变有关。已经描述了α-突触核蛋白基因中的数个点突变(a30p、e46k、h50q、g51d、a53t)，其导致具有常染色体显性遗传的家族性pd。此外，已经描述了发生有pd的患者中的α-突触核蛋白基因的双倍重复和三倍重复，强调了α-突触核蛋白在pd发病机制中的作用(lesage et al.，hum.mol.genet.，2009，18，r48-59)。pd的发病机制仍然难以捉摸，然而，越来越多的证据表明了α-突触核蛋白的致病性折叠导致淀粉样蛋白样原纤维的形成的作用。事实上，pd的特点是在黑质神经元中被称为路易体的胞内α-突触核蛋白聚集体结构的存在，以及在黑质和其他地方的多巴胺能神经元的死亡。α-突触核蛋白是一种天然未折叠的突触前蛋白质，其可错误折叠并聚集成更大的寡聚体和纤维状形式，这与pd的发病机制有关。研究已经表明α-突触核蛋白的小的可溶性寡聚体和初原纤维形式是最具神经毒性的种类(lashuel et al.，j.mol.biol.，2002，322，1089-102)，但是α-突触核蛋白在神经元细胞毒性方面的准确作用仍有待明确(review：cookson，annu.rev.biochem.，2005，74，29-52)。
10.来自细胞和动物模型的最新证据表明，病理性和/或聚集的α-突触核蛋白可以从一个神经元扩散(spread)到另一神经元。一旦进入新细胞内部，α-突触核蛋白聚集体就充当种子(seed)，募集内源性α-突触核蛋白并促进蛋白质聚集(luk et al.，science.2012，338(6109)：949-5；tran et al.，cell rep.2014，7(6)：2054-65)。此外，病理性和/或聚集的α-突触核蛋白的跨突触扩散可以解释通过pd中定义的解剖学连接的脑区域的路易病理状况的逐步发展，这由braak及同事首次描述(braak et al.，neurobiol.aging.2003；24：197-211)。
11.因此，病理性和/或聚集的α-突触核蛋白的细胞间扩散使免疫治疗成为旨在缓解、治疗、延缓或停止pd和其他突触核蛋白病进展的新治疗方法的引人注目的靶标。本文中所述的抗体抑制和/或延迟接种的和/或自发的α-突触核蛋白聚集，并且该功能特征将允许它们与胞外空间中的α-突触核蛋白种子结合以中和种子并因此延迟或抑制α-突触核蛋白聚
集体的传播或者促进清除这些扩散的物质。由于目前只有对症治疗可用，因此开发针对pd和其他突触核蛋白病的这样的治疗将解决未满足的医疗需求。
12.帕金森病的诊断主要是临床的，并且取决于以下的存在：症状和体征的特定组(最初的核心特征是运动徐缓、强直、静止性震颤和姿势不稳)、缓慢进展过程以及对药物治疗的响应。通过死后神经病理学分析对诊断做出最终确认。正在制定策略以将帕金森病病因的最新进展应用于生化生物标志物以及成像生物标志物的开发(schapira，curr opin neurol 2013；26(4)：395-400)。已在不同体液(脑脊液(cerebrospinal fluid，csf)、血浆、唾液)中进行研究的这样的生物标志物包括α-突触核蛋白水平以及dj-1、tau和abeta，以及神经丝蛋白、白介素、骨桥蛋白和下丘泌素(hypocrontin)(schapira，curr opin neurol 2013；26(4)：395-400)，但到目前为止，这些生物标志物都不能单独或组合地用作决定性诊断测试。选择性识别并结合α-突触核蛋白的某些病理结构的用于诊断应用的抗体将具有用作具有高灵敏度和特异性的生物标志物的潜能。据我们所知，尽管存在对于帕金森病研究和药物开发的关键需求，但目前市场上还没有批准的用于监测病理性α-突触核蛋白水平的或可用于临床试验的生物标志物(eberling et al.，jparkinsons dis.2013；3(4)：565-7)。
13.现有技术
14.wo2017/207739提供了以高亲和力特异性结合人α-突触核蛋白并降低α-突触核蛋白在体内扩散的抗体。
技术实现要素：
15.本发明的一个目的是提供α-突触核蛋白结合分子，其可用于治疗、缓解和/或预防与α-突触核蛋白聚集体相关的疾病、病症或异常，例如帕金森病、多系统萎缩、路易体痴呆(lbd；路易体痴呆(dlb)(“纯”路易体痴呆)、帕金森病痴呆(pdd))或弥漫性路易体病。
16.在另一方面中，本发明的一个目的是提供可用于诊断与α-突触核蛋白聚集体相关的疾病、病症或异常、监测与α-突触核蛋白聚集体相关的疾病、病症或异常的疾病进展和/或者监测针对与α-突触核蛋白聚集体相关的疾病、病症或异常的药物活性的分子，所述α-突触核蛋白聚集体包括但不限于：路易体、路易神经突和/或胶质细胞胞质包涵体，所述疾病、病症或异常例如帕金森病、多系统萎缩、路易体痴呆(lbd；路易体痴呆(dlb)(“纯”路易体痴呆)、帕金森病痴呆(pdd))或弥漫性路易体病。
17.本发明一般性地涉及α-突触核蛋白结合分子，其抑制和/或延迟接种的和/或自发的α-突触核蛋白聚集。
18.在一个实施方案中，本发明涉及α-突触核蛋白结合分子，其
19.(i)抑制和/或延迟接种的和/或自发的α-突触核蛋白聚集；以及
20.(ii)能够在体外和/或体内识别并结合病理性和/或聚集的α-突触核蛋白，特别是人α-突触核蛋白。
21.因此，本发明在其最广泛的方面涉及结合α-突触核蛋白的结合分子，特别是抗体或其抗原结合片段。在本发明的一个优选实施方案中，结合分子，特别是抗体或其抗原结合片段，抑制和/或延迟接种的和/或自发的α-突触核蛋白聚集的聚集，并且能够在体外和/或体内识别并结合病理性和/或聚集的α-突触核蛋白，特别是人α-突触核蛋白。α-突触核蛋白
id no：10和seq id no：14；seq id no：20和seq id no：24；seq id no：30和seq id no：34；seq id no：40和seq id no：44；seq id no：50和seq id no：54；seq id no：60和seq id no：64；seq id no：70和seq id no：74；seq id no：30和seq id no：84；seq id no：90和seq id no：94；seq id no：100和seq id no：104；seq id no：110和seq id no：114；seq id no：280和seq id no：284；seq id no：290和seq id no：194；seq id no：140和seq id no：144；seq id no：150和seq id no：154；seq id no：160和seq id no：164；seq id no：170和seq id no：174；seq id no：180和seq id no：184；seq id no：190和seq id no：194；seq id no：200和seq id no：204；seq id no：210和seq id no：214；seq id no：220和seq id no：224；seq id no：230和seq id no：234；seq id no：240和seq id no：244；seq id no：250和seq id no：254；seq id no：260和seq id no：264；seq id no：270和seq id no：274；seq id no：300和seq id no：304；seq id no：310和seq id no：314；seq id no：320和seq id no：324；seq id no：330和seq id no：334；seq id no：340和seq id no：344；seq id no：350和seq id no：354；seq id no：360和seq id no：364；seq id no：370和seq id no：374；seq id no：380和seq id no：384；seq id no：390和seq id no：394；seq id no：400和seq id no：404；seq id no：410和seq id no：414；seq id no：420和seq id no：424；seq id no：430和seq id no：434；seq id no：440和seq id no：414；seq id no：450和seq id no：424；seq id no：460和seq id no：464；seq id no：470和seq id no：474；seq id no：480和seq id no：484；seq id no：490和seq id no：494；seq id no：500和seq id no：504；seq id no：510和seq id no：514；seq id no：520和seq id no：524；seq id no：530和seq id no：534；seq id no：540和seq id no：544；seq id no：550和seq id no：554；seq id no：560和seq id no：564；seq id no：570和seq id no：574；seq id no：580和seq id no：584；seq id no：590和seq id no：474；seq id no：600和seq id no：554；seq id no：610和seq id no：614；seq id no：610和seq id no：624；seq id no：610和seq id no：634；seq id no：610和seq id no：644；seq id no：620和seq id no：614；seq id no：620和seq id no：624；seq id no：620和seq id no：634；seq id no：620和seq id no：644；seq id no：630和seq id no：614；seq id no：630和seq id no：624；seq id no：630和seq id no：634；seq id no：630和seq id no：644；seq id no：640和seq id no：614；seq id no：640和seq id no：624；seq id no：640和seq id no：634；seq id no：640和seq id no：644；seq id no：650和seq id no：614；seq id no：650和seq id no：624；seq id no：650和seq id no：634；seq id no：650和seq id no：644；seq id no：660和seq id no：614；seq id no：670和seq id no：614；seq id no：680和seq id no：614；seq id no：690和seq id no：614；seq id no：690和seq id no：624；seq id no：700和seq id no：614；seq id no：700和seq id no：624；seq id no：710和seq id no：614；seq id no：710和seq id no：624；seq id no：720和seq id no：614；seq id no：720和seq id no：624。
42.因此，本发明还提供了具有分别在以下中所示的氨基酸序列的可变区vh和/或vl的α-突触核蛋白结合抗体：seq id no：10和seq id no：14；seq id no：20和seq id no：24；seq id no：30和seq id no：34；seq id no：40和seq id no：44；seq id no：50和seq id no：54；seq id no：60和seq id no：64；seq id no：70和seq id no：74；seq id no：30和seq id no：84；seq id no：90和seq id no：94；seq id no：100和seq id no：104；seq id no：
110和seq id no：114；seq id no：280和seq id no：284；seq id no：290和seq id no：194；seq id no：140和seq id no：144；seq id no：150和seq id no：154；seq id no：160和seq id no：164；seq id no：170和seq id no：174；seq id no：180和seq id no：184；seq id no：190和seq id no：194；seq id no：200和seq id no：204；seq id no：210和seq id no：214；seq id no：220和seq id no：224；seq id no：230和seq id no：234；seq id no：240和seq id no：244；seq id no：250和seq id no：254；seq id no：260和seq id no：264；seq id no：270和seq id no：274 seq id no：300和seq id no：304；seq id no：310和seq id no：314；seq id no：320和seq id no：324；seq id no：330和seq id no：334；seq id no：340和seq id no：344；seq id no：350和seq id no：354；seq id no：360和seq id no：364；seq id no：370和seq id no：374；seq id no：380和seq id no：384；seq id no：390和seq id no：394；seq id no：400和seq id no：404；seq id no：410和seq id no：414；seq id no：420和seq id no：424；seq id no：430和seq id no：434；seq id no：440和seq id no：414；seq id no：450和seq id no：424；seq id no：460和seq id no：464；seq id no：470和seq id no：474；seq id no：480和seq id no：484；seq id no：490和seq id no：494；seq id no：500和seq id no：504；seq id no：510和seq id no：514；seq id no：520和seq id no：524；seq id no：530和seq id no：534；seq id no：540和seq id no：544；seq id no：550和seq id no：554；seq id no：560和seq id no：564；seq id no：570和seq id no：574；seq id no：580和seq id no：584；seq id no：590和seq id no：474；seq id no：600和seq id no：554；seq id no：610和seq id no：614；seq id no：610和seq id no：624；seq id no：610和seq id no：634；seq id no：610和seq id no：644；seq id no：620和seq id no：614；seq id no：620和seq id no：624；seq id no：620和seq id no：634；seq id no：620和seq id no：644；seq id no：630和seq id no：614；seq id no：630和seq id no：624；seq id no：630和seq id no：634；seq id no：630和seq id no：644；seq id no：640和seq id no：614；seq id no：640和seq id no：624；seq id no：640和seq id no：634；seq id no：640和seq id no：644；seq id no：650和seq id no：614；seq id no：650和seq id no：624；seq id no：650和seq id no：634；seq id no：650和seq id no：644；seq id no：660和seq id no：614；seq id no：670和seq id no：614；seq id no：680和seq id no：614；seq id no：690和seq id no：614；seq id no：690和seq id no：624；seq id no：700和seq id no：614；seq id no：700和seq id no：624；seq id no：710和seq id no：614；seq id no：710和seq id no：624；seq id no：720和seq id no：614；seq id no：720和seq id no：624。
43.在一些实施方案中，抗体包含：
44.a)包含seq id no：11的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：12的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：13的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：15的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：16的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：17的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
45.b)包含seq id no：21的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：22的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含氨基酸序列ysy的vh-cdr3；包含seq id no：25的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：26的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：27的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
46.c)包含seq id no：31的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：32的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：33的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：35的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：36的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：37的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
47.d)包含seq id no：41的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：42的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：43的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：45的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：46的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：47的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
48.e)包含seq id no：21的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：52的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含氨基酸序列ysf的vh-cdr3；包含seq id no：55的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：56的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：27的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
49.f)包含seq id no：61的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：62的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：43的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：65的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：46的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：67的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
50.g)包含seq id no：21的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：72的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含氨基酸序列ysy的vh-cdr3；包含seq id no：75的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：76的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：77的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
51.h)包含seq id no：31的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：32的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：33的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：85的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：36的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：87的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
52.i)包含seq id no：91的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：92的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：93的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：95的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：96的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：97的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
53.j)包含seq id no：101的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：102的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：103的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：105的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：106的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：107的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
54.k)包含seq id no：111的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：112的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：113的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：115的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：106的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：117的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
55.l)包含seq id no：281的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：282的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：283的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：285的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：286的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：287的
氨基酸序列的vl-cdr3；或者
56.m)包含seq id no：31的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：192的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：193的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：195的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：96的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：197的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
57.n)包含seq id no：141的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：142的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：143的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：145的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：16的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：17的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
58.o)包含seq id no：151的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：152的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：153的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：105的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：106的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：107的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
59.p)包含seq id no：161的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：162的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：163的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：165的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：16的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：167的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
60.q)包含seq id no：171的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：172的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：173的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：175的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：176的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：177的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
61.r)包含seq id no：181的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：182的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：183的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：15的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：16的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：187的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
62.s)包含seq id no：201的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：202的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：153的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：105的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：206的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：107的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
63.t)包含seq id no：211的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：212的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：213的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：215的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：216的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：217的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
64.u)包含seq id no：31的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：222的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：223的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：225的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：96的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：227的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
65.v)包含seq id no：231的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：232的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：233的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：235的氨基
酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：236的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：237的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
66.w)包含seq id no：31的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：242的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：243的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：225的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：96的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：247的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
67.x)包含seq id no：31的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：252的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：253的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：255的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：256的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：257的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
68.y)包含seq id no：261的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：262的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：263的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：265的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：176的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：267的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
69.z)包含seq id no：271的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：272的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：273的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：275的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：276的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：277的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
70.aa)包含seq id no：301的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：302的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：303的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：15的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：16的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：307的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
71.bb)包含seq id no：311的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：312的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：313的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：315的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：46的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：67的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
72.cc)包含seq id no：321的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：322的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：323的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：325的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：326的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：327的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
73.dd)包含seq id no：151的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：332的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：333的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：335的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：336的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：107的氨基酸序列的vl-cdr3；或者或者
74.ee)包含seq id no：341的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：342的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：343的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：345的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：346的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：347的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
75.ff)包含seq id no：351的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：352的氨基酸序
列的vh-cdr2；和包含seq id no：353的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：355的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：356的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：357的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
76.gg)包含seq id no：361的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：362的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：363的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：365的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：16的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：367的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
77.hh)包含seq id no：371的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：372的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：373的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：345的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：376的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：347的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
78.ii)包含seq id no：351的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：382的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：383的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：385的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：386的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：387的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
79.jj)包含seq id no：351的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：382的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：393的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：395的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：356的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：357的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
80.kk)包含seq id no：351的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：382的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：393的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：405的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：356的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：357的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
81.ll)包含seq id no：411的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：412的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：413的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：105的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：106的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：107的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
82.mm)包含seq id no：421的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：422的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含氨基酸序列gny的vh-cdr3；包含seq id no：425的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：426的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：427的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
83.nn)包含seq id no：431的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：432的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：433的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：435的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：436的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：437的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
84.oo)包含seq id no：151的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：442的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：443的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：105的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：106的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：107的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
85.pp)包含seq id no：461的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：462的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：463的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：465的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：16的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：467的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
86.qq)包含seq id no：141的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：472的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：473的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：475的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：476的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：477的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
87.rr)包含seq id no：481的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：482的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：483的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：165的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：16的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：487的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
88.ss)包含seq id no：141的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：492的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：493的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：495的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：496的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：497的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
89.tt)包含seq id no：151的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：502的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：503的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：105的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：336的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：107的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
90.uu)包含seq id no：311的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：512的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：513的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：515的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：516的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：517的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
91.vv)包含seq id no：521的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：522的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：463的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：525的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：16的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：467的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
92.ww)包含seq id no：371的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：532的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：533的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：345的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：376的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：537的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
93.xx)包含seq id no：341的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：542的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：543的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：345的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：376的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：347的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
94.yy)包含seq id no：551的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：552的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：553的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：555的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：16的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：557的氨
基酸序列的vl-cdr3；或者
95.zz)包含seq id no：551的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：552的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：563的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：565的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：16的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：557的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
96.aaa)包含seq id no：571的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：202的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：573的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：105的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：106的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：107的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
97.bbb)包含seq id no：581的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：582的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：583的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：585的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：586的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：587的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
98.ccc)包含seq id no：11的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：612的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：13的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：615的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：16的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：17的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
99.ddd)包含seq id no：11的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：612的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：13的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：625的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：16的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：17的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
100.eee)包含seq id no：11的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：612的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：663的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：615的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：16的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：17的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
101.fff)包含seq id no：11的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：612的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：673的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：615的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：16的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：17的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
102.ggg)包含seq id no：11的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：612的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：683的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：615的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：16的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：17的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
103.hhh)包含seq id no：11的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：612的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：683的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：625的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：16的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：17的氨基酸序列的vl-cdr3。
104.这些α-突触核蛋白结合抗体可构成本发明的不同方面。
105.在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸编码本文中所述的
抗体或其抗原结合片段或衍生物。在一些实施方案中，提供了宿主细胞，其中所述宿主细胞包含编码本文中所述的抗体或其抗原结合片段或衍生物的分离的核酸。在一些实施方案中，提供了产生抗体或其抗原结合片段或衍生物的方法，其包括在适合产生所述抗体或其抗原结合片段或衍生物的条件下培养所述宿主细胞。
106.在一些实施方案中，提供了免疫缀合物，其中所述免疫缀合物包含本文中所述的分离的抗体、其抗原结合片段或衍生物以及治疗剂。在一些实施方案中，提供了经标记的抗体、其抗原结合片段或衍生物，其包含本文中所述的抗体、其抗原结合片段或衍生物以及可检测标记。
107.在一些实施方案中，提供了药物组合物，其包含本文中所述的分离的抗体、其抗原结合片段或衍生物以及可药用载体和/或赋形剂。
108.本文中使用的术语“分离的”意指化学化合物，例如核酸或抗体可已经从其自然环境中分离和/或回收。在本发明中，化学化合物优选地是化学合成的，或者是在不同于其天然来源的细胞的细胞体系中合成的，并因此与其天然相关的组分“分离”。化学化合物可通过例如纯化从其自然环境中分离或者通过技术过程(包括但不限于例如基因合成、聚合酶链式反应(polymerase chain reaction，pcr)、载体纯化和蛋白质(抗体)纯化)产生。这样的化学化合物特别地可以是核酸、dna-、rna-或cdna-序列，或者是肽、抗体或蛋白质。
109.本发明不限于根据上述定义的分离的抗体，还涉及与其来源无关的抗体本身。
110.这同样适用于本发明提供的肽、核酸、dna、rna和/或cdna序列，它们以分离的形式(如上文所定义的)或以任何其他形式涵盖在内。
111.在一些实施方案中，提供了预防、缓解和/或治疗与α-突触核蛋白聚集体或病理性α-突触核蛋白相关的疾病、病症或异常的方法，所述疾病、病症或异常例如帕金森病(散发性、家族性伴α-突触核蛋白突变、家族性伴除α-突触核蛋白之外的突变、纯自主神经衰竭和路易体吞咽困难)、路易体痴呆(lbd；路易体痴呆(dlb)(“纯”路易体痴呆)、帕金森病痴呆(pdd))、弥漫性路易体病(dlbd)、散发性阿尔茨海默病、家族性阿尔茨海默病伴app突变、家族性阿尔茨海默病伴ps-1、ps-2或其他突变、家族性英国型痴呆、阿尔茨海默病路易体变体、多系统萎缩(夏-德综合征、纹状体黑质变性和橄榄体脑桥小脑萎缩)、包涵体肌炎、创伤性脑损伤、慢性创伤性脑病、拳击性痴呆、tau蛋白病(皮克病、额颞痴呆、进行性核上性麻痹、皮质基底节变性、17号染色体连锁额颞痴呆伴帕金森综合征和尼曼-皮克c1型病)、唐氏综合征、克罗伊茨费尔特-雅各布病、亨廷顿病、运动神经元病、肌萎缩侧索硬化(散发性、家族性和关岛型als痴呆复合征)、神经轴索营养不良、神经退行性病变伴脑铁沉积1型(哈勒沃登-施帕茨综合征)、朊病毒病、格斯特曼-施特劳斯勒尔-沙因克尔病、共济失调毛细血管扩张症、梅热综合征、亚急性硬化性全脑炎、戈谢病、克拉伯病以及其他的溶酶体贮积症(包括kufor-rakeb综合征和sanfilippo综合征)或快速眼动(rem)睡眠行为障碍。根据一个实施方案，本发明的方法包括向有此需要的对象施用有效浓度或有效量的结合本文中所述α-突触核蛋白(例如，全长抗体或抗体的α-突触核蛋白结合片段或衍生物)的本发明的结合分子，特别是抗体或其抗原结合片段或衍生物。
112.在一些实施方案中，提供了使患有突触核蛋白病的对象保持运动能力或改善运动缺陷(包括减少运动徐缓、强直、静止性震颤或姿势不稳)的方法，其包括向有此需要的对象施用本文中所述的抗体或其抗原结合片段或衍生物，或者包含本文中所述的抗体或其抗原
结合片段或衍生物的药物组合物。
113.在一些实施方案中，提供了使患有突触核蛋白病的对象保持或提高认知能力的方法，其包括向有此需要的对象施用本文中所述的抗体或其抗原结合片段或衍生物，或者包含本文中所述的抗体或其抗原结合片段或衍生物的药物组合物。
114.在一些实施方案中，提供了本文中所述的分离的抗体或其抗原结合片段或衍生物，其用作药物。在一些实施方案中，提供了本文中所述的分离的抗体或其抗原结合片段或衍生物，其用于在对象中缓解、预防和/或治疗突触核蛋白病。在一些实施方案中，提供了本文中所述的抗体或其抗原结合片段或衍生物用于制备用于预防、缓解和/或治疗与α-突触核蛋白聚集体相关的疾病、病症和/或异常的药物的用途。
115.在一些实施方案中，与α-突触核蛋白聚集体相关的疾病、病症和/或异常是突触核蛋白病。在一些实施方案中，突触核蛋白病是帕金森病(散发性、家族性伴α-突触核蛋白突变、家族性伴除α-突触核蛋白之外的突变、纯自主神经衰竭和路易体吞咽困难)、路易体痴呆(lbd；路易体痴呆(dlb)(“纯”路易体痴呆)、帕金森病痴呆(pdd))、弥漫性路易体病(dlbd)、散发性阿尔茨海默病、家族性阿尔茨海默病伴app突变、家族性阿尔茨海默病伴ps-1、ps-2或其他突变、家族性英国型痴呆、阿尔茨海默病路易体变体、多系统萎缩(夏-德综合征、纹状体黑质变性和橄榄体脑桥小脑萎缩)、包涵体肌炎、创伤性脑损伤、慢性创伤性脑病、拳击性痴呆、tau蛋白病(皮克病、额颞痴呆、进行性核上性麻痹、皮质基底节变性、17号染色体连锁额颞痴呆伴帕金森综合征和尼曼-皮克c1型病)、唐氏综合征、克罗伊茨费尔特-雅各布病、亨廷顿病、运动神经元病、肌萎缩侧索硬化(散发性、家族性和关岛型als痴呆复合征)、神经轴索营养不良、神经退行性病变伴脑铁沉积1型(哈勒沃登-施帕茨综合征)、朊病毒病、格斯特曼-施特劳斯勒尔-沙因克尔病、共济失调毛细血管扩张症、梅热综合征、亚急性硬化性全脑炎、戈谢病、克拉伯病以及其他的溶酶体贮积症(包括kufor-rakeb综合征和sanfilippo综合征)或快速眼动(rem)睡眠行为障碍。
116.更具体地，突触核蛋白病选自帕金森病、多系统萎缩、路易体痴呆(lbd；路易体痴呆(dlb)(“纯”路易体痴呆)、帕金森病痴呆(pdd))和弥漫性路易体病。
117.在一些实施方案中，提供了检测α-突触核蛋白聚集体(包括但不限于路易体、路易神经突和/或胶质细胞胞质包涵体)的方法，其包括使样品与本文中所述的抗体或其抗原结合片段或衍生物接触，并使用本领域中已知的方法检测聚集体的存在。在一些实施方案中，样品是脑样品、脑脊液样品或血液样品。
118.在一些实施方案中，提供了用于评价α-突触核蛋白结合分子抑制和/或延迟接种的和/或自发的α-突触核蛋白聚集的能力的方法，该方法包括以下步骤：使α-突触核蛋白结合分子与α-突触核蛋白聚集体(种子)接触；允许α-突触核蛋白结合分子与α-突触核蛋白聚集体结合以形成免疫复合体；向免疫复合体添加α-突触核蛋白单体蛋白和可检测染料，特别是荧光染料；以及确定相对于在不存在结合分子的情况下的接种的聚集，达到可检测染料的半最大信号，特别是荧光染料的信号的时间，其中相对于在不存在结合分子的情况下的接种的聚集，在存在结合分子的情况下达到所述可检测染料的半最大信号的时间增加表明所述α-突触核蛋白结合分子能够抑制和/或延迟接种的和/或白发的α-突触核蛋白聚集。
119.在另一些实施方案中，提供了用于选择/筛选能够抑制和/或延迟接种的和/或自发的α-突触核蛋白聚集的α-突触核蛋白结合分子的方法，该方法包括以下步骤：使α-突触
核蛋白结合分子与α-突触核蛋白聚集体(种子)接触；允许α-突触核蛋白结合分子与α-突触核蛋白聚集体结合以形成免疫复合体；向免疫复合体添加α-突触核蛋白单体蛋白和可检测染料，特别是荧光染料；以及基于在不存在和存在α-突触核蛋白结合分子的情况下确定的可检测染料，特别是荧光染料的信号，选择能够抑制和/或延迟接种的和/或自发的α-突触核蛋白聚集的α-突触核蛋白结合分子。
120.在一些实施方案中，提供了评价或选择能够抑制和/或延迟接种的和/或自发的α-突触核蛋白聚集的α-突触核蛋白结合分子的方法，其中可检测染料是硫磺素(thioflavin，tht)，其与聚集蛋白的β-片层结构结合。
121.在一些实施方案中，提供了评价或选择能够抑制和/或延迟接种的和/或白发的α-突触核蛋白聚集的α-突触核蛋白结合分子的方法，其中α-突触核蛋白单体蛋白与可检测染料，特别是荧光染料共价连接，和/或其中可检测染料，特别是荧光染料的信号是在形成蛋白质聚集体后信号/荧光发射的猝灭。在本发明的范围内还设想了另一些检测方法，包括例如荧光共振能量转移(fluorescence resonance energy transfer，fret)测定等。染料，特别是荧光染料，是本领域技术人员已知的。一些实例包括例如绿色荧光蛋白、黄色荧光蛋白等。
122.在一些实施方案中，如果在本发明的步骤d)中，与不存在α-突触核蛋白结合分子的情况相比，在存在α-突触核蛋白结合分子的情况下接种的和/或自发的α-突触核蛋白聚集被抑制和/或延迟至少10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、100％、200％或300％，则分别评价α-突触核蛋白结合分子为能够抑制和/或延迟接种的和/或自发的α-突触核蛋白聚集或对其进行选择。或者，如果α-突触核蛋白结合分子导致接种的聚集的聚集半衰期(τ1/2值)相对于在不存在结合分子的情况下的接种的聚集提高至少10％，则可将该α-突触核蛋白结合分子评价为能够抑制和/或延迟接种的和/或自发的α-突触核蛋白聚集。
123.在一些实施方案中，用于确定或评价α-突触核蛋白结合分子延迟和/或抑制接种的α-突触核蛋白聚集的能力的方法包括以下步骤：
124.(i)将包含和/或表达单体α-突触核蛋白报道蛋白的细胞与包含α-突触核蛋白结合分子的组合物和能够将α-突触核蛋白结合分子递送到细胞中的转导试剂一起孵育，
125.(ii)用包含α-突触核蛋白聚集体(种子)的组合物和转导试剂孵育细胞；以及
126.(iii)确定α-突触核蛋白报道蛋白的从头聚集，以确定或评价α-突触核蛋白结合分子延迟和/或抑制接种的α-突触核蛋白聚集的能力。
127.在用于确定或评价α-突触核蛋白结合分子延迟和/或抑制接种的α-突触核蛋白聚集的能力的方法中，包含α-突触核蛋白结合分子的组合物和转导试剂在与包含和/或表达单体α-突触核蛋白报道蛋白的细胞孵育之前预混合。在一些实施方案中，用于确定或评价α-突触核蛋白结合分子延迟和/或抑制病理性和/或聚集的α-突触核蛋白的细胞摄取的能力的方法包括以下步骤：
128.(i)将包含和/或表达单体α-突触核蛋白的细胞与α-突触核蛋白结合分子一起孵育，
129.(ii)用α-突触核蛋白聚集体(种子)孵育细胞；以及
130.(iii)确定α-突触核蛋白的从头聚集，以确定或评价α-突触核蛋白结合分子延迟
和/或抑制病理性和/或聚集的α-突触核蛋白的细胞摄取的能力。
131.在本发明的一些实施方案中，用于确定或评价α-突触核蛋白结合分子延迟和/或抑制接种的α-突触核蛋白聚集的能力的方法的α-突触核蛋白结合分子优选地包含α-突触核蛋白抗体或其抗原结合片段或衍生物，更优选地包含本发明的抗体或其抗原结合片段或衍生物。
132.在本发明的一些实施方案中，在确定或评价α-突触核蛋白结合分子延迟和/或抑制接种的α-突触核蛋白聚集的能力的方法的(i)和(ii)中的转导试剂可以是相同或不同的，优选地转导试剂是不同的，更优选地在(i)中的转导试剂包含ab-deliverin
tm
并且在(ii)中的转导试剂包含lipofectamine
tm
2000。
133.在本发明的一些实施方案中，确定或评价α-突触核蛋白结合分子延迟和/或抑制接种的α-突触核蛋白聚集的能力的方法的步骤(iii)包括免疫组织化学、显微术、生物化学或流式细胞术检测方法，优选免疫组织化学，更优选其中通过测量由所述细胞表达的荧光标记的α-突触核蛋白之荧光的免疫组织化学。
134.在本发明的一些实施方案中，用于确定或评价α-突触核蛋白结合分子延迟和/或抑制接种的α-突触核蛋白聚集的能力的方法包括以下步骤：
135.(i)将包含和/或表达单体α-突触核蛋白报道蛋白的细胞与包含α-突触核蛋白结合分子的组合物和能够将α-突触核蛋白结合分子递送到细胞中的转导试剂一起孵育，
136.(ii)用包含α-突触核蛋白聚集体(种子)的组合物和转导试剂孵育细胞；以及
137.(iii)确定α-突触核蛋白报道蛋白的从头聚集，以确定或评价α-突触核蛋白结合分子延迟和/或抑制接种的α-突触核蛋白聚集的能力，
138.其中步骤(i)中的孵育时间长至12小时，优选5小时，并且其中步骤(ii)中的孵育时间为至少12小时，优选96小时，并且其中在(i)中的转导试剂是ab-deliverin
tm
，并且其中在(ii)中的转导试剂是lipofectamine
tm 2000。
139.因此，在本发明的上下文中，本文中使用的术语“转导试剂”(或“转染试剂”)主要是指能够与目的分子形成非共价复合物以在细胞内转运的制剂。转导试剂的一些实例包括但不限于ab-deliverin
tm
、lipofectamine
tm
2000、xfect
tm
转染试剂、viafect
tm
转染试剂、聚乙烯亚胺(polyethylenimine，pei)细胞转染试剂或fugene
tm
。
140.在一些实施方案中，如果与不存在待评价的α-突触核蛋白结合分子的情况相比，在存在α-突触核蛋白结合分子的情况下，接种的α-突触核蛋白聚集被延迟和/或抑制至少10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、100％、200％或300％，则使用本发明的方法将α-突触核蛋白结合分子评价为能够延迟和/或抑制接种的α-突触核蛋白聚集。或者，如果α-突触核蛋白结合分子导致聚集的α-突触核蛋白水平相对于在不存在结合分子的情况下的聚集的α-突触核蛋白水平降低至少10％，则可将该α-突触核蛋白结合分子评价为能够延迟和/或抑制接种的α-突触核蛋白聚集。
141.在本发明的范围内，α-突触核蛋白可具有seq id no：1的序列。α-突触核蛋白聚集体是α-突触核蛋白单体之多聚的富含β-片层的组装体，其可形成可溶性寡聚体或可溶性/不溶性初原纤维或成熟原纤维，所述可溶性寡聚体或可溶性/不溶性初原纤维或成熟原纤维聚集成为胞内沉积物，被检测为帕金森病和其他突触核蛋白病中的一系列路易病理状况。生理条件下α-突触核蛋白不采用有序的三级结构，而是被归类为天然的未折叠蛋白，其
可作为动态和灵活结构构象的混合物存在。错折叠的α-突触核蛋白可形成多聚的中间体寡聚体结构，最终组装成高度有序的纤维状聚集体。
142.本文中使用的术语“聚集的α-突触核蛋白”是指由α-突触核蛋白错折叠的单体和/或多聚体和/或者单体的组装体构成的不溶性或可溶性寡聚结构和/或聚合结构。
143.病理性α-突触核蛋白是错折叠或聚集的或翻译后修饰的α-突触核蛋白，其是路易病理状况的主要组分；路易病理状况可被检测为具有以下形态：路易体、路易神经突、过早路易体或苍白体、伴弥漫性、颗粒状、点状或多形性图案的核周沉积物。此外，病理性α-突触核蛋白是在少突胶质细胞中检测到的胞内原纤维包涵体(也称为胶质细胞胞质包涵体)和神经元胞体、轴突和细胞核中检测到的胞内原纤维包涵体(称为神经元胞质包涵体)的主要组分，其是多系统萎缩的组织学标志。路易病理状况中的病理性α-突触核蛋白通常表现出翻译后修饰例如磷酸化、泛素化、硝化和截短的明显提高。
144.种子是多聚的富含β-片层的结构，其由α-突触核蛋白构成，也可(即除α-突触核蛋白之外)由其他促淀粉样变蛋白(例如tau、淀粉样蛋白β)构成，其可通过延长生长中的多聚体和/或通过充当种子表面上单体成核的模板而使α-突触核蛋白的聚集动力学加速。
145.α-突触核蛋白的自发聚集是在不添加种子的情况下进行的聚集过程。α-突触核蛋白是可溶性蛋白质，其在某些条件下具有自发聚集并形成可溶性寡聚体或可溶性/不溶性初原纤维或成熟原纤维或者洗涤剂不溶性聚集体的倾向。
146.路易体是在帕金森病(pd)、路易体痴呆和其他突触核蛋白病的神经细胞内发育的异常蛋白质聚集体。路易体作为取代其他细胞组分的球形块状物出现。在形态学上，路易体可分类为脑干型或皮质型。经典的脑干路易体是嗜酸性胞质包涵体，其由致密的核组成，核被5至10nm宽的放射状原纤维的晕环(halo)包围，其主要结构组分是α-突触核蛋白；皮质路易体因缺乏晕环而不同。路易体的存在是帕金森病的标志。
147.路易神经突是患病神经元中的异常神经元突起，其包含颗粒状物质、类似于路易体中发现的异常α-突触核蛋白丝、点状、曲张结构和轴突球状体。与路易体一样，路易神经突是α-突触核蛋白病例如路易体痴呆、帕金森病和多系统萎缩的特征。
148.胶质细胞胞质包涵体(也称为papp-lantos包涵体)由在多系统萎缩脑白质中的少突胶质细胞中检测到的不溶性α-突触核蛋白丝状聚集体组成。神经元胞体、轴突和细胞核中的α-突触核蛋白聚集体，称为神经元胞质包涵体，是多系统萎缩的特征性细胞病理学特征。胶质细胞胞质包涵体的检测被认为是多系统萎缩的神经病理学诊断的标志。
149.α-突触核蛋白结合分子是在特定识别位点或表位与病理性和/或聚集的α-突触核蛋白，例如α-突触核蛋白抗体或其片段结合的分子。本发明的抗原结合分子与seq id no：1氨基酸序列内的表位结合。该表位可以是线性表位或非线性表位。优选地，本发明的抗原结合分子与seq id no：1的人α-突触核蛋白的以下氨基酸残基内的表位结合：
150.第1-15(seq id no：121)，10-24(seq id no：122)，28-42(seq id no：124)，36-40(seq id no：2)，37-51(seq id no：125)，51-57(seq id no：3)，51-58(seq id no：136)，65-74(seq id no：4)，65-81(seq id no：5)，81-120(seq id no：137)，82-96(seq id no：130)，91-105(seq id no：131)，93-95(gfv)，100-114(seq id no：132)，109-123(seq id no：133)，118-132(seq id no：134)，124-131(seq id no：7)，127-140(seq id no：135)，128-135(seq id no：8)或131-140位(seq id no：9)。
151.更优选地，本发明的抗原结合分子与seq id no：1的人α-突触核蛋白的第124-131(seq id no：7)、128-135(seq id no：8)或131-140位(seq id no：9)氨基酸残基内的表位结合。甚至更优选地，本发明的抗原结合分子可与包含seq id no：1的人α-突触核蛋白的第126和127位氨基酸(作为用于结合的关键残基)的表位结合。在另一个实施方案中，本发明的抗原结合分子与seq id no：1的人α-突触核蛋白的氨基酸残基内的非线性表位结合。
152.另一些α-突触核蛋白结合分子还可包含多价分子、多特异性分子(例如，双抗体或双互补位抗体(biparatopic antibody))、融合分子、适配体、avimer或者其他天然存在或重组产生的分子。可用于本发明的举例说明性抗原结合分子包括抗体样分子。抗体样分子是可通过与靶分子结合而表现出功能的分子(参见，例如current opinion in biotechnology 2006，17：653-658；current opinion in biotechnology 2007，18：1-10；current opinion in structural biology 1997，7：463-469；protein science 2006，15：14-27)，并且包括例如darpin(wo 2002/020565)、亲和体(affibody)(wo 1995/001937)、avimer(wo 2004/044011；wo 2005/040229)、adnectin(wo 2002/032925)和fynomer(wo 2013/135588)。
153.本文中使用的“抗原结合分子”是可特异性地或选择性地与抗原结合的任何分子。结合分子可包括或者可以是抗体或其片段。α-突触核蛋白结合分子是在特定识别位点、表位处与α-突触核蛋白，例如α-突触核蛋白抗体或其片段结合的分子。
154.本文中使用的术语“α-突触核蛋白抗体”、“抗α-突触核蛋白抗体”和“与病理性和/或聚集的α-突触核蛋白结合的抗体”或简单地“抗体”是指这样的抗体，其能够以足够的亲和力结合病理性α-突触核蛋白和/或聚集的α-突触核蛋白包括但不限于路易体、路易神经突或胶质细胞胞质包涵体，以使得该抗体可用作靶向α-突触核蛋白的治疗剂和/或诊断剂。在一个实施方案中，本发明的α-突触核蛋白抗体与无关的非α-突触核蛋白结合的程度小于该抗体与α-突触核蛋白的结合的约10％，如例如通过放射免疫测定(radioimmunoassay，ria)测量的。
155.一般而言，术语“抗体”在本文中以最广义使用，并且涵盖多种抗体结构，包括但不限于单克隆抗体、多克隆抗体、多特异性抗体(例如，双特异性抗体)、完全人抗体和抗体片段，只要它们表现出所期望的抗原结合活性即可。在本发明内的抗体也可以是嵌合抗体(尤其是与人恒定结构域融合的小鼠vh和vl区)、重组抗体、重组抗体的抗原结合片段、人源化抗体或者展示在噬菌体表面上或展示在嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor，car)t细胞表面上的抗体。
156.抗体的“抗原结合片段”是指不同于完整抗体的包含完整抗体的一部分并且结合与完整抗体结合的抗原的分子。抗体片段的一些实例包括但不限于fv、fab、fab’、fab
’‑
sh、f(ab’)2；双抗体；线性抗体；单链抗体分子(例如scfv)；以及由抗体片段形成的多特异性抗体。
157.本文中使用的术语“单克隆抗体”是指从基本上同质抗体的群体中获得的抗体，即，除可以以少量存在的可能的天然存在突变之外，构成该群体的单独抗体是相同的。单克隆抗体具有高度特异性，针对单一抗原位点。修饰语“单克隆”指示该抗体在基本上同质的抗体群体中的特征，并且不应解释为要求该抗体通过任何特定方法来产生。如上所述，根据本发明使用的单克隆抗体可通过由kohler，nature 256(1975)，495描述的杂交瘤方法来制
备。
158.因此，在本发明的上下文中，术语“抗体”涉及完整的免疫球蛋白分子以及这样的免疫球蛋白分子的一部分(即，“其抗原结合片段”)。此外，如上所讨论的，该术语涉及经修饰和/或经改变的抗体分子。该术语还涉及重组或合成地产生/合成的抗体。该术语还涉及完整的抗体及其抗体片段，如分离的轻链和重链、fab、fv、fab’、fab
’‑
sh、f(ab’)2。术语“抗体”还包括但不限于完全人抗体、嵌合抗体、人源化抗体、cdr接枝的抗体和抗体构建体，如单链fv(scfv)或抗体融合蛋白。
159.人源化抗体是经修饰的抗体，也称为重构人抗体。人源化抗体是通过将来源于经免疫动物的抗体的cdr转移到人抗体的互补决定区来构建的。用于这样的目的的常规遗传重组技术是已知的(参见欧洲专利申请公开no.ep 239400；国际公开no.wo 96/02576；sato k.et al.，cancer research 1993，53：851-856；国际公开no.wo 99/51743)。
160.本文中使用的术语“cdr”涉及“互补决定区”，其是本领域中公知的。cdr是免疫球蛋白的一部分，其决定所述分子的特异性并且与特定配体接触。cdr是所述分子的最可变的部分，并且有助于这些分子的多样性。每个v结构域中均存在三个cdr区：cdr1、cdr2和cdr3。vh-cdr或cdr-h示出可变重链的cdr区并且vl-cdr或cdr-l涉及可变轻链的cdr区。vh意指可变重链并且vl意指可变轻链。ig来源区域的cdr区可如kabat“sequences of proteins of immunological interest”，第5版.nih出版物no.91-3242 u.s.department of health and human services(1991)；chothia j.，mol.biol.196(1987)，901-917或chothia，nature 342(1989)，877-883中所述确定。
[0161]“fc”区包含两个含有抗体的ch2和ch3结构域的重链片段。两个重链片段通过两个或更多个二硫键以及通过ch3结构域的疏水相互作用保持在一起。
[0162]“fab’片段”包含一条轻链以及一条重链的一部分，所述一条重链的一部分包含vh结构域和ch1结构域并且还包含在ch1与ch2结构域之间的区域，以使得可在两个fab’片段的两条重链之间形成链间二硫键以形成f(ab’)2分子。
[0163]“f(ab’)2片段”包含两条轻链和两条重链，所述重链包含ch1与ch2结构域之间的恒定区的一部分，以使得在两条重链之间形成链间二硫键。因此，f(ab’)2片段由通过两条重链之间的二硫键保持在一起的两个fab’片段构成。
[0164]“fv区”包含来自重链和轻链二者的可变区，但缺少恒定区。
[0165]
因此，在本发明的上下文中，提供了抗体分子或其抗原结合片段，其是人源化的并且可成功地用于药物组合物中。
[0166]“与蛋白质限定区域中表位结合的抗体”是要求该区域中存在一个或更多个氨基酸以与蛋白质结合的抗体。
[0167]
在某些实施方案中，“与蛋白质限定区域中表位结合的抗体”通过突变分析来鉴定，其中对该蛋白质的氨基酸进行突变，并且该抗体与所得经改变蛋白质(例如，包含该表位的经改变蛋白质)的结合确定为与未经改变蛋白质的结合的至少20％。在一些实施方案中，“与蛋白质限定区域中表位结合的抗体”通过突变分析来鉴定，其中对该蛋白质的氨基酸进行突变，并且该抗体与所得经改变蛋白质(例如，包含该表位的经改变蛋白质)的结合确定为与未经改变蛋白质的结合的至少30％、至少40％、至少50％、至少60％、至少70％、至少80％或至少90％。在某些实施方案中，抗体的结合通过facs、wb或通过合适的结合测定例
如elisa来确定。
[0168]
在本发明的上下文中使用的术语“与
……
结合”定义至少两个“抗原相互作用位点”彼此的结合(相互作用)。根据本发明，术语“抗原相互作用位点”定义多肽的基序，即本发明的抗体或抗原结合片段的一部分，其显示出与α-突触核蛋白中的特定抗原或特定抗原组特异性相互作用的能力。所述结合/相互作用也应理解为定义“特异性识别”。根据本发明，术语“特异性地识别”意指抗体能够与如本文中定义的α-突触核蛋白的至少两个氨基酸(也称为“关键残基”)特异性地相互作用和/或结合，特别地与seq id no：1的人α-突触核蛋白的以下残基内的至少两个氨基酸相互作用/结合：
[0169]
第1-15(seq id no：121)，10-24(seq id no：122)，28-42(seq id no：124)，36-40(seq id no：2)，37-51(seq id no：125)，51-57(seq id no：3)，51-58(seq id no：136)，65-74(seq id no：4)，65-81(seq id no：5)，81-120(seq id no：137)，82-96(seq id no：130)，91-105(seq id no：131)，93-95(gfv)，100-114(seq id no：132)，109-123(seq id no：133)，118-132(seq id no：134)，124-131(seq id no：7)，127-140(seq id no：135)，128-135(seq id no：8)或131-140位(seq id no：9)。
[0170]
所述残基可形成线性或非线性表位。优选地，本发明的抗原结合分子与seq id no：1的人α-突触核蛋白的第124-131(seq id no：7)、128-135(seq id no：8)或131-140位(seq id no：9)氨基酸残基内的表位结合。甚至更优选地，本发明的抗原结合分子可与包含seq id no：1的人α-突触核蛋白的第126和127位氨基酸(作为用于结合的关键残基)的表位结合。本发明的抗原结合分子还可与seq id no：1的人α-突触核蛋白的氨基酸残基内的非线性表位结合。
[0171]
正在研究的抗原结合分子，特别是抗体或其抗原结合片段的组的交叉反应性可例如通过以下来测试：评估在常规条件下(参见例如harlow和lane，antibodies：a laboratory manual，cold spring harbor laboratory press，(1988)和using antibodies：a laboratory manual，cold spring harbor laboratory press，(1999))抗体或其抗原结合片段的所述组与目的(多)肽以及与许多或多或少(结构上和/或功能上)紧密相关的(多)肽的结合。只有与如本文中定义的某些α-突触核蛋白结构，例如如本文中定义的α-突触核蛋白的特定表位或(多)肽/蛋白质结合但不与或基本上不与同一α-突触核蛋白的任何其他表位或(多)肽结合的那些构建体(即抗体、其抗原结合片段等)被认为对目的表位或(多)肽/蛋白质具有特异性，并被选择用于根据本文中提供的方法进行的进一步研究。这些方法尤其可包括与结构和/或功能上密切相关的分子的结合研究、阻断和竞争研究。这些结合研究还包括facs分析、表面等离子体共振(surface plasmon resonance，spr，例如用biacoretm进行)、分析型超离心、等温滴定量热法、荧光各向异性、荧光光谱术或通过经放射性标记配体结合测定。
[0172]
因此，特异性可通过本领域中已知的方法和如本文中所述的方法通过实验确定。这样的方法包括但不限于western印迹、elisa-、ria-、ecl-、irma-测试和肽扫描。
[0173]
本领域技术人员可理解，表位可包含在α-突触核蛋白中，但也可包含在其降解产物中或者可以是化学合成的肽。仅指出氨基酸位置是为了显示相应氨基酸序列在α-突触核蛋白序列中的位置。本发明涵盖所有包含表位的肽。所述肽可以是长度大于100个氨基酸的多肽的一部分，或者可以是小于100个，优选小于50个，更优选小于25个氨基酸，甚至更优选
小于18个氨基酸的小肽。这样的肽的氨基酸可以是天然氨基酸或非天然氨基酸(例如，β-氨基酸、γ-氨基酸、d-氨基酸)或其组合。此外，本发明可涵盖表位的相应逆反肽(retro-inverso peptide)。所述肽可以是未结合的或结合的。其可与例如小分子(例如，药物或荧光团)、高分子量聚合物(例如，聚乙二醇(polyethylene glycol，peg)、聚乙烯亚胺(pei)、甲基丙烯酸羟丙酯(hydroxypropylmethacrylate，hpma)等)或蛋白质、脂肪酸、糖部分结合或者可插入膜中。为了测试所讨论的抗体和本发明的抗体是否识别相同或相似的表位，本领域中已知许多测定，其中一些(例如“丙氨酸扫描诱变”)在下面的实施例中进行描述。
[0174]
抗体是否识别与本文中提供的另一抗体识别的表位相同的表位或与该表位重叠的表位可通过两种抗体之间针对该表位的竞争来确认。抗体之间的竞争可使用这样的手段例如酶联免疫吸附测定(immunosorbent assay，elisa)、荧光能量转移法(fluorescence energy transfer method，fret)和荧光微体积测定技术(fluorometric microvolume assay technology，)通过竞争性结合测定来评价。与抗原结合的抗体的量与竞争性地结合相同或重叠表位的候选竞争抗体(测试抗体)的结合能力间接相关。换言之，随着针对相同或重叠表位的测试抗体的量或亲和力的提高，与抗原结合的抗体的量降低，而与该抗原结合的测试抗体的量提高。特别地，将适当经标记的抗体和测试抗体同时添加至抗原，并随后使用标记检测结合的抗体。通过预先标记抗体，可容易地确定与抗原结合的抗体的量。该标记没有特别限制，并且根据所使用的测定技术选择标记方法。标记方法的一些具体实例包括荧光标记、放射性标记和酶标记。
[0175]
在本文中，“与重叠表位结合的抗体”或“与相同表位结合的抗体”是指在通常比未标记抗体的浓度高100倍，优选高80倍，更优选高50倍，甚至更优选高30倍，并且还更优选高10倍的浓度下(在该浓度下未标记抗体的结合将经标记抗体的结合量降低50％(ic50))，可使经标记抗体的结合量降低至少50％的测试抗体。抗体识别的表位可通过本领域技术人员已知的方法进行分析，并且例如其可通过western印迹等进行。
[0176]
在一些实施方案中，所述抗体包含：
[0177]
a)包含seq id no：10的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：10的氨基酸序列具有至少96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；或者
[0178]
b)包含seq id no：20的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：20的氨基酸序列具有至少96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；或者
[0179]
c)包含seq id no：30的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：30的氨基酸序列具有至少94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；或者
[0180]
d)包含seq id no：40的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：40的氨基酸序列具有至少94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；或者
[0181]
e)包含seq id no：50的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：50的氨基酸序列具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；或者
[0182]
f)包含seq id no：60的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：60的氨基酸序列具有至少89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；或者
[0183]
g)包含seq id no：70的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：70的氨基酸序列
具有至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；或者
[0184]
h)包含seq id no：90的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：90的氨基酸序列具有至少94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；或者
[0185]
i)包含seq id no：100的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：100的氨基酸序列具有至少87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；或者
[0186]
j)包含seq id no：110的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：110的氨基酸序列具有至少97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；或者
[0187]
k)包含seq id no：280的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：280的氨基酸序列具有至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；或者
[0188]
l)包含seq id no：290的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：290的氨基酸序列具有至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；或者
[0189]
m)包含seq id no：140的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：140的氨基酸序列具有至少94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；或者
[0190]
n)包含seq id no：150的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：150的氨基酸序列具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；或者
[0191]
o)包含seq id no：160的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：160的氨基酸序列具有至少97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；或者
[0192]
p)包含seq id no：170的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：170的氨基酸序列具有至少至少84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；或者
[0193]
q)包含seq id no：180的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：180的氨基酸序列具有至少93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；或者
[0194]
r)包含seq id no：190的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：190的氨基酸序列具有至少88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；或者
[0195]
s)包含seq id no：200的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：200的氨基酸序列具有至少93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；或者
[0196]
t)包含seq id no：210的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：210的氨基酸序列具有至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；或者
[0197]
u)包含seq id no：220的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：220的氨基酸序列具有至少97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；或者
[0198]
v)包含seq id no：230的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：230的氨基酸序列具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链
可变区(vh)；或者
[0199]
w)包含seq id no：240的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：240的氨基酸序列具有至少96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；或者
[0200]
x)包含seq id no：250的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：250的氨基酸序列具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；或者
[0201]
y)包含seq id no：260的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：260的氨基酸序列具有至少92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；或者
[0202]
z)包含seq id no：270的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：270的氨基酸序列具有至少85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；或者
[0203]
aa)包含seq id no：300的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：300的氨基酸序列具有至少97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；或者
[0204]
bb)包含seq id no：310的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：310的氨基酸序列具有至少94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；或者
[0205]
cc)包含seq id no：320的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：320的氨基酸序列具有至少94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；或者
[0206]
dd)包含seq id no：330的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：330的氨基酸序列具有至少96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；或者
[0207]
ee)包含seq id no：340的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：340的氨基酸序列具有至少93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；或者
[0208]
ff)包含seq id no：350的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：350的氨基酸序列具有至少92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；或者
[0209]
gg)包含seq id no：360的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：360的氨基酸序列具有至少93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；或者
[0210]
hh)包含seq id no：370的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：370的氨基酸序列具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；或者
[0211]
ii)包含seq id no：380的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：380的氨基酸序列具有至少92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；或者
[0212]
jj)包含seq id no：390的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：390的氨基酸序列具有至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；或者
[0213]
kk)包含seq id no：400的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：400的氨基酸序列具有至少93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；或者
[0214]
ll)包含seq id no：410的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：410的氨基酸序
列具有至少92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；或者
[0215]
mm)包含seq id no：420的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：420的氨基酸序列具有至少94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；或者
[0216]
nn)包含seq id no：430的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：430的氨基酸序列具有至少96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；或者
[0217]
oo)包含seq id no：440的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：440的氨基酸序列具有至少93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；或者
[0218]
pp)包含seq id no：450的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：450的氨基酸序列具有至少93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；或者
[0219]
qq)包含seq id no：460的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：460的氨基酸序列具有至少94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；或者
[0220]
rr)包含seq id no：470的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：470的氨基酸序列具有至少96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；或者
[0221]
ss)包含seq id no：480的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：480的氨基酸序列具有至少98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；或者
[0222]
tt)包含seq id no：490的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：490的氨基酸序列具有至少98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；或者
[0223]
uu)包含seq id no：500的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：500的氨基酸序列具有至少86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；或者
[0224]
vv)包含seq id no：510的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：510的氨基酸序列具有至少88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；或者
[0225]
ww)包含seq id no：520的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：520的氨基酸序列具有至少89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；或者
[0226]
xx)包含seq id no：530的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：530的氨基酸序列具有至少88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；或者
[0227]
yy)包含seq id no：540的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：540的氨基酸序列具有至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；或者
[0228]
zz)包含seq id no：550的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：550的氨基酸序列具有至少89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；或者
[0229]
aaa)包含seq id no：560的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：560的氨基酸序列具有至少88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；或者
[0230]
bbb)包含seq id no：570的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：570的氨基酸序列具有至少92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；或者
[0231]
ccc)包含seq id no：580的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：580的氨基酸序列具有至少95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；或者
[0232]
ddd)包含seq id no：590的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：590的氨基酸序列具有至少95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；或者
[0233]
eee)包含seq id no：600的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：600的氨基酸序列具有至少89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；或者
[0234]
fff)包含seq id no：610的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：610的氨基酸序列具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；或者
[0235]
ggg)包含seq id no：620的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：620的氨基酸序列具有至少89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；或者
[0236]
hhh)包含seq id no：630的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：630的氨基酸序列具有至少88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；或者
[0237]
iii)包含seq id no：640的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：640的氨基酸序列具有至少88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；或者
[0238]
jjj)包含seq id no：650的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：650的氨基酸序列具有至少88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；或者
[0239]
kkk)包含seq id no：660的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：660的氨基酸序列具有至少89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；或者
[0240]
lll)包含seq id no：670的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：670的氨基酸序列具有至少89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；或者
[0241]
mmm)包含seq id no：680的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：680的氨基酸序列具有至少87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；或者
[0242]
nnn)包含seq id no：690的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：690的氨基酸序列具有至少87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；或者
[0243]
ooo)包含seq id no：700的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：700的氨基酸序列具有至少86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％
或99％序列同一性的重链可变区(vh)；或者
[0244]
ppp)包含seq id no：710的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：710的氨基酸序列具有至少86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；或者
[0245]
qqq)包含seq id no：720的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：720的氨基酸序列具有至少86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)。
[0246]
在一些实施方案中，所述抗体包含：
[0247]
a)包含seq id no：14的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：14的氨基酸序列具有至少99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0248]
b)包含seq id no：24的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：24的氨基酸序列具有至少93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0249]
c)包含seq id no：34的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：34的氨基酸序列具有至少98％或99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0250]
d)包含seq id no：44的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：44的氨基酸序列具有至少94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0251]
e)包含seq id no：54的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：54的氨基酸序列具有至少93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0252]
f)包含seq id no：64的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：64的氨基酸序列具有至少96％、97％、98％或99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0253]
g)包含seq id no：74的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：74的氨基酸序列具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0254]
h)包含seq id no：84的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：84的氨基酸序列具有至少94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0255]
i)包含seq id no：94的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：94的氨基酸序列具有至少99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0256]
j)包含seq id no：104的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：104的氨基酸序列具有至少98％或99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0257]
k)包含seq id no：114的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0258]
l)包含seq id no：284的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0259]
m)包含seq id no：194的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：194的氨基酸序列具有至少95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0260]
n)包含seq id no：144的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：144的氨基酸序列具有至少97％、98％或99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0261]
o)包含seq id no：154的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：154的氨基酸序列具有至少98％或99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0262]
p)包含seq id no：174的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：174的氨基酸序列具有至少93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0263]
q)包含seq id no：184的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0264]
r)包含seq id no：204的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：204的氨基酸序列具有至少97％、98％或99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0265]
s)包含seq id no：214的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：214的氨基酸序列具有至少97％、98％或99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0266]
t)包含seq id no：224的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：224的氨基酸序列具有至少92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0267]
u)包含seq id no：234的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：234的氨基酸序列具有至少97％、98％或99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0268]
v)包含seq id no：244的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：244的氨基酸序列具有至少94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0269]
w)包含seq id no：254的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：254的氨基酸序列具有至少94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0270]
x)包含seq id no：264的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：264的氨基酸序列具有至少96％、97％、98％或99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0271]
y)包含seq id no：274的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：274的氨基酸序列具有至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0272]
z)包含seq id no：304的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：304的氨基酸序列具有至少97％、98％或99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0273]
aa)包含seq id no：314的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：314的氨基酸序列具有至少96％、97％、98％或99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0274]
bb)包含seq id no：324的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：324的氨基酸序列具有至少99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0275]
cc)包含seq id no：334的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：334的氨基酸序列具有至少97％、98％或99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0276]
dd)包含seq id no：344的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：344的氨基酸序列具有至少98％或99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0277]
ee)包含seq id no：354的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：354的氨基酸序列具有至少95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0278]
ff)包含seq id no：364的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：364的氨基酸序列具有至少99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0279]
gg)包含seq id no：374的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：374的氨基酸序列具有至少98％或99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0280]
hh)包含seq id no：384的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：384的氨基酸序列具有至少95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0281]
ii)包含seq id no：394的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：394的氨基酸序列具有至少96％、97％、98％或99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0282]
jj)包含seq id no：404的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：404的氨基酸序列具有至少93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0283]
kk)包含seq id no：414的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0284]
ll)包含seq id no：424的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：424的氨基酸序列具有至少99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0285]
mm)包含seq id no：434的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：434的氨基酸序列具有至少98％或99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0286]
nn)包含seq id no：464的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：464的氨基酸序列具有至少99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0287]
oo)包含seq id no：474的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：474的氨基酸序列具有至少99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0288]
pp)包含seq id no：484的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0289]
qq)包含seq id no：494的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：494的氨基酸序列具有至少99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者rr)包含seq id no：504的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：504的氨基酸序列具有至少97％、98％或99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0290]
ss)包含seq id no：514的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：514的氨基酸序列具有至少98％或99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0291]
tt)包含seq id no：524的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：524的氨基酸序列具有至少99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0292]
uu)包含seq id no：544的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0293]
vv)包含seq id no：554的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：554的氨基酸序列具有至少99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0294]
ww)包含seq id no：564的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：564的氨基酸序列具有至少98％或99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0295]
xx)包含seq id no：574的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：574的氨基酸序列具有至少97％、98％或99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0296]
yy)包含seq id no：584的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：584的氨基酸序列具有至少99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0297]
zz)包含seq id no：614的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：614的氨基酸序列具有至少94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0298]
aaa)包含seq id no：624的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：624的氨基酸序列具有至少93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0299]
bbb)包含seq id no：634的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：634的氨基酸序列具有至少93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0300]
ccc)包含seq id no：644的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：644的氨基酸序列具有至少92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的轻链可变区
(vl)。
[0301]
在一些实施方案中，所述抗体包含：
[0302]
a)包含seq id no：10的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：14的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0303]
b)包含seq id no：20的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：24的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0304]
c)包含seq id no：30的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：34的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0305]
d)包含seq id no：40的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：44的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0306]
e)包含seq id no：50的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：54的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0307]
f)包含seq id no：60的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：64的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0308]
g)包含seq id no：70的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：74的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0309]
h)包含seq id no：30的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：84的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0310]
i)包含seq id no：90的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：94的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0311]
j)包含seq id no：100的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：104的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0312]
k)包含seq id no：110的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：114的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0313]
l)包含seq id no：280的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：284的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0314]
m)包含seq id no：290的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：194的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0315]
n)包含seq id no：140的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：144的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0316]
o)包含seq id no：150的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：154的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0317]
p)包含seq id no：160的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：164的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0318]
q)包含seq id no：170的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：174的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0319]
r)包含seq id no：180的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：184的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0320]
s)包含seq id no：190的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：194的序列的
轻链可变区(vl)；或者
[0321]
t)包含seq id no：200的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：204的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0322]
u)包含seq id no：210的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：214的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0323]
v)包含seq id no：220的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：224的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0324]
w)包含seq id no：230的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：234的序列的轻链可变区(vl)；
[0325]
x)包含seq id no：240的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：244的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0326]
y)包含seq id no：250的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：254的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0327]
z)包含seq id no：260的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：264的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0328]
aa)包含seq id no：270的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：274的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0329]
bb)包含seq id no：300的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：304的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0330]
cc)包含seq id no：310的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：314的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0331]
dd)包含seq id no：320的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：324的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0332]
ee)包含seq id no：330的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：334的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0333]
ff)包含seq id no：340的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：344的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0334]
gg)包含seq id no：350的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：354的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0335]
hh)包含seq id no：360的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：364的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0336]
ii)包含seq id no：370的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：374的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0337]
jj)包含seq id no：380的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：384的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0338]
kk)包含seq id no：390的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：394的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0339]
ll)包含seq id no：400的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：404的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0340]
mm)包含seq id no：410的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：414的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0341]
nn)包含seq id no：420的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：424的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0342]
oo)包含seq id no：430的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：434的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0343]
pp)包含seq id no：440的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：414的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0344]
qq)包含seq id no：450的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：424的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0345]
rr)包含seq id no：460的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：464的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0346]
ss)包含seq id no：470的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：474的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0347]
tt)包含seq id no：480的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：484的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0348]
uu)包含seq id no：490的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：494的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0349]
vv)包含seq id no：500的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：504的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0350]
ww)包含seq id no：510的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：514的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0351]
xx)包含seq id no：520的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：524的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0352]
yy)包含seq id no：530的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：534的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0353]
zz)包含seq id no：540的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：544的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0354]
aaa)包含seq id no：550的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：554的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0355]
bbb)包含seq id no：560的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：564的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0356]
ccc)包含seq id no：570的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：574的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0357]
ddd)包含seq id no：580的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：584的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0358]
eee)包含seq id no：590的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：474的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0359]
fff)包含seq id no：600的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：554的序列
的轻链可变区(vl)；或者
[0360]
ggg)包含seq id no：610的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：614的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0361]
hhh)包含seq id no：610的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：624的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0362]
iii)包含seq id no：610的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：634的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0363]
jjj)包含seq id no：610的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：644的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0364]
kkk)包含seq id no：620的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：614的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0365]
lll)包含seq id no：620的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：624的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0366]
mmm)包含seq id no：620的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：634的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0367]
nnn)包含seq id no：620的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：644的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0368]
ooo)包含seq id no：630的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：614的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0369]
ppp)包含seq id no：630的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：624的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0370]
qqq)包含seq id no：630的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：634的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0371]
rrr)包含seq id no：630的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：644的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0372]
sss)包含seq id no：640的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：614的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0373]
ttt)包含seq id no：640的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：624的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0374]
uuu)包含seq id no：640的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：634的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0375]
vvv)包含seq id no：640的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：644的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0376]
www)包含seq id no：650的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：614的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0377]
xxx)包含seq id no：650的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：624的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0378]
yyy)包含seq id no：650的序列的重链可变区(vh)和包含seq id no：634的序列的轻链可变区(vl)；或者
id no：144的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：144的氨基酸序列具有至少97％、98％或99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0406]
o)包含seq id no：150的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：150的氨基酸序列具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：154的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：154的氨基酸序列具有至少98％或99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0407]
p)包含seq id no：160的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：160的氨基酸序列具有至少97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：164的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0408]
q)包含seq id no：170的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：170的氨基酸序列具有至少至少84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：174的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：174的氨基酸序列具有至少93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0409]
r)包含seq id no：180的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：180的氨基酸序列具有至少93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：184的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0410]
s)包含seq id no：190的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：190的氨基酸序列具有至少88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：194的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：194的氨基酸序列具有至少95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0411]
t)包含seq id no：200的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：200的氨基酸序列具有至少93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：204的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：204的氨基酸序列具有至少97％、98％或99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0412]
u)包含seq id no：210的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：210的氨基酸序列具有至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：214的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：214的氨基酸序列具有至少97％、98％或99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0413]
v)包含seq id no：220的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：220的氨基酸序列具有至少97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：224的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：224的氨基酸序列具有至少92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0414]
w)包含seq id no：230的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：230的氨基酸序列具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：234的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：234的氨基酸序列具有至少97％、98％或99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0415]
x)包含seq id no：240的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：240的氨基酸序
列具有至少96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：244的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：244的氨基酸序列具有至少94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0416]
y)包含seq id no：250的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：250的氨基酸序列具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：254的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：254的氨基酸序列具有至少94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0417]
z)包含seq id no：260的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：260的氨基酸序列具有至少92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：264的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：264的氨基酸序列具有至少96％、97％、98％或99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0418]
aa)包含seq id no：270的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：270的氨基酸序列具有至少85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：274的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：274的氨基酸序列具有至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0419]
bb)包含seq id no：300的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：300的氨基酸序列具有至少97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：304的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：304的氨基酸序列具有至少97％、98％或99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0420]
cc)包含seq id no：310的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：310的氨基酸序列具有至少94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：314的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：314的氨基酸序列具有至少96％、97％、98％或99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0421]
dd)包含seq id no：320的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：320的氨基酸序列具有至少94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：324的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：324的氨基酸序列具有至少99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0422]
ee)包含seq id no：330的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：330的氨基酸序列具有至少96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：334的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：334的氨基酸序列具有至少97％、98％或99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0423]
ff)包含seq id no：340的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：340的氨基酸序列具有至少93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：344的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：344的氨基酸序列具有至少98％或99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0424]
gg)包含seq id no：350的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：350的氨基酸序列具有至少92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：354的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：354的氨基酸序列具有至
少95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0425]
hh)包含seq id no：360的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：360的氨基酸序列具有至少93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：364的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：364的氨基酸序列具有至少99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0426]
ii)包含seq id no：370的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：370的氨基酸序列具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：374的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：374的氨基酸序列具有至少98％或99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0427]
jj)包含seq id no：380的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：380的氨基酸序列具有至少92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：384的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：384的氨基酸序列具有至少95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0428]
kk)包含seq id no：390的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：390的氨基酸序列具有至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：394的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：394的氨基酸序列具有至少96％、97％、98％或99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0429]
ll)包含seq id no：400的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：400的氨基酸序列具有至少93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：404的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：404的氨基酸序列具有至少93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0430]
mm)包含seq id no：410的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：410的氨基酸序列具有至少92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：414的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0431]
nn)包含seq id no：420的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：420的氨基酸序列具有至少94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：424的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：424的氨基酸序列具有至少99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0432]
oo)包含seq id no：430的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：430的氨基酸序列具有至少96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：434的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：434的氨基酸序列具有至少98％或99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0433]
pp)包含seq id no：440的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：440的氨基酸序列具有至少93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：414的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0434]
qq)包含seq id no：450的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：450的氨基酸序列具有至少93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：424的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：424的氨基酸序列具有至少99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0435]
rr)包含seq id no：460的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：460的氨基酸序列具有至少94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：464的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：464的氨基酸序列具有至少99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0436]
ss)包含seq id no：470的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：470的氨基酸序列具有至少96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：474的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：474的氨基酸序列具有至少99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0437]
tt)包含seq id no：480的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：480的氨基酸序列具有至少98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：484的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0438]
uu)包含seq id no：490的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：490的氨基酸序列具有至少98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：494的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：494的氨基酸序列具有至少99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0439]
vv)包含seq id no：500的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：500的氨基酸序列具有至少86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：504的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：504的氨基酸序列具有至少97％、98％或99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0440]
ww)包含seq id no：510的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：510的氨基酸序列具有至少88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：514的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：514的氨基酸序列具有至少98％或99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0441]
xx)包含seq id no：520的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：520的氨基酸序列具有至少89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：524的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：524的氨基酸序列具有至少99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0442]
yy)包含seq id no：530的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：530的氨基酸序列具有至少88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：534的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0443]
zz)包含seq id no：540的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：540的氨基酸序列具有至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：544的序列的轻链可变区(vl)；或者
[0444]
aaa)包含seq id no：550的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：550的氨基酸序列具有至少89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：554的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：554的氨基酸序列具有至少99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0445]
bbb)包含seq id no：560的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：560的氨基酸
序列具有至少88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：564的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：564的氨基酸序列具有至少98％或99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0446]
ccc)包含seq id no：570的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：570的氨基酸序列具有至少92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：574的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：574的氨基酸序列具有至少97％、98％或99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0447]
ddd)包含seq id no：580的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：580的氨基酸序列具有至少95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：584的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：584的氨基酸序列具有至少99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0448]
eee)包含seq id no：590的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：590的氨基酸序列具有至少95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：474的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：474的氨基酸序列具有至少99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0449]
fff)包含seq id no：600的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：600的氨基酸序列具有至少89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：554的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：554的氨基酸序列具有至少99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0450]
ggg)包含seq id no：610的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：610的氨基酸序列具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：614的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：614的氨基酸序列具有至少94％、95％、96％、97％、98％和99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0451]
hhh)包含seq id no：610的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：610的氨基酸序列具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：624的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：624的氨基酸序列具有至少93％、94％、95％、96％、97％、98％和99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0452]
iii)包含seq id no：610的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：610的氨基酸序列具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：634的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：634的氨基酸序列具有至少93％、94％、95％、96％、97％、98％和99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0453]
jjj)包含seq id no：610的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：610的氨基酸序列具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：644的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：644的氨基酸序列具有至少92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％和99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0454]
kkk)包含seq id no：620的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：620的氨基酸
序列具有至少89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：614的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：614的氨基酸序列具有至少94％、95％、96％、97％、98％和99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0455]
lll)包含seq id no：620的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：620的氨基酸序列具有至少89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：624的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：624的氨基酸序列具有至少93％、94％、95％、96％、97％、98％和99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0456]
mmm)包含seq id no：620的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：620的氨基酸序列具有至少89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：634的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：634的氨基酸序列具有至少93％、94％、95％、96％、97％、98％和99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0457]
nnn)包含seq id no：620的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：620的氨基酸序列具有至少89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：644的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：644的氨基酸序列具有至少92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％和99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0458]
ooo)包含seq id no：630的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：630的氨基酸序列具有至少88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：614的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：614的氨基酸序列具有至少94％、95％、96％、97％、98％和99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0459]
ppp)包含seq id no：630的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：630的氨基酸序列具有至少88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：624的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：624的氨基酸序列具有至少93％、94％、95％、96％、97％、98％和99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0460]
qqq)包含seq id no：630的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：630的氨基酸序列具有至少88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：634的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：634的氨基酸序列具有至少93％、94％、95％、96％、97％、98％和99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0461]
rrr)包含seq id no：630的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：630的氨基酸序列具有至少88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：644的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：644的氨基酸序列具有至少92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％和99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0462]
sss)包含seq id no：640的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：640的氨基酸序列具有至少88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：614的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：614的氨基酸序列具有至少94％、95％、96％、97％、98％和99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0463]
ttt)包含seq id no：640的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：640的氨基酸序列具有至少88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：624的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：624的氨基酸序列具有至少93％、94％、95％、96％、97％、98％和99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0464]
uuu)包含seq id no：640的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：640的氨基酸序列具有至少88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：634的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：634的氨基酸序列具有至少93％、94％、95％、96％、97％、98％和99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0465]
vvv)包含seq id no：640的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：640的氨基酸序列具有至少88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：644的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：644的氨基酸序列具有至少92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％和99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0466]
www)包含seq id no：650的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：650的氨基酸序列具有至少88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：614的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：614的氨基酸序列具有至少94％、95％、96％、97％、98％和99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0467]
xxx)包含seq id no：650的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：650的氨基酸序列具有至少88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：624的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：624的氨基酸序列具有至少93％、94％、95％、96％、97％、98％和99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0468]
yyy)包含seq id no：650的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：650的氨基酸序列具有至少88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：634的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：634的氨基酸序列具有至少93％、94％、95％、96％、97％、98％和99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0469]
zzz)包含seq id no：650的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：650的氨基酸序列具有至少88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：644的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：644的氨基酸序列具有至少92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％和99％序列同一性
的轻链可变区(vl)；或者
[0470]
aaaa)包含seq id no：660的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：660的氨基酸序列具有至少89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：614的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：614的氨基酸序列具有至少94％、95％、96％、97％、98％和99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0471]
bbbb)包含seq id no：670的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：670的氨基酸序列具有至少89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：614的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：614的氨基酸序列具有至少94％、95％、96％、97％、98％和99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0472]
cccc)包含seq id no：680的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：680的氨基酸序列具有至少87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：614的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：614的氨基酸序列具有至少94％、95％、96％、97％、98％和99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0473]
dddd)包含seq id no：690的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：690的氨基酸序列具有至少87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：614的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：614的氨基酸序列具有至少94％、95％、96％、97％、98％和99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0474]
eeee)包含seq id no：690的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：690的氨基酸序列具有至少87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：624的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：624的氨基酸序列具有至少93％、94％、95％、96％、97％、98％和99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0475]
ffff)包含seq id no：700的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：700的氨基酸序列具有至少86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：614的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：614的氨基酸序列具有至少94％、95％、96％、97％、98％和99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0476]
gggg)包含seq id no：700的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：700的氨基酸序列具有至少86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：624的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：624的氨基酸序列具有至少93％、94％、95％、96％、97％、98％和99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0477]
hhhh)包含seq id no：710的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：710的氨基酸序列具有至少86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：614的序列的轻链可变区(vl)或
与seq id no：614的氨基酸序列具有至少94％、95％、96％、97％、98％和99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0478]
iiii)包含seq id no：710的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：710的氨基酸序列具有至少86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：624的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：624的氨基酸序列具有至少93％、94％、95％、96％、97％、98％和99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0479]
jjjj)包含seq id no：720的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：720的氨基酸序列具有至少86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：614的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：614的氨基酸序列具有至少94％、95％、96％、97％、98％和99％序列同一性的轻链可变区(vl)；或者
[0480]
kkkk)包含seq id no：720的序列的重链可变区(vh)或与seq id no：720的氨基酸序列具有至少86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的重链可变区(vh)；和包含seq id no：624的序列的轻链可变区(vl)或与seq id no：624的氨基酸序列具有至少93％、94％、95％、96％、97％、98％和99％序列同一性的轻链可变区(vl)。
[0481]
在一些实施方案中，所述抗体包含：
[0482]
a)包含seq id no：11的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：12的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：13的氨基酸序列的vh-cdr3；
[0483]
b)包含seq id no：21的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：22的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含氨基酸序列ysy的vh-cdr3；
[0484]
c)包含seq id no：31的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：32的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：33的氨基酸序列的vh-cdr3；
[0485]
d)包含seq id no：41的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：42的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：43的氨基酸序列的vh-cdr3；
[0486]
e)包含seq id no：21的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：52的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含氨基酸序列ysf的vh-cdr3；
[0487]
f)包含seq id no：61的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：62的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：43的氨基酸序列的vh-cdr3；
[0488]
g)包含seq id no：21的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：72的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含氨基酸序列ysy的vh-cdr3；
[0489]
h)包含seq id no：91的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：92的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：93的氨基酸序列的vh-cdr3；或者
[0490]
i)包含seq id no：101的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：102的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：103的氨基酸序列的vh-cdr3；或者
[0491]
j)包含seq id no：111的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：112的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：113的氨基酸序列的vh-cdr3；或者
[0492]
k)包含seq id no：281的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：282的氨基酸序
列的vh-cdr2；和包含seq id no：283的氨基酸序列的vh-cdr3；或者
[0493]
l)包含seq id no：31的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：192的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：193的氨基酸序列的vh-cdr3；或者
[0494]
m)包含seq id no：141的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：142的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：143的氨基酸序列的vh-cdr3；或者
[0495]
n)包含seq id no：151的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：152的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：153的氨基酸序列的vh-cdr3；或者
[0496]
o)包含seq id no：161的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：162的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：163的氨基酸序列的vh-cdr3；或者
[0497]
p)包含seq id no：171的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：172的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：173的氨基酸序列的vh-cdr3；或者
[0498]
q)包含seq id no：181的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：182的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：183的氨基酸序列的vh-cdr3；或者
[0499]
r)包含seq id no：201的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：202的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：153的氨基酸序列的vh-cdr3；或者
[0500]
s)包含seq id no：211的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：212的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：213的氨基酸序列的vh-cdr3；或者
[0501]
t)包含seq id no：31的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：222的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：223的氨基酸序列的vh-cdr3；或者
[0502]
u)包含seq id no：231的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：232的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：233的氨基酸序列的vh-cdr3；或者
[0503]
v)包含seq id no：31的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：242的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：243的氨基酸序列的vh-cdr3；或者
[0504]
w)包含seq id no：31的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：252的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：253的氨基酸序列的vh-cdr3；或者
[0505]
x)包含seq id no：261的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：262的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：263的氨基酸序列的vh-cdr3；或者
[0506]
y)包含seq id no：271的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：272的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：273的氨基酸序列的vh-cdr3；或者
[0507]
z)包含seq id no：301的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：302的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：303的氨基酸序列的vh-cdr3；或者
[0508]
aa)包含seq id no：311的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：312的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：313的氨基酸序列的vh-cdr3；或者
[0509]
bb)包含seq id no：321的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：322的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：323的氨基酸序列的vh-cdr3；或者
[0510]
cc)包含seq id no：151的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：332的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：333的氨基酸序列的vh-cdr3；或者
[0511]
dd)包含seq id no：341的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：342的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：343的氨基酸序列的vh-cdr3；或者
[0512]
ee)包含seq id no：351的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：352的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：353的氨基酸序列的vh-cdr3；或者
[0513]
ff)包含seq id no：361的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：362的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：363的氨基酸序列的vh-cdr3；或者
[0514]
gg)包含seq id no：371的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：372的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：373的氨基酸序列的vh-cdr3；或者
[0515]
hh)包含seq id no：351的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：382的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：383的氨基酸序列的vh-cdr3；或者
[0516]
ii)包含seq id no：351的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：382的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：393的氨基酸序列的vh-cdr3；或者
[0517]
jj)包含seq id no：411的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：412的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：413的氨基酸序列的vh-cdr3；或者
[0518]
kk)包含seq id no：421的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：422的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含氨基酸序列gny的vh-cdr3；或者
[0519]
ll)包含seq id no：431的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：432的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：433的氨基酸序列的vh-cdr3；或者
[0520]
mm)包含seq id no：151的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：442的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：443的氨基酸序列的vh-cdr3；或者
[0521]
nn)包含seq id no：461的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：462的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：463的氨基酸序列的vh-cdr3；或者
[0522]
oo)包含seq id no：141的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：472的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：473的氨基酸序列的vh-cdr3；或者
[0523]
pp)包含seq id no：481的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：482的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：483的氨基酸序列的vh-cdr3；或者
[0524]
qq)包含seq id no：141的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：492的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：493的氨基酸序列的vh-cdr3；或者
[0525]
rr)包含seq id no：151的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：502的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：503的氨基酸序列的vh-cdr3；或者
[0526]
ss)包含seq id no：311的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：512的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：513的氨基酸序列的vh-cdr3；或者
[0527]
tt)包含seq id no：521的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：522的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：463的氨基酸序列的vh-cdr3；或者
[0528]
uu)包含seq id no：371的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：532的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：533的氨基酸序列的vh-cdr3；或者
[0529]
vv)包含seq id no：341的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：542的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：543的氨基酸序列的vh-cdr3；或者
[0530]
ww)包含seq id no：551的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：552的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：553的氨基酸序列的vh-cdr3；或者
[0531]
xx)包含seq id no：551的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：552的氨基酸序
列的vh-cdr2；和包含seq id no：563的氨基酸序列的vh-cdr3；或者
[0532]
yy)包含seq id no：571的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：202的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：573的氨基酸序列的vh-cdr3；或者
[0533]
zz)包含seq id no：581的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：582的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：583的氨基酸序列的vh-cdr3；或者
[0534]
aaa)包含seq id no：11的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：612的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：13的氨基酸序列的vh-cdr3；或者
[0535]
bbb)包含seq id no：11的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：612的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：663的氨基酸序列的vh-cdr3；或者
[0536]
ccc)包含seq id no：11的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：612的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：673的氨基酸序列的vh-cdr3；或者
[0537]
ddd)包含seq id no：11的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：612的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：683的氨基酸序列的vh-cdr3。
[0538]
在一些实施方案中，抗体包含：
[0539]
a)包含seq id no：15的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：16的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：17的氨基酸序列的vl-cdr3；
[0540]
b)包含seq id no：25的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：26的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：27的氨基酸序列的vl-cdr3；
[0541]
c)包含seq id no：35的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：36的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：37的氨基酸序列的vl-cdr3；
[0542]
d)包含seq id no：45的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：46的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：47的氨基酸序列的vl-cdr3；
[0543]
e)包含seq id no：55的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：56的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：27的氨基酸序列的vl-cdr3；
[0544]
f)包含seq id no：65的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：46的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：67的氨基酸序列的vl-cdr3；
[0545]
g)包含seq id no：75的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：76的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：77的氨基酸序列的vl-cdr3；
[0546]
h)包含seq id no：85的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：36的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：87的氨基酸序列的vl-cdr3；
[0547]
i)包含seq id no：95的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：96的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：97的氨基酸序列的vl-cdr3；
[0548]
j)包含seq id no：105的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：106的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：107的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0549]
k)包含seq id no：115的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：106的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：117的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0550]
l)包含seq id no：285的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：286的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：287的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0551]
m)包含seq id no：195的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：96的氨基酸序列
的vl-cdr2；和包含seq id no：197的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0552]
n)包含seq id no：145的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：16的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：17的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0553]
o)包含seq id no：165的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：16的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：167的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0554]
p)包含seq id no：175的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：176的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：177的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0555]
q)包含seq id no：15的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：16的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：187的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0556]
r)包含seq id no：105的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：206的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：107的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0557]
s)包含seq id no：215的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：216的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：217的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0558]
t)包含seq id no：225的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：96的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：227的氨基酸序列的vl-cdr3
[0559]
u)包含seq id no：235的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：236的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：237的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0560]
v)包含seq id no：225的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：96的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：247的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0561]
w)包含seq id no：255的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：256的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：257的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0562]
x)包含seq id no：265的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：176的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：267的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0563]
y)包含seq id no：275的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：276的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：277的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0564]
z)包含seq id no：15的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：16的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：307的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0565]
aa)包含seq id no：315的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：46的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：67的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0566]
bb)包含seq id no：325的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：326的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：327的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0567]
cc)包含seq id no：335的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：336的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：107的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0568]
dd)包含seq id no：345的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：346的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：347的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0569]
ee)包含seq id no：355的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：356的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：357的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0570]
ff)包含seq id no：365的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：16的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：367的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0571]
gg)包含seq id no：345的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：376的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：347的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0572]
hh)包含seq id no：385的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：386的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：387的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0573]
ii)包含seq id no：395的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：356的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：357的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0574]
jj)包含seq id no：405的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：356的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：357的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0575]
kk)包含seq id no：425的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：426的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：427的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0576]
ll)包含seq id no：435的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：436的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：437的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0577]
mm)包含seq id no：465的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：16的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：467的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0578]
nn)包含seq id no：475的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：476的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：477的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0579]
oo)包含seq id no：165的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：16的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：487的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0580]
pp)包含seq id no：495的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：496的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：497的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0581]
qq)包含seq id no：105的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：336的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：107的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0582]
rr)包含seq id no：515的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：516的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：517的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0583]
ss)包含seq id no：525的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：16的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：467的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0584]
tt)包含seq id no：345的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：376的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：347的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0585]
uu)包含seq id no：555的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：16的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：557的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0586]
w)包含seq id no：565的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：16的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：557的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0587]
ww)包含seq id no：585的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：586的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：587的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0588]
xx)包含seq id no：615的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：16的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：17的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0589]
yy)包含seq id no：625的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：16的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：17的氨基酸序列的vl-cdr3。
[0590]
在一些实施方案中，抗体包含：
[0591]
a)包含与seq id no：11具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr1；包含与seq id no：12具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr2；包含与seq id no：13具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：15的氨基酸序列的vl-cdr1；包含具有seq id no：16的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：17具有序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0592]
b)包含与seq id no：21具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr1；包含与seq id no：22具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr2；包含与氨基酸序列ysy具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：25的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：26的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：27具有序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0593]
c)包含与seq id no：31具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr1；包含与seq id no：32具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr2；包含与seq id no：33具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：35的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：36的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：37的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0594]
d)包含与seq id no：41具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr1；包含与seq id no：42具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr2；包含与seq id no：43具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：45的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：46的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：47的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0595]
e)包含与seq id no：21具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr1；包含与seq id no：52具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr2；包含与氨基酸序列ysf具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：55的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：56的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：27的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0596]
f)包含与seq id no：61具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr1；包含与seq id no：62具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr2；包含与seq id no：43具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：65的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：46的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：67的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0597]
g)包含与seq id no：21具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr1；包含与seq id no：72具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr2；包含与氨基酸序列ysy具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：75的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：76的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：77的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0598]
h)包含与seq id no：31具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr1；包含与seq id no：32具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸
序列的vh-cdr2；包含与seq id no：33具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：85的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：36的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：87的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0599]
i)包含与seq id no：91具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr1；包含与seq id no：92具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含与seq id no：93具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：95的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：96的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：97的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0600]
i)包含与seq id no：101具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr1；包含与seq id no：102具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr2；包含与seq id no：103具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr3；或包含seq id no：105的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：106的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：107的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0601]
k)包含与seq id no：111具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr1；包含与seq id no：112具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr2；包含与seq id no：113具有80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：115的氨基酸序列的vl-cdr1；包含seq id no：106的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含seq id no：117的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0602]
l)包含与seq id no：281具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr1；包含与seq id no：282具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr2；包含与seq id no：283具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：285的氨基酸序列的vl-cdr1；包含具有seq id no：286的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：287具有序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0603]
m)包含与seq id no：31具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr1；包含与seq id no：192具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr2；包含与seq id no：193具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：195的氨基酸序列的vl-cdr1；包含具有seq id no：96的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：197具有序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0604]
n)包含与seq id no：141具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr1；包含与seq id no：142具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr2；包含与seq id no：143具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：145的氨基酸序列的vl-cdr1；包含具有seq id no：16的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：17具有序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0605]
o)包含与seq id no：151具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr1；包含与seq id no：152具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr2；包含与seq id no：153具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性
的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：105的氨基酸序列的vl-cdr1；包含具有seq id no：106的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：107具有序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0606]
p)包含与seq id no：161具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr1；包含与seq id no：162具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr2；包含与seq id no：163具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：165的氨基酸序列的vl-cdr1；包含具有seq id no：16的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：167具有序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0607]
q)包含与seq id no：171具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr1；包含与seq id no：172具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr2；包含与seq id no：173具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：175的氨基酸序列的vl-cdr1；包含具有seq id no：176的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：177具有序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0608]
r)包含与seq id no：181具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr1；包含与seq id no：182具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr2；包含与seq id no：183具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：15的氨基酸序列的vl-cdr1；包含具有seq id no：16的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：187具有序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0609]
s)包含与seq id no：201具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr1；包含与seq id no：202具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr2；包含与seq id no：153具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：105的氨基酸序列的vl-cdr1；包含具有seq id no：206的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：107具有序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0610]
t)包含与seq id no：211具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr1；包含与seq id no：212具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr2；包含与seq id no：213具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：215的氨基酸序列的vl-cdr1；包含具有seq id no：216的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：217具有序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0611]
u)包含与seq id no：31具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr1；包含与seq id no：222具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr2；包含与seq id no：223具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：225的氨基酸序列的vl-cdr1；包含具有seq id no：96的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：227具有序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0612]
v)包含与seq id no：231具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr1；包含与seq id no：232具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr2；包含与seq id no：233具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：235的氨基酸序列的vl-cdr1；包含具有seq id no：236的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：237具有序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0613]
w)包含与seq id no：31具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr1；包含与seq id no：242具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr2；包含与seq id no：243具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：225的氨基酸序列的vl-cdr1；包含具有seq id no：96的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：247具有序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0614]
x)包含与seq id no：31具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr1；包含与seq id no：252具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr2；包含与seq id no：253具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：255的氨基酸序列的vl-cdr1；包含具有seq id no：256的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：257具有序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0615]
y)包含与seq id no：261具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr1；包含与seq id no：262具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr2；包含与seq id no：263具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：265的氨基酸序列的vl-cdr1；包含具有seq id no：176的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：267具有序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0616]
z)包含与seq id no：271具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr1；包含与seq id no：272具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr2；包含与seq id no：273具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：275的氨基酸序列的vl-cdr1；包含具有seq id no：276的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：277具有序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0617]
aa)包含与seq id no：301具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr1；包含与seq id no：302具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr2；包含与seq id no：303具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：15的氨基酸序列的vl-cdr1；包含具有seq id no：16的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：307具有序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0618]
bb)包含与seq id no：311具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr1；包含与seq id no：312具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr2；包含与seq id no：313具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性
的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：315的氨基酸序列的vl-cdr1；包含具有seq id no：46的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：67具有序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0619]
cc)包含与seq id no：321具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr1；包含与seq id no：322具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr2；包含与seq id no：323具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：325的氨基酸序列的vl-cdr1；包含具有seq id no：326的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：327具有序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0620]
dd)包含与seq id no：151具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr1；包含与seq id no：332具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr2；包含与seq id no：333具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：335的氨基酸序列的vl-cdr1；包含具有seq id no：336的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：107具有序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0621]
ee)包含与seq id no：341具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr1；包含与seq id no：342具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr2；包含与seq id no：343具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：345的氨基酸序列的vl-cdr1；包含具有seq id no：346的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：347具有序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0622]
ff)包含与seq id no：351具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr1；包含与seq id no：352具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr2；包含与seq id no：353具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：355的氨基酸序列的vl-cdr1；包含具有seq id no：356的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：357具有序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0623]
gg)包含与seq id no：361具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr1；包含与seq id no：362具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr2；包含与seq id no：363具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：365的氨基酸序列的vl-cdr1；包含具有seq id no：16的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：367具有序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0624]
hh)包含与seq id no：371具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr1；包含与seq id no：372具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr2；包含与seq id no：373具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：345的氨基酸序列的vl-cdr1；包含具有seq id no：376的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：347具有序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0625]
ii)包含与seq id no：351具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr1；包含与seq id no：382具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr2；包含与seq id no：383具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：385的氨基酸序列的vl-cdr1；包含具有seq id no：386的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：387具有序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0626]
jj)包含与seq id no：351具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr1；包含与seq id no：382具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr2；包含与seq id no：393具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：395的氨基酸序列的vl-cdr1；包含具有seq id no：356的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：357具有序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0627]
kk)包含与seq id no：351具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr1；包含与seq id no：382具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr2；包含与seq id no：393具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：405的氨基酸序列的vl-cdr1；包含具有seq id no：356的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：357具有序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0628]
ll)包含与seq id no：411具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr1；包含与seq id no：412具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr2；包含与seq id no：413具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：105的氨基酸序列的vl-cdr1；包含具有seq id no：106的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：107具有序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0629]
mm)包含与seq id no：421具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr1；包含与seq id no：422具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr2；包含与氨基酸序列gny具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：425的氨基酸序列的vl-cdr1；包含具有seq id no：426的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：427具有序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0630]
nn)包含与seq id no：431具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr1；包含与seq id no：432具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr2；包含与seq id no：433具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：435的氨基酸序列的vl-cdr1；包含具有seq id no：436的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：437具有序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0631]
oo)包含与seq id no：151具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr1；包含与seq id no：442具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr2；包含与seq id no：443具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性
的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：105的氨基酸序列的vl-cdr1；包含具有seq id no：106的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：107具有序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0632]
pp)包含与seq id no：461具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr1；包含与seq id no：462具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr2；包含与seq id no：463具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：465的氨基酸序列的vl-cdr1；包含具有seq id no：16的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：467具有序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0633]
qq)包含与seq id no：141具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr1；包含与seq id no：472具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr2；包含与seq id no：473具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：475的氨基酸序列的vl-cdr1；包含具有seq id no：476的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：477具有序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0634]
rr)包含与seq id no：481具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr1；包含与seq id no：482具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr2；包含与seq id no：483具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：165的氨基酸序列的vl-cdr1；包含具有seq id no：16的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：487具有序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0635]
ss)包含与seq id no：141具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr1；包含与seq id no：492具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr2；包含与seq id no：493具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：495的氨基酸序列的vl-cdr1；包含具有seq id no：496的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：497具有序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0636]
tt)包含与seq id no：151具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr1；包含与seq id no：502具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr2；包含与seq id no：503具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：105的氨基酸序列的vl-cdr1；包含具有seq id no：336的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：107具有序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0637]
uu)包含与seq id no：311具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr1；包含与seq id no：512具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr2；包含与seq id no：513具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：515的氨基酸序列的vl-cdr1；包含具有seq id no：516的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：517具有序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0638]
vv)包含与seq id no：521具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr1；包含与seq id no：522具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr2；包含与seq id no：463具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：525的氨基酸序列的vl-cdr1；包含具有seq id no：16的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：467具有序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0639]
ww)包含与seq id no：371具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr1；包含与seq id no：532具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr2；包含与seq id no：533具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：345的氨基酸序列的vl-cdr1；包含具有seq id no：376的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：537具有序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0640]
xx)包含与seq id no：341具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr1；包含与seq id no：542具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr2；包含与seq id no：543具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：345的氨基酸序列的vl-cdr1；包含具有seq id no：376的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：347具有序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0641]
yy)包含与seq id no：551具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr1；包含与seq id no：552具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr2；包含与seq id no：553具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：555的氨基酸序列的vl-cdr1；包含具有seq id no：16的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：557具有序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0642]
zz)包含与seq id no：551具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr1；包含与seq id no：552具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr2；包含与seq id no：563具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：565的氨基酸序列的vl-cdr1；包含具有seq id no：16的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：557具有序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0643]
aaa)包含与seq id no：571具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr1；包含与seq id no：202具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr2；包含与seq id no：573具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：105的氨基酸序列的vl-cdr1；包含具有seq id no：106的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：107具有序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0644]
bbb)包含与seq id no：581具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr1；包含与seq id no：582具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr2；包含与seq id no：583具有至少80％、90％、95％或100％序列同一
性的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：585的氨基酸序列的vl-cdr1；包含具有seq id no：586的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：587具有序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0645]
ccc)包含与seq id no：11具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr1；包含与seq id no：612具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr2；包含与seq id no：13具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：615的氨基酸序列的vl-cdr1；包含具有seq id no：16的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：17具有序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0646]
ddd)包含与seq id no：11具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr1；包含与seq id no：612具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr2；包含与seq id no：13具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：625的氨基酸序列的vl-cdr1；包含具有seq id no：16的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：17具有序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0647]
eee)包含与seq id no：11具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr1；包含与seq id no：612具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr2；包含与seq id no：663具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：615的氨基酸序列的vl-cdr1；包含具有seq id no：16的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：17具有序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0648]
fff)包含与seq id no：11具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr1；包含与seq id no：612具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr2；包含与seq id no：673具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：615的氨基酸序列的vl-cdr1；包含具有seq id no：16的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：17具有序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0649]
ggg)包含与seq id no：11具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr1；包含与seq id no：612具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr2；包含与seq id no：683具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：615的氨基酸序列的vl-cdr1；包含具有seq id no：16的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：17具有序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0650]
hhh)包含与seq id no：11具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr1；包含与seq id no：612具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr2；包含与seq id no：683具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vh-cdr3；包含seq id no：625的氨基酸序列的vl-cdr1；包含具有seq id no：16的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：17具有序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3。
[0651]
在一些实施方案中，抗体包含：
[0652]
a)包含seq id no：11的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：12的氨基酸序列的vh-cdr2；包含seq id no：13的氨基酸序列的vh-cdr3；包含与seq id no：15具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr1；包含与seq id no：16具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：17具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0653]
b)包含seq id no：21的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：22的氨基酸序列的vh-cdr2；包含氨基酸序列ysy的vh-cdr3；包含与seq id no：25具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr1；包含与seq id no：26具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：27具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0654]
c)包含seq id no：31的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：32的氨基酸序列的vh-cdr2；包含seq id no：33的氨基酸序列的vh-cdr3；包含与seq id no：35具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr1；包含与seq id no：36具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：37具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0655]
d)包含seq id no：41的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：42的氨基酸序列的vh-cdr2；包含seq id no：43的氨基酸序列的vh-cdr3；包含与seq id no：45具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr1；包含与seq id no：46具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：47具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0656]
e)包含seq id no：21的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：52的氨基酸序列的vh-cdr2；包含氨基酸序列ysf的vh-cdr3；包含与seq id no：55具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr1；包含与seq id no：56具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：27具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0657]
f)包含seq id no：61的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：62的氨基酸序列的vh-cdr2；包含seq id no：43的氨基酸序列的vh-cdr3；包含与seq id no：65具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr1；包含与seq id no：46具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：67具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0658]
g)包含seq id no：21的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：72的氨基酸序列的vh-cdr2；包含氨基酸序列ysy的vh-cdr3；包含与seq id no：75具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr1；包含与seq id no：76具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：77具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0659]
h)包含seq id no：31的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：32的氨基酸序列的vh-cdr2；包含seq id no：33的氨基酸序列的vh-cdr3；包含与seq id no：85具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr1；包含与seq id no：36具有至
少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：87具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0660]
i)包含seq id no：91的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：92的氨基酸序列的vh-cdr2；和包含seq id no：93的氨基酸序列的vh-cdr3；包含与seq id no：95具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr1；包含与seq id no：96具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：97具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0661]
j)包含seq id no：101的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：102的氨基酸序列的vh-cdr2；包含seq id no：103的氨基酸序列的vh-cdr3；或包含与seq id no：105具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr1；包含与seq id no：106具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：107具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者包含seq id no：111的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：112的氨基酸序列的vh-cdr2；包含具有seq id no：113的氨基酸序列的vh-cdr3；包含与seq id no：115具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr1；包含与seq id no：106具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：117具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0662]
l)包含seq id no：281的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：282的氨基酸序列的vh-cdr2；包含seq id no：283的氨基酸序列的vh-cdr3；包含与seq id no：285具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr1；包含与seq id no：286具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：287具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0663]
m)包含seq id no：31的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：192的氨基酸序列的vh-cdr2；包含seq id no：193的氨基酸序列的vh-cdr3；包含与seq id no：195具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr1；包含与seq id no：96具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：197具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0664]
n)包含seq id no：141的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：142的氨基酸序列的vh-cdr2；包含seq id no：143的氨基酸序列的vh-cdr3；包含与seq id no：145具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr1；包含与seq id no：16具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：17具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0665]
o)包含seq id no：151的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：152的氨基酸序列的vh-cdr2；包含seq id no：153的氨基酸序列的vh-cdr3；包含与seq id no：105具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr1；包含与seq id no：106具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：107具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0666]
p)包含seq id no：161的氨基酸序列vh-cdr1；包含seq id no：162的氨基酸序列的vh-cdr2；包含seq id no：163的氨基酸序列的vh-cdr3；包含与seq id no：165具有至少
80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr1；包含与seq id no：16具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：167具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0667]
q)包含seq id no：171的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：172的氨基酸序列vh-cdr2；包含seq id no：173的氨基酸序列的vh-cdr3；包含与seq id no：175具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr1；包含与seq id no：176具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：177具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0668]
r)包含seq id no：181的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：182的氨基酸序列的vh-cdr2；包含seq id no：183的氨基酸序列的vh-cdr3；包含与seq id no：15具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr1；包含与seq id no：16具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：187具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0669]
s)包含seq id no：201的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：202的氨基酸序列的vh-cdr2；包含seq id no：153的氨基酸序列的vh-cdr3；包含与seq id no：105具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr1；包含与seq id no：206具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：107具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0670]
t)包含seq id no：211的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：212的氨基酸序列的vh-cdr2；包含seq id no：213的氨基酸序列的vh-cdr3；包含与seq id no：215具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr1；包含与seq id no：216具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：217具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0671]
u)包含seq id no：31的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：222的氨基酸序列的vh-cdr2；包含seq id no：223的氨基酸序列的vh-cdr3；包含与seq id no：225具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr1；包含与seq id no：96具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：227具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0672]
v)包含seq id no：231的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：232的氨基酸序列的vh-cdr2；包含seq id no：233的氨基酸序列的vh-cdr3；包含与seq id no：235具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr1；包含与seq id no：236具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：237具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0673]
w)包含seq id no：31的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：242的氨基酸序列的vh-cdr2；包含seq id no：243的氨基酸序列的vh-cdr3；包含与seq id no：225具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr1；包含与seq id no：96具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：247具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0674]
x)包含seq id no：31的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：252的氨基酸序列
的vh-cdr2；包含seq id no：253的氨基酸序列的vh-cdr3；包含与seq id no：255具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr1；包含与seq id no：256具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：257具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0675]
y)包含seq id no：261的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：262的氨基酸序列的vh-cdr2；包含seq id no：263的氨基酸序列的vh-cdr3；包含与seq id no：265具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr1；包含与seq id no：176具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：267具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0676]
z)包含seq id no：271的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：272的氨基酸序列的vh-cdr2；包含seq id no：273的氨基酸序列的vh-cdr3；包含与seq id no：275具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr1；包含与seq id no：276具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：277具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0677]
aa)包含seq id no：301的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：302的氨基酸序列的vh-cdr2；包含seq id no：303的氨基酸序列的vh-cdr3；包含与seq id no：15具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr1；包含与seq id no：16具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：307具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0678]
bb)包含seq id no：311的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：312的氨基酸序列的vh-cdr2；包含seq id no：313的氨基酸序列的vh-cdr3；包含与seq id no：315具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr1；包含与seq id no：46具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：67具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0679]
cc)包含seq id no：321的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：322的氨基酸序列的vh-cdr2；包含seq id no：323的氨基酸序列的vh-cdr3；包含与seq id no：325具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr1；包含与seq id no：326具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：327具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0680]
dd)包含seq id no：151的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：332的氨基酸序列的vh-cdr2；包含seq id no：333的氨基酸序列的vh-cdr3；包含与seq id no：335具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr1；包含与seq id no：336具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：107具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0681]
ee)包含seq id no：341的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：342的氨基酸序列的vh-cdr2；包含seq id no：343的氨基酸序列的vh-cdr3；包含与seq id no：345具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr1；包含与seq id no：346具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：347具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0682]
ff)包含seq id no：351的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：352的氨基酸序列的vh-cdr2；包含seq id no：353的氨基酸序列的vh-cdr3；包含与seq id no：355具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr1；包含与seq id no：356具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：357具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0683]
gg)包含seq id no：361的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：362的氨基酸序列的vh-cdr2；包含seq id no：363的氨基酸序列的vh-cdr3；包含与seq id no：365具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr1；包含与seq id no：16具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：367具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0684]
hh)包含seq id no：371的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：372的氨基酸序列vh-cdr2；包含seq id no：373的氨基酸序列的vh-cdr3；包含与seq id no：345具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr1；包含与seq id no：376具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：347具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0685]
ii)包含seq id no：351的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：382的氨基酸序列的vh-cdr2；包含seq id no：383的氨基酸序列的vh-cdr3；包含与seq id no：385具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr1；包含与seq id no：386具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：387具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0686]
jj)包含seq id no：351的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：382的氨基酸序列的vh-cdr2；包含seq id no：393的氨基酸序列的vh-cdr3；包含与seq id no：395具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr1；包含与seq id no：356具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：357具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0687]
kk)包含seq id no：351的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：382的氨基酸序列的vh-cdr2；包含seq id no：393的氨基酸序列的vh-cdr3；包含与seq id no：405具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr1；包含与seq id no：356具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：357具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0688]
ll)包含seq id no：411的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：412的氨基酸序列的vh-cdr2；包含seq id no：413的氨基酸序列的vh-cdr3；包含与seq id no：105具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr1；包含与seq id no：106具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：107具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0689]
mm)包含seq id no：421的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：422的氨基酸序列的vh-cdr2；包含氨基酸序列gny的vh-cdr3；包含与seq id no：425具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr1；包含与seq id no：426具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：427具有至少
80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0690]
nn)包含seq id no：431的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：432的氨基酸序列的vh-cdr2；包含seq id no：433的氨基酸序列的vh-cdr3；包含与seq id no：435具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr1；包含与seq id no：436具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：437具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0691]
oo)包含seq id no：151的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：442的氨基酸序列的vh-cdr2；包含seq id no：443的氨基酸序列的vh-cdr3；包含与seq id no：105具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr1；包含与seq id no：106具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：107具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0692]
pp)包含seq id no：461的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：462的氨基酸序列的vh-cdr2；包含seq id no：463的氨基酸序列的vh-cdr3；包含与seq id no：465具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr1；包含与seq id no：16具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：467具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0693]
qq)包含seq id no：141的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：472的氨基酸序列的vh-cdr2；包含seq id no：473的氨基酸序列的vh-cdr3；包含与seq id no：475具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr1；包含与seq id no：476具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：477具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0694]
rr)包含seq id no：481的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：482的氨基酸序列的vh-cdr2；包含seq id no：483的氨基酸序列的vh-cdr3；包含与seq id no：165具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr1；包含与seq id no：16具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：487具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0695]
ss)包含seq id no：141的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：492的氨基酸序列的vh-cdr2；包含seq id no：493的氨基酸序列的vh-cdr3；包含与seq id no：495具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr1；包含与seq id no：496具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：497具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0696]
tt)包含seq id no：151的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：502的氨基酸序列的vh-cdr2；包含seq id no：503的氨基酸序列的vh-cdr3；包含与seq id no：105具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr1；包含与seq id no：336具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：107具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0697]
uu)包含seq id no：311的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：512的氨基酸序列的vh-cdr2；包含seq id no：513的氨基酸序列的vh-cdr3；包含与seq id no：515具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr1；包含与seq id no：516具
有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：517具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0698]
vv)包含seq id no：521的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：522的氨基酸序列的vh-cdr2；包含seq id no：463的氨基酸序列的vh-cdr3；包含与seq id no：525具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr1；包含与seq id no：16具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：467具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0699]
ww)包含seq id no：371的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：532的氨基酸序列的vh-cdr2；包含seq id no：533的氨基酸序列的vh-cdr3；包含与seq id no：345具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr1；包含与seq id no：376具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：537具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0700]
xx)包含seq id no：341的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：542的氨基酸序列的vh-cdr2；包含seq id no：543的氨基酸序列的vh-cdr3；包含与seq id no：345具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr1；包含与seq id no：376具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：347具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0701]
yy)包含seq id no：551的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：552的氨基酸序列的vh-cdr2；包含seq id no：553的氨基酸序列的vh-cdr3；包含与seq id no：555具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr1；包含与seq id no：16具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：557具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0702]
zz)包含seq id no：551的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：552的氨基酸序列的vh-cdr2；包含seq id no：563的氨基酸序列的vh-cdr3；包含与seq id no：565具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr1；包含与seq id no：16具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：557具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0703]
aaa)包含seq id no：571的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：202的氨基酸序列的vh-cdr2；包含seq id no：573的氨基酸序列的vh-cdr3；包含与seq id no：105具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr1；包含与seq id no：106具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：107具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0704]
bbb)包含seq id no：581的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：582的氨基酸序列的vh-cdr2；包含seq id no：583的氨基酸序列的vh-cdr3；包含与seq id no：585具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr1；包含与seq id no：586具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：587具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0705]
ccc)包含seq id no：11的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：612的氨基酸序列的vh-cdr2；包含seq id no：13的氨基酸序列的vh-cdr3；包含与seq id no：615具有至少
80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr1；包含与seq id no：16具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：17具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0706]
ddd)包含seq id no：11的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：612的氨基酸序列的vh-cdr2；包含seq id no：13的氨基酸序列的vh-cdr3；包含与seq id no：625具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr1；包含与seq id no：16具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：17具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0707]
eee)包含seq id no：11的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：612的氨基酸序列的vh-cdr2；包含seq id no：663的氨基酸序列的vh-cdr3；包含与seq id no：615具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr1；包含与seq id no：16具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：17具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0708]
fff)包含seq id no：11的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：612的氨基酸序列的vh-cdr2；包含seq id no：673的氨基酸序列的vh-cdr3；包含与seq id no：615具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr1；包含与seq id no：16具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：17具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0709]
ggg)包含seq id no：11的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：612的氨基酸序列的vh-cdr2；包含seq id no：683的氨基酸序列的vh-cdr3；包含与seq id no：615具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr1；包含与seq id no：16具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：17具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3；或者
[0710]
hhh)包含seq id no：11的氨基酸序列的vh-cdr1；包含seq id no：612的氨基酸序列的vh-cdr2；包含seq id no：683的氨基酸序列的vh-cdr3；包含与seq id no：625具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr1；包含与seq id no：16具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr2；和包含与seq id no：17具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性的氨基酸序列的vl-cdr3。
[0711]
在一些实施方案中，α-突触核蛋白抗体包含选自以下的至少一个、两个、三个、四个、五个或六个cdr：(a)包含seq id no：11的氨基酸序列的vh-cdr1；(b)包含seq id no：12的氨基酸序列的vh-cdr2；(c)包含seq id no：13的氨基酸序列的vh-cdr3；(d)包含seq id no：15的氨基酸序列的vl-cdr1；(e)包含seq id no：16的氨基酸序列的vl-cdr2；和(f)包含seq id no：17的氨基酸序列的vl-cdr3。
[0712]
在一些实施方案中，α-突触核蛋白抗体包含选白以下的至少一个、两个、三个、四个、五个或六个cdr：(a)包含seq id no：21的氨基酸序列的vh-cdr1；(b)包含seq id no：22的氨基酸序列的vh-cdr2；(c)包含氨基酸序列ysy的vh-cdr3；(d)包含seq id no：25的氨基酸序列的vl-cdr1；(e)包含seq id no：26的氨基酸序列的vl-cdr2；和(f)包含seq id no：27的氨基酸序列的vl-cdr3。
[0713]
在一些实施方案中，α-突触核蛋白抗体包含选自以下的至少一个、两个、三个、四
个、五个或六个cdr：(a)包含seq id no：31的氨基酸序列的vh-cdr1；(b)包含seq id no：32的氨基酸序列的vh-cdr2；(c)包含seq id no：33的氨基酸序列的vh-cdr3；(d)包含seq id no：35的氨基酸序列的vl-cdr1；(e)包含seq id no：36的氨基酸序列的vl-cdr2；和(f)包含seq id no：37的氨基酸序列的vl-cdr3。
[0714]
在一些实施方案中，α-突触核蛋白抗体包含选自以下的至少一个、两个、三个、四个、五个或六个cdr：(a)包含seq id no：41的氨基酸序列的vh-cdr1；(b)包含seq id no：42的氨基酸序列的vh-cdr2；(c)包含seq id no：43的氨基酸序列的vh-cdr3；(d)包含seq id no：45的氨基酸序列的vl-cdr1；(e)包含seq id no：46的氨基酸序列的vl-cdr2；和(f)包含seq id no：47的氨基酸序列的vl-cdr3。
[0715]
在一些实施方案中，α-突触核蛋白抗体包含选自以下的至少一个、两个、三个、四个、五个或六个cdr：(a)包含seq id no：21的氨基酸序列的vh-cdr1；(b)包含seq id no：52的氨基酸序列的vh-cdr2；(c)包含氨基酸序列ysf的vh-cdr3；(d)包含seq id no：55的氨基酸序列的vl-cdr1；(e)包含seq id no：56的氨基酸序列的vl-cdr2；和(f)包含seq id no：27的氨基酸序列的vl-cdr3。
[0716]
在一些实施方案中，α-突触核蛋白抗体包含选自以下的至少一个、两个、三个、四个、五个或六个cdr：(a)包含seq id no：61的氨基酸序列的vh-cdr1；(b)包含seq id no：62的氨基酸序列的vh-cdr2；(c)包含seq id no：43的氨基酸序列的vh-cdr3；(d)包含seq id no：65的氨基酸序列的vl-cdr1；(e)包含seq id no：46的氨基酸序列的vl-cdr2；和(f)包含seq id no：67的氨基酸序列的vl-cdr3。
[0717]
在一些实施方案中，α-突触核蛋白抗体包含选自以下的至少一个、两个、三个、四个、五个或六个cdr：(a)包含seq id no：21的氨基酸序列的vh-cdr1；(b)包含seq id no：72的氨基酸序列的vh-cdr2；(c)包含氨基酸序列ysy的vh-cdr3；(d)包含seq id no：75的氨基酸序列的vl-cdr1；(e)包含seq id no：76的氨基酸序列的vl-cdr2；和(f)包含seq id no：77的氨基酸序列的vl-cdr3。
[0718]
在一些实施方案中，α-突触核蛋白抗体包含选自以下的至少一个、两个、三个、四个、五个或六个cdr：(a)包含seq id no：31的氨基酸序列的vh-cdr1；(b)包含seq id no：32的氨基酸序列的vh-cdr2；(c)包含seq id no：33的氨基酸序列的vh-cdr3；(d)包含seq id no：85的氨基酸序列的vl-cdr1；(e)包含seq id no：36的氨基酸序列的vl-cdr2；和(f)包含seq id no：87的氨基酸序列的vl-cdr3。
[0719]
在一些实施方案中，α-突触核蛋白抗体包含选自以下的至少一个、两个、三个、四个、五个或六个cdr：(a)包含seq id no：91的氨基酸序列的vh-cdr1；(b)包含seq id no：92的氨基酸序列的vh-cdr2；(c)包含seq id no：93的氨基酸序列的vh-cdr3；(d)包含seq id no：95的氨基酸序列的vl-cdr1；(e)包含seq id no：96的氨基酸序列的vl-cdr2；和(f)包含seq id no：97的氨基酸序列的vl-cdr3。
[0720]
在一些实施方案中，α-突触核蛋白抗体包含选自以下的至少一个、两个、三个、四个、五个或六个cdr：(a)包含seq id no：101的氨基酸序列的vh-cdr1；(b)包含seq id no：102的氨基酸序列的vh-cdr2；(c)包含seq id no：103的氨基酸序列的vh-cdr3；(d)包含seq id no：105的氨基酸序列的vl-cdr1；(e)包含seq id no：106的氨基酸序列的vl-cdr2；和(f)包含seq id no：107的氨基酸序列的vl-cdr3。
[0721]
在一些实施方案中，α-突触核蛋白抗体包含选自以下的至少一个、两个、三个、四个、五个或六个cdr：(a)包含seq id no：111的氨基酸序列的vh-cdr1；(b)包含seq id no：112的氨基酸序列的vh-cdr2；(c)包含seq id no：113的氨基酸序列的vh-cdr3；(d)包含seq id no：115的氨基酸序列的vl-cdr1；(e)包含seq id no：106的氨基酸序列的vl-cdr2；和(f)包含seq id no：117的氨基酸序列的vl-cdr3。
[0722]
在一些实施方案中，α-突触核蛋白抗体包含选自以下的至少一个、两个、三个、四个、五个或六个cdr：(a)包含seq id no：281的氨基酸序列的vh-cdr1；(b)包含seq id no：282的氨基酸序列的vh-cdr2；(c)包含seq id no：283的氨基酸序列的vh-cdr3；(d)包含seq id no：285的氨基酸序列的vl-cdr1；(e)包含seq id no：286的氨基酸序列的vl-cdr2；和(f)包含seq id no：287的氨基酸序列的vl-cdr3。
[0723]
在一些实施方案中，α-突触核蛋白抗体包含选自以下的至少一个、两个、三个、四个、五个或六个cdr：(a)包含seq id no：31的氨基酸序列的vh-cdr1；(b)包含seq id no：192的氨基酸序列的vh-cdr2；(c)包含seq id no：193的氨基酸序列的vh-cdr3；(d)包含seq id no：195的氨基酸序列的vl-cdr1；(e)包含seq id no：96的氨基酸序列的vl-cdr2；和(f)包含seq id no：197的氨基酸序列的vl-cdr3。
[0724]
在一些实施方案中，α-突触核蛋白抗体包含选白以下的至少一个、两个、三个、四个、五个或六个cdr：(a)包含seq id no：141的氨基酸序列的vh-cdr1；(b)包含seq id no：142的氨基酸序列的vh-cdr2；(c)包含seq id no：143的氨基酸序列的vh-cdr3；(d)包含seq id no：145的氨基酸序列的vl-cdr1；(e)包含seq id no：16的氨基酸序列的vl-cdr2；和(f)包含seq id no：17的氨基酸序列的vl-cdr3。
[0725]
在一些实施方案中，α-突触核蛋白抗体包含选自以下的至少一个、两个、三个、四个、五个或六个cdr：(a)包含seq id no：151的氨基酸序列的vh-cdr1；(b)包含seq id no：152的氨基酸序列的vh-cdr2；(c)包含seq id no：153的氨基酸序列的vh-cdr3；(d)包含seq id no：105的氨基酸序列的vl-cdr1；(e)包含seq id no：106的氨基酸序列的vl-cdr2；和(f)包含seq id no：107的氨基酸序列的vl-cdr3。
[0726]
在一些实施方案中，α-突触核蛋白抗体包含选白以下的至少一个、两个、三个cdr：(a)包含seq id no：161的氨基酸序列的vh-cdr1；(b)包含seq id no：162的氨基酸序列的vh-cdr2；(c)包含seq id no：163的氨基酸序列的vh-cdr3。
[0727]
在一些实施方案中，α-突触核蛋白抗体包含选自以下的至少四个、五个或六个cdr：(a)包含seq id no：161的氨基酸序列的vh-cdr1；(b)包含seq id no：162的氨基酸序列的vh-cdr2；(c)包含seq id no：163的氨基酸序列的vh-cdr3；(d)包含seq id no：165的氨基酸序列的vl-cdr1；(e)包含seq id no：16的氨基酸序列的vl-cdr2；和(f)包含seq id no：167的氨基酸序列的vl-cdr3。
[0728]
在一些实施方案中，α-突触核蛋白抗体包含选白以下的至少一个、两个、三个、四个、五个或六个cdr：(a)包含seq id no：171的氨基酸序列的vh-cdr1；(b)包含seq id no：172的氨基酸序列的vh-cdr2；(c)包含seq id no：173的氨基酸序列的vh-cdr3；(d)包含seq id no：175的氨基酸序列的vl-cdr1；(e)包含seq id no：176的氨基酸序列的vl-cdr2；和(f)包含seq id no：177的氨基酸序列的vl-cdr3。
[0729]
在一些实施方案中，α-突触核蛋白抗体包含选自以下的至少一个、两个、三个、四
个、五个或六个cdr：(a)包含seq id no：181的氨基酸序列的vh-cdr1；(b)包含seq id no：182的氨基酸序列的vh-cdr2；(c)包含seq id no：183的氨基酸序列的vh-cdr3；(d)包含seq id no：15的氨基酸序列的vl-cdr1；(e)包含seq id no：16的氨基酸序列的vl-cdr2；和(f)包含seq id no：187的氨基酸序列的vl-cdr3。
[0730]
在一些实施方案中，α-突触核蛋白抗体包含选自以下的至少一个、两个、三个、四个、五个或六个cdr：(a)包含seq id no：201的氨基酸序列的vh-cdr1；(b)包含seq id no：202的氨基酸序列的vh-cdr2；(c)包含seq id no：153的氨基酸序列的vh-cdr3；(d)包含seq id no：105的氨基酸序列的vl-cdr1；(e)包含seq id no：206的氨基酸序列的vl-cdr2；和(f)包含seq id no：107的氨基酸序列的vl-cdr3。
[0731]
在一些实施方案中，α-突触核蛋白抗体包含选自以下的至少一个、两个、三个、四个、五个或六个cdr：(a)包含seq id no：211的氨基酸序列的vh-cdr1；(b)包含seq id no：212的氨基酸序列的vh-cdr2；(c)包含seq id no：213的氨基酸序列的vh-cdr3；(d)包含seq id no：215的氨基酸序列的vl-cdr1；(e)包含seq id no：216的氨基酸序列的vl-cdr2；和(f)包含seq id no：217的氨基酸序列的vl-cdr3。
[0732]
在一些实施方案中，α-突触核蛋白抗体包含选自以下的至少一个、两个、三个、四个、五个或六个cdr：(a)包含seq id no：31的氨基酸序列的vh-cdr1；(b)包含seq id no：222的氨基酸序列的vh-cdr2；(c)包含seq id no：223的氨基酸序列的vh-cdr3；(d)包含seq id no：225的氨基酸序列的vl-cdr1；(e)包含seq id no：96的氨基酸序列的vl-cdr2；和(f)包含seq id no：227的氨基酸序列的vl-cdr3。
[0733]
在一些实施方案中，α-突触核蛋白抗体包含选白以下的至少一个、两个、三个、四个、五个或六个cdr：(a)包含seq id no：231的氨基酸序列的vh-cdr1；(b)包含seq id no：232的氨基酸序列的vh-cdr2；(c)包含seq id no：233的氨基酸序列的vh-cdr3；(d)包含seq id no：235的氨基酸序列的vl-cdr1；(e)包含seq id no：236的氨基酸序列的vl-cdr2；和(f)包含seq id no：237的氨基酸序列的vl-cdr3。
[0734]
在一些实施方案中，α-突触核蛋白抗体包含选自以下的至少一个、两个、三个、四个、五个或六个cdr：(a)包含seq id no：31的氨基酸序列的vh-cdr1；(b)包含seq id no：242的氨基酸序列的vh-cdr2；(c)包含seq id no：243的氨基酸序列的vh-cdr3；(d)包含seq id no：225的氨基酸序列的vl-cdr1；(e)包含seq id no：96的氨基酸序列的vl-cdr2；和(f)包含seq id no：247的氨基酸序列的vl-cdr3。
[0735]
在一些实施方案中，α-突触核蛋白抗体包含选自以下的至少一个、两个、三个、四个、五个或六个cdr：(a)包含seq id no：31的氨基酸序列的vh-cdr1；(b)包含seq id no：252的氨基酸序列的vh-cdr2；(c)包含seq id no：253的氨基酸序列的vh-cdr3；(d)包含seq id no：255的氨基酸序列的vl-cdr1；(e)包含seq id no：256的氨基酸序列的vl-cdr2；和(f)包含seq id no：257的氨基酸序列的vl-cdr3。
[0736]
在一些实施方案中，α-突触核蛋白抗体包含选自以下的至少一个、两个、三个、四个、五个或六个cdr：(a)包含seq id no：261的氨基酸序列的vh-cdr1；(b)包含seq id no：262的氨基酸序列的vh-cdr2；(c)包含seq id no：263的氨基酸序列的vh-cdr3；(d)包含seq id no：265的氨基酸序列的vl-cdr1；(e)包含seq id no：176的氨基酸序列的vl-cdr2；和(f)包含seq id no：267的氨基酸序列的vl-cdr3。
[0737]
在一些实施方案中，α-突触核蛋白抗体包含选白以下的至少一个、两个、三个、四个、五个或六个cdr：(a)包含seq id no：271的氨基酸序列的vh-cdr1；(b)包含seq id no：272的氨基酸序列的vh-cdr2；(c)包含seq id no：273的氨基酸序列的vh-cdr3；(d)包含seq id no：275的氨基酸序列的vl-cdr1；(e)包含seq id no：276的氨基酸序列的vl-cdr2；和(f)包含seq id no：277的氨基酸序列的vl-cdr3。
[0738]
在一些实施方案中，α-突触核蛋白抗体包含选自以下的至少一个、两个、三个、四个、五个或六个cdr：(a)包含seq id no：301的氨基酸序列的vh-cdr1；(b)包含seq id no：302的氨基酸序列的vh-cdr2；(c)包含seq id no：303的氨基酸序列的vh-cdr3；(d)包含seq id no：15的氨基酸序列的vl-cdr1；(e)包含seq id no：16的氨基酸序列的vl-cdr2；和(f)包含seq id no：307的氨基酸序列的vl-cdr3。
[0739]
在一些实施方案中，α-突触核蛋白抗体包含选自以下的至少一个、两个、三个、四个、五个或六个cdr：(a)包含seq id no：311的氨基酸序列的vh-cdr1；(b)包含seq id no：312的氨基酸序列的vh-cdr2；(c)包含seq id no：313的氨基酸序列的vh-cdr3；(d)包含seq id no：315的氨基酸序列的vl-cdr1；(e)包含seq id no：46的氨基酸序列的vl-cdr2；和(f)包含seq id no：67的氨基酸序列的vl-cdr3。
[0740]
在一些实施方案中，α-突触核蛋白抗体包含选白以下的至少一个、两个、三个、四个、五个或六个cdr：(a)包含seq id no：321的氨基酸序列的vh-cdr1；(b)包含seq id no：322的氨基酸序列的vh-cdr2；(c)包含seq id no：323的氨基酸序列的vh-cdr3；(d)包含seq id no：325的氨基酸序列的vl-cdr1；(e)包含seq id no：326的氨基酸序列的vl-cdr2；和(f)包含seq id no：327的氨基酸序列的vl-cdr3。
[0741]
在一些实施方案中，α-突触核蛋白抗体包含选自以下的至少一个、两个、三个、四个、五个或六个cdr：(a)包含seq id no：151的氨基酸序列的vh-cdr1；(b)包含seq id no：332的氨基酸序列的vh-cdr2；(c)包含seq id no：333的氨基酸序列的vh-cdr3；(d)包含seq id no：335的氨基酸序列的vl-cdr1；(e)包含seq id no：336的氨基酸序列的vl-cdr2；和(f)包含seq id no：107的氨基酸序列的vl-cdr3。
[0742]
在一些实施方案中，α-突触核蛋白抗体包含选白以下的至少一个、两个、三个、四个、五个或六个cdr：(a)包含seq id no：341的氨基酸序列的vh-cdr1；(b)包含seq id no：342的氨基酸序列的vh-cdr2；(c)包含seq id no：343的氨基酸序列的vh-cdr3；(d)包含seq id no：345的氨基酸序列的vl-cdr1；(e)包含seq id no：346的氨基酸序列的vl-cdr2；和(f)包含seq id no：347的氨基酸序列的vl-cdr3。
[0743]
在一些实施方案中，α-突触核蛋白抗体包含选自以下的至少一个、两个、三个、四个、五个或六个cdr：(a)包含seq id no：351的氨基酸序列的vh-cdr1；(b)包含seq id no：352的氨基酸序列的vh-cdr2；(c)包含seq id no：353的氨基酸序列的vh-cdr3；(d)包含seq id no：355的氨基酸序列的vl-cdr1；(e)包含seq id no：356的氨基酸序列的vl-cdr2；和(f)包含seq id no：357的氨基酸序列的vl-cdr3。
[0744]
在一些实施方案中，α-突触核蛋白抗体包含选自以下的至少一个、两个、三个、四个、五个或六个cdr：(a)包含seq id no：361的氨基酸序列的vh-cdr1；(b)包含seq id no：362的氨基酸序列的vh-cdr2；(c)包含seq id no：363的氨基酸序列的vh-cdr3；(d)包含seq id no：365的氨基酸序列的vl-cdr1；(e)包含seq id no：16的氨基酸序列的vl-cdr2；和(f)
id no：105的氨基酸序列的vl-cdr1；(e)包含seq id no：106的氨基酸序列的vl-cdr2；和(f)包含seq id no：107的氨基酸序列的vl-cdr3。
[0753]
在一些实施方案中，α-突触核蛋白抗体包含选白以下的至少一个、两个、三个、四个、五个或六个cdr：(a)包含seq id no：461的氨基酸序列的vh-cdr1；(b)包含seq id no：462的氨基酸序列的vh-cdr2；(c)包含seq id no：463的氨基酸序列的vh-cdr3；(d)包含seq id no：465的氨基酸序列的vl-cdr1；(e)包含seq id no：16的氨基酸序列的vl-cdr2；和(f)包含seq id no：467的氨基酸序列的vl-cdr3。
[0754]
在一些实施方案中，α-突触核蛋白抗体包含选自以下的至少一个、两个、三个、四个、五个或六个cdr：(a)包含seq id no：141的氨基酸序列的vh-cdr1；(b)包含seq id no：472的氨基酸序列的vh-cdr2；(c)包含seq id no：473的氨基酸序列的vh-cdr3；(d)包含seq id no：475的氨基酸序列的vl-cdr1；(e)包含seq id no：476的氨基酸序列的vl-cdr2；和(f)包含seq id no：477的氨基酸序列的vl-cdr3。
[0755]
在一些实施方案中，α-突触核蛋白抗体包含选自以下的至少一个、两个、三个、四个、五个或六个cdr：(a)包含seq id no：481的氨基酸序列的vh-cdr1；(b)包含seq id no：482的氨基酸序列的vh-cdr2；(c)包含seq id no：483的氨基酸序列的vh-cdr3；(d)包含seq id no：165的氨基酸序列的vl-cdr1；(e)包含seq id no：16的氨基酸序列的vl-cdr2；和(f)包含seq id no：487的氨基酸序列的vl-cdr3。
[0756]
在一些实施方案中，α-突触核蛋白抗体包含选自以下的至少一个、两个、三个、四个、五个或六个cdr：(a)包含seq id no：141的氨基酸序列的vh-cdr1；(b)包含seq id no：492的氨基酸序列的vh-cdr2；(c)包含seq id no：493的氨基酸序列的vh-cdr3；(d)包含seq id no：495的氨基酸序列的vl-cdr1；(e)包含seq id no：496的氨基酸序列的vl-cdr2；和(f)包含seq id no：497的氨基酸序列的vl-cdr3。
[0757]
在一些实施方案中，α-突触核蛋白抗体包含选自以下的至少一个、两个、三个、四个、五个或六个cdr：(a)包含seq id no：151的氨基酸序列的vh-cdr1；(b)包含seq id no：502的氨基酸序列的vh-cdr2；(c)包含seq id no：503的氨基酸序列的vh-cdr3；(d)包含seq id no：105的氨基酸序列的vl-cdr1；(e)包含seq id no：336的氨基酸序列的vl-cdr2；和(f)包含seq id no：107的氨基酸序列的vl-cdr3。
[0758]
在一些实施方案中，α-突触核蛋白抗体包含选自以下的至少一个、两个、三个、四个、五个或六个cdr：(a)包含seq id no：311的氨基酸序列的vh-cdr1；(b)包含seq id no：512的氨基酸序列的vh-cdr2；(c)包含seq id no：513的氨基酸序列的vh-cdr3；(d)包含seq id no：515的氨基酸序列的vl-cdr1；(e)包含seq id no：516的氨基酸序列的vl-cdr2；和(f)包含seq id no：517的氨基酸序列的vl-cdr3。
[0759]
在一些实施方案中，α-突触核蛋白抗体包含选白以下的至少一个、两个、三个、四个、五个或六个cdr：(a)包含seq id no：521的氨基酸序列的vh-cdr1；(b)包含seq id no：522的氨基酸序列的vh-cdr2；(c)包含seq id no：463的氨基酸序列的vh-cdr3；(d)包含seq id no：525的氨基酸序列的vl-cdr1；(e)包含seq id no：16的氨基酸序列的vl-cdr2；和(f)包含seq id no：467的氨基酸序列的vl-cdr3。
[0760]
在一些实施方案中，α-突触核蛋白抗体包含选自以下的至少一个、两个或三个cdr：(a)包含seq id no：371的氨基酸序列的vh-cdr1；(b)包含seq id no：532的氨基酸序
id no：625的氨基酸序列的vl-cdr1；(e)包含seq id no：16的氨基酸序列的vl-cdr2；和(f)包含seq id no：17的氨基酸序列的vl-cdr3。
[0769]
在一些实施方案中，α-突触核蛋白抗体包含选自以下的至少一个、两个、三个、四个、五个或六个cdr：(a)包含seq id no：11的氨基酸序列的vh-cdr1；(b)包含seq id no：612的氨基酸序列的vh-cdr2；(c)包含seq id no：663的氨基酸序列的vh-cdr3；(d)包含seq id no：615的氨基酸序列的vl-cdr1；(e)包含seq id no：16的氨基酸序列的vl-cdr2；和(f)包含seq id no：17的氨基酸序列的vl-cdr3。
[0770]
在一些实施方案中，α-突触核蛋白抗体包含选白以下的至少一个、两个、三个、四个、五个或六个cdr：(a)包含seq id no：11的氨基酸序列的vh-cdr1；(b)包含seq id no：612的氨基酸序列的vh-cdr2；(c)包含seq id no：673的氨基酸序列的vh-cdr3；(d)包含seq id no：615的氨基酸序列的vl-cdr1；(e)包含seq id no：16的氨基酸序列的vl-cdr2；和(f)包含seq id no：17的氨基酸序列的vl-cdr3。
[0771]
在一些实施方案中，α-突触核蛋白抗体包含选白以下的至少一个、两个、三个、四个、五个或六个cdr：(a)包含seq id no：11的氨基酸序列的vh-cdr1；(b)包含seq id no：612的氨基酸序列的vh-cdr2；(c)包含seq id no：683的氨基酸序列的vh-cdr3；(d)包含seq id no：615的氨基酸序列的vl-cdr1；(e)包含seq id no：16的氨基酸序列的vl-cdr2；和(f)包含seq id no：17的氨基酸序列的vl-cdr3。
[0772]
在一些实施方案中，α-突触核蛋白抗体包含选自以下的至少一个、两个、三个、四个、五个或六个cdr：(a)包含seq id no：11的氨基酸序列的vh-cdr1；(b)包含seq id no：612的氨基酸序列的vh-cdr2；(c)包含seq id no：683的氨基酸序列的vh-cdr3；(d)包含seq id no：625的氨基酸序列的vl-cdr1；(e)包含seq id no：16的氨基酸序列的vl-cdr2；和(f)包含seq id no：17的氨基酸序列的vl-cdr3。
[0773]
在一些实施方案中，α-突触核蛋白抗体包含选自以下的至少一个、两个或三个cdr：(a)包含选自以下的氨基酸序列的vh-cdr1：
[0774]
seq id no：11，21，31，41，61，91，101，111，141，151，161，171，181，201，211，231，261，271，281，301，311，321，341，351，361，371，411，421，431，461，481，521，551，571和581，
[0775]
(b)包含选自以下的氨基酸序列的vh-cdr2：
[0776]
seq id no：12，22，32，42，52，62，72，92，102，112，142，152，162，172，182，192，202，212，222，232，242，252，262，272，282，302，312，322，332，342，352，362，372，382，412，422，432，442，462，472，482，492，502，512，522，532，542，552，582和612，
[0777]
(c)包含选自以下的氨基酸序列的vh-cdr3：
[0778]
seq id no：13，ysy，33，43，ysf，93，103，113，143，153，163，173，183，193，213，223，233，243，253，263，273，283，303，313，323，333，343，353，363，373，383，393，413，gny，433，443，463，473，483，493，503，513，533，543，553，563，573，583，663，673和683。
[0779]
在一些实施方案中，α-突触核蛋白抗体包含选自以下的至少一个、两个或三个cdr：(a)包含选自以下的氨基酸序列的vl-cdr1：
[0780]
seq id no：15，25，35，45，55，65，75，85，95，105，115，145，165，175，195，215，225，235，255，265，275，285，315，325，335，345，355，365，385，395，405，425，435，465，475，495，515，525，555，565，585，615和625，
[0781]
(b)包含选白以下的氨基酸序列的vl-cdr2：
[0782]
seq id no：16，26，36，46，56，76，96，106，176，206，216，236，256，276，286，326，336，346，356，376，386，426，436，476，496，516和586，
[0783]
(c)包含选自以下的氨基酸序列的vl-cdr3：
[0784]
seq id no：17，27，37，47，67，77，87，97，107，117，167，177，187，197，217，227，237，247，257，267，277，287，307，327，347，357，367，387，427，437，467，477，487，497，517，537，557和587。
[0785]
在另一个实施方案中，α-突触核蛋白抗体包含选自以下的重链可变结构域(vh)：
[0786]
seq id no：10，20，30，40，50，60，70，90，100，110，140，150，160，170，180，190，200，210，220，230，240，250，260，270，280，290，300，310，320，330，340，350，360，370，380，390，400，410，420，430，440，450，460，470，480，490，500，510，520，530，540，550，560，570，580，590，600，610，620，630，640，650，660，670，680，690，700，710和720，
[0787]
其包含该序列的翻译后修饰。
[0788]
在一个特定实施方案中，重链可变结构域(vh)包含选自以下的至少一个、两个或三个cdr：(a)包含选白以下的氨基酸序列的vh-cdr1：
[0789]
seq id no：11，21，31，41，61，91，101，111，141，151，161，171，181，201，211，231，261271，281，301，311，321，341，351，361，371，411，421，431，461，481，521，551，571和581，
[0790]
(b)包含选自以下的氨基酸序列的vh-cdr2：
[0791]
seq id no：12，22，32，42，52，62，72，92，102，112，142，152，162，172，182，192，202，212，222，232，242，252，262，272，282，302，312，322，332，342，352，362，372，382，412，422，432，442，462，472，482，492，502，512，522，532，542，552，582和612，
[0792]
(c)包含选自以下的氨基酸序列的vh-cdr3：
[0793]
seq id no：13，ysy，33，43，ysf，93，103，113，143，153，163，173，183，193，213，223，233，243，253，263，273，283，303，313，323，333，343，353，363，373，383，393，413，gny，433，443，463，473，483，493，503，513，533，543，553，563，573，583，663，673和683。
[0794]
在另一个实施方案中，α-突触核蛋白抗体包含选自以下的轻链可变结构域(vl)：
[0795]
seq id no：14，24，34，44，54，64，74，84，94，104，114，144，154，174，184，194，204，214，224，234，244，254，264，274，284，304，314，324，334，344，354，364，374，384，394，404，414，424，434，464，474，484，494，504，514，524，544，554，564，574，584，614，624，634和644，
[0796]
其包含该序列的翻译后修饰。
[0797]
在一个特定实施方案中，轻链可变结构域(vl)包含选自以下的至少一个、两个或三个cdr：(a)包含选自以下的氨基酸序列的vl-cdr1：
[0798]
seq id no：15，25，35，45，55，65，75，85，95，105，115，145，165，175，195，215，225，235，255，265，275，285，315，325，335，345，355，365，385，395，405，425，435，465，475，495，515，525，555，565，585，615和625，
[0799]
(b)包含选自以下的氨基酸序列的vl-cdr2：
[0800]
seq id no：16，26，36，46，56，76，96，106，176，206，216，236，256，276，286，326，336，346，356，376，386，426，436，476，496，516和586，
[0801]
(c)包含选自以下的氨基酸序列的vl-cdr3：
[0802]
seq id no：17，27，37，47，67，77，87，97，107，117，167，177，187，197，217，227，237，247，257，267，277，287，307，327，347，357，367，387，427，437，467，477，487，497，517，537，557和587。
[0803]
在一些实施方案中，本发明涉及选白以下的抗体：
[0804]
acl-7067-1101c8-ab2，acl-7067-1102g3-ab1，acl-7067-1106a8-ab2，acl-7067-1107g5-ab2，acl-7067-1108h1-ab1，acl-7067-1111b12-ab2，acl-7067-1112h8-ab2，acl-7067-1108b11-ab2，acl-7067-1113d10-ab1，acl-7067-1116f2-ab1，acl-7067-1206e5-ab1，acl-7079-2501b11-ab3，acl-707 9-2501d10-ab1，acl-7079-2501g2-ab2，acl-7079-2503c6-ab1，acl-7079-2504a6-ab1，acl-7079-2506e2-ab2，acl-7079-2506f3-ab1，acl-7079-2507b3-ab1，acl-7079-2511b3-ab3，acl-7079-2601b6-ab1，acl-7079-2602g4-ab4，acl-7079-2603c1-ab3，acl-7079-2603f3-ab1，acl-7079-2605b3-ab2，acl-7079-2606a6-ab2，acl-7079-2509e5-ab2，acl-7087-4119e10-ab2，acl-7087-4125e6-ab1，acl-7088-4301d5-ab2，acl-7088-4301e12-ab2，acl-7088-4301h3-ab2，acl-7088-4303a1-ab1，acl-7088-4303a3-ab1，acl-7088-4303b6-ab2，acl-7088-4303h6-ab1，acl-7088-4305h7-ab1，acl-7088-4317a4-ab1，acl-7089-4409f1-ab1，acl-7089-4415g5-ab1，acl-7089-4417g6-ab1，acl-7089-4418c5-ab1，acl-7089-4418f6-ab1，acl-8033-5a12-ab1，acl-8033-25a3-ab1，acl-8033-1g10-ab1，acl-8033-19a2-ab1，acl-8033-8c10-ab1，acl-8033-7a2-ab1，acl-8033-1a12-ab1，acl-8033-4f3-ab1，acl-8033-17f5-ab1，acl-8033-18c11-ab1，acl-8033-18d12-ab1，acl-8033-1f8-ab1，acl-8033-22e5-ab1，acl-8033-27d8-ab1，acl-8033-21c8-ab1，hacl-7067-1101c8-ab2_h1l1，hacl-7067-1101c8-ab2_h1l2，hacl-7067-1101c8-ab2_h1l3，hacl-7067-1101c8-ab2_h1l4，hacl-7067-1101c8-ab2_h2l1，hacl-7067-1101c8-ab2_h2l2，hacl-7067-1101c8-ab2_h2l3，hacl-7067-1101c8-ab2_h2l4，hacl-7067-1101c8-ab2_h3l1，hacl-7067-1101c8-ab2_h3l2，hacl-7067-1101c8-ab2_h3l3，hacl-7067-1101c8-ab2_h3l4，hacl-7067-1101c8-ab2_h4l1，hacl-7067-1101c8-ab2_h4l2，hacl-7067-1101c8-ab2_h4l3，hacl-7067-1101c8-ab2_h4l4，hacl-7067-1101c8-ab2_h5l1，hacl-7067-1101c8-ab2_h5l2，hacl-7067-1101c8-ab2_h5l3，hacl-7067-1101c8-ab2_h5l4，hacl-7067-1101c8-ab2_h6l1，hacl-7067-1101c8-ab2_h7l1，hacl-7067-1101c8-ab2_h8l1，hacl-7067-1101c8-ab2_h9l1，hacl-7067-1101c8-ab2_h9l2，hacl-7067-1101c8-ab2_h10l1，hacl-7067-1101c8-ab2_h10l2，hacl-7067-1101c8-ab2_h11l1，hacl-7067-1101c8-ab2_h11l2，hacl-7067-1101c8-ab2_h12l1和hacl-7067-1101c8-ab2_h12l2。
[0805]
在某些优选的实施方案中，抗体可选自以下：
[0806]
hacl-7067-1101c8-ab2_h5l1，hacl-7067-1101c8-ab2_h8l1，hacl-7067-1101c8-ab2_h9l1，hacl-7067-1101c8-ab2_h9l2，hacl-7067-1101c8-ab2_h10l1，hacl-7067-1101c8-ab2_h10l2，hacl-7067-1101c8-ab2_h11l1，hacl-7067-1101c8-ab2_h11l2，hacl-7067-1101c8-ab2_h12l1和hacl-7067-1101c8-ab2_h12l2。
[0807]
如本文所表明的，这些人源化抗体显示出有利的对α突触核蛋白的亲和力、表达水平和与人接纳体框架的序列同一性。其均延迟了接种的聚集。在某些优选的实施方案中，抗体可选自以下：
[0808]
hacl-7067-1101c8-ab2_h5l1，hacl-7067-1101c8-ab2_h8l1，hacl-7067-1101c8-ab2_h9l1，hacl-7067-1101c8-ab2_h9l2和hacl-7067-1101c8-ab2_h10l1。
[0809]
如本文所表明的，与嵌合抗体caci-7067-1101c8-ab2相比，这些人源化抗体显示出针对聚集形式的α突触核蛋白的提高的亲和力。在某些优选的实施方案中，抗体可选自以下：
[0810]
hacl-7067-1101c8-ab2_h5l1，hacl-7067-1101c8-ab2_h8l1，hacl-7067-1101c8-ab2_h9l1，hacl-7067-1101c8-ab2_h9l2，hacl-7067-1101c8-ab2_h10l1和hacl-7067-1101c8-ab2_h10l2。
[0811]
如本文所表明的，与嵌合抗体caci-7067-1101c8-ab2相比，这些人源化抗体显示出在延迟α突触核蛋白聚集方面的效力。
[0812]
在一些实施方案中，抗体与选白以下的抗体结合相同或相似的表位(完全或部分重叠的表位)：
[0813]
acl-7067-1101c8-ab2，acl-7067-1102g3-ab1，acl-7067-1106a8-ab2，acl-7067-1107g5-ab2，acl-7067-1108h1-ab1，acl-7067-1111b12-ab2，acl-7067-1112h8-ab2，acl-7067-1108b11-ab2，acl-7067-1113d10-ab1，acl-7067-1116f2-ab1，acl-7067-1206e5-ab1，acl-7079-2501b11-ab3，acl-7079-2501d10-ab1，acl-7079-2501g2-ab2，acl-7079-2503c6-ab1，acl-7079-2504a6-ab1，acl-7079-2506e2-ab2，acl-7079-2506f3-ab1，acl-7079-2507b3-ab1，acl-7079-2511b3-ab3，acl-7079-2601b6-ab1，acl-7079-2602g4-ab4，acl-7079-2603c1-ab3，acl-7079-2603f3-ab1，acl-7079-2605b3-ab2，acl-7079-2606a6-ab2，acl-7079-2509e5-ab2，acl-7087-4119e10-ab2，acl-7087-4125e6-ab1，acl-7088-4301d5-ab2，acl-7088-4301e12-ab2，acl-7088-4301h3-ab2，acl-7088-4303a1-ab1，acl-7088-4303a3-ab1，acl-7088-4303b6-ab2，acl-7088-4303h6-ab1，acl-7088-4305h7-ab1，acl-7088-4317a4-ab1，acl-7089-4409f1-ab1，acl-7089-4415g5-ab1，acl-7089-4417g6-ab1，acl-7089-4418c5-ab1，acl-7089-4418f6-ab1，acl-8033-5a12-ab1，acl-8033-25a3-ab1，acl-8033-1g10-ab1，acl-8033-19a2-ab1，acl-8033-8c10-ab1，acl-8033-7a2-ab1，acl-8033-1a12-ab1，acl-8033-4f3-ab1，acl-8033-17f5-ab1，acl-8033-18c11-ab1，acl-8033-18d12-ab1，acl-8033-1f8-ab1，acl-8033-22e5-ab1，acl-8033-27d8-ab1，acl-8033-21c8-ab1，hacl-7067-1101c8-ab2_h1l1，hacl-7067-1101c8-ab2_h1l2，hacl-7067-1101c8-ab2_h1l3，hacl-7067-1101c8-ab2_h1l4，hacl-7067-1101c8-ab2_h2l1，hacl-7067-1101c8-ab2_h2l2，hacl-7067-1101c8-ab2_h2l3，hacl-7067-1101c8-ab2_h2l4，hacl-7067-1101c8-ab2_h3l1，hacl-7067-1101c8-ab2_h3l2，hacl-7067-1101c8-ab2_h3l3，hacl-7067-1101c8-ab2_h3l4，hacl-7067-1101c8-ab2_h4l1，hacl-7067-1101c8-ab2_h4l2，hacl-7067-1101c8-ab2_h4l3，hacl-7067-1101c8-ab2_h4l4，hacl-7067-1101c8-ab2_h5l1，hacl-7067-1101c8-ab2_h5l2，hacl-7067-1101c8-ab2_h5l3，hacl-7067-1101c8-ab2_h5l4，hacl-7067-1101c8-ab2_h6l1，hacl-7067-1101c8-ab2_h7l1，hacl-7067-1101c8-ab2_h8l1，hacl-7067-1101c8-ab2_h9l1，hacl-7067-1101c8-ab2_h9l2，hacl-7067-1101c8-ab2_h10l1，hacl-7067-1101c8-ab2_h10l2，hacl-7067-1101c8-ab2_h11l1，hacl-7067-1101c8-ab2_h11l2，hacl-7067-1101c8-ab2_h12l1和hacl-7067-1101c8-ab2_h12l2。
[0814]
在某些优选的实施方案中，抗体与选自以下的抗体结合相同或相似的表位(完全或部分重叠的表位)：
[0815]
hacl-7067-1101c8-ab2_h5l1，hacl-7067-1101c8-ab2_h8l1，hacl-7067-1101c8-ab2_h9l1，hacl-7067-1101c8-ab2_h9l2，hacl-7067-1101c8-ab2_h10l1，hacl-7067-1101c8-ab2_h10l2，hacl-7067-1101c8-ab2_h11l1，hacl-7067-1101c8-ab2_h11l2，hacl-7067-1101c8-ab2_h12l1和hacl-7067-1101c8-ab2_h12l2。
[0816]
如本文所表明的，这些人源化抗体显示出有利的对α突触核蛋白的亲和力、表达水平和与人接纳体框架的序列同一性。其均延迟了接种的聚集。在某些优选的实施方案中，抗体与选白以下的抗体结合相同或相似的表位(完全或部分重叠的表位)：
[0817]
hacl-7067-1101c8-ab2_h5l1，hacl-7067-1101c8-ab2_h8l1，hacl-7067-1101c8-ab2_h9l1，hacl-7067-1101c8-ab2_h9l2和hacl-7067-1101c8-ab2_h10l1。
[0818]
如本文所表明的，与嵌合抗体caci-7067-1101c8-ab2相比，这些人源化抗体显示出针对聚集形式的α突触核蛋白的提高的亲和力。在某些优选的实施方案中，该抗体与选自以下的抗体结合相同或相似的表位(完全或部分重叠的表位)：
[0819]
hacl-7067-1101c8-ab2_h5l1，hacl-7067-1101c8-ab2_h8l1，hacl-7067-1101c8-ab2_h9l1，hacl-7067-1101c8-ab2_h9l2，hacl-7067-1101c8-ab2_h10l1和hacl-7067-1101c8-ab2_h10l2。
[0820]
如本文所表明的，与嵌合抗体caci-7067-1101c8-ab2相比，这些人源化抗体显示出在延迟α突触核蛋白聚集方面的效力。
[0821]
在一些实施方案中，提供了分离的抗体，其中该分离的抗体与包含序列seq id no：2的相同或相似的表位结合。在一些实施方案中，提供了分离的抗体，其中该分离的抗体与包含序列seq id no：3的相同表位结合。在一些实施方案中，提供了分离的抗体，其中该分离的抗体与包含序列seq id no：4的相同表位结合。在一些实施方案中，提供了分离的抗体，其中该分离的抗体与包含序列seq id no：5的相同表位结合。在一些实施方案中，提供了分离的抗体，其中该分离的抗体与包含含有seq id no：1的第93至95位氨基酸的序列的相同表位结合。在一些实施方案中，提供了分离的抗体，其中该分离的抗体与包含序列seq id no：7的相同表位结合。在一些实施方案中，提供了分离的抗体，其中该分离的抗体与包含序列seq id no：8的相同表位结合。在一些实施方案中，提供了分离的抗体，其中该分离的抗体与包含序列seq id no：9的相同表位结合。在一些实施方案中，提供了分离的抗体，其中该分离的抗体与包含序列seq id no：121的相同或相似表位结合。在一些实施方案中，提供了分离的抗体，其中该分离的抗体与包含序列seq id no：136的相同或相似表位结合。在一些实施方案中，提供了分离的抗体，其中该分离的抗体与包含序列seq id no：130的相同或相似表位结合。在一些实施方案中，提供了分离的抗体，其中该分离的抗体与包含序列seq id no：131的相同或相似表位结合。在一些实施方案中，提供了分离的抗体，其中该分离的抗体与包含序列seq id no：134的相同或相似表位结合。在一些实施方案中，提供了分离的抗体，其中该分离的抗体与包含序列seq id no：135的相同或相似表位结合。在一些实施方案中，提供了分离的抗体，其中该分离的抗体与包含序列seq id no：122的相同或相似表位结合。在一些实施方案中，提供了分离的抗体，其中该分离的抗体与包含序列seq id no：124的相同或相似表位结合。在一些实施方案中，提供了分离的抗体，其中该分离的抗体
与包含序列seq id no：125的相同或相似表位结合。在一些实施方案中，提供了分离的抗体，其中该分离的抗体与包含序列seq id no：132的相同或相似表位结合。在一些实施方案中，提供了分离的抗体，其中该分离的抗体与包含序列seq id no：133的相同或相似表位结合。在一些实施方案中，提供了分离的抗体，其中该分离的抗体与包含序列seq id no：137的相同或相似表位结合。在一些实施方案中，提供了分离的抗体，其中该分离的抗体与seq id no：1的人α-突触核蛋白的氨基酸残基内的相同或相似的非线性表位结合。术语“相同或相似的表位”是指本文提供的任何抗体。
[0822]
与本文提供的任何抗体结合相同表位的抗体也是本发明的一部分。在一些实施方案中，提供了分离的抗体，其中该分离的抗体与包含序列seq id no：2的相同表位结合。在一些实施方案中，提供了分离的抗体，其中该分离的抗体与包含序列seq id no：3的相同表位结合。在一些实施方案中，提供了分离的抗体，其中该分离的抗体与包含序列seq id no：4的相同表位结合。在一些实施方案中，提供了分离的抗体，其中该分离的抗体与包含序列seq id no：5的相同表位结合。在一些实施方案中，提供了分离的抗体，其中该分离的抗体与包含含有seq id no：1的第93至95位氨基酸的序列的相同表位结合。在一些实施方案中，提供了分离的抗体，其中该分离的抗体与包含序列seq id no：7的相同表位结合。在一些实施方案中，提供了分离的抗体，其中该分离的抗体与包含序列seq id no：8的相同表位结合。在一些实施方案中，提供了分离的抗体，其中该分离的抗体与包含序列seq id no：9的相同表位结合。在一些实施方案中，提供了分离的抗体，其中该分离的抗体与包含序列seq id no：121的相同表位结合。在一些实施方案中，提供了分离的抗体，其中该分离的抗体与包含序列seq id no：136的相同表位结合。在一些实施方案中，提供了分离的抗体，其中该分离的抗体与包含序列seq id no：130的相同表位结合。在一些实施方案中，提供了分离的抗体，其中该分离的抗体与包含序列seq id no：131的相同表位结合。在一些实施方案中，提供了分离的抗体，其中该分离的抗体与包含序列seq id no：134的相同表位结合。在一些实施方案中，提供了分离的抗体，其中该分离的抗体与包含序列seq id no：135的相同表位结合。在一些实施方案中，提供了分离的抗体，其中该分离的抗体与包含序列seq id no：122的相同表位结合。在一些实施方案中，提供了分离的抗体，其中该分离的抗体与包含序列seq id no：124的相同表位结合。在一些实施方案中，提供了分离的抗体，其中该分离的抗体与包含序列seq id no：125的相同表位结合。在一些实施方案中，提供了分离的抗体，其中该分离的抗体与包含序列seq id no：132的相同表位结合。在一些实施方案中，提供了分离的抗体，其中该分离的抗体与包含序列seq id no：133的相同表位结合。在一些实施方案中，提供了分离的抗体，其中该分离的抗体与包含序列seq id no：137的相同表位结合。在一些实施方案中，提供了分离的抗体，其中该分离的抗体与seq id no：1的人α-突触核蛋白的氨基酸残基内的相同非线性表位结合。术语“相同表位”是指本文提供的任何抗体。
[0823]
根据上文，在某些实施方案中，考虑了本文提供的抗体的氨基酸序列变体。例如，可期望改善抗体的结合亲和力和/或其他生物学特性。抗体的氨基酸序列变体可通过将适当的修饰引入编码抗体的核苷酸序列或通过肽合成来制备。这样的修饰包括，例如，从抗体氨基酸序列内缺失，和/或插入至抗体氨基酸序列内，和/或替换抗体氨基酸序列内的残基。可进行缺失、插入和替换的任何组合以获得最终构建体，前提是最终构建体具有所期望的特征，例如抗原结合。
[0824]
在某些实施方案中，提供了具有一个或更多个氨基酸替换的抗体变体。替换突变的目的位点包括cdr和fr。在表1中“优选的替换”的标题下显示了保守替换。在表1中“示例性替换”的标题下提供了更多基本的变化，并且如下涉及氨基酸侧链分类进一步描述。可将氨基酸替换引入目的抗体中，并针对期望的活性(例如保留/改善的抗原结合、降低的免疫原性或者改善的adcc或cdc)筛选产物。
[0825]
表1
[0826]
原始残基示例性替换优选的替换ala(a)val；leu；ilevalarg(r)lys；gln；asnlysasn(n)gln；his；asp，lys；argglnasp(d)glu；asnglucys(c)ser；alasergln(q)asn；gluasnglu(e)asp；glnaspgly(g)alaalahis(h)asn；gln；lys；argargile(i)leu；val；met；ala；phe；正亮氨酸leuleu(l)正亮氨酸；ile；val；met；ala；pheilelys(k)arg；gln；asnargmet(m)leu；phe；ileleuphe(f)trp；leu；val；ile；ala；tyrtyrpro(p)alaalaser(s)thrthrthr(t)val；sersertrp(w)tyr；phetyrtyr(y)trp；phe；thr；serpheval(v)ile；leu；met；phe；ala；正亮氨酸leu
[0827]
氨基酸可根据共同的侧链特性进行分组：
[0828]
(1)疏水性：正亮氨酸、met、ala、val、leu、ile；
[0829]
(2)中性亲水性：cys、ser、thr、asn、gln；
[0830]
(3)酸性：asp、glu；
[0831]
(4)碱性：his、lys、arg；
[0832]
(5)影响链取向的残基：gly、pro；
[0833]
(6)芳香族：trp、tyr、phe。
[0834]
非保守替换将需要将这些分类之一的成员交换为另一个分类。
[0835]
在某些实施方案中，可将一个或更多个氨基酸修饰引入本文提供的抗体的fc区，从而产生fc区变体。fc区变体可包含在一个或更多个氨基酸位置处包含氨基酸修饰(例如替换)的鼠fc区序列(例如：igg1、igg2a或igg2b)。fc区变体可包含在一个或更多个氨基酸位置处包含氨基酸修饰(例如替换)的人fc区序列(例如人igg1、igg2、igg3或igg4的fc区)
(例如包含s228p突变的igg4同种型)。
[0836]
在某些实施方案中，fc区被突变以提高其在ph 6.0下对fcrn的亲和力并因此延长抗体半衰期。具有对fcrn的增强的亲和力的抗体包括具有fc区残基252、253、254、256、428、434中一个或更多个的替换的那些，所述替换包括具有m252y/s254t/t256e替换的所谓yte突变(dall
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acqua et al，j immunol.169：5171-5180(2002))或ls突变m428l/n434s(zalevsky et al，nat biotechnol.28(2)：157-159(2010))。
[0837]
在某些实施方案中，本发明考虑了具有一些但不是全部效应子功能的抗体变体，这使其成为针对其中体内抗体半衰期是重要的但某些效应子功能(例如补体活化和adcc)不必要或有害的应用的期望候选物。可进行体外和/或体内细胞毒性测定以确认cdc和/或adcc活性的降低/耗竭。例如，可进行fc受体(fcr)结合测定以确保抗体缺失fcγr结合(因此可能缺失adcc活性)，但保留fcrn结合能力。介导adcc的原代细胞即nk细胞仅表达fcγriii，而单核细胞和小胶质细胞表达fcγri、fcγrii和fcγriii。在ravetch和kinet，annu.rev.immunol.9：457-492(1991)的第464页表3中总结了造血细胞上的fcr表达。在以下中描述了评估目的分子的adcc活性的体外测定的非限制性实例：美国专利no.5,500,362(参见，例如hellstrom，i.et al.proc.nat’l acad.sci.usa 83：7059-7063(1986))和hellstrom，i et al.，proc.nat’l acad.sci.usa 82：1499-1502(1985)；5,821，337(参见bruggemann，m.et al.，j.exp.med.166：1351-1361(1987))。
[0838]
具有降低的效应子功能的抗体包括具有fc区残基234、235、238、265、269、270、297、327和329中一个或更多个的替换的那些(美国专利no.6,737,056)。描述了具有与fcr改善或减弱的结合的某些抗体变体。(参见，例如，美国专利no.6,737,056；wo 2004/056312和shields et al.，j.biol.chem.9(2)：6591-6604(2001))。这样的fc突变体包括在氨基酸第265、269、270、297和327位的两个或更多个中具有替换的fc突变体，包括其中将残基265和297替换为丙氨酸的所谓“dana”fc突变体(美国专利no.7,332,581)或其中将残基265替换为丙氨酸并将残基297替换为甘氨酸的所谓“dang”fc突变体。或者，具有降低的效应子功能的抗体包括具有fc区残基234、235和329中一个或更多个的替换的那些，将残基234和235替换为丙氨酸并将残基329替换为甘氨酸的所谓“pg-lala”fc突变体(lo，m.et al.，journal of biochemistry，292，3900-3908)。可使用在第234、235和321位的其他已知突变，在ch2结构域中包含突变l234f/l235e/p331 s的所谓的tm突变体(oganesyan et al.acta cryst.d64，700-704.(2008))。来自人igg4同种型的抗体包括突变s228p/l235e以稳定铰链并降低fgr结合(schlothauer et al，peds，29(10)：457-466)。
[0839]
其他fc变体包括在fc区残基238、256、265、272、286、303、305、307、311、312、317、340、356、360、362、376、378、380、382、413、424或434中一个或更多个处具有替换的那些，例如fc区残基434的替换(美国专利no.7,371,826)。另见duncan & winter，nature 322：738-40(1988)；美国专利no.5,648,260；美国专利no.5,624,821。
[0840]
可使用重组方法和组合物产生抗体，例如，如在美国专利no.4,816,567中所述的。在一个实施方案中，提供了编码本文所述的α-突触核蛋白抗体的分离的核酸。这样的核酸可编码包含抗体vl的氨基酸序列和/或包含抗体vh的氨基酸序列(例如，抗体的轻链和/或重链)。在另一个实施方案中，提供了包含这样的核酸的一种或更多种载体(例如，表达载体)。在另一个实施方案中，提供了包含这样的核酸的宿主细胞。在一个这样的实施方案中，
宿主细胞包含以下(例如，已用以下转化)：(1)包含编码包含抗体vl的氨基酸序列和包含抗体vh的氨基酸序列的核酸的载体，或(2)包含编码包含抗体vl的氨基酸序列的核酸的第一载体，以及包含编码包含抗体vh的氨基酸序列的核酸的第二载体。在一个实施方案中，宿主细胞是真核细胞，例如中国仓鼠卵巢(chinese hamster ovary，cho)细胞或淋巴细胞(例如yo、nso、sp20)。在一个实施方案中，提供了制备抗α-突触核蛋白抗体的方法，其中该方法包括在适合于抗体表达的条件下培养包含编码如上提供的抗体的核酸的宿主细胞，并且任选地回收来自宿主细胞(或宿主细胞培养基)的抗体。
[0841]
对于α-突触核蛋白抗体的重组产生，分离编码例如如上所述的抗体的核酸，并插入用于在宿主细胞中进一步克隆和/或表达的一种或更多个载体中。
[0842]
用于克隆或表达编码抗体的载体的合适的宿主细胞包括本文所述的原核或真核细胞。
[0843]
本发明还涉及针对α-突触核蛋白的天然多肽和重组多肽的特异性抗体的产生。例如，该产生基于动物如小鼠的免疫接种。然而，在本发明内还设想了用于产生抗体/抗血清的其他动物。例如，单克隆和多克隆抗体可由兔、小鼠、山羊、驴等产生。可将编码对应选择的α-突触核蛋白的多肽的多核苷酸亚克隆到合适的载体中，其中重组多肽将在适合于其表达的生物体中，例如在细菌中表达。因此，可将表达的重组蛋白注射到小鼠中，并且可从例如通过心内血液穿刺提供的小鼠血清中获得产生的特异性抗体。许多其他策略是本领域已知的，例如通过基因枪或喷射注射和肌内或皮内注射使用本领域公知的并涵盖脂质体介导的递送的dna疫苗策略。因此，针对α-突触核蛋白的多肽或蛋白质或表位的抗体，特别是针对本文提供的抗体的表位的抗体，可通过直接肌内注射表达所期望的α-突触核蛋白的多肽或蛋白质或表位的载体来通过直接免疫动物来获得。获得的特异性抗体的量可使用也在下文中描述的elisa来定量。用于产生抗体的另外的方法是本领域公知的，参见例如harlow和lane，
″
antibodies，a laboratory manual
″
，csh press，cold spring harbor，1988。
[0844]
因此，本发明的抗体可通过本领域技术人员已知的方法产生。具体而言，将编码目标抗体的dna插入到表达载体中。插入到表达载体的实施使得表达在表达调节区例如增强子和启动子的控制下发生。接下来，使用该表达载体转化宿主细胞以表达抗体。在该步骤中可使用宿主和表达载体的适当组合。
[0845]
载体的一些实例包括m13系列载体、puc系列载体、pbr322、pbluescript和pcr-script。除了这些载体之外，例如pgem-t、pdirect或pt7也可用于cdna亚克隆和切除的目的。
[0846]
特别地，表达载体可用于产生抗体的目的。例如，当宿主是大肠杆菌(e.coli)例如jm109、dh5α、hb101或xl1-blue时，表达载体不可或缺地具有允许在大肠杆菌中有效表达的启动子，例如lacz启动子(ward et al.，nature(1989)341，544-546；和faseb j(1992)6，2422-2427)，arab启动子(better et al.，science(1988)240，1041-1043)或t7启动子。这样的载体的一些实例包括上述载体以及pgex-5x-1(由pharmacia制造)、“qiaexpress系统”(由qiagen制造)、pegfp和pet(在这种情况下，宿主优选为表达t7 rna聚合酶的bl21)。
[0847]
载体可包含用于多肽分泌的信号序列。在大肠杆菌周质中产生的情况下，pelb信号序列(lei，s.p.et al.，j.bacteriol.(1987)169，4397)可用作用于多肽分泌的信号序列。可使用例如氯化钙法或电穿孔法将载体转移至宿主细胞。
[0848]
除了大肠杆菌表达载体之外，用于产生本发明抗体的载体的一些实例包括哺乳动物来源的表达载体(例如，pcdna3(由invitrogen corp.制造)、pegf-bos(nucleic acids.res.1990，18(17)，p5322)、pef和pcdm8)、昆虫细胞来源的表达载体(例如，“bac-to-bac杆状病毒表达系统”(由gibco brl制造)和pbacpak8)、植物来源的表达载体(例如pmh1和pmh2)、动物病毒来源的表达载体(例如phsv、pmv和padexlcw)、逆转录病毒来源的表达载体(例如pzipneo)、酵母来源的表达载体(例如“毕赤酵母(pichia)表达试剂盒”(由invitrogen corp.制造)、pnv11和sp-q01)和枯草芽孢杆菌来源的表达载体(例如ppl608和pkth50)。
[0849]
出于在动物细胞例如cho细胞、cos细胞或nih3t3细胞中表达的目的，载体不可或缺地具有针对胞内表达所必需的启动子，例如sv40启动子(mulligan et al.，nature(1979)277，108)、mmtv-ltr启动子、ef1α启动子(mizushima et al.，nucleic acids res(1990)18，5322)、cag启动子(gene(1991)108，193)或cmv启动子，并且更优选地，具有用于筛选转化细胞的基因(例如，可作为药物标志物的药物抗性基因(新霉素、g418等))。具有这样的特性的载体的一些实例包括pmam、pdr2、pbk-rsv、pbk-cmv、poprsv和pop13。
[0850]
旨在稳定表达基因并提高胞内基因拷贝数目的示例性方法涉及在基因扩增中用具有作为其互补物的dhfr基因的载体(例如pchoi)并使用甲氨蝶呤(methotrexate，mtx)转染缺乏核酸合成途径的cho细胞。旨在瞬时表达基因的示例性方法涉及使用具有在其染色体上表达sv40t抗原的基因的cos细胞，以用具有sv40复制起点的载体(pcd等)转化细胞。此外，可使用来源于多瘤病毒、腺病毒、牛乳头瘤病毒(bpv)等的复制起点。用于提高宿主细胞系统中基因拷贝数目的表达载体可另外包含选择标志物，例如氨基糖苷转移酶(aph)基因、胸苷激酶(thymidine kinase，tk)基因、大肠杆菌黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(ecogpt)基因，或二氢叶酸还原酶(dhfr)基因。
[0851]
通过上述方法获得的本发明的抗体可从宿主细胞内部或所述细胞外部(培养基，或这样的)分离，并纯化为几乎纯的和均质的抗体。抗体可通过常规用于分离和纯化抗体的方法进行分离和纯化，并且方法的种类无限制。例如，抗体可通过适当选择和组合柱色谱、过滤、超滤、盐析、溶剂沉淀、溶剂萃取、蒸馏、免疫沉淀、sds-聚丙烯酰胺凝胶电泳、等电聚焦、透析、再结晶等方法进行分离和纯化。
[0852]
色谱包括例如亲和色谱、离子交换色谱、疏水色谱、凝胶过滤、反相色谱和吸附色谱(strategies for protein purification and characterization：a laboratory course manual.ed daniel r.marshak et al.，cold spring harbor laboratory press，1996)。上述色谱方法可使用液相色谱，例如hplc和fplc进行。用于亲和色谱的柱包括蛋白a柱和蛋白g柱。使用蛋白a的柱包括例如hyperd、poros和sepharose ff(ge amersham biosciences)。本发明包括使用这些纯化方法高度纯化的抗体。
[0853]
可将获得的抗体纯化至均质。抗体的分离和纯化可使用通常用于蛋白质分离和纯化的分离和纯化方法进行。例如，抗体可通过适当选择和组合柱色谱例如亲和色谱、过滤、超滤、盐析、透析、sds-聚丙烯酰胺凝胶电泳、等电聚焦等无限制地进行分离和纯化(antibodies：a laboratory manual.ed harlow和david lane，cold spring harbor laboratory，1988)。用于亲和色谱的柱包括例如蛋白a柱和蛋白g柱。
[0854]
本文提供的α-突触核蛋白抗体可通过本领域已知的多种测定来鉴定、筛选或表征
其物理/化学特性和/或生物活性。
[0855]
在一个方面中，将本发明的抗体例如通过已知方法，例如elisa、facs、免疫荧光或免疫组织化学来测试其抗原结合活性。
[0856]
在另一个方面中，竞争测定可用于鉴定与本文所述的任何抗体竞争与聚集或病理性α-突触核蛋白结合的抗体。在某些实施方案中，这样的竞争性抗体与由本文所述抗体结合的相同或相似表位(例如，具有全部或部分重叠的线性或构象表位)结合。用于对与抗体结合的表位作图的一些详细示例性方法提供于morris(1996)
″
epitope mapping protocols，
″
in methods in molecular biology vol.66(humana press，totowa，nj)中。
[0857]
本发明还提供了免疫缀合物，其包含与一种或更多种治疗剂缀合的本文提供的α-突触核蛋白抗体，所述治疗剂例如化学治疗剂或药物、生长抑制剂、毒素(例如，蛋白质毒素，细菌、真菌、植物或动物来源的酶活性毒素，或其片段)、放射性同位素(即，放射性缀合物)、血脑屏障穿透部分或可检测的标记。
[0858]
本文中使用的“治疗(treatment)”(及其语法变体，例如“治疗(treat)”或“治疗(treating)”)是指试图改变被治疗个体的自然进程的临床干预，并且可用于预防或在临床病理进程期间进行。期望的治疗作用包括但不限于预防疾病或病症或异常的发生或复发、减轻症状、减轻疾病的任何直接或间接病理后果、预防转移、降低疾病进展速度、改善或缓解疾病状态，以及缓解或改善预后。在一些实施方案中，本发明的抗体用于延迟疾病的发展或者减缓疾病、病症或异常的进展。在一些特定实施方案中，本发明的结合分子用于预防、减缓、停止、保持和/或改善患有突触核蛋白病的对象的运动能力或运动缺陷、认知能力或认知缺陷、或行为障碍。在另一些特定实施方案中，本发明的结合分子用于改善运动能力，特别是面部表情、言语、眼运动功能障碍、静止时震颤、动作震颤、语调提高、手的快速交替运动、手指敲击、腿敏捷性、脚跟-胫测试、从椅子坐起、姿势、身体摇摆和/或步态；改善认知缺陷，特别是如通过moca(蒙特利尔认知评估(montreal cognitive assessment))或艾登布鲁克认知检查(addenbrookes cognitive examination)来测量的；和/或改善行为障碍，特别是使用npi量表，其中突触核蛋白病是多系统萎缩(multiple system atrophy，msa)。
[0859]
在另一个实施方案中，当突触核蛋白病是帕金森病、路易体痴呆(lbd；路易体痴呆(dlb)(“纯”路易体痴呆)、帕金森病痴呆(pdd))或弥漫性路易体病时，本发明的结合分子用于：(i)改善运动能力，特别是日常生活活动(与帕金森病有关的言语、流涎、吞咽、书写、切割食物和处理用具、穿衣、卫生、在床上翻身和调整床上用品、跌倒、步行时僵硬、步行、震颤、感觉不适)、运动检查(言语、面部表情、静止时震颤、手的动作或姿势性震颤、僵硬、手指敲击、手运动、手的快速交替运动、腿敏捷性、从椅子坐起、姿势、步态、姿势稳定性、身体运动迟缓和运动功能减退、运动障碍、临床波动)、有症状的直立位、反复跌倒和晕厥、和/或不明原因的短暂性丧失意识；和/或(ii)改善认知缺陷；和/或(iii)改善行为障碍，特别是行为和情绪(智力障碍、思维障碍、抑郁、积极性/主动性)、妄想、幻觉、激动/攻击性、抑郁/烦躁、焦虑、情感高涨/欣快、情感淡漠/冷漠、易激惹/不稳定性、运动障碍、夜间行为和/或食欲/进食、注意力缺陷、执行功能、视觉空间能力、幻视；和/或(iv)改善快速眼动(rem)睡眠障碍，特别是失眠、嗜睡。
[0860]
在一个实施方案中，提供了药物组合物，其包含作为活性成分的抗体、其抗原结合片段或其衍生物以及可药用载体和/或赋形剂。例如，抗体、其抗原结合片段或其衍生物可
视情况与可药用载体或介质(例如如无菌水或盐水溶液、植物油、乳化剂、混悬剂、表面活性剂、稳定剂、矫味剂、赋形剂、载剂、防腐剂和黏合剂)组合，并配制成药物制剂。载体的一些实例包括轻质无水硅酸、乳糖、结晶纤维素、甘露醇、淀粉、cannellose钙、羧甲基纤维素钠、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、聚乙烯醇缩醛二乙氨基乙酸酯、聚乙烯吡咯烷酮、明胶、中链脂肪酸甘油三酯、聚氧乙烯氢化蓖麻油60、蔗糖、羧甲基纤维素、玉米淀粉和无机盐。
[0861]
这些制剂中活性成分的量可在指定的剂量范围内视情况设置。
[0862]
在另一个实施方案中，本公开内容提供了产品，其包含至少(i)容器(例如，注射剂)；(ii)在容器内的包含作为活性成分的抗体、其抗原结合片段或其衍生物的药物组合物；以及(iii)指示根据所期望的给药方案施用抗体、其抗原结合片段或其衍生物的文件。另外，标记、注射器、注射针、药理学上可接受的介质、酒精棉布、膏药等可另外地视情况与该产品一起包装。例如，容器可以是瓶子、玻璃瓶或注射器，并且可由任何多种材料例如玻璃和塑料制成。容器包含药物组合物，并且具有例如用橡胶塞密封的出口。容器是与例如指示药物组合物用于预防或治疗选定病理状态的标记一起提供的。在一些情况下，该标记可描述抗体、其抗原结合片段或其衍生物与另外的药物组合使用的实施方案。
[0863]
本发明的抗体、免疫缀合物、药物组合物(和任何另外的治疗剂)可通过任何合适的方式施用，所述方式包括肠胃外、肺内和鼻内施用，并且如果期望用于局部治疗，包括病灶内、宫内或膀胱内施用。肠胃外输注包括肌内、静脉内、动脉内、腹膜内或皮下施用。给药可通过任何合适的途径，例如通过注射，例如静脉内或皮下注射，这部分地取决于施用是短暂的还是慢性的。本文考虑了多种给药方案，包括但不限于单次施用或在不同时间点多次施用、推注施用和脉冲输注。
[0864]
本发明的抗体、免疫缀合物、药物组合物可以以与良好医学实践一致的方式配制、给药和施用。在该上下文中考虑的因素包括：所治疗的特定疾病或病症或异常、所治疗的特定对象、个体患者的临床状况、疾病或病症或异常的原因、药剂的递送部位、施用方法、施用方案、以及医学实践者已知的其他因素。抗体或免疫缀合物不需要但任选地与目前用于预防或治疗所讨论的疾病或病症或异常的一种或更多种药剂一起配制。这样的其他药剂的有效量取决于存在于制剂中的抗体或免疫缀合物的量、疾病或病症或异常或治疗的类型，以及上述其他因素。这些通常以与如本文所述的相同的剂量和施用途径，或以经验/临床上确定为合适的任何剂量和任何途径使用。
[0865]
应当理解，任何上述制剂或治疗方法均可使用本发明的免疫缀合物和α-突触核蛋白抗体二者进行。
[0866]
在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸编码本文所述的抗体。
[0867]
在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：18。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：28。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：38。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：48。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：58。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋
白抗体的seq id no：68。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：78。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：98。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：108。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：118。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：288。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：298。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：148。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：158。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：168。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：178。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：188。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：198。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：208。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：218。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：228。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：238。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：248。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：258。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：268。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：278。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：308。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：318。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：328。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：338。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：348。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：358。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：368。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：378。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：388。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：398。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：408。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：418。在一些实施方案中，提供了
分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：428。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：438。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：448。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：458。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：468。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：478。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：488。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：498。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：508。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：518。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：528。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：538。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：548。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：558。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：568。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：578。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：588。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：598。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：608。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：618。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：628。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：638。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：648。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：658。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：668。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：678。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：688。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：698。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：708。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：718。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：728。
[0868]
在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：19。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包
含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：29。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：39。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：49。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：59。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：69。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：79。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：89。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：99。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：109。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：119。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：289。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：199。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：149。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：159。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：169。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：179。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：189。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：209。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：219。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：229。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：239。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：249。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：259。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：269。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：279。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：309。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：319。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：329。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：339。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：349。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：359。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：369。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：379。在一些实
施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：389。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：399。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：409。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：419。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：429。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：439。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：449。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：459。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：469。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：479。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：489。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：499。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：509。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：519。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：529。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：539。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：549。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：559。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：569。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：579。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：589。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：609。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：619。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：629。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：639。在一些实施方案中，提供了分离的核酸，其中所述分离的核酸包含编码α-突触核蛋白抗体的seq id no：649。
[0869]
在某些实施方案中，本文中提供的结合分子或抗体具有≤1μm、≤100nm、≤10nm、≤1nm、≤0.1nm、≤0.01nm或≤0.001nm(例如10-8
m或更低，例如10-8
m至10-13
m，例如10-9
m至10-13
m)的解离常数(kd)，特别是关于结合α-突触核蛋白，特别是聚集的α-突触核蛋白和/或病理性α-突触核蛋白。
[0870]
在某些实施方案中，本文中提供的结合分子或抗体具有≤1μm、≤100nm、≤10nm、≤1nm、≤0.1nm、≤0.01nm或≤0.001nm(例如10-8
m或更低，例如10-8
m至10-13
m，例如10-9
m至10-13
m)的解离常数(kd)，特别是关于结合病理性和/或聚集的α-突触核蛋白，包括但不限于
初原纤维、原纤维、寡聚体、路易体、路易神经突(lewy neurites)和/或胶质细胞胞质包涵体。
[0871]
在一个实施方案中，使用表面等离子体共振测定，使用或(biacore，inc.，piscataway，nj)在25℃下以-10响应单位(ru)用固定化抗原cm5芯片来测量kd。
[0872]
在一些实施方案中，提供了如本文中所述的本发明的抗体，特别是分离抗体，其结合人α-突触核蛋白，其中该抗体以小于100nm、小于10nm、小于1nm、小于200pm、小于100pm或小于10pm的kd结合聚集的α-突触核蛋白和/或病理性α-突触核蛋白。优选地，本发明的抗体以小于100nm、小于10nm、小于1nm、小于200pm、小于100pm或小于10pm的kd结合聚集的α-突触核蛋白和/或病理性α-突触核蛋白。
[0873]
本发明的结合分子，特别是抗体，可以优先于非聚集的α-突触核蛋白和/或非病理性α-突触核蛋白(例如单体α-突触核蛋白)而选择性地结合聚集的α-突触核蛋白和/或病理性α-突触核蛋白。这种选择性可以根据解离速率(dissociation(or“off”)rate)(kd)来测量。因此，本发明的结合分子，特别是抗体，可以表现出与聚集的α-突触核蛋白和/或病理性α-突触核蛋白(例如纤维状α-突触核蛋白)的比非聚集的α-突触核蛋白和/或非病理性α-突触核蛋白(例如单体α-突触核蛋白)更慢，优选显著更慢的解离速率(kd)。例如，本发明的结合分子，特别是抗体，可显示出与聚集的α-突触核蛋白和/或病理性α-突触核蛋白(例如纤维状α-突触核蛋白)的比非聚集α-突触核蛋白和/或非病理性α-突触核蛋白(如单体α-突触核蛋白)慢至少10倍，优选慢至少100倍，并且更优选慢至少1000倍的解离速率(kd)。这种选择性可以根据相对解离常数(kd)来测量。因此，本发明的结合分子，特别是抗体，可显示出关于聚集的α-突触核蛋白和/或病理性α-突触核蛋白(例如纤维状α-突触核蛋白)的比非聚集的α-突触核蛋白和/或非病理性α-突触核蛋白(例如单体α-突触核蛋白)更低，优选显著更低的解离常数(kd)。例如，本发明的结合分子，特别是抗体，可显示出与关于聚集的α-突触核蛋白和/或病理性α-突触核蛋白(例如纤维状α-突触核蛋白)的比非聚集α-突触核蛋白和/或非病理性α-突触核蛋白(例如单体α-突触核蛋白)低至少10倍，更优选低至少20倍，并且更优选低至少100倍的解离常数(kd)。kd和kd可以使用表面等离子体共振测定，使用或(biacore，inc.，piscataway，nj)在25℃下以-10响应单位(ru)用固定化抗原cm5芯片测得。具体方法在本文中的实施例部分中描述(参见“通过spr对α-突触核蛋白单体和α-突触核蛋白原纤维的亲和力测量”和“通过表面等离子体共振(spr)表征aci-7067-1101c8-ab2人源化变体”)，其可根据本发明作为参考方法应用。
[0874]
本发明的结合分子，特别是抗体，可以以≤1μm、≤100nm、≤10nm、≤1nm或≤0.1nm的ic
50
抑制和/或延迟接种的和/或自发的α-突触核蛋白聚集。ic
50
可以通过测量相对于不存在抗体的情况作为抗体浓度的函数形成的从头α-突触核蛋白聚集体的百分比来获得。可以绘制剂量-响应曲线并使用等式6获得ic
50
值。参见图12和描述体外细胞模型的实施例，其方法可以在做必要的更改后应用。或者，可以绘制剂量-响应曲线并使用等式7获得ic
50
值。参见图13和描述小鼠初级皮质神经元实验的实施例，其方法可以在做必要的更改后应用。
[0875]
本发明的结合分子，特别是抗体，可以抑制和/或延迟接种的和/或自发的α-突触核蛋白聚集，如通过聚集半衰期(t
1/2
)的百分比变化所定量的。用于测量聚集半衰期的合适
方法在本文中提供，参见实施例“接种的α-突触核蛋白聚集的抑制或延迟”，其描述可以在做必要的更改后应用。本发明的抗体的t
1/2
值显著提高，例如至少提高10％，如针对在不存在抗体的情况下的聚集归一化的。
[0876]
在一些实施方案中，提供了抗体、其抗原结合片段或其衍生物，其与人α-突触核蛋白在包含在seq id no：1中的表位中结合。在一些具体实施方案中，提供了抗体，其与人α-突触核蛋白在第36至40位氨基酸残基(seq id no：2)中结合。在一些具体实施方案中，提供了抗体，其与人α-突触核蛋白在第1至15位氨基酸残基(seq id no：121)中结合。在一些具体实施方案中，提供了抗体，其与人α-突触核蛋白在第51至57位氨基酸残基(seq id no：3)中结合。在一些具体实施方案中，提供了抗体，其与人α-突触核蛋白在第51至58位氨基酸残基(seq id no：136)中结合。在一些具体实施方案中，提供了抗体，其与人α-突触核蛋白在第65至74位氨基酸残基(seq id no：4)中结合。在一些具体实施方案中，提供了抗体，其与人α-突触核蛋白在第65至81位氨基酸残基(seq id no：5)中结合。在一些具体实施方案中，提供了抗体，其与人α-突触核蛋白在第82至96位氨基酸残基(seq id no：130)中结合。在一些具体实施方案中，提供了抗体，其与人α-突触核蛋白在第91至105位氨基酸残基(seq id no：131)中结合。在一些具体实施方案中，提供了抗体，其与人α-突触核蛋白在seq id no：1的第93至95位氨基酸残基(gfv)中结合。在一些具体实施方案中，提供了抗体，其与人α-突触核蛋白在第118至132位氨基酸残基(seq id no：134)中结合。在一些具体实施方案中，提供了抗体，其与人α-突触核蛋白在第124至131位氨基酸残基(seq id no：7)中结合。在一些具体实施方案中，提供了抗体，其与人α-突触核蛋白在第127至140位氨基酸残基(seq id no：135)中结合。在一些具体实施方案中，提供了抗体，其与人α-突触核蛋白在第10至24位氨基酸残基(seq id no：122)中结合。在一些具体实施方案中，提供了抗体，其与人α-突触核蛋白在第128至135位氨基酸残基(seq id no：8)中结合。在一些具体实施方案中，提供了抗体，其与人α-突触核蛋白在第131至140位氨基酸残基(seq id no：9)中结合。在一些具体实施方案中，提供了抗体，其与人α-突触核蛋白在第28至42位氨基酸残基(seq id no：124)中结合。在一些具体实施方案中，提供了抗体，其与人α-突触核蛋白在第37至51位氨基酸残基(seq id no：125)中结合。在一些具体实施方案中，提供了抗体，其与人α-突触核蛋白在第100至114位氨基酸残基(seq id no：132)中结合。在一些具体实施方案中，提供了抗体，其与人α-突触核蛋白在第109至123位氨基酸残基(seq id no：133)中结合。在一些具体实施方案中，提供了抗体，其与人α-突触核蛋白在第81至120位氨基酸残基(seq id no：137)中结合。在一些实施方案中，提供了抗体，其与seq id no：1的人α-突触核蛋白的氨基酸残基中的非线性表位结合。更优选地，本发明的抗原结合分子与seq id no：1的人α-突触核蛋白的第124至131位(seq id no：7)、第128至135位(seq id no：8)或第131至140位(seq id no：9)氨基酸残基中的表位结合。甚至更优选地，本发明的抗原结合分子可以与包含seq id no：1的人α-突触核蛋白的第126和127位氨基酸作为结合的关键残基的表位结合。
[0877]
在一些实施方案中，提供了与人α-突触核蛋白结合的分离抗体，其中该抗体结合胞外或胞质α-突触核蛋白。在一些实施方案中，与单体或聚集的α-突触核蛋白结合的分离抗体。在本发明的一些实施方案中，单体、寡聚或聚集的α-突触核蛋白是翻译后修饰的，例如，是磷酸化或亚硝基化的。本发明还涉及包含如本文中所述的结合分子，特别是本发明的抗体(包括α-突触核蛋白抗体片段及衍生物)的组合物，并涉及在预防、诊断或治疗突触核
蛋白病中使用这样的组合物的治疗和诊断方法，其中向有此需要的患者施用有效量的结合分子。
[0878]
在某些实施方案中，本文中所述的α-突触核蛋白抗体可用于检测生物样品中α-突触核蛋白的存在。这样的方法(其具体实例在本文中描述)通常使用分离样品在体外进行。然而，在一些情况下，它们可以在适当的情况下在体内进行。在一些具体实施方案中，本文中所述的α-突触核蛋白抗体可用于检测生物样品中的聚集的和/或病理性α-突触核蛋白(包括但不限于路易体、路易神经突和/或胶质细胞胞质包涵体)的存在。如本文中所用，术语“检测”涵盖定量或定性检测。生物样品(在所有依赖于这样的检测的方法中)通常是来自哺乳动物对象，特别是人对象的临床样品。在某些实施方案中，生物样品包括细胞或组织，例如脑脊液(csf)、脑的细胞或组织(例如，脑皮质或海马)或血液。在一些实施方案中，生物样品是脑脊液。
[0879]
在一些实施方案中，提供了在诊断或检测方法中使用的本文中所述的α-突触核蛋白抗体。在另一方面中，提供了检测生物样品中α-突触核蛋白存在的方法。在某些实施方案中，该方法包括在允许α-突触核蛋白抗体与α-突触核蛋白结合的条件下使生物样品与如本文中所述的α-突触核蛋白抗体接触，并检测α-突触核蛋白抗体与α-突触核蛋白之间是否形成复合体。这样的方法可以是体外和/或体内方法。此外，可以将受试生物样品中的α-突触核蛋白抗体与α-突触核蛋白之间形成的复合体与对照生物样品(例如，来自一个或更多个健康对象的生物样品)中形成的复合体进行比较。受试生物样品中α-突触核蛋白抗体与α-突触核蛋白之间形成的复合体的量也可以被量化并与对照生物样品(例如，来自一个或更多个健康对象的生物样品)中形成的复合体的量或已知在健康对象中形成的复合体的平均量进行比较。
[0880]
在一些实施方案中，本文中所述的α-突触核蛋白抗体用于选择适合治疗的对象，所述治疗包括用α-突触核蛋白抗体进行的治疗，例如其中α-突触核蛋白是用于选择患者的一种生物标志物。例如，在一些实施方案中，α-突触核蛋白抗体用于检测：对象是否患有与α-突触核蛋白聚集体相关的疾病、病症或异常，所述α-突触核蛋白聚集体包括但不限于路易体、路易神经突和/或胶质细胞胞质包涵体；或者对象是否处于与α-突触核蛋白聚集体相关的疾病或病症或异常的高风险中(或易感于所述疾病或病症或异常)，所述α-突触核蛋白聚集体包括但不限于路易体、路易神经突和/或胶质细胞胞质包涵体。
[0881]
可以使用本发明的抗体诊断的示例性疾病或病症或异常包括与α-突触核蛋白聚集体相关的疾病或病症或异常，所述α-突触核蛋白聚集体包括但不限于路易体、路易神经突和/或胶质细胞胞质包涵体，其表现在于认知缺陷或行为障碍，或者运动缺陷或障碍，例如运动徐缓、强直、静止性震颤或姿势不稳。具体地，可使用本发明的抗体、其抗原结合片段或其衍生物诊断的疾病或病症或异常包括突触核蛋白病，例如帕金森病、多系统萎缩、路易体痴呆(lbd；路易体痴呆(dlb))(“纯”路易体痴呆)、帕金森病痴呆(pdd))或弥漫性路易体病。
[0882]
可以使用本发明的抗体预防或治疗的示例性疾病或病症或异常包括与α-突触核蛋白聚集体相关的疾病、障碍或异常，所述α-突触核蛋白聚集体包括但不限于路易体、路易神经突和/或胶质细胞胞质包涵体，其表现在于认知缺陷或行为障碍，或者运动缺陷或障碍，例如运动徐缓、强直、静止性震颤或姿势不稳。具体地，可使用本发明的抗体、其抗原结
合片段或其衍生物诊断的疾病或病症或异常包括突触核蛋白病，例如帕金森病、多系统萎缩、路易体痴呆(lbd；路易体痴呆(dlb))(“纯”路易体痴呆)、帕金森病痴呆(pdd))或弥漫性路易体病。
[0883]
在一些实施方案中，提供了免疫缀合物，其中所述免疫缀合物包含本文中所述的分离抗体以及治疗剂。
[0884]
在一些实施方案中，提供了经标记抗体，其包含本文中所述的抗体以及可检测标记。
[0885]
在一些实施方案中，本发明的α-突触核蛋白结合分子与可检测标记连接。
[0886]
在一些实施方案中，α-突触核蛋白结合分子是免疫缀合物的一部分，在所述免疫缀合物中α-突触核蛋白结合分子与另一种合适的治疗剂共价连接。
[0887]
在一些实施方案中，α-突触核蛋白结合分子是包含α-突触核蛋白结合分子的药物组合物的一部分，或其中α-突触核蛋白结合分子与另一种合适的治疗剂共价连接的免疫缀合物的一部分，或者包含α-突触核蛋白特异性结合分子与可药用载体和/或赋形剂的组合的组合物的一部分。
[0888]
在一些实施方案中，α-突触核蛋白结合分子是诊断试剂盒的一部分，所述诊断试剂盒包含α-突触核蛋白特异性结合分子，或其中α-突触核蛋白特异性结合分子与另一种合适的治疗剂共价连接的免疫缀合物，或者包含α-突触核蛋白特异性结合分子和α-突触核蛋白激动剂和同源分子或者作为替选地其拮抗剂的组合物。
[0889]
在一些实施方案中，α-突触核蛋白结合分子被用于免疫诊断方法中，所述方法用于预防、诊断与α-突触核蛋白聚集体相关的疾病或病症或异常、减轻所述疾病或病症或异常的症状，或者治疗所述疾病或病症或异常，所述α-突触核蛋白聚集体包括但不限于路易体、路易神经突和/或胶质细胞胞质包涵体。
[0890]
在一些实施方案中，α-突触核蛋白结合分子是用于预防突触核蛋白病、减轻与突触核蛋白病相关的症状或治疗突触核蛋白病的免疫治疗方法的一部分，其中向有此需要的患者施用有效量的α-突触核蛋白结合分子或其中α-突触核蛋白结合分子与另一种合适的治疗剂共价连接的免疫缀合物，或者包含α-突触核蛋白结合分子的组合物。
[0891]
在一些实施方案中，将α-突触核蛋白结合分子，或其中α-突触核蛋白结合分子与另一种合适的治疗剂共价连接的免疫缀合物，或包含α-突触核蛋白结合分子的组合物施用于有此需要的患者，用于诊断、预防、减轻、延迟、抑制或治疗与α-突触核蛋白聚集体相关的疾病、病症或异常，例如帕金森病、多系统萎缩、路易体痴呆(lbd；路易体痴呆(dlb)(“纯”路易体痴呆)、帕金森病痴呆(pdd))或弥漫性路易体病。
[0892]
在一些实施方案中，将α-突触核蛋白结合分子，或其中α-突触核蛋白特异性结合分子与另一种合适的治疗剂共价连接的免疫缀合物，或者包含α-突触核蛋白结合分子和α-突触核蛋白激动剂和同源分子或者作为替代地其拮抗剂的组合物施用于有此需要的患者，用于诊断或监测与α-突触核蛋白聚集体相关的疾病、病症或异常的方法中，所述疾病、病症或异常例如帕金森病(散发性、家族性伴α-突触核蛋白突变、家族性伴除α-突触核蛋白之外的突变、纯自主神经衰竭和路易体吞咽困难)、路易体痴呆(lbd；路易体痴呆(dlb)(“纯”路易体痴呆)、帕金森病痴呆(pdd))、弥漫性路易体病(dlbd)、散发性阿尔茨海默病、家族性阿尔茨海默病伴app突变、家族性阿尔茨海默病伴ps-1、ps-2或其他突变、家族性英国型痴呆、
阿尔茨海默病路易体变体、多系统萎缩(夏-德综合征、纹状体黑质变性和橄榄体脑桥小脑萎缩)、包涵体肌炎、创伤性脑损伤、慢性创伤性脑病、拳击性痴呆、tau蛋白病(皮克病、额颞痴呆、进行性核上性麻痹、皮质基底节变性、17号染色体连锁额颞痴呆伴帕金森综合征和尼曼-皮克c1型病)、唐氏综合征、克罗伊茨费尔特-雅各布病、亨廷顿病、运动神经元病、肌萎缩侧索硬化(散发性、家族性和关岛型als痴呆复合征)、神经轴索营养不良、神经退行性病变伴脑铁沉积1型(哈勒沃登-施帕茨综合征)、朊病毒病、格斯特曼-施特劳斯勒尔-沙因克尔病、共济失调毛细血管扩张症、梅热综合征、亚急性硬化性全脑炎、戈谢病、克拉伯病以及其他的溶酶体贮积症(包括kufor-rakeb综合征和sanfilippo综合征)或快速眼动(rem)睡眠行为障碍。
[0893]
在一些实施方案中，α-突触核蛋白结合分子被用于以下方法中：用于诊断症状前疾病或病症或异常的方法，或用于监测疾病或病症或异常进展以及药物的治疗效力的方法，或用于预测响应性的方法，或用于选择可能对用α-突触核蛋白结合分子的治疗有响应的患者的方法。所述方法优选使用人血液或尿样品进行。最优选地，该方法包括基于elisa或表面适应的测定。
[0894]
在一些实施方案中，α-突触核蛋白结合分子被用于其中使本发明的α-突触核蛋白结合分子与样品(例如血液、脑脊液或脑组织)接触以检测、诊断或监测帕金森病、多系统萎缩、路易体痴呆(lbd；路易体痴呆(dlb)(“纯”路易体痴呆)、帕金森病痴呆(pdd))或弥漫性路易体病的方法中。
[0895]
在一些实施方案中，α-突触核蛋白结合分子被用于其中使本发明的α-突触核蛋白特异性结合分子与样品(例如血液、脑脊液或脑组织)接触以检测、诊断与α-突触核蛋白聚集体相关的疾病或病症或异常的方法中，所述疾病或病症或异常例如帕金森病(散发性、家族性伴α-突触核蛋白突变、家族性伴除α-突触核蛋白之外的突变、纯自主神经衰竭和路易体吞咽困难)、路易体痴呆(lbd；路易体痴呆(dlb)(“纯”路易体痴呆)、帕金森病痴呆(pdd))、弥漫性路易体病(dlbd)、散发性阿尔茨海默病、家族性阿尔茨海默病伴app突变、家族性阿尔茨海默病伴ps-1、ps-2或其他突变、家族性英国型痴呆、阿尔茨海默病路易体变体、多系统萎缩(夏-德综合征、纹状体黑质变性和橄榄体脑桥小脑萎缩)、包涵体肌炎、创伤性脑损伤、慢性创伤性脑病、拳击性痴呆、tau蛋白病(皮克病、额颞痴呆、进行性核上性麻痹、皮质基底节变性、17号染色体连锁额颞痴呆伴帕金森综合征和尼曼-皮克c1型病)、唐氏综合征、克罗伊茨费尔特-雅各布病、亨廷顿病、运动神经元病、肌萎缩侧索硬化(散发性、家族性和关岛型als痴呆复合征)、神经轴索营养不良、神经退行性病变伴脑铁沉积1型(哈勒沃登-施帕茨综合征)、朊病毒病、格斯特曼-施特劳斯勒尔-沙因克尔病、共济失调毛细血管扩张症、梅热综合征、亚急性硬化性全脑炎、戈谢病、克拉伯病以及其他的溶酶体贮积症(包括kufor-rakeb综合征和sanfilippo综合征)或快速眼动(rem)睡眠行为障碍。
[0896]
在一些实施方案中，将α-突触核蛋白结合分子，或其中α-突触核蛋白结合分子与另一种合适的治疗剂共价连接的免疫缀合物，或包含α-突触核蛋白结合分子和α-突触核蛋白激动剂和同源分子或者作为替代地其拮抗剂的组合物施用于有此需要的患者，用于预防、减轻或治疗与α-突触核蛋白聚集体相关的疾病、病症或异常或突触核蛋白病或帕金森病、多系统萎缩、路易体痴呆(lbd；路易体痴呆(dlb)(“纯”路易体痴呆)、帕金森病痴呆(pdd))或弥漫性路易体病。
[0897]
在一些实施方案中，将α-突触核蛋白结合分子，或其中α-突触核蛋白结合分子与另一种合适的治疗剂共价连接的免疫缀合物，或包含α-突触核蛋白结合分子和α-突触核蛋白激动剂和同源分子或者作为替代地其拮抗剂的组合物施用于有此需要的患者，用于治疗与α-突触核蛋白聚集体相关的疾病或病症或异常，所述疾病或病症或异常例如帕金森病(散发性、家族性伴α-突触核蛋白突变、家族性伴除α-突触核蛋白之外的突变、纯自主神经衰竭和路易体吞咽困难)、路易体痴呆(lbd；路易体痴呆(dlb)(“纯”路易体痴呆)、帕金森病痴呆(pdd))、散发性阿尔茨海默病、家族性阿尔茨海默病伴app突变、家族性阿尔茨海默病伴ps-1、ps-2或其他突变、家族性英国型痴呆、阿尔茨海默病路易体变体、多系统萎缩(夏-德综合征、纹状体黑质变性和橄榄体脑桥小脑萎缩)、包涵体肌炎、创伤性脑损伤、慢性创伤性脑病、拳击性痴呆、tau蛋白病(皮克病、额颞痴呆、进行性核上性麻痹、皮质基底节变性、17号染色体连锁额颞痴呆伴帕金森综合征和尼曼-皮克c1型病)、唐氏综合征、克罗伊茨费尔特-雅各布病、亨廷顿病、运动神经元病、肌萎缩侧索硬化(散发性、家族性和关岛型als痴呆复合征)、神经轴索营养不良、神经退行性病变伴脑铁沉积1型(哈勒沃登-施帕茨综合征)、朊病毒病、格斯特曼-施特劳斯勒尔-沙因克尔病、共济失调毛细血管扩张症、梅热综合征、亚急性硬化性全脑炎、戈谢病、克拉伯病以及其他的溶酶体贮积症(包括kufor-rakeb综合征和sanfilippo综合征)或快速眼动(rem)睡眠行为障碍。
[0898]
在一些实施方案中，将α-突触核蛋白结合分子，或其中α-突触核蛋白结合分子与另一种合适的治疗剂共价连接的免疫缀合物，或包含α-突触核蛋白特异性结合分子和α-突触核蛋白激动剂和同源分子或者作为替代地其拮抗剂的组合物施用于有此需要的患者，用于制造用于治疗以下的药物：与α-突触核蛋白聚集体相关的疾病、病症或异常、或突触核蛋白病或帕金森病、多系统萎缩、路易体痴呆(lbd；路易体痴呆(dlb)(“纯”路易体痴呆)、帕金森病痴呆(pdd))或弥漫性路易体病。
[0899]
在一些实施方案中，提供了用作药物的α-突触核蛋白抗体或免疫缀合物。在一些实施方案中，提供了用于治疗方法中的α-突触核蛋白抗体或免疫缀合物。在某些实施方案中，提供了用于预防、诊断和/或治疗突触核蛋白病的抗α-突触核蛋白抗体或免疫缀合物。在本发明的一个优选实施方案中，提供了用于预防、诊断和/或治疗与α-突触核蛋白聚集体相关的疾病、病症或异常的α-突触核蛋白抗体或免疫缀合物，所述疾病、病症或异常例如帕金森病、多系统萎缩、路易体痴呆(lbd；路易体痴呆(dlb)(“纯”路易体痴呆)、帕金森病痴呆(pdd))或弥漫性路易体病。
[0900]
在一些实施方案中，本发明描述了α-突触核蛋白抗体或免疫缀合物在制造或制备药物中的用途。在一个这样的实施方案中，该方法还包括向个体施用有效量的至少一种另外的治疗剂。
[0901]
本发明的抗体或免疫缀合物可在治疗中单独使用或与其他药剂组合使用。例如，本发明的抗体或免疫缀合物可以与至少一种另外的治疗剂共同施用。
[0902]
在本发明的另一方面中，提供了包含可用于治疗、预防和/或诊断上述疾病或病症或异常的材料的制品。制品包括容器和在容器上或与容器相关联的标签或包装插页。合适的容器包括例如瓶子、小瓶、注射器、iv溶液袋等。容器可以由多种材料形成，例如玻璃或塑料。容器容纳组合物并且可以具有无菌进入口(例如容器可以是静脉内溶液袋，或具有可被皮下注射针刺穿的塞子的小瓶)，所述组合物本身即有效或与另一种组合物组合而有效以
用于治疗、预防和/或诊断疾病、病症或异常。组合物中的至少一种活性剂是本发明的抗体或免疫缀合物。标签或包装插页表明该组合物用于治疗所选病症。此外，制品可包括(a)其中装有组合物的第一容器，其中该组合物包含本发明的抗体或免疫缀合物；以及(b)其中装有组合物的第二容器，其中该组合物包含另外的治疗剂。本发明的该实施方案中的制品可还包括包装插页，其指示该组合物可用于治疗特定病症。作为替代或补充，制品还可包括第二(或第三)容器，其包含可药用缓冲剂，例如抑菌注射用水(bwfi)、磷酸盐缓冲盐水、林格溶液或右旋糖溶液。从商业和用户的角度来看，其还可以包括其他所需的材料，包括其他缓冲剂、稀释剂、过滤器、针头和注射器。
[0903]
本发明的方法可包括施用至少一种另外的治疗，优选其中所述另外的治疗选自但不限于神经药物，左旋多巴(例如)、儿茶酚-o-甲基转移酶抑制剂(例如恩他卡朋、托卡朋)、多巴胺激动剂、单胺氧化酶b抑制剂(例如雷沙吉兰、司来吉兰)金刚烷胺、抗胆碱能药物、抗abeta抗体、抗tau抗体、tau聚集抑制剂、β-淀粉样蛋白聚集抑制剂、抗bace1抗体和bace1抑制剂。
[0904]
本发明还涉及检测聚集的和/或病理性α-突触核蛋白(包括但不限于路易神经突、路易体和/或胶质细胞胞质包涵体)的方法，其包括使样品与本发明的结合分子接触，优选地其中样品是脑样品、脑脊液样品、尿样品或血液样品。
[0905]
在一些实施方案中，本发明包括：如本文中所述的本发明的α-突触核蛋白结合分子，特别是抗体，其结合聚集的和/或病理性α-突触核蛋白；以及这些分子用于诊断、预防、减轻或治疗与α-突触核蛋白聚集体相关的疾病、病症或异常的用途，所述疾病、病症或异常例如帕金森病、多系统萎缩、路易体痴呆(lbd；路易体痴呆(dlb)(“纯”路易体痴呆)、帕金森病痴呆(pdd))或弥漫性路易体疾病。
[0906]
在另一个实施方案中，施用对α-突触核蛋白具有特异性的如本文中所述的本发明的结合分子，特别是抗体，以预防、减轻或治疗与α-突触核蛋白聚集体相关的疾病、病症或异常，所述疾病、病症或异常选自帕金森病、多系统萎缩、路易体痴呆(lbd；路易体痴呆(dlb)(“纯”路易体痴呆)、帕金森病痴呆(pdd))和弥漫性路易体病。
[0907]
在另一个实施方案中，使结合聚集的和/或病理性α-突触核蛋白的如本文中所述的结合分子，特别是抗体或其抗原结合片段，与样品接触以检测、诊断或监测与α-突触核蛋白聚集体相关的疾病、病症或异常，所述疾病、病症或异常选自帕金森病(散发性、家族性伴α-突触核蛋白突变、家族性伴除α-突触核蛋白之外的突变、纯自主神经衰竭和路易体吞咽困难)、路易体痴呆(lbd；路易体痴呆(dlb)(“纯”路易体痴呆)、帕金森病痴呆(pdd))、弥漫性路易体病(dlbd)、散发性阿尔茨海默病、家族性阿尔茨海默病伴app突变、家族性阿尔茨海默病伴ps-1、ps-2或其他突变、家族性英国型痴呆、阿尔茨海默病路易体变体、多系统萎缩(夏-德综合征、纹状体黑质变性和橄榄体脑桥小脑萎缩)、包涵体肌炎、创伤性脑损伤、慢性创伤性脑病、拳击性痴呆、tau蛋白病(皮克病、额颞痴呆、进行性核上性麻痹、皮质基底节变性、17号染色体连锁额颞痴呆伴帕金森综合征和尼曼-皮克c1型病)、唐氏综合征、克罗伊茨费尔特-雅各布病、亨廷顿病、运动神经元病、肌萎缩侧索硬化(散发性、家族性和关岛型als痴呆复合征)、神经轴索营养不良、神经退行性病变伴脑铁沉积1型(哈勒沃登-施帕茨综合征)、朊病毒病、格斯特曼-施特劳斯勒尔-沙因克尔病、共济失调毛细血管扩张症、梅热综合征、亚急性硬化性全脑炎、戈谢病、克拉伯病以及其他的溶酶体贮积症(包括kufor-rakeb
综合征和sanfilippo综合征)或快速眼动(rem)睡眠行为障碍。
[0908]
本发明还涉及用于评价α-突触核蛋白结合分子抑制和/或延迟接种的和/或自发的α-突触核蛋白聚集的能力的方法，其包括以下步骤：使α-突触核蛋白结合分子与α-突触核蛋白聚集体(种子)接触；允许α-突触核蛋白结合分子与α-突触核蛋白聚集体结合，以形成免疫复合体；向免疫复合体添加α-突触核蛋白单体蛋白和可检测染料，特别是荧光染料；以及确定相对于不存在结合分子情况下的接种的聚集而言达到可检测染料的半最大信号，特别是荧光染料的信号的时间。在一个作为替代或补充的实施方案中，用于评价α-突触核蛋白结合分子抑制和/或延迟接种的和/或自发的α-突触核蛋白聚集的能力的方法可以包括以下步骤：使α-突触核蛋白结合分子与α-突触核蛋白聚集体(种子)接触；允许α-突触核蛋白结合分子与α-突触核蛋白聚集体结合，以形成免疫复合体；向免疫复合体添加α-突触核蛋白单体蛋白和可检测染料，特别是荧光染料；以及确定达到可检测染料的半最大信号，特别是荧光染料的信号的时间，其中在结合分子的存在下达到可检测染料的半最大信号的时间相对于不存在结合分子的情况下的接种的聚集的提高表明α-突触核蛋白结合分子能够抑制和/或延迟接种的和/或自发的α-突触核蛋白聚集。在另一个作为替代或补充的实施方案中，用于评价α-突触核蛋白结合分子抑制和/或延迟接种的和/或自发的α-突触核蛋白聚集的能力的方法可以包括以下步骤：使α-突触核蛋白结合分子与α-突触核蛋白聚集体(种子)接触；允许α-突触核蛋白结合分子与α-突触核蛋白聚集体结合，以形成免疫复合体；向免疫复合体添加α-突触核蛋白单体蛋白和可检测染料，特别是荧光染料；以及确定达到可检测染料的半最大信号，特别是荧光染料的信号的时间，并且检测在结合分子的存在下达到可检测染料的半最大信号的时间相对于不存在结合分子的情况下的接种的聚集的提高，表明α-突触核蛋白结合分子抑制和/或延迟接种的和/或自发的α-突触核蛋白聚集。在又一作为替代或补充的实施方案中，用于评价α-突触核蛋白结合分子抑制和/或延迟接种的和/或自发的α-突触核蛋白聚集的能力的方法可以包括以下步骤：使α-突触核蛋白结合分子与α-突触核蛋白聚集体(种子)接触；允许α-突触核蛋白结合分子与α-突触核蛋白聚集体结合，以形成免疫复合体；向免疫复合体添加α-突触核蛋白单体蛋白和可检测染料，特别是荧光染料；以及测量在α-突触核蛋白结合分子的存在下达到可检测染料的半最大信号的时间相对于不存在结合分子的情况下的接种的聚集的提高，作为结合分子具有抑制/或延迟接种的和/或自发的α-突触核蛋白聚集的能力的指示。
[0909]
本发明还涉及用于筛选能够抑制和/或延迟接种的和/或白发的α-突触核蛋白聚集的α-突触核蛋白结合分子的方法，其包括以下步骤：使α-突触核蛋白结合分子与α-突触核蛋白聚集体(种子)接触；允许α-突触核蛋白结合分子与α-突触核蛋白聚集体结合，以形成免疫复合体；向免疫复合体添加α-突触核蛋白单体蛋白和可检测染料，特别是荧光染料；以及基于在α-突触核蛋白结合分子的不存在和存在下确定的可检测染料，特别是荧光染料的信号，选择能够抑制和/或延迟接种的和/或白发的α-突触核蛋白聚集的α-突触核蛋白结合分子。
[0910]
本文中提供的筛选或评价方法还可包括提供待筛选/评价的α-突触核蛋白结合分子的步骤。结合分子可以例如以文库，特别是抗体文库的形式提供。技术人员熟知用于提供结合分子文库，特别是抗体文库的方法。或者，可以在评价/筛选之前从商业上获得文库。
[0911]
本发明还涉及用于筛选α-突触核蛋白结合分子抑制和/或延迟接种的和/或自发
的α-突触核蛋白聚集的能力的体外测定，所述测定包括以下步骤：使α-突触核蛋白结合分子与α-突触核蛋白聚集体(种子)接触；允许α-突触核蛋白结合分子与α-突触核蛋白聚集体结合，以形成免疫复合体；向免疫复合体添加α-突触核蛋白单体蛋白和可检测染料，特别是荧光染料；以及基于在α-突触核蛋白结合分子的不存在和存在下确定的可检测染料，特别是荧光染料的信号，选择能够抑制和/或延迟接种的和/或自发的α-突触核蛋白聚集的α-突触核蛋白结合分子。在一个作为替代或补充的实施方案中，本发明涉及用于评价α-突触核蛋白结合分子抑制和/或延迟接种的和/或自发的α-突触核蛋白聚集的能力的体外测定，所述测定包括以下步骤：使α-突触核蛋白结合分子与α-突触核蛋白聚集体(种子)接触；允许α-突触核蛋白结合分子与α-突触核蛋白聚集体结合，以形成免疫复合体；向免疫复合体添加α-突触核蛋白单体蛋白和可检测染料，特别是荧光染料；以及确定达到可检测染料的半最大信号，特别是荧光染料的信号的时间，其中在结合分子的存在下达到可检测染料的半最大信号的时间相对于不存在结合分子的情况下的接种的聚集的提高表明α-突触核蛋白结合分子能够抑制和/或延迟接种的和/或自发的α-突触核蛋白聚集。在一个具体实施方案中，荧光染料是硫磺素。
[0912]
本发明还涉及用于筛选或评价α-突触核蛋白结合分子，特别是抗体的试剂盒。这样的试剂盒可包含用于执行本文中提供的方法和/或测定的所有必要组分，例如如缓冲剂、可检测染料、实验室设备、反应容器、说明书等。
[0913]
本发明还涉及用于预防、减轻或治疗与α-突触核蛋白，特别是病理性α-突触核蛋白和/或聚集的α-突触核蛋白相关的疾病、病症和/或异常的方法，所述方法包括向有此需要的对象施用有效量的本发明的α-突触核蛋白结合分子，特别是抗体。
附图说明
[0914]
图1：抗体与人全长重组α-突触核蛋白的结合。使用间接elisa确定来源于稳定杂交瘤克隆的抗体与重组全长α-突触核蛋白的结合。抗体从1μg/ml稀释至0.0005μg/ml。结果以光密度(optical density，o.d.)表示，示出了两个技术重复的平均值
±
sem。商业抗体syn1用作阳性对照。
[0915]
图2.α-突触核蛋白的表位作图。使用间接elisa针对覆盖人α-突触核蛋白1至140aa的整个序列的15聚体肽的文库确定来源于稳定杂交瘤克隆的抗体的表位作图。(a)1至69aa的肽和全长α-突触核蛋白的结果。(b)64至140aa的肽和全长α-突触核蛋白的结果。结果以光密度(o.d.)表示。每条棒代表单独抗体的数据。α-突触核蛋白的氨基酸序列如表3所示。
[0916]
图3：mab对接种的a-syn聚集中聚集半衰期的影响。(a)在3.28μm的指定mab存在下来自体外α-突触核蛋白聚集的τ
1/2
值相对于无mab对照的变化。误差棒代表经计算的sem。使用单因素anova(dunnett多重比较检验)相对于无抗体(无mab)情况下的聚集来确定显著性(n.s.不显著；(*)p＜0.033；(***)p＜0.001)。(b)绘制在指定mab存在下接种的聚集的τ
1/2
值相对于不存在抗体情况下的百分比提高。误差棒代表误差的传播(等式5)。使用单因素anova(dunnett多重比较检验)相对于具有igg2a对照ab情况下的聚集来确定显著性(n.s.不显著；(*)p＜0.033；(***)p＜0.001)。
[0917]
图4：α-突触核蛋白抗体对单体或纤维状α-突触核蛋白的响应的单循环动力学传
感图。(a)来自aci-7067-1101c8-ab2单体α-突触核蛋白的单循环动力学的传感图(黑色迹线)。(b)来自aci-7067-1113d10-ab1单体α-突触核蛋白的单循环动力学的传感图(黑色迹线)。(c)来自aci-7067-1101c8-ab2纤维状α-突触核蛋白的单循环动力学的传感图(黑色迹线)。(d)来自aci-7067-1113d10-ab1纤维状α-突触核蛋白的单循环动力学的传感图(黑色迹线)。使用同质朗缪尔模型(langmuir model)的1∶1结合拟合显示为重叠(灰色迹线)。
[0918]
图5：α-突触核蛋白抗体在来自pd和msa病例的组织中的靶标结合。用α-突触核蛋白抗体进行免疫染色以用于检测(a)来自pd杏仁核的脑组织和(b)msa病例的延髓中的病理性α-突触核蛋白聚集体的代表性图像。识别在ser129处磷酸化的α-突触核蛋白的抗体(psyn)被用作检测病理性聚集和磷酸化α-突触核蛋白的对照。
[0919]
图6：α-突触核蛋白的表位作图。使用间接elisa针对覆盖人α-突触核蛋白1至140aa的整个序列的15聚体肽的文库确定来源于稳定杂交瘤克隆的抗体的表位作图。(a)1至69aa的肽和全长α-突触核蛋白的结果。(b)64至140aa的肽和全长α-突触核蛋白的结果。结果以光密度(o.d.)表示。每条棒代表单独抗体的数据。α-突触核蛋白的氨基酸序列如表3所示。
[0920]
图7：α-突触核蛋白抗体(mab)对接种的a-syn聚集中的聚集半衰期的影响。(a)在3.28μm的指定mab存在下来白体外α-突触核蛋白聚集的τ
1/2
值相对于无mab对照的变化。误差棒代表经计算的sem。使用单因素anova(dunnett多重比较检验)相对于无抗体(无mab)情况下的聚集来确定显著性((****)p＜0.0001)。(b)绘制在指定mab存在下接种的聚集的τ
1/2
值相对于不存在抗体情况下的百分比提高。误差棒代表误差的传播(等式5)。使用单因素anova(dunnett多重比较检验)相对于无抗体对照情况下的聚集来确定显著性(n.s.不显著；(**)p＜0.01；(***)p＜0.0008，(****)p＜0.0001)。
[0921]
图8至11：α-突触核蛋白抗体(mab)在帕金森病体内小鼠模型中的效力。(图8)人α-突触核蛋白预形成原纤维(hpff)载剂处理的对照和α-突触核蛋白抗体aci-7067-1101c8-ab2、aci-7067-1108b11-ab2或aci-7067-1113d10-ab1在第17周距离基线(第0周)的体重百分比变化。误差棒代表经计算的sd。使用welch t检验相对于hpff-载剂对照组确定显著性；(*)p＜0.05；(**)p＜0.01。(图9a)(hpff)载剂处理的对照和α-突触核蛋白抗体aci-7067-1101c8-ab2、aci-7067-1108b11-ab2或aci-7067-1113d10-ab1的注射部位对侧梨状皮质中的磷酸化α-突触核蛋白染色密度。数据以几何平均值绘制，并且误差棒代表经计算的几何sd。使用双因素anova(针对组群校正)相对于hpff-载剂对照组确定显著性；(*)p＜0.05。(图9b)图9a中的数据以算术平均值绘制，并且误差棒代表测量值的标准误差。使用成对曼恩-惠特尼检验确定显著性；(*)p＜0.05。(图10)hpff载剂处理的对照和α-突触核蛋白抗体aci-7067-1101c8-ab2、aci-7067-1108b11-ab2或aci-7067-1113d10-ab1的注射部位对侧脑干中的磷酸化α-突触核蛋白染色密度。数据以几何平均值绘制，并且误差棒代表经计算的几何sd。使用双因素anova(针对组群校正)相对于hpff-载剂对照组确定显著性；(*)p＜0.05。(图11)磷酸盐缓冲盐水(pbs)或hpff处理的对照或者用α-突触核蛋白抗体aci-7067-1101c8-ab2、aci-7067-1108b11-ab2或aci-7067-1113d10-ab1处理的hpff的注射部位同侧梨状皮质中的neun神经元染色密度。数据以几何平均值绘制，并且误差棒代表经计算的几何sd。使用双因素anova(针对组群校正)相对于hpff-载剂对照组确定显著性；(*)p＜0.05；(**)p＜0.01，(****)p＜0.0001。
[0922]
图12：对体外细胞模型中α-突触核蛋白接种能力和聚集的抑制。相对于不存在抗体的情况，作为抗体浓度的函数形成的从头α-突触核蛋白聚集体的百分比。误差棒代表标准偏差。绘制剂量响应曲线，并使用等式6获得3.3nm(aci-7067-1101c8-ab2)、4.5nm(aci-7067-1108b11-ab2)和39.6nm(aci-7067-1113d10-ab1)的ic
50
值。
[0923]
图13：对小鼠初级皮质神经元中α-突触核蛋白接种能力、聚集和摄取的抑制。相对于不存在抗体的情况，作为抗体浓度的函数形成的从头α-突触核蛋白聚集体的百分比。误差棒代表标准偏差。绘制剂量响应曲线，并使用等式7获得114nm(aci-7067-1101c8-ab2)、143nm(aci-7067-1108b11-ab2)和702nm(aci-7067-1113d10-ab1)的ic
50
值。
[0924]
图14：α-突触核蛋白的表位作图。使用间接elisa针对覆盖人α-突触核蛋白1至140aa的整个序列的15聚体肽的文库确定来源于稳定杂交瘤克隆的抗体的表位作图。(a)1至69aa的肽和全长α-突触核蛋白的结果。(b)64至140aa的肽和全长α-突触核蛋白的结果。结果以光密度(o.d.)表示。每条棒代表单独抗体的数据。α-突触核蛋白的氨基酸序列如表3所示。
[0925]
图15：α-突触核蛋白的表位作图。使用间接elisa针对覆盖人α-突触核蛋白1至140aa的整个序列的15聚体肽的文库确定来源于稳定杂交瘤克隆的抗体的表位作图。(a)1至78aa的肽和全长α-突触核蛋白的结果。(b)73至140aa的肽和全长α-突触核蛋白的结果。结果以光密度(o.d.)表示。每条棒代表单独抗体的数据。α-突触核蛋白的氨基酸序列如表3所示。
[0926]
图16至17：α-突触核蛋白抗体(mab)对接种的a-syn聚集中的聚集半衰期的影响。(a)在3.28μm的指定mab存在下来自体外α-突触核蛋白聚集的τ
1/2
值相对于无mab对照的变化。误差棒代表经计算的sem。使用单因素anova(dunnett多重比较检验)相对于无抗体(无mab)情况下的聚集来确定显著性((****)p＜0.0001)。(b)绘制在指定mab存在下接种的聚集的τ
1/2
值相对于不存在抗体情况下的百分比提高。误差棒代表误差的传播(等式5)。使用单因素anova(dunnett多重比较检验)相对于无抗体对照情况下的聚集来确定显著性(n.s.不显著；(**)p＜0.01；(***)p＜0.0008，(****)p＜0.0001)。
[0927]
图18：aci-7067-1101c8-ab2人源化变体mab对接种的a-syn聚集中的聚集半衰期的影响。(a)在3.28μm的指定mab存在下来自体外α-突触核蛋白聚集的τ
1/2
值相对于无mab对照的变化。误差棒代表经计算的标准偏差。使用单因素anova(dunnett多重比较检验)相对于无抗体(无mab)情况下的聚集来确定显著性((****)p＜0.0001)。(b)绘制在指定mab存在下接种的聚集的τ
1/2
值相对于不存在抗体情况下的百分比提高。误差棒代表经计算的sem。使用单因素anova(dunnett多重比较检验)相对于无抗体(无mab)情况下的聚集来确定显著性((****)p＜0.0001)。
[0928]
参考以下非限制性实施例将进一步理解本发明：
实施例
[0929]
α-突触核蛋白脂质体疫苗组合物的制备
[0930]
根据wo2012/055933中公开的方案制备基于脂质体的抗原构建体。以人全长α-突触核蛋白作为抗原的脂质体疫苗用于抗体产生(表2，seqid no：1)或以α-突触核蛋白肽作为抗原的脂质体疫苗用于抗体产生。
[0931]
表2：抗原描述
[0932][0933]
小鼠免疫接种
[0934]
雌性c57bl/6jolahsd和balb/colahsd小鼠(envigo，usa)在10周龄时进行疫苗接种。已知c57bl/6jolahsd亚品系具有α-突触核蛋白基因的自发性缺失。用疫苗对小鼠进行疫苗接种，所述疫苗在作为佐剂的合成的单磷酰基六酰基脂质a 3-脱酰基(3d-(6-acyl))(avanti polar lipids，usa)存在下含有存在于脂质体表面上的α-突触核蛋白肽或人全长α-突触核蛋白。
[0935]
在第0、5、8、21、35、84天以及在一些情况下在第14、28、63、73和398天通过皮下注射(s.c.)对小鼠进行疫苗接种。在免疫接种之前7天对小鼠采血并制备肝素化血浆(免疫前血浆)，且在第一次免疫接种之后在第14、28、40、84、90天以及在一些情况下在第7、21、35、37、73、77和308天对小鼠采血并制备肝素化血浆。用于骨髓瘤融合的小鼠另外通过腹膜内注射(i.p.)不含佐剂的脂质体疫苗每天免疫接种三或四次加强注射。在所有经免疫接种小鼠中都获得了非常高的抗原特异性igg响应。
[0936]
产生特异性和高亲和力单克隆抗体的克隆的小鼠杂交瘤细胞系的分离
[0937]
使小鼠安乐死并使用来自经免疫接种小鼠的脾细胞进行与pai骨髓瘤细胞的融合。为了筛选融合产物，将细胞培养上清液以1∶50稀释并使用基于luminex珠的多重测定(luminex，the netherlands)进行分析。luminex珠与全长α-突触核蛋白、α-突触核蛋白肽1-60aa、α-突触核蛋白肽1-95aa、α-突触核蛋白肽61-140aa或全长β-突触核蛋白(不相关靶标)缀合，并使用针对igg1、igg2a、igg2b、igg2c和igg3亚类具有特异性的抗小鼠igg-fc抗体(jackson immunoresearch，usa)捕获igg。与全长α-突触核蛋白结合的luminex测定结果鉴定了92个命中(hit)。在经免疫接种小鼠脾细胞和pai骨髓瘤细胞的第二轮融合中，通过与全长α-突触核蛋白结合的luminex测定鉴定了400个命中。使用含血清的选择培养基使有生存力的杂交瘤生长，然后选择与全长α-突触核蛋白结合的最佳杂交瘤进行亚克隆。有限稀释后，使克隆的杂交瘤在含有低免疫球蛋白的培养基中生长，并选择稳定的集落用于抗体筛选和选择。
[0938]
在经免疫接种小鼠脾细胞或淋巴结(腘、轴、肱(brachial)和腹股沟)与x63/ag.8653骨髓瘤细胞的另一轮融合中，通过与α-突触核蛋白肽1-120aa结合的elisa测定鉴定了279个命中。使用含血清的选择培养基使有生存力的杂交瘤生长，然后选择与α-突触核蛋白肽结合的最佳杂交瘤进行亚克隆。有限稀释后，克隆的杂交瘤在含有低免疫球蛋白的培养基中生长，并选择稳定的集落用于抗体筛选和选择。
[0939]
抗体与人全长α-突触核蛋白的结合
[0940]
使用间接elisa确定抗体与人全长α-突触核蛋白的结合。将全长α-突触核蛋白在ph 9.6的碳酸盐/碳酸氢盐缓冲液(sigma，c3041)中稀释至终浓度2.5μg/ml，并在4℃下包
被至elisa板上过夜。在用pbs/0.05％聚乙二醇脱水山梨糖醇单月桂酸酯(20)洗涤并在37℃(pbs/0.05％20/1％bsa)下封闭1小时之后，将板在37℃下用使用pbs/0.05％20/1％bsa作为稀释剂的α-突触核蛋白抗体的1μg/ml至0.0005μg/ml的三倍稀释系列进行孵育。syn1抗体(bd biosciences，610787；表位91-99aa)的稀释系列(三倍，0.1μg/ml至0.0001μg/ml)在适用的情况下用作阳性对照。接下来，将板用pbs/0.05％20洗涤并在37℃下用检测抗体——以1∶1000稀释的与碱性磷酸酶缀合的抗小鼠igg(jackson immunoresearch laboratories inc.，115-055-164，)孵育2小时。最终洗涤之后，将板在25℃下用1mg/ml碱性磷酸酶底物(对硝基苯磷酸二钠六水合物；pnpp，s0942，sigma)孵育2小时，并使用elisa读板器(tecan，switzerland)读取405nm处的吸光度光密度(o.d.)信号。所有生成的抗体都显示出与人全长α-突触核蛋白的良好结合(图1)。
[0941]
α-突触核蛋白的表位作图
[0942]
从稳定的杂交瘤中收获无血清上清液。然后通过间接elisa测定筛选含有目的抗体的上清液以确定表位。首先使用覆盖人α-突触核蛋白整个序列的15聚体肽的文库确定表位，所述15聚体肽跨越氨基酸(aa)1-140，具有9aa偏移和6aa重叠。除了n端肽1-14aa(seq id no：130)在c端生物素化合成之外，所有肽均在具有氨基己酸间隔子的n端生物素化合成。简而言之，将链霉亲和素包被的elisa板在4℃(pbs/0.05％20/1％bsa)下封闭过夜，然后在25℃下用0.25μm生物素化全长α-突触核蛋白或生物素化的15聚体肽孵育1小时。表3中提供了肽序列。将板用pbs/0.05％20洗涤，然后用以1/100稀释的杂交瘤上清液在25℃下孵育1小时。接下来，将板用pbs/0.05％20洗涤并在25℃下用检测抗体——以1∶1000稀释的与碱性磷酸酶缀合的抗小鼠igg(jackson immunoresearch laboratories inc.，115-055-164，)孵育1小时。最终洗涤之后，将板用碱性磷酸酶底物(对硝基苯磷酸二钠六水合物；pnpp，s0942，sigma)在25℃下孵育2小时，并使用elisa读板器(tecan，switzerland)读取405nm处的吸光度光密度(o.d.)信号。发现受测抗体与以下肽中的一种或更多种结合：1-14aa、1-15aa、10-24aa、28-42aa、46-60aa、64-78aa、82-96aa、91-105aa、118-132aa、127-140aa或81-120aa。对于抗体aci-7079-2601b6-ab1、aci-7087-4125e6-ab1和aci-7089-4415g5-ab1，未鉴定出线性表位，未观察到与15聚体长度的肽的结合，而抗体与全长α-突触核蛋白结合。结果如图2、图6、图14和图15所示。
[0943]
表3：用于表位作图的15聚体肽的文库
[0944][0945]
*在c端生物素化的肽
[0946]
使用覆盖α-突触核蛋白序列的8聚体肽的文库进一步确定表位，该序列先前通过间接elisa在15聚体肽的文库上进行了鉴定。8聚体肽被设计为具有1aa偏移和7aa重叠。最后，为了确定抗体结合的关键残基，使用了肽的丙氨酸扫描文库，其覆盖了先前用15聚体肽的文库鉴定的α-突触核蛋白序列。丙氨酸扫描文库的肽长度为15至30个残基，其被合成为在序列中每个位置都有一个丙氨酸残基替换天然残基(天然残基为丙氨酸时除外)。所有肽均在具有氨基己酸间隔子的n端生物素化合成。对于间接elisa，将链霉亲和素包被的elisa板在4℃(pbs/0.05％20/1％bsa)下封闭过夜，然后在25℃下用0.25μm生物素化肽孵育1小时。将板用pbs/0.05％20洗涤，然后用以1/100稀释的杂交瘤上清液在25℃下孵育1小时。接下来，将板用pbs/0.05％20洗涤并在25℃下用检测抗体——以1∶1000稀释的与碱性磷酸酶缀合的抗小鼠igg(jackson immunoresearch laboratories inc.，115-055-164，)孵育1小时。最终洗涤之后，将板与碱性磷酸酶底物(对硝基苯磷酸二钠六水合物；pnpp，s0942，sigma)在25℃下孵育2小时，并使用elisa读板器(tecan，switzerland)读取405nm处的吸光度光密度(o.d.)信号。抗体的结合表位如表4所示。
[0947]
表4：抗体结合表位
[0948]
[0949]
[0950]
[0951]
[0952][0953]
接种的α-突触核蛋白聚集的抑制或延迟
[0954]
评价了单克隆抗α-突触核蛋白抗体在体外抑制α-突触核蛋白聚集的能力。α-突触核蛋白预形成聚集体(种子)的存在提高了单体α-突触核蛋白的从头聚集倾向。在添加单体α-突触核蛋白用于聚集测定之前，将α-突触核蛋白抗体用α-突触核蛋白种子孵育。α-突触核蛋白聚集的动力学通过硫磺素t(tht)荧光进行监测。α-突触核蛋白抗体抑制接种的聚集的能力通过聚集半衰期(达到半最大tht荧光信号的时间)的百分比变化来定量。
[0955]
将浓度为5mg/ml的α-突触核蛋白重组蛋白(rpeptide，s-1001-4)重悬并用dpbs(slide-a-lyzer mini dialysis 10k mwco，thermoscientific，88404)在4℃下透析四次，每次60分钟。然后通过离心过滤(具有ultracel膜的microcon dna快速流动离心过滤装置，sigma，mrcf0r100)除去较高分子量的物质。将声处理的α-突触核蛋白原纤维用pbs稀释至终浓度为1.0mg/ml。聚集体在低结合96孔板(thermoscientific，278752)中组装，每种条件下一式三份。α-突触核蛋白种子以单体α-突触核蛋白终浓度的1％(14μm)使用。
[0956]
将α-突触核蛋白种子(34.5皮摩尔)用α-突触核蛋白抗体(787皮摩尔，约22.8当量)在25℃下孵育1小时。作为参考对照，在不添加α-突触核蛋白抗体的情况下孵育α-突触核蛋白种子。syn303抗体(biolegend，824301)用作参考标准品(tran et al.，cell rep.2014，7(6)：2054-65)。为了控制来自抗体的任何非α-突触核蛋白特异性作用，重组产生或购买(thermofisher，02-6200)小鼠同种型对照(igg2a)并将其用作阴性对照。
[0957]
添加单体asyn和tht(3mm储备溶液，sigma，d8537)以分别达到14μm和46μm的终浓度。然后将每种聚集等分至96孔板的3个独立的孔中(65μμl/孔)。使用m200 infinite pro微读板器(tecan，switzerland)进行动力学测量。
[0958]
对于每种聚集条件，tht荧光测量值一式三份地获得(技术重复)，并在独立的日期中运行两次(总共n＝6)。通过减去初始tht值(t＝0)进行基线校正，然后将数据归一化为最大tht信号百分比(参见等式1)。聚集半衰期(τ1/2)是使用s形剂量-响应(sigmoidal dose-response)(参见等式2)或单相关联(one-phase association)(参见等式3)(graphpad prism 7)根据非线性回归计算的，并表示达到最大tht信号的一半所需的时间。
[0959]
等式1：
[0960][0961]
其中％tht(x)是t＝x时刻的tht信号百分比，tht(x0)是t＝0时刻的tht信号，而tht(x
max
)是最大tht信号。
[0962]
等式2：
[0963][0964]
其中bottom是最小tht信号的拟合，top是最大tht信号的拟合，ec50是tht信号在bottom和top中间时的x值，而hillslope是曲线的陡度。在此，聚集半衰期(τ
1/2
)由ec50直接获得。
[0965]
等式3：
[0966]
％tht(x)＝tht(x0) ((plateau-tht(x0))*(1-exp(-k*x))
[0967]
其中tht(x0)是初始tht信号，plateau是最大tht信号的拟合，而k是速率常数。在此，聚集半衰期(τ
1/2
)由ln(2)/k计算。
[0968]
等式4：
[0969][0970]
其中τ
无mab
是不存在抗体(mab)情况下的聚集半衰期，τ
mab
是存在指定抗体情况下的聚集半衰期。
[0971]
等式5：
[0972][0973]
其中％τ
mab
是来自等式4的τ
1/2
的百分比提高，τ
无mab
是不存在mab情况下的聚集半衰期，τ
mab
是存在指定mab情况下的聚集半衰期，sem是标准误差(由等式2和3的拟合得到的计算值)。
[0974]
使用s形拟合(等式2)或指数拟合(等式3)根据动力学曲线和最佳拟合获得聚集半衰期(τ
1/2
)。使用不同的时间框架来获得最佳拟合，因为在聚集完成之后tht信号会降低。将在指定抗体存在下τ
1/2
值的变化相对于不存在抗体情况下的τ
1/2
值进行归一化。图3a、图7a、图16a和图17a示出了如针对不存在抗体的情况下的聚集归一化的τ
1/2
值变化的比较。观察到所有抗体的τ
1/2
值显著提高，证明了抗体在延迟α-突触核蛋白的接种的和/或自发的聚集方面的良好效力。用syn303或igg2a对照的预孵育显示对接种的聚集没有显著影响(图3a)。
[0975]
τ
1/2
值的百分比提高是相对于不存在抗体情况下的接种的聚集计算的(参见等式4)。图3b、图7b、图16b和图17b示出了在α-突触核蛋白种子用指定抗体预孵育之后经计算的τ
1/2
值的百分比提高，证明了抗体在延迟接种的和/或自发的α-突触核蛋白聚集方面的良好效力。相对于igg2a对照，使用市售syn303抗体预孵育时未观察到τ
1/2
的显著变化提高(图3b)。α-突触核蛋白种子用本发明的所有抗体的预孵育均显示出τ
1/2
值的显著百分比提高。
[0976]
通过spr对α-突触核蛋白单体和α-突触核蛋白原纤维的亲和力测量
[0977]
使用cm5系列s传感器芯片(ge healthcare，br-1005-30)在表面等离子体共振(spr)仪器(biacore t200，ge healthcare life sciences)上进行亲和力测量。流动通道(fc)1至4用新鲜的edc/nhs溶液(胺偶联试剂盒，两种试剂的比例为1∶1，ge healthcare，br-1006-33)激活。山羊抗小鼠抗体(ge healthcare，br-1008-38)以在10mm乙酸钠(ph 5.0)中稀释的30μg/ml的浓度被捕获。随后，所有未反应的活化酯基团都用1m乙醇胺(ge healthcare，br-1006-33)封端。通过ph 1.7的10mm甘氨酸(ge healthcare，28-9950-84)的3次连续再生去除任何非共价结合的抗体。在乙醇胺封端之后(结合(bound))以及最终在再生之后(最终(final))评价固定水平。使用2000响应单位(ru)的靶标固定法进行α-突触核蛋白抗体的非共价固定。抗体在ph 5.5的10mm乙酸钠(ge healthcare，br-1003-52)中稀释至终浓度为5μg/ml。
[0978]
使用单循环动力学法进行α-突触核蛋白抗体对单体或纤维状α-突触核蛋白物质的结合亲和力。仪器用1
×
hbs-p 缓冲液(来自ge healthcare，br-1003-52的10
×
储液，在milli-q水中稀释)启动。进行由连续2倍稀释制备的，浓度从0.62至50nm提高的单体α-突触核蛋白(asyn)(bostonbiochem，sp-485)的注射，接触时间为300秒/注射，流量为30μl/分钟。在最终的50nm注射之后是900秒的解离阶段。使用ph 1.7的10mm甘氨酸的3次再生实现了传感器对山羊抗小鼠抗体层的再生。进行由连续2倍稀释制备的，浓度从5.56至450nm提高的α-突触核蛋白原纤维的注射，接触时间为300秒/注射，流量为30μl/分钟。在最终的450nm注射之后是900秒的解离阶段。使用ph 1.7的10mm甘氨酸的3次再生实现了传感器对山羊抗小鼠抗体层的再生。从单循环动力学获得的结果通过biacore t200评价软件使用1∶1结合同质朗缪尔模型(具有全局rmax)评价，其中循环5作为空白减去。获得以下动力学参数：结合速率(ka)、解离速率(kd)、亲和常数(kd，kd与ka的比值)、最大响应(rmax)和拟合优度(chi2)。
[0979]
α-突触核蛋白抗体的非共价捕获在三个独立的运行中进行。基于2000 ru的靶标固定水平，捕获水平范围为约1800至约2100 ru。获得了对单体和纤维状α-突触核蛋白的响应的传感图，两种抗体的一些代表性实例如图4所示。在大多数情况下，动力学常数是由1∶1同质结合模型确定的。对于aci-7067-1101c8-ab2与单体asyn，使用异质配体模型以获得ka和kd值，并且使用稳态模型以确定kd和rmax。来自通过spr的单循环动力学亲和力测量值的动力学拟合参数如表5所示。aci-7067-1101c8-ab2、aci-7079-2503c6-ab1、aci-7079-2603f3-ab1、aci-7088-4303b6-ab1、aci-8033-4f3-ab1和aci-7067-1113d10-ab1表现出对纤维状α-突触核蛋白的结合偏好，并且显示出与纤维状α-突触核蛋白的解离速率(kd)比单体α-突触核蛋白显著更低(图4)。
[0980]
表5：通过spr获得的亲和力测量值
[0981]
[0982]
[0983]
[0984]
[0985]
[0986][0987]
人α-突触核蛋白聚集体的靶标结合
[0988]
在对来自pd和多系统萎缩(msa)捐赠者脑的组织的免疫组织化学实验中评价了靶标结合。人脑组织获自荷兰脑库。所有组织都是从捐赠者那里收集的，荷兰脑库已经从捐赠者那里获得了脑尸检和将材料和临床信息用于研究目的的书面知情同意书。使用荧光二抗检测对10μm厚的冰冻切片进行免疫组织化学。识别在ser129处磷酸化的α-突触核蛋白的抗体[ep1536y](psyn)(abcam ab51253)被用作检测病理性聚集的和磷酸化的α-突触核蛋白的对照。抗体aci-7067-1101c8-ab2、aci-7067-1113d10-ab1和aci-7067-1108b11-ab2与pd病例中的路易体和路易神经突中的病理性α-突触核蛋白聚集体结合(图5a)，并与msa病例中的胶质细胞胞质包涵体中的病理性α-突触核蛋白聚集体结合(图5b)。使用表5中列出的其他抗体也获得了类似的结果(数据未示出)。
[0989]
抗体可变区基因测序
[0990]
将克隆杂交瘤细胞裂解物用于可变区基因测序。收获小鼠杂交瘤并使用含有使核糖核酸酶失活的胍盐的裂解缓冲液使其裂解。然后通过不含核糖核酸酶的脱氧核糖核酸酶去除基因组dna，并用基于硅石的亲和柱使用多次洗涤纯化rna，并使用不含核糖核酸酶的水将其从柱上洗脱。一旦rna被提取，立即通过分光光度法测量其纯度和浓度。在变性琼脂糖凝胶上评估rna的完整性，并使用逆转录酶(reverse transcriptase，rt)将rna逆转录成cdna。在添加反应混合物之前，将rna加热至70℃持续10分钟以破坏rna二级结构。rt产物直接用于pcr扩增。对于cdna的高保真pcr扩增，将对应于编码抗体的不同基因家族的每个可变区引物独立地与分别用于重链可变结构域(vh)和轻链可变结构域(vl)的恒定引物混合。首先，使用简并引物池(对于vh为12个，对于vl为12个)，并且根据结果，使用第二池来获得pcr产物。在pcr反应之后，通过在用溴化乙锭染色的2％琼脂糖凝胶上进行凝胶电泳来分析产物。vl和vh的pcr产物在琼脂糖凝胶上使用三乙酸-edta(tae)独立地纯化。然后使用染料终止子测序法对从凝胶上切下的经纯化片段进行测序。使用与用于pcr的相同的引物进行测序反应。在两个方向上进行测序以在两个末端处提供重叠。通过ig blast/kabat数据库分析测序数据。vh和vl的核苷酸序列显示在表6中。vh和vl的蛋白质序列及其互补决定区(cdr)显示在表7中。
[0991]
[0992]
[0993]
[0994]
[0995]
[0996]
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[1040]
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[1045]
[1046]
[1047]
[1048]
[1049]
[1050]
[1051]
7067-1101c8-ab2、aci-7067-1108b11-ab2或aci-7067-1113d10-ab1)以30mg/kg/周腹膜内(i.p.)注射，从手术周(第0周)开始至立体定向手术之后第16周，持续17周。每天监测小鼠的健康状况，每周记录体重。给药后未观察到不良反应；动物没有表现出痛苦或不适，活动水平正常。aci-7067-1101c8-ab2和aci-7067-1108b11-ab2与注射有人预形成原纤维的载剂处理对照组相比，表现出体重减轻速率显著降低，而对于aci-7067-1113d10-ab1观察到体重速率降低的趋势(图8)。
[1055]
接种之后17周后，通过灌注20ml磷酸盐缓冲盐水然后经心脏灌注20ml 10％中性缓冲福尔马林将小鼠处死。脑在10％中性缓冲福尔马林中浸泡固定72小时。用于石蜡包埋的经固定脑通过分级乙醇和二甲苯脱水，然后用石蜡浸润。经处理脑被定向并包埋在石蜡块中，随后以5微米进行切片。对于病理性α-突触核蛋白的定量，使载玻片最初经过两步表位修复，并用温和的pk消化进行处理，然后用针对磷酸化α-突触核蛋白的抗体[ep1536y]进行染色。通过用抗体克隆a60(millipore)进行的ihc对neun(一种神经元特异性蛋白质)进行染色来进行神经元密度测量。所有ihc测量值的数据均通过axio scan.z1数字全载玻片扫描仪(carl zeiss)获取。目的区域，即与注射部位互连的脑区域，被手动定界，并使用自动软件算法在每个载玻片上进行ihc染色(染色面积百分比)的定量。ihc分析和定量以关于治疗组不知情的方式进行。通过病理性磷酸化α-突触核蛋白ihc染色(通过神经元密度归一化)的提高和人预形成原纤维注射组的neun ihc染色的降低来监测m83小鼠模型中疾病的扩散和病理状况的传播。aci-7067-1101c8-ab2和aci-7067-1108b11-ab2显著延迟了病理性α-突触核蛋白的聚集和接种，其由注射部位对侧梨状皮质和脑干中的α-突触核蛋白病理水平显著降低所指示(图9a、图9b和图10)，而对于aci-7067-1113d10-ab1，观察到病理性α-突触核蛋白的聚集和接种延迟的趋势，其由注射部位对侧梨状皮质和脑干中α-突触核蛋白病理水平的降低所指示。总而言之，aci-7067-1101cs-ab2和aci-7067-1108b11-ab2显著降低了病理性α-突触核蛋白在体内的扩散，如通过病理性α-突触核蛋白的降低测得的。此外，aci-7067-1101c8-ab2和aci-7067-1113d10-ab1显示出注射部位同侧皮质中神经元丢失的显著恢复(图11)，而对于aci-7067-1108b11-ab2观察到注射部位同侧皮质中神经元丢失的恢复趋势。
[1056]
抑制细胞中的a-syn传播
[1057]
在对α-突触核蛋白接种敏感的体外细胞模型和在小鼠原代皮质神经元中，评价了单克隆抗α-突触核蛋白抗体抑制α-突触核蛋白聚集的摄取和接种的能力。将α-突触核蛋白种子添加至细胞模型或原代神经元启动了单体α-突触核蛋白的从头聚集。相对于同种型对照抗体，在存在或不存在α-突触核蛋白抗体的情况下评估从头a-syn聚集体的形成或从头病理性α-突触核蛋白(磷酸化α-突触核蛋白)的形成。将α-突触核蛋白抗体抑制摄取或接种的聚集的能力量化为观察到的α-突触核蛋白聚集体数目的百分比变化。
[1058]
对于体外细胞模型，在室温下在低结合96孔板(eppendorfmicroplate 96/v-pp，sigma，ep951040227)中将α-突触核蛋白抗体(aci-7067-1101c8-ab2、aci-7067-1108b11-ab2或aci-7067-1113d10-ab1)或同种型对照抗体用0.4μl/孔ab-deliverin
tm
转染试剂(oz biosciences，ai21000)孵育30分钟。然后将抗体/ab-deliverin添加至细胞，在处理之前24小时以8,000个细胞/孔的密度平板接种，并放回培养箱中(37℃和5％co2下)培养5小时。将α-突触核蛋白种子(0.05μg/孔)在血清减少培养基(opti-mem
tm
，life technologies，
31985070)中稀释，并在25℃下在低结合96孔板中用0.2μl/孔lipofectamine
tm 2000转染试剂(life technologies，11668019)孵育30分钟。然后将α-突触核蛋白种子/lipofectamine添加至细胞。细胞还用不含α-突触核蛋白种子的lipofectamine转导作为参考对照。将细胞放回培养箱中(37℃，5％co2下)。然后在转导之后24小时时为细胞补充100μl dmem/glutamax(gibco，31966-021)，补充5％胎牛血清(合格且热灭活；gibco，10500-064)和1％青霉素-链霉素(10,000u/ml；gibco，15140-122)。在初始转导之后96小时时，用等体积的冷的2％triton x-100、pbs中的8％pfa和hoechst 33342(1：10,000)固定细胞。去除培养基并用pbs洗涤3次，将经固定细胞留在pbs中，避光，并进行高含量成像分析以检测和量化从头α-突触核蛋白聚集体的形成。固有荧光报告蛋白的使用允许检测从头α-突触核蛋白聚集体。然后相对于不存在抗体的情况计算形成的聚集体百分比。ic50值由使用等式6的拟合(graphpad prism 7)获得。
[1059]
等式6
[1060][1061]
aci-7067-1101c8-ab2、aci-7067-1108b11-ab2和aci-7067-1113d10-ab1以剂量依赖性方式降低了α-突触核蛋白聚集体的接种能力(图12)。
[1062]
对于小鼠原代皮质神经元，将细胞在384孔板中培养。在体外第6天(div)时，将α-突触核蛋白抗体(aci-7067-1101c8-ab2、aci-7067-1108b11-ab2或aci-7067-1113d10-ab1)或同种型对照抗体添加至以40,000个细胞/孔的密度平板接种的细胞并孵育30分钟。然后将α-突触核蛋白种子(8μg)添加至细胞。在第13个div(添加α-突触核蛋白种子之后7天)时，将细胞用pfa固定并用针对磷酸化α-突触核蛋白的抗体(ep1536y)和hoechst染色剂染色。进行高含量图像分析以检测和量化从头α-突触核蛋白聚集体/细胞的形成。然后相对于不存在抗体的情况计算形成的聚集体百分比。组合来自三个独立实验的数据，ic
50
值由使用等式7的拟合(graphpad prism 7)获得。
[1063]
等式7
[1064][1065]
aci-7067-1101c8-ab2、aci-7067-1108b11-ab2和aci-7067-1113d10-ab1以剂量依赖性方式降低了α-突触核蛋白聚集体的摄取和接种能力(图13)。
[1066]
抗人a突触核蛋白小鼠单克隆抗体的人源化
[1067]
人源化可变区的设计
[1068]
使用同源性匹配来选择将aci-7067-1101c8-ab2 cdr移植至其上的人受体框架。人和小鼠种系可变基因的数据库，例如imgt数据库(ehren mann，f et al，(2010)nucl.acids res.，38(s1)：d301-d307)或igblast(yej.et al，(2013)，nucleic acids res.2013 jul；41(web server issue)：w34-w40)或vbase2(retter i et al，(2005)nucleic acids res.33，database issue d671-d674)可用于识别最接近鼠重链和轻链v区
的人可变结构域亚家族(分别为seq id no：10和seq id no：14)。在这些亚家族中选择待用作受体的重链和轻链可变序列(vh和vl)可以基于序列同源性和/或对cdr1和cdr2环区的典范结构的匹配，以帮助在移植后保持六个cdr的正确构象。
[1069]
例如，imgt数据库的使用表明了aci-7067-1101c8-ab2重链可变结构域框架和人重链可变结构域亚家族3的成员之间的最佳序列同源性。针对以下种系序列观察到cdr和框架序列二者的最高同源性和同一性：ighv3-73*01、ighv3-73*02、ighv3-72*01、ighv3-49*01，对于直至cdr3的整个序列，所有这些都具有高于75％的序列同一性。ighv3-73*01和ighv3-73*02显示出79％的序列同一性，而ighv3-72*01和ighv3-49*01分别显示出76％和75％的序列同一性。ighv3-73*01由于其高度序列同源性和已知的稳定性而被选为vh框架。
[1070]
使用相同的方法，aci-7067-1101c8-ab2轻链可变结构域序列显示出与人轻链可变结构域κ亚家族2的成员的最佳序列同源性。针对以下种系序列观察到cdr和框架序列二者的最高同源性和同一性：igkv2-30*02、igkv2-30*01、igkv2d-29*02、igkv2-24*01，对于直至cdr3的整个序列，所有这些都具有高于79％的序列同一性。igkv2-30*02显示出最高的序列同一性，为81％，而igkv2-30*01、igkv2d-29*02的序列同一性为80％。igkv2-30*02由于其高度序列同源性被选为vl框架。
[1071]
在aci-7067-1101c8-ab2 cdr序列中鉴定了潜在的脱酰胺和异构化位点，为可变重链中的第n53和d61位，以及可变轻链中的第n28位(根据kabat编号系统)。通过3d同源性建模，这些ptm位点被证实是溶剂可及的。在vh区引入点突变n54a和d61a，而在vl区引入g29a以去除cdr l1中的脱酰胺位点。当组合时，所有突变都保留了aci-7067-1101c8-ab2与其靶标的结合；这组突变包含在aci-7067-1101c8-ab2的第一人源化变体中。
[1072]
作为人源化过程的起点，将鼠cdr移植至vh和vl区二者的人受体框架上。所得的人-小鼠杂交重链可变序列具有人ighv3-73*01框架区、aci-7067-1101c8-ab2小鼠cdr及从上述imgt搜索鉴定的最佳匹配的jh区段。类似地，人-小鼠杂交轻链可变结构域具有人igkv2-30*02框架区、aci-7067-1101c8-ab2小鼠cdr和最佳匹配的jk区段。
[1073]
为了使cdr容纳至人受体框架上，通过将人残基替换为小鼠残基来修饰关键位置。这个过程称为回复突变，并且是单克隆抗体的人源化中最不可预测的过程。它需要从小鼠抗体中鉴定和选择需要被保留的关键框架残基，以保持亲和力，同时使人源化抗体中的潜在免疫原性最小化。
[1074]
为了鉴定可最大程度地影响cdr构象和/或者vh/vl定向的残基，通过同源建模使用abodybuilder服务器(dunbar，j.et al(2016).nucleic acids res.44.w474-w478)和pbd：1nbv作为框架结构和vh/vl定向的模板，生成了人-小鼠杂交vh-vl对的3d模型。模型分析允许基于位置对cdr环构象和/或重链-轻链可变结构域堆积的推定影响来选择位置的亚组。该位置亚组由可变重链中的第28、49、78、93和100b位以及可变轻链中的第27b和36位组成。
[1075]
从第一个设计开始，通过在上述位置引入从人到小鼠残基的回复突变，产生了新的可变重链和轻链组。表8和11示出了根据kabat编号系统在每个不同可变结构域中的回复突变组合。
[1076]
表8：针对haci-7067-1101c8-ab2重链可变区的受体人框架的回复突变和序列同一性。
[1077]
链回复突变与ighv3-73*01的序列同一性hacl-7067-1101c8-ab2_h1s28t/g49a/a78l/t93v86％hacl-7067-1101c8-ab2_h2s28t/a78l/t93v87％hacl-7067-1101c8-ab2_h3s28t/t93v88％hacl-7067-1101c8-ab2_h4s28t/g49a88％hacl-7067-1101c8-ab2_h5g49a/t93v88％hacl-7067-1101c8-ab2_h6s28t/g49a/a78l/t93v/m100bs85％hacl-7067-1101c8-ab2_h7s28t/g49a/a78l/t93v/m100bt85％hacl-7067-1101c8-ab2_h8s28t/a78l/m100bl89％hacl-7067-1101c8-ab2_h9a78l90％hacl-7067-1101c8-ab2_h10a78l/m100bl90％hacl-7067-1101c8-ab2_h11-91％hacl-7067-1101c8-ab2_h12-/m100bl91％
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人源化抗体变体的产生
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使用标准分子生物学技术合成重链和轻链可变结构域二者的dna编码序列并将其克隆到质粒中，从而允许在哺乳动物细胞中表达。重链可变结构域与人免疫球蛋白igg1恒
定结构域融合，并且轻链可变结构域被克隆到含有恒定κ轻链结构域的质粒中。通过使用expifectamine
tm 293转染试剂盒(thermofischer scientific，a14524)共转染重链和轻链质粒，嵌合抗体和人源化变体在expi293f细胞中瞬时表达。转染之后，使细胞保持在37℃下在150rpm搅拌和8％co2水平下。转染之后6天，收获上清液并将其纯化到预填充有1ml mabselect sure树脂的蛋白质a柱(ge healthcare life sciences，17543803)上。将柱用ph 7.0的0.1m tris平衡，随后加载细胞培养液。上样后，用ph 7.0的0.1m tris洗涤柱，随后使用ph 3.5的0.1m柠檬酸盐洗脱。然后通过添加ph 9.0的0.1m tris中和洗脱物。然后将样品在pbs缓冲液中透析。
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通过表面等离子体共振(spr)表征aci-7067-1101c8-ab2人源化变体
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所有变体均通过spr筛选针对α-突触核蛋白聚集体和单体二者的结合。使用cm5系列s传感器芯片(ge healthcare life sciences，29-1496-03)在spr仪器(biacore 8k，ge healthcare life sciences)上进行单浓度测量。流动通道(fc)1至8用新鲜的edc/nhs溶液(胺偶联试剂盒，两种试剂的比例为1∶1，ge healthcare life sciences，br100050)激活。然后将在10mm naac(ph 4.5)中稀释的30μg/ml f(ab)
′
2山羊抗人igg fc(jackson immunoresearch europe ltd，109-006-098)以10μl/分钟的流量注入通道1至8，持续420秒。芯片通过流量为10μl/分钟、持续420秒的1m乙醇胺-hcl(ge healthcare life sciences，br100050)灭活。
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在运行缓冲液1
×
hbs-ep (ge healthcare life sciences，br100669)中稀释的人igg1同种型对照通过流量为10μl/分钟的抗人fc igg被捕获至fc1上。在运行缓冲液1
×
hbs-ep 中稀释的aci-7067-1101c8-ab2人源化变体通过流量为10μl/分钟的抗人fc igg被捕获至fc2上。
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将100nm的分析物a-syn单体(boston biochem，sp-485)和运行缓冲液以30μl/分钟的流量有序注射至fc1-fc2中，持续400秒的缔合阶段，随后是600秒的解离。将450nm的分析物a-syn聚集体和运行缓冲液以30μl/分钟的流量有序注射至fc1-fc2中，持续400秒的缔合阶段，随后是3600秒的解离。在每个解离阶段之后注入ph 1.5的10mm甘氨酸作为再生缓冲液。
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减去参考通道fc1和缓冲通道的数据以生成传感图。实验数据通过1∶1结合模型或异质配体模型拟合。确定每个人源化变体的嵌合抗体的相对koff。结果如表14所示。
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表14：aci-7067-1101c8-ab2人源化变体针对α-突触核蛋白的聚集和单体形式的相对koff。
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基于变体对α-突触核蛋白的亲和力、其表达水平和/或与人受体框架的序列同一性，选择了10个变体用于通过spr进行的全动力学测量。
[1098]
使用cm5系列s传感器芯片(ge healthcare，br-1005-30)在表面等离子体共振(spr)仪器(biacore 8k，ge healthcare life sciences)上进行亲和力测量。流动通道(fc)1至8用新鲜的edc/nhs溶液(胺偶联试剂盒，两种试剂的比例为1∶1，ge healthcare life sciences，br-1006-33)激活。抗人抗体(ge healthcare life sciences，br-1008-39)以在10mm乙酸钠(ph 5.0)中稀释的30μg/ml的浓度被捕获。随后，所有未反应的活化酯基团都用1m乙醇胺(ge healthcare life sciences，br-1006-33)封端。通过ph 1.7的10mm甘氨酸(ge healthcare life sciences，28-9950-84)的3次连续再生去除任何非共价结合的抗体。在乙醇胺封端之后(结合)以及最终在再生之后(最终)评价固定水平。使用200响应单位(ru)的靶标固定法进行α-突触核蛋白抗体的非共价固定。抗体在ph 5.5的10mm乙酸钠(ge healthcare，br-1003-52)中稀释至终浓度为2μg/ml。
[1099]
使用单循环动力学法进行α-突触核蛋白抗体对单体或纤维状α-突触核蛋白物质的结合亲和力。仪器用1
×
hbs-p 缓冲液(来自ge healthcare，br-1003-52的10
×
储液，在milli-q水中稀释)启动。进行由连续2倍稀释制备的，浓度从0.62至50nm提高的单体α-突触核蛋白(asyn)(boston biochem，sp-485)的注射，接触时间为300秒/注射，流量为30μl/分钟。在最终的50nm注射之后是900秒的解离阶段。使用ph 1.7的10mm甘氨酸的3次再生实现了传感器对山羊抗人抗体层的再生。进行由连续2倍稀释制备的，浓度从5.56至450nm提高的α-突触核蛋白原纤维的注射，接触时间为300秒/注射，流量为30μl/分钟。在最终的450nm注射之后是900秒的解离阶段。使用ph 1.7的10mm甘氨酸的3次再生实现了传感器对山羊抗人抗体层的再生。从单循环动力学获得的结果通过biacore k8评价软件使用1∶1结合同质朗缪尔模型(具有全局rmax)评价，其中循环5作为空白减去。获得以下动力学参数：结合速率(ka)、解离速率(kd)、亲和常数(kd，kd与ka的比值)、最大响应(rmax)和拟合优度(chi2)。
[1100]
动力学常数是从针对相对于聚集形式的结合的1∶1同质结合模型中确定的，而稳态拟合用于确定相对于α-突触核蛋白的单体形式的kd值。动力学常数如表15所示。
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表15：对选定的aci-7067-1101c8-ab2人源化变体进行的亲和力测量
[1102]
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总体而言，所有人源化变体都保留了对α-突触核蛋白的亲和力，并具有对纤维状α-突触核蛋白的结合偏好。haci-7067-1101c8-ab2_h5l1、haci-7067-1101c8-ab2_h8l1、haci-7067-1101c8-ab2_h9l1、haci-7067-1101c8-ab2_h9l2和haci-7067-1101c8-ab2_h10l1证明了与嵌合抗体caci-7067-1101c8-ab2相比针对α-突触核蛋白的聚集形式的提高的亲和力。
[1104]
抑制或延迟aci-7067-1101c8-ab2人源化变体的接种的α-突触核蛋白聚集
[1105]
在先前描述的接种的α-突触核蛋白聚集测定中测试抗体抑制或延迟α-突触核蛋白接种的聚集的能力。将抗体与嵌合抗体进行比较，以鉴定性能最佳的人源化变体。图18a示出了如针对不存在抗体情况下的聚集所归一化的τ
1/2
值变化的比较。图18b示出了α-突触核蛋白种子预孵育后τ
1/2
值的经计算百分比提高，证明了受测抗体在延迟α-突触核蛋白的接种的和/或自发的聚集方面的效力。与无mab对照相比，所有人源化变体在延迟接种的聚集方面均表现出良好的效力。在所有受测的人源化变体中，haci-7067-1101c8-ab2_h5l1、haci-7067-1101c8-ab2_h8l1、haci-7067-1101c8-ab2_h9l1、haci-7067-1101c8-ab2_h9l2、haci-7067-1101c8-ab2_h10l1、haci-7067-1101c8-ab2_h10l2在延迟α突触核蛋白聚集方面表现出与嵌合抗体caci-7067-1101c8-ab2相比相同或改善的效力。
[1106]
除非另有定义，否则本文中使用的所有技术和科学术语均具有与本发明所属领域的普通技术人员所通常理解的相同的含义。出于与本发明相关的所有目的，本文中具体提及的所有出版物和专利均通过引用以其整体并入。
[1107]
本发明的范围不受本文中描述的一些具体实施方案的限制。实际上，根据在先描述和附图，除了本文中描述的那些之外的对本发明的多种修改对于本领域技术人员来说将变得明显。这样的修改旨在落入所附权利要求书的范围内。此外，本文中描述的本发明的所有方面和实施方案均被认为是广泛适用的并且可以与任何和所有其他一致的实施方案，包括那些从本发明的其他方面适当地取得(包括单独的)的实施方案组合。
再多了解一些
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