一种含噻唑-吡啶甲基芳杂环季铵盐侧链的截短侧耳素衍生物及其制备方法与应用

1.本发明属于药物化学技术领域，具体涉及一种含噻唑-吡啶甲基芳杂环季胺盐侧链的截短侧耳素衍生物及其制备方法与应用。


背景技术：

2.由于抗生素的广泛使用甚至滥用，众多细菌产生了日益严重的多重耐药性，已成为影响全球人类健康的巨大威胁和公共卫生危机，现有抗生素如头孢菌素类、氨基糖苷类、大环内酯类甚至多黏菌素对某些“超级细菌”引起的感染已无法治疗，或者是由于严重的不良反应无法广泛使用，探索具有新型抗菌作用机制、开发良好生物利用度且毒性较低的抗生素是现在药物开发的关键。
3.截短侧耳素是由担子菌纲侧耳属pleurotus mutilus.和pleurotus passeckerianus.菌发酵液中分离提取到的白色晶体，由一个含8个手性中心的5-6-8-三元环骨架和一个乙醇酸酯的侧链(c-14位侧链)组成。截短侧耳素类药物主要作用与于细菌核糖体50s亚基的肽酰转移酶活性中心，可以导致其亚甲基发生重排。目前，无论是已经上市还是处于临床阶段的化合物，都是对截短侧耳素的c-14侧链的进行结构改造来提高其抑菌活性。
4.杂环化合物有着独特的生物活性，毒性低，内吸性高，常被用作医药和农药的结构组成单元，在医药和农药合成方面起着重要的作用。


技术实现要素：

5.为了克服上述现有技术的缺点，本发明的目的在于提供一种含噻唑-吡啶甲基芳杂环季铵盐侧链的截短侧耳素衍生物及其制备方法与应用，治疗感染性疾病。
6.为了达到上述目的，本发明采用以下技术方案予以实现：
7.本发明公开了一种含噻唑-吡啶甲基芳杂环季铵盐侧链的截短侧耳素衍生物，所述截短侧耳素衍生物为式ⅰ或式ii中的一种，及二者药学上可接受的盐，以及所述的式ⅰ或式ii化合物及其药学上可接受的盐的溶剂化合物、对映异构体、非对映异构体、互变异构体或其任意比例的混合物，包括外消旋混合物：
[0008][0009]
其中：x选自o、n和s；r1、r2、r3、r4、r5和r6独立选自氢原子、卤素、甲基、甲氧基、三氟甲基、硝基和氰基。
[0010]
优选地，所述截短侧耳素衍生物的代表性化合物如下：
[0011][0012]
优选地，所述药学上可接受的盐为式ⅰ或式ii化合物与盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸、醋酸、富马酸、马来酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、柠檬酸、苹果酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、甲苯磺酸、谷氨酸或天冬氨酸形成的盐。
[0013]
本发明还公开了上述一种含噻唑-吡啶甲基芳杂环季铵盐侧链的截短侧耳素衍生物的制备方法，包含如下步骤：
[0014]
1)以截短侧耳素与对甲苯磺酰氯为原料反应得到中间体ⅰ；
[0015]
其中，中间体ⅰ为
[0016]
2)以步骤1)所得中间体ⅰ与2-巯基-4-(4-吡啶基)噻唑为原料，反应并纯化得到中间体ii；
[0017]
其中，中间体ii为
[0018]
3)以步骤2)所得的中间体ii与各种取代溴甲基芳杂环反应，纯化，得到如通式ⅰ或
通式ii所示结构的含噻唑-吡啶甲基芳杂环季铵盐侧链的截短侧耳素衍生物。
[0019]
优选地，步骤1)中，反应所用溶液为二氯甲烷；反应条件为在室温下反应5h；所述截短侧耳素与对甲苯磺酰氯的摩尔比为1：1.2；步骤2)中，反应所用溶剂为n，n-二甲基甲酰胺；反应条件为在碱性催化剂条件下，60℃加热反应6h。
[0020]
进一步优选地，所述碱性催化剂为碳酸钾和碘化钾。
[0021]
优选地，步骤3)中，反应所用溶剂为二氯甲烷、乙腈、甲苯或丙酮；室温下反应室温下反应7-11h。
[0022]
本发明还公开了上述一种含噻唑-吡啶甲基芳杂环季铵盐侧链的截短侧耳素衍生物在制备治疗感染性疾病药物制剂中的应用。
[0023]
优选地，所述感染性疾病为人或动物经耐药菌感染引起的感染性疾病。
[0024]
优选地，所述治疗感染性疾病药物制剂为单独使用或与可药用的赋形剂、稀释剂混合制成口服给药的片剂、胶囊剂、颗粒剂、糖浆剂、预混剂或微丸剂，或者制成非口服方式给药的搽剂或注射剂。
[0025]
本发明还公开了一种药物组合物，所述药物组合物包含权利要求1-3任意一项所述的含噻唑-吡啶甲基芳杂环季铵盐侧链的截短侧耳素衍生物作为活性成分。
[0026]
与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
[0027]
本发明提供的一种含噻唑-吡啶甲基芳杂环季铵盐侧链的截短侧耳素衍生物，利用噻唑-吡啶作为连接体，对截短侧耳素进行成季铵盐结构改造并进行广泛的生物活性筛选，获得了一类新型的具有抗病原微生物活性的季铵盐侧链截短侧耳素化合物，对合成的截短侧耳素衍生物进行初步的体外抗菌活性实验，验证了其优异的抗菌活性，尤其是对耐药菌，合成的化合物1-15对表皮葡萄球菌(atcc 12228)、金黄色葡萄球菌(atcc 25923和atcc 29213)、表皮葡萄球菌(atcc 12228)、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(atcc 33591)、鲍曼不动杆菌(atcc 19606)、沙门氏菌(atcc 14028)和大肠杆菌(atcc 25922和cmcc 44103)均具有良好的抑制作用，优选化合物3抑菌效果远优于上市的三种截短侧耳素类抗生素(瑞他莫林、泰妙菌素和沃尼妙林)，同时改善了截短侧耳素类衍生物水溶性差的问题，有潜力作为新型抗生素应用于感染性疾病的治疗，进一步为防治人或动物感染性疾病，特别是耐药菌引起的感染性疾病。
[0028]
本发明提供的制备上述含噻唑-吡啶甲基芳杂环季铵盐侧链的截短侧耳素衍生物的制备方法，以截短侧耳素、不同取代芳杂环溴代物为原料，在催化剂作用下，以噻唑-吡啶为连接体制得含噻唑-吡啶甲基芳杂环季铵盐侧链的截短侧耳素衍生物，该制备方法操作安全性高、反应条件温和、成本低廉、产率较高，适用于工业化生产。
附图说明
[0029]
图1是本发明中化合物2在氘代dmso中的核磁氢谱图；
[0030]
图2是本发明中化合物2在氘代dmso中的核磁碳谱图；
[0031]
图3是本发明中化合物3在氘代dmso中的核磁氢谱图；
[0032]
图4是本发明中化合物3在氘代dmso中的核磁碳谱图；
[0033]
图5是化合物3对表皮葡萄球菌(atcc 12228)的体外抗菌活性测定结果图；
[0034]
图6是化合物3对大肠杆菌(cmcc 44103)的体外抗菌活性测定结果图；
[0035]
图7是化合物3对金黄色葡萄球菌(atcc 29213)的体外抗菌活性测定结果图。
具体实施方式
[0036]
为了使本技术领域的人员更好地理解本发明方案，下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分的实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都应当属于本发明保护的范围。
[0037]
需要说明的是，本发明的说明书和权利要求书及上述附图中的术语“第一”、“第二”等是用于区别类似的对象，而不必用于描述特定的顺序或先后次序。应该理解这样使用的数据在适当情况下可以互换，以便这里描述的本发明的实施例能够以除了在这里图示或描述的那些以外的顺序实施。此外，术语“包括”和“具有”以及他们的任何变形，意图在于覆盖不排他的包含，例如，包含了一系列步骤或单元的过程、方法、系统、产品或设备不必限于清楚地列出的那些步骤或单元，而是可包括没有清楚地列出的或对于这些过程、方法、产品或设备固有的其它步骤或单元。
[0038]
下面结合附图对本发明做进一步详细描述：
[0039]
本发明提供的一种含噻唑-吡啶甲基芳杂环季铵盐侧链的截短侧耳素衍生物的化学结构式如式ⅰ或式ii所示：
[0040][0041]
其中：x选自o、n和s；r1、r2、r3、r4、r5和r6独立选自氢原子、卤素、甲基、甲氧基、三氟甲基、硝基和氰基。
[0042]
本发明提供的一种含噻唑-吡啶甲基芳杂环季铵盐侧链的截短侧耳素衍生物的药学上可接受的盐，所述药学上可接受的盐为式ⅰ或式ii化合物与盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸、醋酸、富马酸、马来酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、柠檬酸、苹果酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、甲苯磺酸、谷氨酸或天冬氨酸形成的盐，代表性衍生物的可药用盐如下所示：
[0043][0044]
本发明提供的一种含噻唑-吡啶甲基芳杂环季铵盐侧链的截短侧耳素衍生物还包括所述的式ⅰ或式ii化合物及其药学上可接受的盐的溶剂化合物、对映异构体、非对映异构体、互变异构体或其任意比例的混合物，包括外消旋混合物。
[0045]
本发明提供的一种含噻唑-吡啶甲基芳杂环季铵盐侧链的截短侧耳素衍生物的合成方法如下：
[0046]
(1)以截短侧耳素与对甲苯磺酰氯为原料反应得到中间体ⅰ，反应式如下：
[0047][0048]
其中，反应所用溶液为二氯甲烷；反应条件为在室温下反应4h；所述截短侧耳素与对苯甲磺酰氯的摩尔比为1：1.2；
[0049]
(2)以步骤(1)所得中间体ⅰ与2-巯基-4-(4-吡啶基)噻唑为原料，反应并纯化得到中间体ii，反应式如下：
[0050][0051]
其中，反应所用溶剂为n，n-二甲基甲酰胺；反应条件为在碱性催化剂条件下，60℃加热反应6h；所述碱性催化剂为碳酸钾和碘化钾；所述中间体ⅰ与2-巯基-4-(4-吡啶基)噻唑的摩尔比为1.9:2；
[0052]
(3)以步骤(2)所得的中间体ii与各种取代溴甲基芳杂环反应，纯化，得到如通式ⅰ或通式ii所示结构的含噻唑-吡啶甲基芳杂环季铵盐侧链的截短侧耳素衍生物，反应式如下：
[0053][0054]
其中，反应所用溶剂为二氯甲烷、乙腈、甲苯或丙酮，优选溶剂为乙腈；反应条件为室温下反应7-11h，进一步优选为9h；所述中间体ii与各种取代溴甲基芳杂环的摩尔比为1:4。
[0055]
1、合成化合物1-15的具体实施例
[0056]
本发明部分优选实施方案中化合物结构式如下所示：
[0057][0058]
下面给出上述化合物合成的实施例，化合物的结构经nmr表征。
[0059]
实施例1
[0060]
(1)中间体ⅰ的制备
[0061][0062]
将截短侧耳素(757mg，2mmol)与对甲苯磺酰氯(456mg，2.4mmol)溶于二氯甲烷(80ml)，置于反应器中，加入tea(0.8ml，6mmol)和dmap(24.4mg，0.2mmol)，室温搅拌5h。减压浓缩反应液，使用饱和碳酸氢钠水溶液(50ml)洗涤浓缩后的产物，得到中间体ⅰ(1012.1mg，1.9mmol)，产率95.0％。所制备中间体ⅰ用于中间体ii的原料。
[0063]
(2)中间体ii的制备
[0064][0065]
将中间体ⅰ(1012.1mg，1.9mmol)和2-巯基-4-(4-吡啶基)噻唑(388mg，2mmol)溶解于n，n-二甲基甲酰胺(40ml)，置于反应器中，加入碳酸钾(524.4mg，3.8mmol)和碘化钾
(31.54mg，0.19mmol)，60℃加热反应6h。反应结束后使用饱和氯化铵水溶液稀释，乙酸乙酯萃取，浓缩乙酸乙酯相，柱层析分离得到中间体ii(943mg，1.7mmol)，洗脱剂为二氯甲烷：甲醇(v:v)＝20：1。产率89.4％。
[0066]
(3)合成化合物1
[0067]
化合物1：4-(2-((3ar，4r，5r，7s，8s，9r，9as，12r)-8-羟基-4,7,9,12-四甲基-3-氧代-7-乙烯基十氢-4,9a-丙环戊[8]环烯-5-基)氧基)-2-氧代乙基)噻唑-4-基)-1-((5-甲基噻吩-2-基)甲基)吡啶基溴盐的制备
[0068][0069]
将中间体ii(166mg，0.3mmol)和2-溴甲基-5-甲基噻吩(229.2mg，1.2mmol)溶解于乙腈(10ml)，置于反应器中，室温下反应9h，减压浓缩溶剂，残余物柱层析分离纯化(200-300目硅胶粉为固定相，流动相为二氯甲烷：甲醇(v：v)＝20：1)，干燥后得到化合物1(146.02mg，0.196mmol)，产率65.2％。
[0070]1h nmr(600mhz,dmso)δ9.29(d,j＝6.6hz,2h),9.12(s,1h),8.59(d,j＝6.7hz,2h),7.97(d,j＝2.4hz,1h),7.69(dd,j＝4.9,3.9hz,1h),7.59(dd,j＝4.9,1.4hz,1h),6.09(dd,j＝15.7,12.2hz,1h),5.84(s,2h),5.45(d,j＝9.3hz,1h),4.98
–
4.85(m,2h),4.67(d,j＝5.0hz,1h),4.33(s,2h),2.49(s,1h),2.47
–
2.38(m,3h)2.32(dd,j＝17.2,10.8hz,1h),2.21
–
2.06(m,1h),2.08
–
1.89(m,2h),1.74
–
1.62(m,2h),1.56
–
1.47(m,1h),1.40(s,4h),1.38
–
1.21(m,3h),1.19(d,j＝16.0hz,1h),1.01(m,1h),0.87(s,3h),0.79(d,j＝7.0hz,3h),0.54(d,j＝7.1hz,3h).
[0071]
13
c nmr(151mhz,dmso)δ217.62,166.94,166.86,152.64,150.75,148.68,147.26,146.91,143.19,128.63,123.27,116.38,115.68,113.03,72.86,70.85,57.60,55.26,45.36,44.37,43.63,41.83,36.59,36.76,36.38,34.36,30.27,28.80,27.02,24.89,16.57,15.37,14.59,11.76.
[0072]
实施例2
[0073]
化合物2：4-(2-((3ar，4r，5r，7s，8s，9r，9as，12r)-8-羟基-4,7,9,12-四甲基-3-氧代-7-乙烯基十氢-4,9a-丙环戊[8]环烯-5-基)氧基)-2-氧代乙基)噻唑-4-基)-1-((5-硝基呋喃-2-基)甲基)吡啶基溴盐的制备
[0074][0075]
中间体ⅰ和中间体ⅱ的制备过程同实施例1，将中间体ii(166mg，0.3mmol)和2-溴甲基-5-硝基呋喃(247.2mg，1.2mmol)溶解于二氯甲烷(10ml)，置于反应器中，室温下反应9h，减压浓缩溶剂，残余物柱层析分离纯化(200-300目硅胶粉为固定相，流动相为二氯甲烷：甲醇(v：v)＝20：1)，干燥得到化合物2(108.68mg，0.143mmol)，产率为47.7％。图1为化合物2在氘代dmso中的核磁氢谱，图2为化合物2在氘代dmso中的核磁碳谱。
[0076]1h nmr(600mhz,dmso)δ9.30(d,j＝6.6hz,2h),9.08(s,1h),8.68(d,j＝6.6hz,2h),7.81(d,j＝3.8hz,1h),7.29(d,j＝3.8hz,1h),6.17(s,2h),6.06(dd,j＝17.7,11.2hz,1h),5.58(d,j＝8.4hz,1h),4.97
–
4.88(m,2h),4.55(d,j＝6.0hz,1h),4.34(s,2h),2.42(s,1h),2.23(dd,j＝19.3,10.9hz,1h),2.17
–
2.00(m,3h),1.72
–
1.61(m,2h),1.56
–
1.48(m,1h),1.45
–
1.25(m,7h),1.15(d,j＝15.8hz,1h),1.08
–
0.99(m,1h),0.89(s,3h),0.83(d,j＝7.0hz,3h),0.64(d,j＝7.1hz,3h).
[0077]
13
c nmr(151mhz,dmso)δ217.53,166.94,166.81,152.63,150.71,148.49,148.26,145.95,141.18,127.62,124.29,116.27,115.58,114.07,72.89,70.88,57.60,55.27,45.37,44.34,43.94,41.97,36.84,36.72,36.36,34.44,30.52,28.80,27.02,24.89,16.57,14.90,11.96.
[0078]
实施例3
[0079]
化合物3:4-(2-((3ar，4r，5r，7s，8s，9r，9as，12r)-8-羟基-4,7,9,12-四甲基-3-氧代-7-乙烯基十氢-4,9a-丙环戊[8]环烯-5-基)氧基)-2-氧代乙基)噻唑-4-基)-1-(噻吩-3-基甲基)吡啶基溴盐的制备
[0080][0081]
中间体ⅰ和中间体ⅱ的制备过程同实施例1，将中间体ii(166mg，0.3mmol)和3-溴甲基噻吩(212.4mg，1.2mmol)溶解于乙腈(10ml)，置于反应器中，室温下反应8h，减压浓缩溶剂，残余物柱层析分离纯化(200-300目硅胶粉为固定相，流动相为二氯甲烷：甲醇(v：v)＝20：1)，干燥得到化合物8(125.73mg，0.172mmol)，产率为57.3％。
[0082]1h nmr(600mhz,dmso)δ9.35(d,j＝6.5hz,2h),9.21(s,1h),8.88(d,j＝6.4hz,2h),7.67(d,j＝4.2hz,1h),7.31(d,j＝4.2hz,1h),6.21(s,2h),6.18(dd,j＝16.7,13.2hz,1h),5.67(d,j＝9.1hz,1h),4.87
–
4.81(m,2h),61(d,j＝5.2hz,1h),4.41(s,2h),2.55(s,1h),2.31(dd,j＝19.1,11.9hz,1h),2.21
–
2.02(m,3h),1.73
–
1.64(m,2h),1.57
–
1.43(m,1h),1.40
–
1.24(m,7h),1.19(d,j＝16.1hz,1h),1.04
–
0.97(m,1h),0.87(s,3h),0.81(d,j＝7.0hz,3h),0.73(d,j＝7.1hz,3h).
[0083]
13
c nmr(151mhz,dmso)δ217.53,166.94,166.81,152.63,150.71,148.49,148.26,145.95,141.18,127.62,124.29,116.27,115.58,114.07,72.89,70.88,57.60,55.27,45.37,44.34,43.94,41.97,36.84,36.72,36.36,34.44,30.52,28.80,27.02,24.89,16.57,14.90,11.96.
[0084]
实施例4
[0085]
化合物4：1-((5-氰基噻吩-2-基)甲基)-4-(2-((3ar，4r，5r，7s，8s，9r，9as，12r)-8-羟基-4,7,9,12-四甲基-3-氧基-7-乙烯基十氢-4,9a-丙环戊[8]环-5-基)氧基)-2-氧基乙基)硫代)噻唑-4-基)吡啶基溴盐的制备
[0086][0087]
中间体ⅰ和中间体ⅱ的制备过程同实施例1，将中间体ii(166mg，0.3mmol)和2-氰基-5-溴甲基噻吩(242.4mg，1.2mmol)溶解于乙腈(10ml)，置于反应器中，室温下反应10h，减压浓缩溶剂，残余物柱层析分离纯化(200-300目硅胶粉为固定相，流动相为二氯甲烷：甲醇(v：v)＝20：1)，干燥得到化合物4(134.57mg，0.178mmol)，产率为59.3％。
[0088]1h nmr(600mhz,dmso)δ9.31(d,j＝6.1hz,2h),9.12(s,1h),8.78(d,j＝5.6hz,2h),7.83(d,j＝3.8hz,1h),7.31(d,j＝3.9hz,1h),6.21(s,2h),6.09(dd,j＝18.6,11.3hz,1h),5.61(d,j＝8.5hz,1h),4.99
–
4.87(m,2h),4.58(d,j＝7.3hz,1h),4.41(s,2h),2.39(s,1h),2.27(dd,j＝19.4,11.9hz,1h),2.20
–
2.07(m,3h),1.76
–
1.67(m,2h),1.51
–
1.43(m,1h),1.40
–
1.21(m,7h),1.17(d,j＝16.8hz,1h),1.10
–
0.97(m,1h),0.88(s,3h),0.81(d,j＝7.7hz,3h),0.71(d,j＝7.3hz,3h).
[0089]
13
c nmr(151mhz,dmso)δ217.68,166.23,166.17,152.68,150.76,148.37,147.21,146.91,143.19,128.63,123.27,116.38,115.68,114.29,113.03,72.86,70.85,57.60,55.26,45.36,44.37,43.63,41.87,36.59,36.81,36.38,34.66,30.27,28.93,27.02,24.89,16.63,14.76,11.54.
[0090]
实施例5
[0091]
化合物5：1-(呋喃-2-基甲基)-4-(2-((3ar，4r，5r，7s，8s，9r，9as，12r)-8-羟基-4,7,9,12-四甲基-3-氧代-7-乙烯基十氢-4,9a-丙环戊[8]环烯-5-基)氧基)-2-氧代乙基)噻唑-4-基)吡啶基溴盐的制备
[0092][0093]
中间体ⅰ和中间体ⅱ的制备过程同实施例1，将中间体ii(166mg，0.3mmol)和2-溴甲基呋喃(193.2mg，1.2mmol)溶解于乙腈(10ml)，置于反应器中，室温下反应8h，减压浓缩溶剂，残余物柱层析分离纯化(200-300目硅胶粉为固定相，流动相为二氯甲烷：甲醇(v：v)＝25：1)，干燥得到目标产物化合物5(129.42mg，0.181mmol)，产率为60.3％。
[0094]1h nmr(600mhz,dmso)δ9.27(d,j＝6.5hz,2h),9.12(s,1h),8.27(d,j＝6.9hz,2h),8.01(d,j＝2.6hz,1h),7.64(dd,j＝4.7,3.2hz,1h),7.26(dd,j＝6.1,1.7hz,1h),6.21(dd,j＝15.6,12.9hz,1h),6.01(s,2h),5.76(d,j＝9.1hz,1h),5.01
–
4.84(m,2h),4.63(d,j＝6.0hz,1h),4.38(s,2h),2.56(s,1h),2.34(dd,j＝19.0,11.8hz,1h),2.21
–
2.18(m,1h),2.09
–
1.96(m,2h),1.84
–
1.68(m,2h),1.59
–
1.46(m,1h),1.39(s,4h),1.32
–
1.27(m,3h),1.16(d,j＝16.0hz,1h),1.09(m,1h),0.98(s,3h),0.88(d,j＝6.0hz,3h),0.71(d,j＝8.0hz,3h).
[0095]
13
c nmr(151mhz,dmso)δ217.49,166.57,166.37,152.58,150.22,148.56,148.37,146.66,141.17,126.37,123.01,118.67,116.57,114.27,71.37,70.87,56.61,55.37,
45.37,44.34,43.96,41.98,36.84,36.72,36.36,34.45,30.52,28.07,27.04,24.79,16.57,14.90,11.96.
[0096]
实施例6
[0097]
化合物6：4-(2-((3ar，4r，5r，7s，8s，9r，9as，12r)-8-羟基-4,7,9,12-四甲基-3-氧代-7-乙烯基十氢-4,9a-丙环戊[8]环烯-5-基)氧基)-2-氧代乙基)噻唑-4-基)-1-((5-甲氧基噻吩-2-基)甲基)吡啶基溴盐的制备
[0098][0099]
中间体ⅰ和中间体ⅱ的制备过程同实施例1，将中间体ii(166mg，0.3mmol)和2-溴甲基-5-甲氧基噻吩(231.6mg，1.2mmol)溶解于甲苯(10ml)，置于反应器中，室温下反应9h，减压浓缩溶剂，残余物柱层析分离纯化(200-300目硅胶粉为固定相，流动相为二氯甲烷：甲醇(v：v)＝20：1)，干燥得到化合物6(140.79mg，0.185mmol)，产率为61.7％。
[0100]1h nmr(600mhz,dmso)δ9.21(d,j＝8.6hz,2h),9.11(s,1h),8.73(d,j＝7.2hz,2h),7.66(d,j＝3.9hz,1h),7.31(d,j＝4.1hz,1h),6.45(s,2h),6.13(dd,j＝18.6,12.1hz,1h),5.81(m,3h),5.63(d,j＝6.9hz,1h),5.01
–
4.79(m,2h),4.67(d,j＝5.1hz,1h),4.49(s,2h),2.56(s,1h),2.31(dd,j＝20.3,14.9hz,1h),2.21
–
2.03(m,3h),1.86
–
1.71(m,2h),1.63
–
1.51(m,1h),1.41
–
1.30(m,7h),1.21(d,j＝16.1hz,1h),1.10
–
0.98(m,1h),0.91(s,3h),0.87(d,j＝7.0hz,3h),0.81(d,j＝7.1hz,3h).
[0101]
13
c nmr(151mhz,dmso)δ217.78,166.67,166.35,152.67,150.37,148.36,148.96,146.67,141.54,126.37,123.04,118.64,116.35,114.24,71.01,70.03,63.21,56.65,55.36 45.37,44.33,43.91,41.99,36.84,36.77,36.33,34.45,30.57,28.07,27.14,24.89,16.57,14.98,11.91.
[0102]
实施例7
[0103]
化合物7：1-((1h-吡咯-2-基)甲基)-4-(2-((3ar，4r，5r，7s，8s，9r，9as，12r)-8-羟基-4,7,9,12-四甲基-3-氧基-7-乙烯基十氢-4,9a-丙环五[8]环-5-基)氧基)-2-氧乙基)硫代噻唑-4-吡啶基溴盐的制备
[0104][0105]
中间体ⅰ和中间体ⅱ的制备过程同实施例1，将中间体ii(166mg，0.3mmol)和2-溴甲基吡咯(192mg，1.2mmol)溶解于二氯甲烷(10ml)，置于反应器中，室温下反应9h，减压浓缩溶剂，残余物柱层析分离纯化(200-300目硅胶粉为固定相，流动相为二氯甲烷：甲醇(v：v)＝15：1)，干燥得到化合物7(109.24mg，0.153mmol)，产率为51.0％。
[0106]1h nmr(600mhz,dmso)δ9.37(d,j＝6.6hz,2h),9.19(s,1h),8.58(d,j＝7.2hz,2h),8.12(s,1h)7.98(d,j＝3.5hz,1h),7.82(dd,j＝6.2,3.5hz,1h),7.42(dd,j＝5.4,1.8hz,1h),6.26(dd,j＝18.6,14.5hz,1h),6.01(s,2h),5.64(d,j＝9.1hz,1h),5.01
–
4.88
(m,2h),4.61(d,j＝7.2hz,1h),4.43(s,2h),3.68(s,1h),2.65(dd,j＝18.5,11.8hz,1h),2.28
–
2.15(m,1h),2.09
–
1.99(m,2h),1.81
–
1.73(m,2h),1.61
–
1.53(m,1h),1.48(s,4h),1.33
–
1.21(m,3h),1.12(d,j＝15.7hz,1h),1.01(m,1h),0.87(s,3h),0.81(d,j＝7.6hz,3h),0.76(d,j＝7.3hz,3h).
[0107]
13
c nmr(151mhz,dmso)δ217.48,166.30,166.87,152.66,150.64,148.37,148.29,145.31,141.28,127.36,124.37,116.87,114.88,114.17,72.69,70.78,57.86,55.37,45.21,44.73,43.49,41.91,36.85,36.16,36.46,34.47,30.51,28.88,27.17,24.90,16.63,14.71,11.97.
[0108]
实施例8
[0109]
化合物8:1-((5-氟噻吩-2-基)甲基)-4-(2-((3ar，4r，5r，7s，8s，9r，9as，12r)-8-羟基-4,7,9,12-四甲基-3-氧基-7-乙烯基十氢-4,9a-丙环戊[8]环-5-基)氧基)-2-氧基乙基)噻唑-4-基)吡啶基溴盐的制备
[0110][0111]
中间体ⅰ和中间体ⅱ的制备过程同实施例1，将中间体ii(166mg，0.3mmol)和2-溴甲基-4-氟噻吩(253.8mg，1.2mmol)溶解于丙酮(10ml)，置于反应器中，室温下反应9h，减压浓缩溶剂，残余物柱层析分离纯化(200-300目硅胶粉为固定相，流动相为二氯甲烷：甲醇(v：v)＝20：1)，干燥得到化合物3(104.11mg，0.139mmol)，产率为46.3％。图3为化合物3在氘代dmso中的核磁氢谱，图4为化合物3在氘代dmso中的核磁碳谱。
[0112]1h nmr(600mhz,dmso)δ9.36(d,j＝6.6hz,2h),9.08(s,1h),8.63(d,j＝6.8hz,2h),7.94(d,j＝2.9hz,1h),7.71(dd,j＝5.0,2.9hz,1h),7.38(dd,j＝4.9,1.4hz,1h),6.06(dd,j＝17.7,11.2hz,1h),5.93(s,2h),5.57(d,j＝8.3hz,1h),4.94
–
4.86(m,2h),4.58(d,j＝6.0hz,1h),4.33(s,2h),2.42(s,1h),2.23(dd,j＝19.2,10.8hz,1h),2.16
–
2.07(m,1h),2.07
–
1.97(m,2h),1.74
–
1.62(m,2h),1.56
–
1.47(m,1h),1.38(s,4h),1.35
–
1.23(m,3h),1.13(d,j＝16.0hz,1h),1.03(m,1h),0.86(s,3h),0.83(d,j＝7.0hz,3h),0.64(d,j＝7.1hz,3h).
[0113]
13
c nmr(151mhz,dmso)δ217.54,166.94,166.60,148.58,147.60,145.58,141.14,135.32,128.64,127.89,127.28,127.10,124.18,115.60,72.87,70.85,58.03,57.60,45.37,44.33,43.91,41.96,36.83,36.72,36.35,34.44,30.52,28.83,27.03,24.89,16.59,14.91,11.97.
[0114]
实施例9
[0115]
化合物9：1-(呋喃-3-基甲基)-4-(2-((3ar，4r，5r，7s，8s，9r，9as，12r)-8-羟基-4,7,9,12-四甲基-3-氧代-7-乙烯基十氢-4,9a-丙环戊[8]环烯-5-基)氧基)-2-氧代乙基)噻唑-4-基)吡啶基溴盐的制备
[0116][0117]
中间体ⅰ和中间体ⅱ的制备过程同实施例1，将中间体ii(166mg，0.3mmol)和3-溴甲基呋喃(192mg，1.2mmol)溶解于二氯甲烷(10ml)，置于反应器中，室温下反应9h，减压浓缩溶剂，残余物柱层析分离纯化(200-300目硅胶粉为固定相，流动相为二氯甲烷：甲醇(v：v)＝10：1)，干燥得到化合物9(136.57mg，0.191mmol)，产率为63.7％。
[0118]1h nmr(600mhz,dmso)δ9.23(d,j＝6.6hz,2h),9.19(s,1h),8.71(d,j＝6.4hz,2h),7.91(d,j＝3.1hz,1h),7.76(dd,j＝6.1,2.4hz,1h),7.40(dd,j＝5.0,1.5hz,1h),6.12(dd,j＝16.7,13.1hz,1h),5.97(s,2h),5.61(d,j＝9.1hz,1h),4.98
–
4.81(m,2h),4.67(d,j＝6.7hz,1h),4.42(s,2h),2.39(s,1h),2.31(dd,j＝17.2,11.8hz,1h),2.19
–
2.10(m,1h),2.06
–
1.99(m,2h),1.70
–
1.62(m,2h),1.53
–
1.48(m,1h),1.40(s,4h),1.34
–
1.21(m,3h),1.10(d,j＝17.1hz,1h),1.01(m,1h),0.93(s,3h),0.84(d,j＝7.0hz,3h),0.71(d,j＝7.1hz,3h).
[0119]
13
c nmr(151mhz,dmso)δ217.53,166.94,166.81,152.63,150.71,148.49,148.26,145.95,141.18,127.62,124.29,116.27,115.58,114.07,72.89,70.88,57.60,55.27,45.37,44.34,43.94,41.97,36.84,36.72,36.36,34.44,30.52,28.80,27.02,24.89,16.57,14.90,11.96.
[0120]
实施例10
[0121]
化合物10：1-((5-氰基噻吩-3-基)甲基)-4-(2-((3ar，4r，5r，7s，8s，9r，9as，12r)-8-羟基-4,7,9,12-四甲基-3-氧基-7-乙烯基十氢-4,9a-丙环戊[8]环-5-基)氧基)-2-氧基乙基)硫代)噻唑-4-基)吡啶基溴盐的制备
[0122][0123]
中间体ⅰ和中间体ⅱ的制备过程同实施例1，将中间体ii(166mg，0.3mmol)和2-氰基-4-溴甲基噻吩(242.4mg，1.2mmol)溶解于乙腈(10ml)，置于反应器中，室温下反应10h，减压浓缩溶剂，残余物柱层析分离纯化(200-300目硅胶粉为固定相，流动相为二氯甲烷：甲醇(v：v)＝20：1)，干燥得到化合物10(103.57mg，0.137mmol)，产率为45.7％。
[0124]1h nmr(600mhz,dmso)δ9.37(d,j＝6.7hz,2h),9.16(s,1h),8.81(d,j＝5.7hz,2h),7.86(d,j＝3.8hz,1h),7.29(d,j＝4.2hz,1h),6.19(s,2h),6.07(dd,j＝14.1,12.3hz,1h),5.57(d,j＝8.6hz,1h),4.97
–
4.86(m,2h),4.61(d,j＝7.6hz,1h),4.43(s,2h),2.43(s,1h),2.31(dd,j＝18.4,11.4hz,1h),2.23
–
2.04(m,3h),1.79
–
1.68(m,2h),1.50
–
1.43(m,1h),1.40
–
1.19(m,7h),1.14(d,j＝16.9hz,1h),1.09
–
0.97(m,1h),0.87(s,3h),0.80(d,j＝7.7hz,3h),0.72(d,j＝7.4hz,3h).
[0125]
13
c nmr(151mhz,dmso)δ217.53,166.94,166.81,152.63,150.71,148.49,148.26,145.95,141.18,127.62,124.29,116.27,115.58,114.46,114.07,72.89,70.88,57.60,
55.27,45.37,44.34,43.94,41.97,36.84,36.72,36.36,34.44,30.52,28.80,27.02,24.89,16.57,14.90,11.96.
[0126]
实施例11
[0127]
化合物11：1-((5-氟噻吩-3-基)甲基)-4-(2-((3ar，4r，5r，7s，8s，9r，9as，12r)-8-羟基-4,7,9,12-四甲基-3-氧基-7-乙烯基十氢-4,9a-丙环戊[8]环-5-基)氧基)-2-氧基乙基)硫代)噻唑-4-基)吡啶基溴盐的制备
[0128][0129]
中间体ⅰ和中间体ⅱ的制备过程同实施例1，将中间体ii(166mg，0.3mmol)和2-氟-4-溴甲基噻吩(253.8mg，1.2mmol)溶解于丙酮(10ml)，置于反应器中，室温下反应9h，减压浓缩溶剂残余物柱层析分离纯化(200-300目硅胶粉为固定相，流动相为二氯甲烷：甲醇(v：v)＝10：1)，干燥得到化合物11(107.11mg，0.143mmol)，产率为47.7％。
[0130]1h nmr(600mhz,dmso)δ9.29(d,j＝6.6hz,2h),9.11(s,1h),8.68(d,j＝6.7hz,2h),7.86(d,j＝3.9hz,1h),7.32(d,j＝4.1hz,1h),6.21(s,2h),6.09(dd,j＝18.6,12.1hz,1h),5.61(d,j＝8.5hz,1h),4.99
–
4.81(m,2h),4.57(d,j＝6.9hz,1h),4.21(s,2h),2.40(s,1h),2.27(dd,j＝18.1,10.7hz,1h),2.18
–
2.01(m,3h),1.81
–
1.63(m,2h),1.58
–
1.50(m,1h),1.48
–
1.23(m,7h),1.21(d,j＝14.8hz,1h),1.09
–
1.01(m,1h),0.91(s,3h),0.85(d,j＝7.5hz,3h),0.79(d,j＝7.4hz,3h).
[0131]
13
c nmr(151mhz,dmso)δ217.53,166.94,166.81,152.63,150.71,148.49,148.26,145.95,141.18,127.62,124.29,116.27,115.58,114.07,72.89,70.88,57.60,55.27,45.37,44.34,43.94,41.97,36.84,36.72,36.36,34.44,30.52,28.80,27.02,24.89,16.57,14.90,11.96.
[0132]
实施例12
[0133]
化合物12：1-((5-氰基呋喃-3-基)甲基)-4-(2-((3ar，4r，5r，7s，8s，9r，9as，12r)-8-羟基-4,7,9,12-四甲基-3-氧代-7-乙烯基十氢-4,9a-丙环五[8]环-5-基)氧基)-2-氧乙基)硫代噻唑-4-基)吡啶基溴盐的制备
[0134][0135]
中间体ⅰ和中间体ⅱ的制备过程同实施例1，将中间体ii(166mg，0.3mmol)和2-氰基-4-(溴甲基)呋喃(223.2mg，1.2mmol)溶解于丙酮(10ml)，置于反应器中，室温下反应9h，减压浓缩溶剂，残余物柱层析分离纯化(200-300目硅胶粉为固定相，流动相为二氯甲烷：甲醇(v：v)＝20：1)，干燥得到化合物12(120.62mg，0.163mmol)，产率为54.3％。
[0136]1h nmr(600mhz,dmso)δ9.27(d,j＝6.6hz,2h),9.06(s,1h),8.71(d,j＝6.6hz,2h),7.79(d,j＝3.9hz,1h),7.31(d,j＝3.4hz,1h),6.13(s,2h),6.07(dd,j＝18.7,11.3hz,1h),5.61(d,j＝8.7hz,1h),4.93
–
4.86(m,2h),4.61(d,j＝6.8hz,1h),4.33(s,
2h),2.43(s,1h),2.21(dd,j＝19.5,11.2hz,1h),2.16
–
2.03(m,3h),1.70
–
1.63(m,2h),1.58
–
1.43(m,1h),1.40
–
1.26(m,7h),1.20(d,j＝15.6hz,1h),1.06
–
0.98(m,1h),0.88(s,3h),0.81(d,j＝7.0hz,3h),0.73(d,j＝7.2hz,3h).
[0137]
13
c nmr(151mhz,dmso)δ217.53,166.94,166.81,152.63,150.71,148.49,148.26,145.95,141.18,127.62,124.29,116.27,115.96,115.58,114.07,72.89,70.88,57.60,55.27,45.37,44.34,43.94,41.97,36.84,36.72,36.36,34.44,30.52,28.80,27.02,24.89,16.57,14.90,11.96.
[0138]
实施例13
[0139]
化合物13：1-((2-氯噻吩-3-基)甲基)-4-(2-((3ar，4r，5r，7s，8s，9r，9as，12r)-8-羟基-4,7,9,12-四甲基-3-氧基-7-乙烯基十氢-4,9a-丙环戊[8]环-5-基)氧基)-2-氧基乙基)噻唑-4-基)吡啶基溴盐的制备
[0140][0141]
中间体ⅰ和中间体ⅱ的制备过程同实施例1，将中间体ii(166mg，0.3mmol)和2-氯-3-溴甲基噻吩(253.8mg，1.2mmol)溶解于乙腈(10ml)，置于反应器中，室温下反应8h，减压浓缩溶剂，残余物柱层析分离纯化(200-300目硅胶粉为固定相，流动相为二氯甲烷：甲醇(v：v)＝10：1)，干燥得到化合物13(130.99mg，0.171mmol)，产率为57.0％。
[0142]1h nmr(600mhz,dmso)δ9.31(d,j＝6.7hz,2h),9.11(s,1h),8.71(d,j＝6.8hz,2h),7.79(d,j＝3.9hz,1h),7.30(d,j＝3.9hz,1h),6.20(s,2h),6.21(dd,j＝18.7,12.2hz,1h),5.60(d,j＝8.5hz,1h),4.93
–
4.81(m,2h),4.56(d,j＝6.9hz,1h),4.30(s,2h),2.41(s,1h),2.20(dd,j＝19.4,10.7hz,1h),2.20
–
2.01(m,3h),1.73
–
1.64(m,2h),1.57
–
1.41(m,1h),1.37
–
1.25(m,7h),1.16(d,j＝15.9hz,1h),1.09
–
0.98(m,1h),0.87(s,3h),0.84(d,j＝7.1hz,3h),0.65(d,j＝7.2hz,3h).
[0143]
13
c nmr(151mhz,dmso)δ217.53,166.94,166.81,152.63,150.71,148.49,148.26,145.95,141.18,127.62,124.29,116.27,115.58,114.07,72.89,70.88,57.60,55.27,45.37,44.34,43.94,41.97,36.84,36.72,36.36,34.44,30.52,28.80,27.02,24.89,16.57,14.90,11.96.
[0144]
实施例14
[0145]
化合物14：1-((1h-吡咯-3-基)甲基)-4-(2-((3ar，4r，5r，7s，8s，9r，9as，12r)-8-羟基-4,7,9,12-四甲基-3-氧基-7-乙烯基十氢-4,9a-丙环五[8]环-5-基)氧基)-2-氧乙基)硫代噻唑-4-吡啶基溴盐的制备
[0146][0147]
中间体ⅰ和中间体ⅱ的制备过程同实施例1，将中间体ii(166mg，0.3mmol)和3-溴甲基吡咯(192mg，1.2mmol)溶解于乙腈(10ml)，置于反应器中，室温下反应8h，减压浓缩溶
剂，残余物柱层析分离纯化(200-300目硅胶粉为固定相，流动相为二氯甲烷：甲醇(v：v)＝10：1)，干燥得到化合物14(104.24mg，0.146mmol)，产率为48.7％。
[0148]1h nmr(600mhz,dmso)δ9.41(d,j＝6.8hz,2h),9.21(s,1h),8.57(d,j＝7.3hz,2h),8.22(s,1h)7.99(d,j＝3.4hz,1h),7.83(dd,j＝6.1,3.6hz,1h),7.48(dd,j＝5.6,1.9hz,1h),6.31(dd,j＝18.5,14.7hz,1h),6.07(s,2h),5.98(d,j＝9.7hz,1h),5.12
–
4.87(m,2h),4.59(d,j＝7.3hz,1h),4.40(s,2h),3.71(s,1h),2.70(dd,j＝18.6,12.8hz,1h),2.30
–
2.13(m,1h),2.10
–
1.97(m,2h),1.80
–
1.71(m,2h),1.63
–
1.51(m,1h),1.47(s,4h),1.31
–
1.22(m,3h),1.10(d,j＝14.7hz,1h),1.02(m,1h),0.81(s,3h),0.80(d,j＝7.6hz,3h),0.74(d,j＝7.4hz,3h).
[0149]
13
c nmr(151mhz,dmso)δ217.53,166.94,166.81,152.63,150.71,148.49,148.26,145.95,141.18,127.62,124.29,116.27,115.58,114.07,72.89,70.88,57.60,55.27,45.37,44.34,43.94,41.97,36.84,36.72,36.36,34.44,30.52,28.80,27.02,24.89,16.57,14.90,11.96.
[0150]
实施例15
[0151]
化合物15：4-(2-((3ar，4r，5r，7s，8s，9r，9as，12r)-8-羟基-4,7,9,12-四甲基-3-氧代-7-乙烯基十氢-4,9a-丙环戊[8]环烯-5-基)氧基)-2-氧代乙基)噻唑-4-基)-1-((5-甲基-1h-吡咯-3-基)甲基)-1-吡啶基溴盐的制备
[0152][0153]
中间体ⅰ和中间体ⅱ的制备过程同实施例1，将中间体ii(166mg，0.3mmol)和2-甲基-3-溴甲基吡咯(208.8mg，1.2mmol)溶解于甲苯(10ml)，置于反应器中，室温下反应8h，减压浓缩溶剂，残余物柱层析分离纯化(200-300目硅胶粉为固定相，流动相为二氯甲烷：甲醇(v：v)＝15：1)，干燥得到化合物15(118.66mg，0.163mmol)，产率为54.3％。
[0154]1h nmr(600mhz,dmso)δ9.33(d,j＝6.7hz,2h),9.18(s,1h),8.64(d,j＝6.8hz,2h),8.23(s,1h)7.97(d,j＝2.7hz,1h),7.61(dd,j＝4.7,1.3hz,1h),6.11(dd,j＝16.1,12.0hz,1h),5.80(s,2h),5.51(d,j＝9.2hz,1h),4.93
–
4.84(m,2h),4.72(d,j＝5.3hz,1h),4.41(s,2h),2.52(s,1h),2.48
–
2.39(m,3h)2.32(dd,j＝17.4,11.8hz,1h),2.19
–
2.07(m,1h),2.03
–
1.88(m,2h),1.75
–
1.63(m,2h),1.57
–
1.41(m,1h),1.39(s,4h),1.31
–
1.20(m,3h),1.13(d,j＝16.4hz,1h),1.01(m,1h),0.88(s,3h),0.76(d,j＝7.1hz,3h),0.63(d,j＝7.1hz,3h).
[0155]
13
c nmr(151mhz,dmso)δ217.53,166.94,166.81,152.63,150.71,148.49,148.26,145.95,141.18,127.62,124.29,116.27,115.58,114.07,72.89,70.88,57.60,55.27,45.37,44.34,43.94,41.97,36.84,36.72,36.36,34.44,30.52,28.80,27.02,24.89,16.57,14.90,11.96.
[0156]
2.体外抗菌活性测定
[0157]
采用微量肉汤稀释法，以莫西沙星为阳性对照品(购于上海麦克林生化科技有限公司)，测试含噻唑-吡啶甲基芳杂环季铵盐侧链的截短侧耳素衍生物的最低抑菌浓度
(minimum inhibitory concentration,mic)，同时与已上市的截短侧耳素类抗生素瑞他莫林(购于南京康满林化工实业有限公司)、泰妙菌素(购于上海源叶生物科技有限公司)和沃尼妙林(购于上海吉至生化科技有限公司)进行比较，以筛选出活性更优的截短侧耳素类衍生物。
[0158]
实验菌株包括革兰氏阳性菌：表皮葡萄球菌atcc 12228、金黄色葡萄球菌atcc 29213、atcc 25923和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌atcc 33591；革兰氏阴性菌：沙门氏菌atcc14028、鲍曼不动杆菌atcc 19606、大肠杆菌atcc 25922和cmcc 44103，所有菌株均购自于美国模式培养物集存库。
[0159]
具体操作步骤如下：
[0160]
(1)mhb培养基配制：称取mhb培养基(购于广州环凯微生物科技有限公司)20.0g，加入到1l蒸馏水中，加热煮沸至完全溶解，分装于锥形瓶中，121℃高压灭菌15min，备用。
[0161]
(2)实验菌株培养至对数生长期：无菌条件下，将复苏后的实验菌株接种到100ml mhb培养基中，置于37℃恒温恒湿培养箱中培养20-22h，备用。
[0162]
(3)样品液制备：称取待测样品(本发明合成的化合物1-15、瑞他莫林、泰妙菌素和沃尼妙林)用dmso溶液溶解，配制成浓度为10.24mg/ml的样品液，阳性对照品(莫西沙星)用dmso溶液溶解，配制成浓度为5.12mg/ml的样品液。
[0163]
(4)菌悬液制备：无菌条件下，将培养至对数生长期的实验菌株用mhb培养基校正到0.5麦氏单位浊度标准后按1：200的比例进行稀释，备用。
[0164]
(5)微量二倍稀释法测定mic：取无菌96孔板，在第2孔加入10μl莫西沙星样品液，第4-11孔加入10μl dmso溶液，第3、4孔加入10μl按梯度设置稀释过的样品液，并对药物进行二倍稀释至第10孔，第11孔为溶剂对照。然后每孔加入190μl稀释过的菌悬液，使每孔最终的菌液浓度为5
×
105cfu/ml，置37℃恒温恒湿箱中培育20-22h。
[0165]
(6)mic终点判读：黑色背景下肉眼观察96孔板中所见能完全抑制细菌生长的浓度为该样品对该种细菌的最低抑菌浓度。(代表化合物2的部分体外抗菌结果见附图5-7，其中，小孔自左向右依次对应为阳性、128、64、32、16、8、4、2、1、阴性)
[0166]
表1受试药物的最小抑菌浓度(μg/ml)
[0167]
[0168][0169]
由表1可知，化合物1-15对表皮葡萄球菌(atcc 12228)和金黄色葡萄球菌(atcc25923和atcc 29213)均具有良好的抑制作用，且化合物1-12对表皮葡萄球菌(atcc 12228)的抑制效果要远优于已上市截短侧耳素类抗生素，其中化合物3的抑制效果最优，mic值可以达到1μg/ml，远低于上市药物中抑菌效果最好的泰妙菌素(mic＝16μg/ml)；对于金黄色葡萄球菌(atcc 25923和atcc 29213)而言，化合物1-15均有明显的抑制作用，其中抑制作用最优的化合物3的mic可以达到0.5μg/ml和0.25μg/ml；合成的化合物1-15均可以对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(atcc 33591)产生良好的抑制作用，mic值处于1到64μg/ml。
[0170]
此外，化合物1-13以及化合物15对沙门氏菌(atcc 14028)的抑制效果不弱于已上市的三种截短侧耳素类抗生素，所有化合物的mic值均处于1到64μg/ml之间。对于鲍曼不动杆菌(atcc 19606)和大肠杆菌(atcc 25922和cmcc 44103)，化合物1-15也产生不同程度的抑制作用。化合物11对鲍曼不动杆菌(atcc 19606)的抑制效果最佳，mic值可以达到2μg/ml；化合物3对大肠杆菌(atcc 25922和cmcc 44103)的抑制效果最优，mic值分别为1和0.5μg/ml。
[0171]
综上，本发明中含噻唑-吡啶甲基芳杂环季铵盐侧链的截短侧耳素衍生物可以对不同的菌株产生抑制作用，大多数化合物对耐药菌的抑制能力强于三种上市药物，具有进一步进行临床研究的意义。
[0172]
3.化合物溶解度的测定
[0173]
实验方法：选取代表性化合物3、5、7测定溶解度，以瑞他莫林的盐酸盐作为对照。分别取各自样品1mg定量溶解于10ml容量瓶中，采取高效液相色谱法测定其吸收峰面积；再将代表性化合物3、5、7及对照药物瑞他莫林盐酸盐的饱和溶剂稀释10倍体积，采用高效液
相色谱法测定其吸收峰面积；通过对吸收峰面积的计算获得其各自水中溶解度。
[0174]
实验仪器为岛津lc-16，色谱柱为hypersil c18 ods(4.6
×
250mm
×
5μm)，流速为1.0ml/min，检测波长为235nm，流动相为水：乙腈＝30：70。
[0175]
表2代表性化合物3、5、7的溶解度
[0176]
化合物溶解度(mg/ml，ph＝7.0水中)31.8552.0172.32瑞他莫林盐酸盐0.12
[0177]
由表2的测试结果可知，所测试的化合物3、5和7均具有良好的水溶性，其中化合物7具有最好的水溶性，溶解度达到了2.32mg/ml。与对照药物瑞他莫林盐酸盐相比，水溶性具有显著的改善。
[0178]
以上内容仅为说明本发明的技术思想，不能以此限定本发明的保护范围，凡是按照本发明提出的技术思想，在技术方案基础上所做的任何改动，均落入本发明权利要求书的保护范围之内。