抗衰老祛皱组合物及其在抗衰老化妆品中的应用的制作方法

1.本发明涉及化妆品领域，尤其涉及一种抗衰老祛皱组合物及其在抗衰老化妆品中的应用。


背景技术：

[0002]“抗衰老”，永远不过时的话题。人体表面最大的器官无外乎就是皮肤，其直接接触外界环境，受到诸如：空气污染、氧化、紫外线照射等等危害性因素的刺激。无时无刻不让爱美人士感到担忧。此外随着年龄的增长，皮肤或多或少的会出现皱纹、弹性降低、色素沉积等面部衰老的特征。而这一现象与目前人们对于外貌美丽的追求是相违背的。随着生化科技的进步和发展，科学家们正努力研制抗衰老产品。以具有生理活性的物质为化妆品原料改善皮肤老化松弛和皱纹成为热点，消费者对抗衰老化妆品的需求增多，尤其是对祛皱祛斑、靓丽肤色等延缓衰老的新需求日益增长；企业为抓住市场热点，推出各种抗衰老护肤品，市场发展迅猛。抗衰老产品在三大功效(美白、防晒和抗衰老)产品的专利申请量上遥遥领先。
[0003]
皮肤的老化是一个持续渐进的生理过程。在外观上表现为皮肤干燥、松弛、皱纹、色素的沉积，老化的发生包括多方面因素，大体分为内源性和外源性的氧化损伤。内源性的氧化损伤主要受遗传控制、自由基损伤和代谢紊乱等。外源性的氧化损伤主要受环境影响，如在紧张、压力等状态下，或受过度饮酒、吸烟等不健康的生活习惯影响，以及环境污染、紫外线照射等作用。氧是自由基产生的关键因素，是皮肤衰老的标志。在外源性的氧化损伤中，紫外线的伤害很大，被称为光老化。光老化是紫外辐照诱导的损伤和内源性损伤的叠加，表现为表皮角质损伤、皮肤弹性胶原蛋白减少、金属蛋白酶类的增加、炎症浸润和血管扩张。
[0004]
正常情况下，人体存在的抗氧化剂如维生素e、维生素c、过氧化物酶等能够清除过多的自由基，使自由基的生成和清除处于动态平衡。当自由基过量产生时，如果抗氧化物不足，就可能发生衰老变化。抗衰老化妆品的作用体现从以下几个方面：富含抗氧化物质，抑制自由基的产生，减少自由基对皮肤的损伤；吸收紫外线，抑制光照和紫外线对皮肤的辐照损伤；抑制金属蛋白酶的活性，减少对皮肤胶原蛋白的降解；促进胶原蛋白酶的活性，促进皮肤胶原蛋白合成。
[0005]
目前所研究的抗皱原料包括以下几种：(1)胜肽类：肽类是蛋白质结构中的组成片段，是由具有一定序列的氨基酸通过酰胺键相连，由两个氨基酸组成的肽称为二肽，3个氨基酸组成的称为三肽，以此类推。肽与生物体内别的物质相比，最大特点是具有快速皮肤渗透和高生物活性，能在短时间内实现显著嫩肤抗皱效果。(2)维生素类：维生素a又叫做视黄醇，是脂溶性的醇类物质。视黄醇，不仅促进真皮胶原蛋白的形成，也能增加弹性蛋白纤维的形成；烟酰胺又称维生素b3是水溶性维生素。它是合成烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(nad)的主要辅酶。烟酰胺提高人类成纤维细胞中组蛋白乙酰转移酶(hat)的活性，同时降低衰老细胞中hat和组蛋白h4的含量即烟酰胺通过组蛋白能够逆转衰老成纤维细胞的表型调制；
维生素e又称生育酚，能够促进新陈代谢、改善肌肤弹性，对皮肤免受自由基损伤有决定性作用；维生素c又称抗坏血酸，抗氧化性强，但不稳定，不易进入细胞内，且大剂量会损伤细胞内dna。维生素e和c具有协同清除自由基的作用。(3)腺苷是一种天然嘌呤核苷并且可通过三磷酸腺苷(atp)分解得到。研究发现腺苷可能对动态皱纹具有有益的影响。(4)植物活性成分：包括石榴皮、绿茶、桉树、番红花、槐花等，这些植物中所具有的没食子酸的衍生物、番红花素、类黄酮等因具有良好的抗氧化作用，以及对
·
oh，o2·
等自由基有良好的清除能力，因而被广泛应用于抗衰老化妆品中。
[0006]
专利cn110638722 a公开了一种抗衰老化妆品，其原料包括edta二钠、人参皂甙、芦荟叶粉、麦芽糊精、柠檬酸、甘油、甜菜碱、biostine hp、烟酰胺、甘草酸二钾、抗敏剂、纤连蛋白、磷酸氢二钠、肌肽、双胞蘑菇提取物、棕榈酰信号肽类、防腐剂和水。该发明抗衰老化妆品通过各组分的协同作用，不仅可以有效保持各活性成分的活性和促进各类成分的有效吸收和发挥作用，还可以有效促进皮肤各层细胞的生长和胶原蛋白的生成，制备得到的产品具有显著的保湿、提高皮肤屏障功能、抗皱、亮肤美白效果，可以有效延缓皮肤衰老。
[0007]
专利cn113576975 a公开了一种易吸收的抗衰老组合物，包括：视黄醇棕榈酸酯1～5份，乙酰基六肽-8 1～5份，棕榈酰四肽-7 1～5份，海藻糖1～10份，乳酸钠1～5份，生育酚1～5份，透明质酸钠0.1～1份，欧洲七叶树籽提取物1～6份，苦参根提取物1～4份，肌肽0.1～1份，肌酸0.1～1份，聚谷氨酸0.1～1份，黄原胶0.1～0.5份，复配防腐剂0.01～1份，水30～90份。本发明选用了乙酰基六肽-8、棕榈酰四肽-7作为视黄醇棕榈酸酯具有协同作用的其它抗衰活性成分，促进胶原蛋白生成的多肽类成分，缓解细纹皱纹，以增强视黄醇棕榈酸酯的抗衰老作用，解决皮肤出现皱纹、失去弹性等老化现象。
[0008]
现有技术中大多直接在化妆品中添加多肽作为抗衰老成分，然而，生物活性多肽直接被添加在化妆品中时其作用十分有限，由于它们相对较高的分子量及极性，导致它们不易穿透角质层屏障，此外，多肽在储存和使用过程中容易变性和失活，因此，发明出一种吸收性好，稳定性强的抗衰老祛皱组合物应用于抗衰老化妆品中将具有十分重要的市场推广价值。


技术实现要素：

[0009]
有鉴于现有技术中的上述缺陷，本发明所要解决的技术问题制备是一种吸收性好，稳定性强的抗衰老祛皱组合物及其在抗衰老化妆品中的应用。
[0010]
一种抗衰老祛皱组合物，包括如下重量份的组分：
[0011]
棕榈酰肽-环糊精包合物脂质体1～5份、葡萄籽提取物1～2份、迷迭香提取物1～2份、视黄醇棕榈酸酯0.5～1份、羟基频哪酮视黄酸酯0.5～1份。
[0012]
棕榈酰三肽-5为胜肽系列应用最早和最广泛的美容胜肽。一般消费者所称三肽或胶原肽coll-o2即是棕榈酰三肽-5，因为其促进真皮层中胶原蛋白和弹性蛋白的合成性能优良，胶原肽coll-o2通过组织生长因子(tgf-β)刺激皮肤胶原蛋白合成，达到抚平皱纹和紧肤的抗皱目的。肽是构成人体一切细胞的基本材料，肽是生命存在的形式。正因小分子肽的特殊生理活性作用，在本质上大量改善皮肤问题，应用在化妆品中的效果很好。棕榈酰三肽-5，其美容之功效可与注射骨胶原相媲美。它能促进人体纤维细胞中胶原蛋白及氨基葡萄糖的合成，强化结缔组织，增加肌肤紧实度，促进细胞活性；添加到化妆品
中，能为肌肤补充胶原蛋白，提升其弹性，显著减少脸面皱纹；能提高肌肤含水量，恢复光滑紧致，改善肤色，增强光泽与透明度，然而多肽与寡肽相比分子量及极性相对较大，因此皮肤对其的透过性较差，且多肽直接添加于化妆品中时往往不能发挥最大作用，并且多肽不易储存，容易失活。
[0013]
环糊精(cyclodextrin，cyd)是由多个吡喃葡萄糖单元以1,4糖苷键连接组成的环状低聚糖，葡萄糖单元均为4c1椅式构象。环糊精具有特殊的空腔结构，从结构上赋予了环糊精可作为主体包合客体分子的可能性。有很多研究结果表明，环糊精在包合客体分子后，其包合物可改善客体分子的溶解度、稳定性和生物利用度，对光、热等条件敏感和易氧化的客体分子起到保护作用。因此，本发明人提出将棕榈酰肽用环糊精进行包合，不仅能够提高其溶解性并且成分也变得更为稳定。
[0014]
所述棕榈酰肽-环糊精包合物的制备方法，包括如下步骤：
[0015]
s1称取40～50重量份的α-环糊精，10～15重量份的棕榈酰三肽-5，分别研磨后经2～4℃下干燥6～8h；
[0016]
s2取干燥后的α-环糊精加入到30～40重量份0.01～0.05mol/l磷酸缓冲液中，取干燥后的棕榈酰三肽-5加入到10～15重量份0.01～0.05mol/l磷酸缓冲液中，分别用0.5～1mol/l的naoh溶液将上述两种混合液调至ph＝6～7；
[0017]
s3将棕榈酰三肽-5混合溶液缓慢滴加至α-环糊精混合溶液中，滴加完毕后搅拌10～20min，随后在40～45khz，300～400w，40～45℃下超声40～60min；
[0018]
s4超声完毕后在2～4℃，15～20r/min下混悬12～14h，混悬完毕后在-30～-40℃，5～10pa下冷冻干燥20～24h，即得棕榈酰肽-环糊精包合物。
[0019]
进行包合后，棕榈酰肽能够更容易地溶解并且更稳定地发挥其抗衰祛皱的功效，然而，当应用于化妆品时良好的透皮性和肌肤相容性将进一步提高有效成分的吸收及释放。脂质体作为一种由磷脂分子构成的脂质囊泡，最早于1960年左右发现并开始进行深入研究。磷脂分子具有亲水基团和两条疏水链，在水中能自发形成脂质体双层。这种特殊结构能够增强其在皮肤中的渗透以及细胞的吸收效率，将其应用于抗衰老化妆品中用于传送释放活性肽能够增强功效，有利于活性成分作用的最大化。然而，当脂质体粘附在角质层内壁时可能导致脂质体的破裂，从而导致包裹的成分泄露。本发明人发现在脂质体制备中添加肉豆蔻酸能够很好地改善脂质体的柔韧性及流动性，因此能够更好地渗透进皮肤，将其应用于抗衰老化妆品将有效地提高产品的抗老化效果。
[0020]
所述棕榈酰肽-环糊精包合物脂质体的制备方法，包括如下步骤：
[0021]
s1称取15～20重量份的1,2-丙二醇溶于60～70重量份的水中，再加入8～10重量份的大豆卵磷脂，0.2～0.5重量份的肉豆蔻酸，5～10重量份的棕榈酰肽-环糊精包合物，混合混匀后得到溶液x；
[0022]
s2称取10～15重量份的甘油加入到85～90重量份的水中，混合均匀，得到溶液y；
[0023]
s3将溶液x，y分别加热至40～50℃，随后缓慢将溶液x倒入溶液y中，在800～1000bar，60～65℃下均质2～3次，随后用《100kda的超滤膜包超滤处理，得到棕榈酰肽-环糊精包合物脂质体。
[0024]
本发明还提供了所述抗衰老祛皱的组合物在抗衰老化妆品中的应用，方法如下：
[0025]
将4～15重量份保湿剂加入到50～80重量份的水中，加热至80～85℃搅拌溶解；降
温至50～60℃，将剩余的1～15重量份保湿剂后续加入；降温至40～45℃，加入增稠剂0.2～0.5重量份、防腐剂0.2～0.5重量份、棕榈酰肽-环糊精包合物脂质体5～15重量份，搅拌10～20min，得到抗衰老祛皱的化妆品。
[0026]
进一步的，所述保湿剂各自独立地为银耳多糖、甘油、透明质酸钠、1,2-丙二醇或丁二醇中的至少一种。
[0027]
进一步的，所述增稠剂为黄原胶、海藻糖或卡波姆中的至少一种。
[0028]
进一步的，所述防腐剂为苯氧乙醇、尼泊金酯、对羟基苯乙酮或乙基己基甘油中的至少一种。
[0029]
与现有技术相比，本发明的有益效果：
[0030]
(1)通过对棕榈酰肽包合环糊精，很好地提高了多肽的水溶性及稳定性，进一步制备得到的脂质体由于其独特的肌肤相容性，使得活性成分能更好地渗透进皮肤深层，更长久地发挥抗衰老祛皱功效；
[0031]
(2)通过在脂质体制备中添加肉豆蔻酸导致其流动性更佳，更易透过皮肤而达到肌肤深层，从而发挥更佳的功效；
[0032]
(3)所制备的抗衰老祛皱组合物使用效果良好且成分温和，适合于市场大面积推广。
具体实施方式
[0033]
下面，通过具体实施例对本发明的技术方案进行详细说明，但是应该明确提出这些实施例用于举例说明，但是不解释为限制本发明的范围。
[0034]
本发明实施例中部分原料的参数如下：
[0035]
棕榈酰三肽-5，cas号：623172-56-5，湖州浦瑞生物医药技术有限公司。
[0036]
α-环糊精，cas号：10016-20-3，水分≤11.0％，ph值：5.0～8.0，江苏丰园生物技术有限公司。
[0037]
对照例1
[0038]
一种抗衰老祛皱组合物，由如下组分：棕榈酰肽-环糊精包合物3g、葡萄籽提取物2g、迷迭香提取物2g、视黄醇棕榈酸酯1g、羟基频哪酮视黄酸酯1g。
[0039]
所述棕榈酰肽-环糊精包合物的制备方法，包括如下步骤：
[0040]
s1称取45g的α-环糊精，10g的棕榈酰三肽-5，分别研磨后4℃下干燥6h；
[0041]
s2取干燥后的α-环糊精加入到40g 0.01mol/l磷酸缓冲液中，取干燥后的棕榈酰三肽-5加入到10g 0.01mol/l磷酸缓冲液中，分别用1mol/l的naoh溶液将上述两种混合液调至ph＝7；
[0042]
s3将棕榈酰三肽-5混合溶液缓慢滴加至α-环糊精混合溶液中，滴加完毕后搅拌10min，随后在40khz，300w，45℃下超声40min；
[0043]
s4超声完毕后在4℃，15r/min下混悬12h，混悬完毕后在-30℃，5pa下冷冻干燥20h，即得棕榈酰肽-环糊精包合物。
[0044]
实施例1
[0045]
一种抗衰老祛皱组合物，由以下组分混合均匀得到：棕榈酰肽-环糊精包合物脂质体3g、葡萄籽提取物2g、迷迭香提取物2g、视黄醇棕榈酸酯1g、羟基频哪酮视黄酸酯1g。
[0046]
所述棕榈酰肽-环糊精包合物脂质体的制备方法，包括如下步骤：
[0047]
s1称取45g的α-环糊精，10g的棕榈酰三肽-5，分别研磨后4℃下干燥6h；
[0048]
s2取干燥后的α-环糊精加入到40g 0.01mol/l磷酸缓冲液中，取干燥后的棕榈酰三肽-5加入到10g 0.01mol/l磷酸缓冲液中，分别用1mol/l的naoh溶液将上述两种混合液调至ph＝7；
[0049]
s3将棕榈酰三肽-5混合溶液缓慢滴加至α-环糊精混合溶液中，滴加完毕后搅拌10min，随后在40khz，300w，45℃下超声40min；
[0050]
s4超声完毕后在4℃，15r/min下混悬12h，混悬完毕后在-30℃，5pa下冷冻干燥20h，即得棕榈酰肽-环糊精包合物；
[0051]
s5称取20g的1,2-丙二醇溶于60g水中，再加入8g的大豆卵磷脂，0.2g的肉豆蔻酸，5g的棕榈酰肽-环糊精包合物，混合混匀后得到溶液x；
[0052]
s6称取10g的甘油加入到90g的水中，混合均匀，得到溶液y；
[0053]
s7将溶液x,y分别加热至45℃，随后缓慢将溶液x倒入溶液y中，在800bar，65℃下均质3次，随后用《100kda的超滤膜包超滤处理，得到棕榈酰肽-环糊精包合物脂质体。
[0054]
实施例2
[0055]
一种抗衰老祛皱组合物，由如下组分混合均匀得到：棕榈酰三肽-5 1g、葡萄籽提取物2g、迷迭香提取物2g、视黄醇棕榈酸酯1g、羟基频哪酮视黄酸酯1g。
[0056]
实施例3
[0057]
一种抗衰老祛皱的化妆品的制备方法：
[0058]
称取对照例1所述的抗衰老祛皱组合物5g，丁二醇20g，甘油5g，透明质酸钠2g，黄原胶0.5g，对羟基苯乙酮0.2g，水65g；
[0059]
将丁二醇加入水中，加热至85℃并进行搅拌直至溶解；降温至60℃，将透明质酸钠用甘油进行分散后投入；降温至45℃，加入剩余组分搅拌10min，得到抗衰老祛皱的化妆品。
[0060]
实施例4
[0061]
一种抗衰老祛皱的化妆品的制备方法：
[0062]
称取实施例1所述的抗衰老祛皱组合物5g，丁二醇20g，甘油5g，透明质酸钠2g，黄原胶0.5g，对羟基苯乙酮0.2g，水65g；
[0063]
将丁二醇加入水中，加热至85℃并进行搅拌直至溶解；降温至60℃，将透明质酸钠用甘油进行分散后投入；降温至45℃，加入剩余组分搅拌10min，得到抗衰老祛皱的化妆品。
[0064]
实施例5
[0065]
一种抗衰老祛皱的化妆品的制备方法：
[0066]
称取实施例1所述的抗衰老祛皱组合物5g，丁二醇20g，甘油5g，透明质酸钠2g，黄原胶0.5g，对羟基苯乙酮0.2g，水65g；
[0067]
将丁二醇加入水中，加热至85℃并进行搅拌直至溶解；降温至60℃，将透明质酸钠用甘油进行分散后投入；降温至45℃，加入剩余组分搅拌10min，得到抗衰老祛皱的化妆品。
[0068]
测试例1
[0069]
对实施例3，4，5进行除皱性能的测试，测试方法参考t/zhca006-2019化妆品抗皱功效测试方法进行测试，选取志愿者60人，身体健康(30～65岁)且皮肤状况良好，分3组，每组20人，均为女性，面部无明显发红，皮损，伤疤等情况。在使用产品前，采集受试者样品涂
抹区域及对照区域的皱纹图像，使用分析软件分析不同位置的皱纹总体积值。受试区域涂抹需完全覆盖，对照区域则涂抹甘油溶液。分别试用对照例及实施例中的产品，早晚洁面后各使用一次，使用14天后，再次采集受试者样品涂抹区域及对照区域的皱纹图像，使用分析软件分析不同位置的皱纹总体积值，计算测试前后的差值，并以该公式计算得出皱纹相对变化率：(δv
对照
－δv
样品
)/δv
对照
*100％＝皱纹相对变化率。具体结果见表1。
[0070]
δv
样品
＝(v0－v
t
)
[0071]
式中：
[0072]
δv
样品
—样品涂抹侧皱纹总体积差值的平均值，单位为立方毫米(mm3)；
[0073]v0
—样品涂抹侧皱纹总体积初始值的平均值，单位为立方毫米(mm3)；
[0074]vt
—样品使用后，不同测量时间点，样品涂抹侧皱纹总体积测量值的平均值，单位为立方毫米(mm3)。
[0075]
δv
对照
＝(v
r0-v
rt
)
[0076]
式中：
[0077]
δv
对照
—对照侧皱纹总体积差值的平均值，单位为立方毫米(mm3)；
[0078]vr0
—对照侧皱纹总体积初始值的平均值单位为立方毫米(mm3)；
[0079]vrt
—样品使用后，不同测量时间点，对照侧皱纹总体积测量值的平均值，单位为立方毫米(mm3)。
[0080]
表1-除皱性能测试结果表
[0081]
实验方案皱纹相对变化率实施例320.3％实施例435.4％实施例514.1％
[0082]
从测试结果可以看出，除皱性能最佳的为实施例4，实施例5中由于添加了棕榈酰三肽-5导致具有一定的除皱效果，然而，活性多肽的直接添加很难发挥出其最大功效，并且经历长时间的使用样品在使用过程中容易失活，导致其的除皱性能不如实施例3，4。实施例3中对棕榈酰三肽-5进行了包合提高了其水溶性和稳定性有利于活性成分发挥作用，而实施例5中制备了棕榈酰三肽-5包合物的脂质体，脂质体制备中添加肉豆蔻酸导致其流动性更佳，更易透过皮肤而达到肌肤深层，提高了其在皮肤上的渗透性，能够帮助有效成分更好地释放，因此抗皱性能表现最佳。
[0083]
测试例2
[0084]
对实施例3，4，5进行稳定性实验，测试标准参考(化妆品稳定性试验指导原则t/shfca 002-2021)中的标准进行测试。具体步骤为样品分别在温度54℃、相对湿度75％、避光及温度﹣5℃、避光下循环放置7天，进行耐热耐寒交替实验，分别检测样品的性质以及涂抹均匀性和是否有分层现象。具体结果见表3。
[0085]
表2-稳定性实验结果
[0086]
实验方案性状涂抹均匀性是否分层实施例3白色乳液保湿滋润，涂布均一，性状良好否实施例4白色乳液保湿滋润，涂布均一，性状良好否实施例5白色乳液保湿滋润，涂布均一，性状较差是
[0087]
从稳定性测试来看，实施例3，4表现较佳，对于多肽进行包合和包合后再保护成功地提高了其稳定性，即使面临恶劣的条件也不容易失活甚至变质，这对于化妆品长时间的使用及存放是非常有利的。实施例3中对棕榈酰三肽-5进行了包合提高了其水溶性和稳定性有利于活性成分的保持，而实施例5中制备了棕榈酰三肽-5包合物的脂质体，脂质体制备中添加肉豆蔻酸导致其柔韧性更强，有效成分不易泄露，帮助有效成分更好地保存，因此稳定性表现较佳。
[0088]
测试例3
[0089]
对对照例1及实施例1，2中所制备的抗衰老祛皱组合物进行自由基清除率的测试，分别取对照例1及实施例1，2中抗衰老祛皱的组合物20mg，各自用无水乙醇溶解并定容至250ml，制得3种待测样品。称取20mg dpph(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼)，用无水乙醇溶解后定容至250ml，得dpph溶液。取待测样品各2ml加入dpph溶液2ml(a组)，取试管加入2mldpph溶液和2ml无水乙醇(b组)，取配制好的样品2ml，加入2ml无水乙醇(c组)，将a-c三组试样置于37℃下恒温反应1h后测定各自的吸光度(519nm下)，每组取平均值，通过下式得出自由基清除率：
[0090]
dpph自由基清除率＝(1－(a－c)/b)*100％
[0091]
表3-自由基清除率结果表
[0092]
实验方案自由基清除率对照例185.4％实施例194.2％实施例270.6％
[0093]
dpph自由基清除率能够很好地反应组合物的抗衰老性能，从结果来看对照例1及实施例1中的自由基清除率高于实施例2，这说明棕榈酰三肽-5的包合并不影响多肽活性成分发挥作用，并且由于包合后水溶性及稳定性的提高，活性成分的作用能够持续更久，实施例2脂质体制备中添加肉豆蔻酸导致其流动性更佳，更易透过皮肤而达到肌肤深层，帮助多肽活性成分更好地渗透进皮肤，更持久地释放进而发挥其抗氧化性。