一种源于铁皮石斛和绞股蓝的活性成分组合物及其应用

1.本发明涉及化妆品、护肤品技术领域，具体而言，涉及一种源于铁皮石斛和绞股蓝的活性成分组合物及其在化妆品、护肤品中的应用。


背景技术：

2.目前，随着人们生活水平的不断提高，人们对促进肌肤健康、白晳的化妆品、护肤品的需求越来越高。但是，人们受自身年纪的增长、生活压力的增大、长期使用电子产品及户外紫外线辐射、化妆品应用不当等多种因素的影响，导致皮肤中的黑色素容易沉着，当黑色素局部过量沉积时，人们的脸上容易岀现雀斑、黄褐斑、晒斑等不同类型的色素沉着斑，严重影响人们的外在形象，为适应人们改善外在形象的需求，市面上的美白类化妆品、护肤品的产品种类多种多样。
3.已上市的护肤品中通知添加各种具有美白或者祛斑的组分以减少皮肤黑色素的产生或加快皮肤黑色素的代谢，从而提高产品的美白祛斑的效果。然而，现有的护肤品中添加的化学药物或激素类药物虽然在短期时间内对皮肤具有明显改善作用，但长期使用会造成严重的副作用。随着“回归大自然”的社会呼声越来越高，中药及天然药物在化妆品和护肤品中的应用越来越广泛，但是目前中药在化妆品、护肤品中的应用主要是以提取物的形式应用，而当前化妆品用中药提取物尚没有国家或行业统一的质量标准，导致化妆品用中药提取物的质量差异较大。而以天然产物单体化学成分为原料在化妆品或护肤品中的应用还较少。天然产物单体化学成分结构明确、纯度较高，可以有效控制其质量，并且其作用机制容易阐述清楚。
4.中药铁皮石斛(dendrobium officinale kimura et migo)又名黑节草、铁皮枫斗等，为兰科石斛属植物，是我国传统名贵药用植物，早在《神农本草经》中就列为上品，被誉为“九大仙草”之一。药用部分是新鲜或干燥茎，具有强阴益精、厚肠胃、轻身延年的功效。现代药理学研究表明，铁皮石斛的主要有效成分为多糖类化合物和联苄类化合物，具有抗肿瘤、抗氧化、抗衰老、增强免疫、调节胃肠运动、降血糖、降血脂等多重功效。
5.绞股蓝(gynostemma pentaphyllum makino.)又名七叶胆、福音草等，是葫芦科绞股蓝属植物。药理学研究表明：绞股蓝具有较好的降血压、降血糖、降血脂、抗肿瘤、抗衰老、提高免疫力等作用。其中，绞股蓝皂苷和绞股蓝次级皂苷是绞股蓝中的主要活性成分。
6.现有技术中的化妆品和护肤品主要有以下几方面的缺陷：
7.缺陷一：过敏反应。过敏反应副作用都是因人而异的，有些人使用后会出现强烈的过敏反应，一旦出现过敏反应就应及时停止用药，以免给自己带来更多伤害。皮肤过敏的原因是由于化妆品中的某些成分，对皮肤细胞产生刺激，使皮肤细胞产生抗体，从而导致过敏。化妆品致敏源最多的是香料、防腐剂、重金属。其中重金属主要是指一些代有剥脱、美白性质的铅、汞含量超标的化妆品；香料包括：大花茉莉香精、新国际香精、晚香玉a型香精、白玫瑰香精、紫丁香精、桂花香精。防腐剂包括：咪唑烷基脲、对羟基苯甲酸酯、布罗波尔、甲醛。另外还有染发剂对苯二胺、氯化钴，油彩硫酸镍，和松香。
8.缺陷二：工艺复杂且成本较高。
9.缺陷三：具有黏膜刺激性。化妆品中常含有酸、碱、盐、表面活性剂等化学成分。这些化学物质作用于皮肤、人体器官的黏膜后，经常会引起刺激性皮肤病变，又称刺激性接触皮炎。化妆品引起的不良反应中，比较多见的是局部皮肤瘙痒，同时出现红斑、丘疹、脱屑或刺痛感，反应轻微。但也有个别属于难以恢复或不可逆的严重损害。
10.缺陷四：耐药性。耐药性又称抗药性，一般是指病原体与药物多次接触后，对药物的敏感性下降甚至消失，致使药物对该病原体的疗效降低或无效。
11.缺陷五：降低皮肤免疫力。使皮肤的天然保湿能力及免疫力降低，造成皮肤干燥，粗糙，皮脂分泌旺盛，毛孔粗大。皮肤将会更快衰老。
12.缺陷六：安全可靠性低且具有较大的毒副作用，严重可引发皮癌。防腐剂可能会在日光照射下转变成有毒物质，加速皮肤老化，增加人们患皮肤癌的风险。
13.基于以上原因，需要对化妆品和护肤品进一步研究，以解决常见的化妆品和护肤品易产生过敏反应、工艺复杂且成本较高、具有黏膜刺激性、易产生耐药性、降低皮肤免疫力以及具有较大的毒副作用的问题。


技术实现要素：

14.基于此，本发明的主要目的在于提供了一种源于铁皮石斛与绞股蓝的活性成分药物组合物，以解决现有技术中常见的活性成分不明确，化妆品和护肤品易产生过敏反应、工艺复杂且成本较高、具有黏膜刺激性、易产生耐药性、降低皮肤免疫力以及具有较大的毒副作用的问题。
15.为了实现上述目的，根据本发明的一个方面，提供了一种药物组合物，该药物组合物包含式i的化合物和绞股蓝次级皂苷，其中该式i的化合物和该绞股蓝次级皂苷的重量比为(1～10):(1～10)，
16.其中，该式i的化合物具有以下的结构式
[0017][0018]
其中，r1至r5各自独立地选自氢、氟、氯、溴、碘、c1至c8烷基基团、c1至c8烯基基团、c1至c8炔基基团、c1至c8氟代烷基基团、c1至c8氟代烯基基团、c1至c8氟代炔基基团、c1至c8氯代烷基基团、c1至c8氯代烯基基团、c1至c8氯代炔基基团、c1至c8溴代烷基基团、c1至c8溴代烯基基团、c1至c8溴代炔基基团、c1至c8碘代烷基基团、c1至c8碘代烯基基团或c1至
c8碘代炔基基团。
[0019]
进一步地，r1至r5各自独立地选自氢、氟、c1至c3烷基基团、c1至c3烯基基团、c1至c3炔基基团、c1至c3氟代烷基基团、c1至c3氟代烯基基团或c1至c3氟代炔基基团。
[0020]
进一步地，r1和r5独立地选自氢、氟或c1至c3烷基基团，所述c1至c3烷基基团优选地为甲基基团，并且r2、r3、r4、r6如上所定义。
[0021]
进一步地，r1和r5独立地选自氢、氟或甲基基团，并且r2、r3、r4、r6分别为甲基。
[0022]
进一步地，该绞股蓝次级皂苷选自由以下组成的组中的一种或多种：绞股蓝次级皂苷a、绞股蓝次级皂苷b、绞股蓝次级皂苷c、绞股蓝次级皂苷d、绞股蓝次级皂苷e、绞股蓝次级皂苷f、绞股蓝次级皂苷g、绞股蓝次级皂苷h、绞股蓝次级皂苷i、绞股蓝次级皂苷j、绞股蓝次级皂苷k、绞股蓝次级皂苷l、绞股蓝次级皂苷m、绞股蓝次级皂苷n、绞股蓝次级皂苷o、绞股蓝次级皂苷p、绞股蓝次级皂苷q、绞股蓝次级皂苷r、绞股蓝次级皂苷s、绞股蓝次级皂苷t、绞股蓝次级皂苷u、绞股蓝次级皂苷v、绞股蓝次级皂苷w和绞股蓝次级皂苷x。
[0023]
进一步地，该绞股蓝次级皂苷为绞股蓝次级皂苷a(gypensapogenin a)。gypensapogenin a化合物的具体结构如下所示：
[0024][0025]
进一步地，该式i的化合物为毛兰素。毛兰素化合物的具体结构如下所示：
[0026][0027]
进一步地，该式i的化合物和该绞股蓝次级皂苷的重量比为(1～2):(1～3)。
[0028]
进一步地，该式i的化合物和该绞股蓝次级皂苷的重量比为1:(1～3)。
[0029]
进一步地，该式i的化合物和该绞股蓝次级皂苷的重量比为1:(2～3)。
[0030]
进一步地，该式i的化合物和该绞股蓝次级皂苷的重量比为1:3。
[0031]
根据本发明的另一方面，提供了一种包含上述药物组合物的化妆品或护肤品。
[0032]
进一步地，该化妆品或护肤品还包含药学上可接受的药用辅料。
[0033]
进一步地，该药用辅料选自乳化剂、增稠剂、芳香剂、防腐剂、润湿剂、保湿剂、表面
活性剂和润滑剂中的一种或多种。
[0034]
进一步地，该药用辅料选自甘油、丙二醇、透明质酸钠、海藻酸钠、羟丙基甲基纤维素、黄原胶、月桂醇聚醚-7、鲸蜡硬脂醇、十二烷基苯磺酸钠和肉豆蔻酸异丙酯中的一种或多种。
[0035]
进一步地，该化妆品或护肤品为美白类化妆品或护肤品。
[0036]
进一步地，该化妆品或护肤品为面霜、面膜、护手霜或洗面奶。
[0037]
进一步地，本发明的化妆品或护肤品含有相对于化妆品或护肤品的重量计算总量为0.00001至50wt.％、或0.0001至10wt.％、或0.0001至5wt.％、或0.005至1wt.％、或0.1至20wt.％、或0.5至15wt.％、或1至5wt.％的至少一种药用辅料。
[0038]
根据本发明的另一方面，提供了一种上述药物组合物在制备用于治疗皮肤疾病的药物中的用途。
[0039]
根据本发明的另一方面，提供了一种上述药物组合物在制备用于治疗与酪氨酸酶相关的皮肤疾病的药物中的用途。
[0040]
根据本发明的另一方面，提供了一种上述药物组合物或上述化妆品或护肤品组合物在制备用于美白、保湿、抗皱等产品中的用途。
[0041]
进一步地，该化妆品或护肤品组合物为面霜、面膜、护手霜或洗面奶。
[0042]
根据本发明的另一方面，提供了一种制备化妆品或护肤品的方法，该方法包括以下步骤：
[0043]
1)取适量的式i的化合物和绞股蓝次级皂苷以及适量的药用辅料至第一溶剂，得到第一混合物，其中该式i的化合物和该绞股蓝次级皂苷的重量比为(1～10):(1～10)，其中，该式i的化合物具有以下的结构式
[0044][0045]
其中，r1至r5各自独立地选自氢、氟、氯、溴、碘、c1至c8烷基基团、c1至c8烯基基团、c1至c8炔基基团、c1至c8氟代烷基基团、c1至c8氟代烯基基团、c1至c8氟代炔基基团、c1至c8氯代烷基基团、c1至c8氯代烯基基团、c1至c8氯代炔基基团、c1至c8溴代烷基基团、c1至c8溴代烯基基团、c1至c8溴代炔基基团、c1至c8碘代烷基基团、c1至c8碘代烯基基团或c1至c8碘代炔基基团；
[0046]
2)添加适量的该药用辅料至第二溶剂，得到第二混合物；以及
[0047]
3)将该第一混合物和该第二混合物混合，得到化妆品或护肤品。
[0048]
进一步地，该药用辅料选自乳化剂、增稠剂、芳香剂、防腐剂、润湿剂、保湿剂、表面活性剂和润滑剂中的一种或多种。
[0049]
进一步地，该药用辅料选自甘油、丙二醇、透明质酸钠、海藻酸钠、羟丙基甲基纤维素、黄原胶、月桂醇聚醚-7、鲸蜡硬脂醇、十二烷基苯磺酸钠和肉豆蔻酸异丙酯中的一种或多种。
[0050]
进一步地，在步骤3)中进一步添加该第二溶剂。
[0051]
进一步地，该第一溶剂和该第二溶剂是相同的或不同的。
[0052]
进一步地，该第一溶剂选自c1～c4的醇、二醇、醚、水、甲酸和乙酸中的一种或多种。
[0053]
进一步地，该第二溶剂选自c1～c4的醇、二醇、醚、水、甲酸和乙酸中的一种或多种。
[0054]
根据本发明的另一方面，提供了一种制备药物组合物的方法，该方法包括将适量的从铁皮石斛中提取分离得到的式i的化合物与适量的从绞股蓝中提取分离得到的绞股蓝次级皂苷进行混合，得到药物组合物，其中该式i的化合物和该绞股蓝次级皂苷的重量比为(1～10):(1～10)，其中，该式i的化合物具有以下的结构式
[0055][0056]
其中，r1至r5各自独立地选自氢、氟、氯、溴、碘、c1至c8烷基基团、c1至c8烯基基团、c1至c8炔基基团、c1至c8氟代烷基基团、c1至c8氟代烯基基团、c1至c8氟代炔基基团、c1至c8氯代烷基基团、c1至c8氯代烯基基团、c1至c8氯代炔基基团、c1至c8溴代烷基基团、c1至c8溴代烯基基团、c1至c8溴代炔基基团、c1至c8碘代烷基基团、c1至c8碘代烯基基团或c1至c8碘代炔基基团。
[0057]
进一步地，该方法包括以下步骤：
[0058]
1)取适量的铁皮石斛药材，添加10-12倍体积的70％-95％的乙醇进行回流提取1-3小时，过滤，得到滤液，回收乙醇至无醇味，加入等体积的乙酸乙酯萃取，回收乙酸乙酯得到萃取物，将乙酸乙酯萃取物经硅胶柱层析分离，以正己烷-乙酸乙酯3:1-5:1的比例洗脱，经重结晶得到毛兰素。
[0059]
2)取适量的绞股蓝药材，加10-30倍水煎煮1-3小时，放冷，过滤，滤液加载至d101大孔树脂层析柱，以10-25％乙醇洗脱，回收10％-25％乙醇至无醇味，加盐酸调ph值至1～2，水浴水解4-8小时，静置沉淀6-10小时，过滤，收集沉淀，经硅胶柱层析分离，以正己烷-乙酸乙酯15:1-25:1洗脱，经重结晶得到gypensapogenin a。
[0060]
3)将适量的毛兰素和适量的gypensapogenin a混合，得到药物组合物，其中该毛兰素和该绞股蓝次级皂苷的重量比为(1～10):(1～10)。
[0061]
应用本发明的技术方案，本发明的药物组合物包含式i的化合物和绞股蓝次级皂苷，其中该式i的化合物和该绞股蓝次级皂苷的重量比为(1～10):(1～10)。该药物组合物对人体安全可靠、无毒副作用、对黏膜无刺激性，具有明显的美白、抗皱、消炎止氧作用，可以用于面霜、面膜、护手霜或洗面奶等化妆品、护肤品中，具有美白活性从而能够很好地解决常见的化妆品或护肤品组合物易产生过敏反应、工艺复杂且成本较高、具有黏膜刺激性、易产生耐药性、降低皮肤免疫力以及具有较大的毒副作用的问题。
具体实施方式
[0062]
下面将结合本技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本技术中的实施例，本领域技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本技术保护的范围。
[0063]
需要说明的是，在不冲突的情况下，本技术中的实施例及实施例中的特征可以相互组合。下面将结合实施例来详细说明本发明。
[0064]
以下结合具体实施例对本发明作进一步详细描述，这些实施例不能理解为限制本技术所要求保护的范围。
[0065]
正如背景技术部分所描述的，现有的化妆品或护肤品组合物中常见的活性成分不明确，化妆品和护肤品易产生过敏反应、工艺复杂且成本较高、具有黏膜刺激性、易产生耐药性、降低皮肤免疫力以及具有较大的毒副作用的问题。为了解决上述问题，本发明提供了一种药物组合物，该药物组合物包含式i的化合物和绞股蓝次级皂苷，其中该式i的化合物和该绞股蓝次级皂苷的重量比为(1～10):(1～10)，其中，该式i的化合物具有以下的结构式
[0066][0067]
其中，r1至r5各自独立地选自氢、氟、氯、溴、碘、c1至c8烷基基团、c1至c8烯基基团、c1至c8炔基基团、c1至c8氟代烷基基团、c1至c8氟代烯基基团、c1至c8氟代炔基基团、c1至c8氯代烷基基团、c1至c8氯代烯基基团、c1至c8氯代炔基基团、c1至c8溴代烷基基团、c1至c8溴代烯基基团、c1至c8溴代炔基基团、c1至c8碘代烷基基团、c1至c8碘代烯基基团或c1至c8碘代炔基基团。
[0068]
本发明的药物组合物中两者具有协同美白活性，并且该组合物对人体安全可靠、无毒副作用、对黏膜无刺激性，并且其效果优于铁皮石斛及绞股蓝药材提取物和单独的单体化合物，具有良好的面霜等化妆品、护肤品的开发应用前景，以满足市场消费者的需求。
[0069]
在一种优选的实施方式中，r1至r5各自独立地选自氢、氟、c1至c3烷基基团、c1至c3烯基基团、c1至c3炔基基团、c1至c3氟代烷基基团、c1至c3氟代烯基基团或c1至c3氟代炔基基团。
[0070]
在一种优选的实施方式中，r1和r5独立地选自氢、氟或c1至c3烷基基团，所述c1至c3烷基基团优选地为甲基基团，并且r2、r3、r4、r6如上所定义。
[0071]
在一种优选的实施方式中，r1和r5独立地选自氢、氟或甲基基团，并且r2、r3、r4、r6分别为甲基。
[0072]
在一种优选的实施方式中，该绞股蓝次级皂苷(gypensapogenin)选自由以下组成的组中的一种或多种：绞股蓝次级皂苷a(gypensapogenin a)、绞股蓝次级皂苷b(gypensapogenin b)、绞股蓝次级皂苷c(gypensapogenin c)、绞股蓝次级皂苷d(gypensapogenin d)、绞股蓝次级皂苷e(gypensapogenin e)、绞股蓝次级皂苷f(gypensapogenin f)、绞股蓝次级皂苷g(gypensapogenin g)、绞股蓝次级皂苷h(gypensapogenin h)、绞股蓝次级皂苷i(gypensapogenin i)、绞股蓝次级皂苷j(gypensapogenin j)、绞股蓝次级皂苷k(gypensapogenin k)、绞股蓝次级皂苷l(gypensapogenin l)、绞股蓝次级皂苷m(gypensapogenin m)、绞股蓝次级皂苷n(gypensapogenin n)、绞股蓝次级皂苷o(gypensapogenin o)、绞股蓝次级皂苷p(gypensapogenin p)、绞股蓝次级皂苷q(gypensapogenin q)、绞股蓝次级皂苷r(gypensapogenin r)、绞股蓝次级皂苷s(gypensapogenin s)、绞股蓝次级皂苷t(gypensapogenin t)、绞股蓝次级皂苷u(gypensapogenin u)、绞股蓝次级皂苷v(gypensapogenin v)、绞股蓝次级皂苷w(gypensapogenin w)和绞股蓝次级皂苷x(gypensapogenin x)。绞股蓝次级皂苷均具有达玛烷型三萜的母核结构，绞股蓝次级皂苷是从绞股蓝总皂苷的总皂苷水解物中分离得到，具有相同或相似的药理活性。
[0073]
其中，上述绞股蓝次级皂苷的结构式和制备可参照现有技术文献如(li,n.et al.,2012.triterpenes possessing an unprecedented skeleton isolated f rom hydrolyzate of total saponins from gynostemma pentaphyllum.european j ournal of medicinal chemistry 50,173-178；xiaoshu zhang.et al.,2017.triterpenes derived from hydrolyzate of total gynostemma pentaphyllum saponins with anti-hepatic fibrosis and protective activity against h2o2-induced injury.phytochemistry.2017dec；144:226-232；xiao-shu zhang.et al.,2015.novel dammarane-type triterpenes isolated from hydrolyzate of total gynostemma pentaphyllum saponins.bioorg med chem lett.2015aug 15；25(16):3095-9；xiaoshu zhang.et al.,2019.four new dammarane-type triterpenes derivatives from hydrolyzate of total gynostemma pentaphyllum saponins and their bioactivities.nat prod res.2019jun；33(11):1605-1611；xiao-shu zhang.et al.,2015.gypensapogenin h,a novel dammarane-type triterpene induces cell cycle arrest and apoptosis on prostate cancer cells.steroids.2015dec；104:276-83)。
[0074]
在一种优选的实施方式中，该绞股蓝次级皂苷为绞股蓝次级皂苷a(gypensapogenin a)。gypensapogenin a化合物的具体结构如下所示：
[0075][0076]
在一种优选的实施方式中，绞股蓝次级皂苷(gypensapogenin)可以以立体异构体存在。应当知道，本发明包括绞股蓝次级皂苷(gypensapogenin)的所有几何异构体和旋光异构体及其混合物(包括外消旋化合物)的用途。互变异构体及其混合物的用途也构成本发明的一个方面。
[0077]
包括式i的化合物和绞股蓝次级皂苷的上述药物组合物通常可给包括人在内的哺乳动物施用，其施用形式为常用的药物组合物的形式，例如胶囊剂、微型胶囊剂、片剂、颗粒剂、散剂、锭剂、糖浆、气雾剂、吸入、溶液、注射液、悬浮剂、乳剂、栓剂等，且最适合的配剂形式为乳剂。
[0078]
包括式i的化合物和绞股蓝次级皂苷的上述药物组合物可以局部用药，例如皮肤局部用药，该药用组合物可为溶液剂、混悬剂、七氟烃烷气雾剂和干粉制剂；或者全身用药，例如口服给药，组合物形式可为片剂、胶囊剂、糖浆、粉剂或颗粒剂，或者胃肠外给药，药物形式可为溶液剂或混悬剂，或者皮下给药或者栓剂直肠给药，或者透皮给药。
[0079]
对于局部用药，活性物质适宜的使用形式为油膏、药酒、乳剂、溶液、洗液、喷雾剂、悬液等。以油膏、乳剂和溶液为好。这些用于局部施用的药剂的制备可以是将作为活性成分的产物与非毒性、惰性的通常用于这些制剂、且适于局部治疗的固体或液体载体混合。
[0080]
在一种优选的实施方式中，该式i的化合物为毛兰素。毛兰素化合物的具体结构如下所示：
[0081][0082]
为进一步增强该药物组合物中两种组分的协同作用效果即增强该药物组合物的美白功效，在一种优选的实施方式中，该式i的化合物和该绞股蓝次级皂苷的重量比为(1～2):(1～3)。
[0083]
在一种优选的实施方式中，该式i的化合物和该绞股蓝次级皂苷的重量比为1:(1～3)。
[0084]
在一种优选的实施方式中，该式i的化合物和该绞股蓝次级皂苷的重量比为1:(2～3)。
[0085]
在一种优选的实施方式中，该式i的化合物和该绞股蓝次级皂苷的重量比为1:3。
[0086]
根据本发明的另一方面，提供了一种包含上述药物组合物的化妆品或护肤品。
[0087]
本发明的化妆品或护肤品如面膜的配制物还可以含有适宜的添加剂和载体以改善其性质和简化制备，在一种优选的实施方式中，该化妆品或护肤品还包含药学上可接受的药用辅料。
[0088]
在一种优选的实施方式中，本发明的化妆品或护肤品含有相对于化妆品或护肤品的重量计算总量为0.00001至50wt.％、或0.0001至10wt.％、或0.0001至5wt.％、或0.005至1wt.％、或0.1至20wt.％、或0.5至15wt.％、或1至5wt.％的至少一种药用辅料。
[0089]
在一种优选的实施方式中，该药用辅料选自乳化剂、增稠剂、芳香剂、防腐剂、润湿剂、保湿剂、表面活性剂和润滑剂中的一种或多种。
[0090]
上述乳化剂是甲基纤维素、单硬脂酸甘油酯、羟化卵磷脂、乙酰化单甘油酯、二乙二醇二硬脂酸酯、三羟基甲烷、干酪素、乙二醇单硬脂酸酯、乙基羟乙基纤维素、二乙酰单甘油酯、醋酸脂肪酸甘油酯、木糖醇酐单油酸酯、海藻酸丙二醇酯、二缩三甘油单月桂酸酯中的一种或几种。
[0091]
上述增稠剂为卡波姆、丙烯酸(酯)类/c10-c30烷醇丙烯酸酯交联聚合物、丙烯酸钠/丙烯酰二甲基牛磺酸钠共聚物/异十六烷/聚山梨醇酯-80、丙烯酸羟乙酯/丙烯酰二甲基牛磺酸钠共聚物、甲基葡糖二油酸酯、聚丙烯酰胺、鲸蜡硬脂醇、硬脂酸、黄原胶、羟乙基纤维素中的至少一种。
[0092]
上述芳香剂为香精。
[0093]
上述防腐剂为苯氧乙醇、乙基己基甘油、羟苯甲酯以及羟苯丙酯中的至少一种。
[0094]
上述润湿剂为肉豆蔻酸异丙酯、乳木果油、棕榈酸异辛酯、二甲基硅油、白矿油、氢化椰子油、霍霍巴籽油、辛酸/癸酸甘油三酯、坚果油、葵花籽油中的至少一种。
[0095]
上述保湿剂为丙三醇、甘油聚醚-26、1,3-丁二醇、1,4-丁二醇、1,3-丙二醇、甜菜碱、透明质酸钠、糖类同分异构体中的至少一种。
[0096]
本发明中对于上述表面活性剂的种类没有特别的限制，可以采用本领域中常用的表面活性剂。所述表面活性剂包括阴离子表面活性剂、阳离子表面活性剂、两性表面活性剂、非离子表面活性剂和高分子表面活性剂中的一种或几种。
[0097]
在本发明的一些优选的实施例中，所述阳离子表面活性剂包括聚季铵盐-7、阳离子瓜尔胶、泛醇中的一种或几种。
[0098]
在本发明的一些优选的实施例中，所述阴离子表面活性剂包括甘草酸二钾、月桂醇聚醚硫酸酯钠、十二烷基硫酸钠、二甲苯磺酸钠、十四酸、十二酸、十八酸和甲基椰油酰牛磺酸钠中的一种或几种。
[0099]
在本发明的一些优选的实施例中，所述两性表面活性剂包括丙三醇(甘油)、椰油基两性醋酸钠、椰油酰胺丙基甜菜碱、亮氨酸和椰油酰胺丙基甜菜碱中的一种或几种。
[0100]
在本发明的一些优选的实施例中，所述非离子表面活性剂包括丁二醇、烟酰胺、邻苯二甲酸烷基胺、聚甘油4葵酸酯、硬脂酸乙二醇双酯、椰油酸单乙醇酰胺和尿囊素中的一种或几种。
[0101]
在本发明的一些优选的实施例中，所述高分子表面活性剂包括羟乙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、黄原胶和透明质酸钠中的一种或几种。
[0102]
本发明中，对于表面活性剂的用量没有特别的限制，可以采用本领域中配制护肤用品的常规用量。
[0103]
上述润滑剂为液体石蜡、肉豆蔻酸异丙酯、聚二甲基硅氧烷和霍霍巴籽油中的一种或者几种。
[0104]
在一种优选的实施方式中，该药用辅料选自甘油、丙二醇、透明质酸钠、海藻酸钠、羟丙基甲基纤维素、黄原胶、月桂醇聚醚-7、鲸蜡硬脂醇、十二烷基苯磺酸钠和肉豆蔻酸异丙酯中的一种或多种。
[0105]
在一种优选的实施方式中，该化妆品或护肤品为美白类化妆品或护肤品。
[0106]
在一种优选的实施方式中，该化妆品或护肤品为面霜、面膜、护手霜或洗面奶。
[0107]
根据本发明的另一方面，提供了一种上述药物组合物在制备用于治疗皮肤疾病的药物中的用途。
[0108]
根据本发明的另一方面，提供了一种上述药物组合物在制备用于治疗与酪氨酸酶相关的皮肤疾病的药物中的用途。
[0109]
在一种优选的实施方式中，上述药物组合物还适用于粉刺、牛皮癣和其它伴有增强的或有病理学改变的角质化的皮肤病的局部和全身治疗，适用于炎性和过敏性皮肤症状的局部和全身治疗。另外，上述药物组合物还可以用于控制具有炎性或退化或转化变化的粘膜病症。不仅如此，上述药物组合物，最好是以局部制剂的形式使用，还可用于治疗轻度或重度损伤的皮肤(皮肤老化)。
[0110]
在本发明中，术语“治疗”也包括“预防”，除非存在与此相反的具体说明。术语“治疗(的)”和“治疗(地)”应该作相应的理解。
[0111]
本发明还提供治疗皮肤疾病的方法，该方法包括给予所述患者治疗有效量的上文定义的式i的化合物或其药学上可接受的溶剂化物以及治疗有效量的上文定义的绞股蓝次级皂苷。
[0112]
本发明还提供治疗炎性和过敏性皮肤疾病的方法，该方法包括给予所述患者治疗有效量的上文定义的式i的化合物或其药学上可接受的溶剂化物以及治疗有效量的上文定义的绞股蓝次级皂苷。
[0113]
本发明还提供治疗轻度或重度皮肤损伤的方法，该方法包括给予所述患者治疗有效量的上文定义的式i的化合物或其药学上可接受的溶剂化物以及治疗有效量的上文定义的绞股蓝次级皂苷。
[0114]
当然，对于上述治疗用途，用药剂量根据所用化合物、给药方式、所需要的治疗和所适用的疾病而不同。上文定义的式i的化合物的日剂量可以为0.001mg/kg-100mg/kg。上文定义的绞股蓝次级皂苷的日剂量可以为0.001mg/kg-100mg/kg。
[0115]
根据本发明的另一方面，提供了一种上述药物组合物或上述化妆品或护肤品组合物在制备用于美白、保湿、抗皱等产品中的用途。
[0116]
在一种优选的实施方式中，该化妆品或护肤品组合物为面霜、面膜、护手霜或洗面奶。
[0117]
根据本发明的另一方面，本发明的化妆品或护肤品例如面膜组成物质可以容易地
通过将适宜量的各成分在例如提供有搅拌桨的反应器中混合来制备。
[0118]
根据本发明的另一方面，提供了一种制备化妆品或护肤品的方法，该方法包括以下步骤：
[0119]
1)取适量的式i的化合物和绞股蓝次级皂苷以及适量的药用辅料至第一溶剂，得到第一混合物，其中该式i的化合物和该绞股蓝次级皂苷的重量比为(1～10):(1～10)，其中，该式i的化合物具有以下的结构式
[0120][0121]
其中，r1至r5各自独立地选自氢、氟、氯、溴、碘、c1至c8烷基基团、c1至c8烯基基团、c1至c8炔基基团、c1至c8氟代烷基基团、c1至c8氟代烯基基团、c1至c8氟代炔基基团、c1至c8氯代烷基基团、c1至c8氯代烯基基团、c1至c8氯代炔基基团、c1至c8溴代烷基基团、c1至c8溴代烯基基团、c1至c8溴代炔基基团、c1至c8碘代烷基基团、c1至c8碘代烯基基团或c1至c8碘代炔基基团；
[0122]
2)添加适量的该药用辅料至第二溶剂，得到第二混合物；以及
[0123]
3)将该第一混合物和该第二混合物混合，得到化妆品或护肤品。
[0124]
在一种优选的实施方式中，该药用辅料选自乳化剂、增稠剂、芳香剂、防腐剂、润湿剂、保湿剂、表面活性剂和润滑剂中的一种或多种。
[0125]
在一种优选的实施方式中，该药用辅料选自甘油、丙二醇、透明质酸钠、海藻酸钠、羟丙基甲基纤维素、黄原胶、月桂醇聚醚-7、鲸蜡硬脂醇、十二烷基苯磺酸钠和肉豆蔻酸异丙酯中的一种或多种。
[0126]
在一种优选的实施方式中，在步骤3)中进一步添加该第二溶剂。
[0127]
在一种优选的实施方式中，该第一溶剂和该第二溶剂是相同的或不同的。
[0128]
在一种优选的实施方式中，该第一溶剂选自c1～c4的醇、二醇、醚、水、甲酸和乙酸中的一种或多种。
[0129]
在一种优选的实施方式中，该第二溶剂选自c1～c4的醇、二醇、醚、水、甲酸和乙酸中的一种或多种。
[0130]
根据本发明的另一方面，提供了一种制备化妆品或护肤品的方法，该方法包括以下步骤：
[0131]
1)按重量份数取适量的毛兰素和gypensapogenin a，加入适量的丙二醇和去离子水，超声加热使其完全溶解，备用(组分a)；
[0132]
2)取适量甘油、透明质酸钠、海藻酸钠、羟丙基甲基纤维素、黄原胶、月桂醇聚醚-7、鲸蜡硬脂醇、十二烷基苯磺酸钠、肉豆蔻酸异丙酯，加入适量的去离子水，加热至70～80℃，不断搅拌，使其完全溶解，备用(组分b)；
[0133]
3)将上述组分a缓缓加入组分b中，并不断搅拌使其分散均匀，加入剩余的丙二醇和去离子水，搅拌均匀。放冷至室温，即得含毛兰素和gypensapogenin a的护肤品。
[0134]
根据本发明的另一方面，提供了一种制备药物组合物的方法，该方法包括将从铁皮石斛中提取分离得到的式i的化合物与从绞股蓝中提取分离得到的绞股蓝次级皂苷进行混合，得到药物组合物，其中该式i的化合物和该绞股蓝次级皂苷的重量比为(1～10):(1～10)，其中，该式i的化合物具有以下的结构式
[0135][0136]
其中，r1至r5各自独立地选自氢、氟、氯、溴、碘、c1至c8烷基基团、c1至c8烯基基团、c1至c8炔基基团、c1至c8氟代烷基基团、c1至c8氟代烯基基团、c1至c8氟代炔基基团、c1至c8氯代烷基基团、c1至c8氯代烯基基团、c1至c8氯代炔基基团、c1至c8溴代烷基基团、c1至c8溴代烯基基团、c1至c8溴代炔基基团、c1至c8碘代烷基基团、c1至c8碘代烯基基团或c1至c8碘代炔基基团。
[0137]
在一种优选的实施方式中，该方法包括以下步骤：
[0138]
1)取适量的铁皮石斛药材，添加10-12倍体积的70％-95％的乙醇进行回流提取1-3小时，过滤，得到滤液，回收乙醇至无醇味，加入等体积的乙酸乙酯萃取，回收乙酸乙酯得到萃取物，将乙酸乙酯萃取物经硅胶柱层析分离，以正己烷-乙酸乙酯3:1-5:1的比例洗脱，经重结晶得到毛兰素。
[0139]
2)取适量的绞股蓝药材，加10-30倍水煎煮1-3小时，放冷，过滤，滤液加载至d101大孔树脂层析柱，以10-25％乙醇洗脱，回收10％-25％乙醇至无醇味，加盐酸调ph值至1～2，水浴水解4-8小时，静置沉淀6-10小时，过滤，收集沉淀，经硅胶柱层析分离，以正己烷-乙酸乙酯15:1-25:1洗脱，经重结晶得到gypensapogenin a。
[0140]
3)将适量的毛兰素和适量的gypensapogenin a混合，得到药物组合物，其中该毛兰素和该绞股蓝次级皂苷的重量比为(1～10):(1～10)。
[0141]
制备实施例
[0142]
毛兰素的制备工艺
[0143]
取适量的铁皮石斛药材，添加10-12倍体积的70％-95％的乙醇进行回流提取1-3
小时，过滤，得到滤液，回收乙醇至无醇味，加入等体积的乙酸乙酯萃取，回收乙酸乙酯得到萃取物，将乙酸乙酯萃取物经硅胶柱层析分离，以正己烷-乙酸乙酯3:1-5:1的比例洗脱，经重结晶得到毛兰素。
[0144]
毛兰素(erianin)的结构鉴定
[0145][0146]1h-nmr(400mhz,cdcl3)δ:6.81(1h,d,j＝2.0hz,h-2),6.72(1h,d,j＝8.2hz,h-5),6.63(1h,dd,j＝8.2,2.0hz,h-6),6.35(2h,s,h-2',6'),3.84(3h,s,-och
3-4),3.82(9h,s,-och
3-3',4',5'),2.80(4h,s,h-a,a'),5.64(1h,s,-oh)；
13
c-nmr(100mhz,cdcl3)δ:153.2,145.3,144.7,137.5,136.4,135.2,119.5,114.4,110.4,105.3,60.8,56.2,38.3,37.3。
[0147]
gypensapogenin a的制备工艺
[0148]
取适量的绞股蓝药材，加10-30倍水煎煮1-3小时，放冷，过滤，滤液加载至d101大孔树脂层析柱，以10-25％乙醇洗脱，回收10％-25％乙醇至无醇味，加盐酸调ph值至1～2，水浴水解4-8小时，静置沉淀6-10小时，过滤，收集沉淀，经硅胶柱层析分离，以正己烷-乙酸乙酯15:1-25:1洗脱，经重结晶得到gypensapogenin a。
[0149]
gypensapogenin a的结构鉴定
[0150][0151]1h-nmr(400mhz,cdcl3)δ:7.01(1h,brs,h-22),4.54(1h,brs,h-1),3.95(1h,brd,j＝5.1hz,h-3),2.36(3h,s,h-27),1.67(3h,s,h-26),1.24(3h,s,h-28),1.01(3h,s,h-30),0.85(3h,s,h-29),0.84(3h,s,h-18)；
13
c-nmr(100mhz,cdcl3)δ:197.0,152.8,146.2,145.2,133.7,130.6,130.4,84.1,74.1,48.4,46.3,39.5,38.2,38.1,33.3,32.4,32.3,31.6,30.6,28.8,27.5,25.9,25.2,24.4,23.7,22.6,20.8,19.4,15.2,13.1。
[0152]
下面通过具体实施方式进一步详细说明本发明所要求保护的药物组合物：
[0153]
实施例1：分别称取毛兰素1份，gypensapogenin a 1份，混合均匀，制得组合物1。
[0154]
实施例2：分别称取毛兰素1份，gypensapogenin a 2份，混合均匀，制得组合物2。
[0155]
实施例3：分别称取毛兰素2份，gypensapogenin a 1份，混合均匀，制得组合物3。
[0156]
实施例4：分别称取毛兰素1份，gypensapogenin a 3份，混合均匀，制得组合物4。
[0157]
毛兰素、gypensapogenin a及其组合物酪氨酸酶抑制活性
[0158]
实验药物
[0159]
毛兰素、gypensapogenin a分别按照上述毛兰素、gypensapogenin a的制备方法制备。受试药物组合物1～4按照实施例1～4方法制备。
[0160]
实验方法
[0161]
将毛兰素、gypensapogenin a及其组合物分别用dmso溶解，将130μl磷酸缓冲盐溶液(50mm，ph＝6.8)、10μl酪氨酸酶溶液(33.3u/ml)和10μl药物溶液混合均匀，加入50μl l-dopa(终浓度0.5mm)，混合均匀，10min后与酶标仪中490nm波长下测定od值。同时设置空白对照组，以10μl dmso代替药物溶液。各设置5个复孔，计算平均值，根据下面公式计算不同药物组合物对酪氨酸酶的抑制率。
[0162]
抑制率(％)＝(od对照-od药物)/od对照
×
100％
[0163]
实验结果如表1所示。
[0164]
表1不同浓度组合物对酪氨酸酶的抑制率
[0165][0166]
如表1所示，与空白组相比，毛兰素和gypensapogenin a对酪氨酸酶均有一定抑制活性。与单体化合物相比，毛兰素和gypensapogenin a组合物对酪氨酸酶的抑制活性更强，说明毛兰素和gypensapogenin a对酪氨酸酶具有协同抑制作用。因此，该组合物可用于制备美白类化妆品、护肤品，如面霜、面膜、手霜、洗面奶等。
[0167]
以上所述的仅是本发明的实施例，方案中公知的具体结构及特性等常识在此未作过多描述。应当指出，对于本领域的技术人员来说，在不脱离本发明的前提下，还可以作出若干变形和改进，这些也应该视为本发明的保护范围，这些都不会影响本发明实施的效果和专利的实用性。本技术要求的保护范围应当以其权利要求的内容为准，说明书中的具体实施方式等记载可以用于解释权利要求的内容。
[0168]
以上对本技术实施例进行了详细介绍，本文中应用了具体个例对本技术的原理及实施方式进行了阐述，以上实施例的说明仅用于帮助理解本技术的方法及其核心思想。同时，本领域技术人员依据本技术的思想，基于本技术的具体实施方式及应用范围上做出的
改变或变形之处，都属于本技术保护的范围。综上所述，本说明书内容不应理解为对本技术的限制。