假木贼碱在加热非燃烧电子递送产品中的应用、固态薄片及其制备方法与流程

1.本发明涉及假木贼碱在加热非燃烧电子递送产品中的应用，属于电子递送产品领域。


背景技术：

2.随着人们对健康和环境的日益关注，研发能够有效降低烟草有害成分释放量的新型烟草制品已逐渐成为世界各国烟草行业的发展重点。目前，比较具有代表性的是加热非燃烧型烟草制品(又称低温卷烟)，其是通过特殊的加热源对烟芯加热，加热时烟丝中的尼古丁通过挥发产生烟气来满足吸烟者的需求；与传统卷烟不同，加热非燃烧型烟草制品的烟丝处于加热而非燃烧状态，从而减少传统烟草高温燃烧裂解产生的有害成分，降低了主流烟气危害成分；同时，其还能克服电子烟不具有真烟味道的缺点。因此，加热非燃烧烟草制品越来越受到消费者的欢迎。
3.目前，加热非燃烧型烟草制品的成分主要是尼古丁，生物毒性较高，刺激性强，击喉感明显。因此，如何提高加热非燃烧型烟草制品的生物安全性和改善刺激性成为本领域亟待解决的难题。


技术实现要素：

4.本发明的目的在于提供一种假木贼碱在加热非燃烧电子递送产品中的用途。本发明提供的加热非燃烧电子递送产品与现有加热非燃烧电子递送产品具备相同的体验感，且刺激性小，安全性高。
5.为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：
6.本发明提供了假木贼碱在加热非燃烧电子递送产品中的应用。
7.优选地，假木贼碱与雾化剂、填充物、胶粘剂、植物纤维、水和香精按照不同工艺制备固态薄片，供加热非燃烧电子递送产品使用。
8.本发明还提供了一种固态薄片，所述固态薄片由包括以下质量百分比的原料制备得到：假木贼碱0.5～5％、雾化剂5～20％、填充物40～60％、胶粘剂3～5％、植物纤维1～3％、香精0.1～2％和余量的水。
9.优选地，所述假木贼碱以游离型形式使用。
10.优选地，所述假木贼碱包括(-)-s-假木贼碱、(-)-r-假木贼碱或(
±
)-假木贼碱。
11.优选地，所述雾化剂为丙三醇和/或丙二醇。
12.优选地，所述填充物为草本植物。
13.优选地，所述胶粘剂为聚阴离子纤维素和/或羧甲基纤维素。
14.本发明还提供了上述技术方案所述固态薄片的制备方法，包括如下步骤：
15.将假木贼碱、雾化剂、填充物、胶粘剂、植物纤维、香精和水混合后，经辊压法或稠浆法，得到固态薄片。
16.本发明还提供了上述技术方案所述固态薄片的制备方法，包括如下步骤：
17.(1)将假木贼碱、雾化剂、香精和水混合，得到涂布液；
18.(2)将填充物、胶黏剂和植物纤维混合后制浆，再抄造成基片；
19.(3)将所述步骤(1)得到的涂布液涂布到所述步骤(2)得到的基片上，再经造纸法或干法造纸法，得到固态薄片；
20.所述步骤(1)和(2)没有先后顺序。
21.本发明提供了假木贼碱在加热非燃烧电子递送产品中的应用。本发明将生物毒性较低且刺激性小的假木贼碱应用到加热非燃烧电子递送产品中，能够提高加热非燃烧电子递送产品的安全性和口感，改善刺激性。实施例的结果表明，采用ceti8 v3.0电子烟吸烟机抽吸，固定抽吸持续时间为3s，抽吸频率为30s，抽吸容量为55ml，加热非燃烧电子递送产品中假木贼碱释放量达到50～220μg/puff(标准抽吸模式下每口气溶胶中生物碱质量)，满足不同消费者的需求。
附图说明
22.图1为在nic气溶胶吸入性剂量为87mg/kg、43.5mg/kg、26.1mg/kg、8.7mg/kg暴露染毒期间的大鼠死亡率；
23.图2为nic吸入剂量与大鼠死亡率结果的非线性拟合曲线；
24.图3为在ana气溶胶吸入性剂量为174mg/kg、130mg/kg、87mg/kg、43.5mg/kg暴露染毒期间的大鼠死亡率；
25.图4为ana吸入剂量与大鼠死亡率结果的非线性拟合曲线；
26.图5为ana亚急性毒性实验过程中雄性大鼠体重变化情况；
27.图6为ana亚急性毒性实验过程中雌性大鼠体重变化情况；
28.图7为ana亚急性毒性实验过程中雄性大鼠进食变化情况；
29.图8为ana亚急性毒性实验过程中雌性大鼠进食变化情况；
30.图9为ana受试动物组织病理学检查结果。
具体实施方式
31.本发明提供了假木贼碱在加热非燃烧电子递送产品中的应用。
32.在本发明中，所述假木贼碱优选与雾化剂、填充物、胶粘剂、植物纤维、水和香精按照不同工艺制备固态薄片，供加热非燃烧电子递送产品使用。
33.在本发明中，所述固态薄片优选由包括以下质量百分比的原料制备得到：假木贼碱0.5～5％、雾化剂5～20％、填充物40～60％、胶粘剂3～5％、植物纤维1～3％、香精0.1～2％和余量的水。
34.本发明还提供了一种固态薄片，由包括以下质量百分比的原料制备得到：假木贼碱0.5～5％、雾化剂5～20％、填充物40～60％、胶粘剂3～5％、植物纤维1～3％、香精0.1～2％和余量的水。
35.以质量百分比计，制备本发明所述固态薄片的原料包括假木贼碱0.5～5％，优选为1～5％，进一步优选为1～3％，更优选为1～2％。在本发明中，所述假木贼碱优选以游离型形式使用；所述假木贼碱优选包括( )-r-假木贼碱、(-)-s-假木贼或(
±
)-假木贼碱。本
发明对所述假木贼碱的来源没有特殊的限定，采用本领域技术人员熟知的市售产品即可。在本发明中，所述假木贼碱生物毒性较低，分子量小且易挥发，在雾化剂的作用下，实现假木贼碱向人体的有效递送，能够带来与尼古丁相同的体验效果。
36.以质量百分比计，制备本发明所述固态薄片的原料还包括雾化剂5～20％，优选为5～15％，更优选为10～15％。在本发明中，所述雾化剂优选为丙三醇和/或丙二醇；当所述雾化剂为丙三醇和丙二醇时，所述丙三醇与丙二醇的质量比优选为3：1或2：1。本发明对所述雾化剂的来源没有特殊的限定，采用本领域技术人员熟知的市售产品即可。在本发明中，所述雾化剂能够促进假木贼碱的释放，实现假木贼碱向人体的有效递送。
37.以质量百分比计，制备本发明所述固态薄片的原料还包括填充物40～60％，优选为50～60％。在本发明中，所述填充物优选为草本植物，更优选为绿茶、薄荷、咖啡中的一种或多种；当填充物为绿茶和薄荷时，所述绿茶和薄荷的质量比优选为5：1；当填充物为绿茶和咖啡时，所述绿茶和咖啡的质量比优选为5：1。本发明对所述填充物的来源没有特殊的限定，采用本领域技术人员熟知的市售产品即可。在本发明中，所述填充物在固体薄片中起到填充作用，能够降低固态薄片的成本。
38.以质量百分比计，制备本发明所述固态薄片的原料还包括胶粘剂3～5％，优选为4～5％。在本发明中，所述胶粘剂优选为聚阴离子纤维素和/或羧甲基纤维素，更优选为聚阴离子纤维素和羧甲基纤维素；所述胶粘剂为聚阴离子纤维素和羧甲基纤维素时，所述聚阴离子纤维素与羧甲基纤维素的体积比优选为1：1。本发明对所述胶粘剂的来源没有特殊的限定，采用本领域技术人员熟知的市售产品即可。在本发明中，所述胶粘剂起到粘结作用，将各原料粘结在一起。
39.以质量百分比计，制备本发明所述固态薄片的原料还包括植物纤维1～3％，更优选为2～3％。在本发明中，所述植物纤维优选为木浆纤维。本发明对所述木浆纤维的尺寸没有特殊的限定，根据常识进行选择即可。本发明对所述植物纤维的来源没有特殊的限定，采用本领域技术人员熟知的市售产品即可。在本发明中，所述植物纤维起到提高固态薄片强度的作用。
40.以质量百分比计，制备本发明所述固态薄片的原料还包括0.1～2％香精，优选为1～2％。在本发明中，所述香精优选为植物萃取物或合成香精，进一步优选为草莓香精、薄荷香精、苹果香精和凉味剂中的至少一种，更优选为草莓香精、薄荷香精、苹果香精和凉味剂中的两种；当所述香精为草莓香精和薄荷香精时；所述草莓香精与薄荷香精的质量比优选为1：1；当所述香精为草莓香精和苹果香精时；所述草莓香精与苹果香精的质量比优选为2：1；当所述香精为草莓香精和凉味剂时；所述草莓香精与凉味剂的质量比优选为1.5：1。本发明对所述香精的来源没有特殊的限定，采用本领域技术人员熟知的市售产品即可。在本发明中，所述香精用于提供固态薄片所需的香味。
41.以质量百分比计，制备本发明所述固态薄片的原料还包括余量的水。本发明对所述水的来源没有特殊的限定，采用本领域技术人员熟知的市售产品即可。在本发明中，所述水为溶剂，起到溶解原料的作用。
42.本发明采用假木贼碱配合其它原料替代烟草添加物，采用加热非燃烧设备，实现假木贼碱向人体的有效递送，能够带来与尼古丁相似的体验效果。
43.本发明提供的固态薄片较传统的加热非燃烧固态烟草制品，能够减少或替代尼古
丁的使用，减少对尼古丁的依赖。
44.本发明采用的假木贼碱无明显击喉感、刺激性小，制备固态薄片通过加热非燃烧设备加热形成含有假木贼碱的气溶胶来完成假木贼碱的输送，适合于加热非燃烧设备中使用，是一种安全性高的电子传送产品。
45.本发明提供的假木贼碱具有含量高(质量百分比≥98％)的特征，且没有天然尼古丁含有烟草特有的四种亚硝基胺成分(亚硝基新烟碱nat、亚硝基降烟碱nnn、亚硝基假木贼碱nab及甲基亚硝胺基吡啶基丁酮nnk)，生物安全性较高。
46.假木贼碱与尼古丁的大鼠急性吸入毒性评价结果显示，假木贼碱吸入性半数致死剂量(lc50)值为125mg/kg，尼古丁吸入性半数致死剂量(lc50)值为37.8mg/kg，与尼古丁比较，假木贼碱生物安全性较高，可以替代烟草制品在加热非燃烧电子递送产品中使用。
47.本发明还提供了上述技术方案所述固态薄片的制备方法，包括如下步骤：
48.将假木贼碱、雾化剂、填充物、胶粘剂、植物纤维、香精和水混合后，经辊压法或稠浆法，得到固态薄片。
49.本发明将假木贼碱、雾化剂、填充物、胶粘剂、植物纤维和水混合后，经辊压法或稠浆法，得到固态薄片。
50.在本发明中，所述填充物在使用前优选对所述填充物进行粉碎。本发明对所述粉碎的操作没有特殊的限定，将填充物粉碎至满足使用要求即可。
51.本发明对所述假木贼碱、雾化剂、填充物、胶粘剂、植物纤维和水混合的操作没有特殊的限定，采用本领域技术人员熟知的制备混合物料的技术方案即可。
52.本发明对所述辊压法和稠浆法的具体操作没有特殊的限定，采用本领域技术人员熟知的操作即可。
53.本发明还提供了上述技术方案所述固态薄片的制备方法，包括如下步骤：
54.(1)将假木贼碱、雾化剂、香精和水混合，得到涂布液；
55.(2)将填充物、胶黏剂和植物纤维混合后制浆，再抄造成基片；
56.(3)将所述步骤(1)得到的涂布液涂布到所述步骤(2)得到的基片上，再经造纸法或干法造纸法，得到固态薄片；
57.所述步骤(1)和(2)没有先后顺序。
58.本发明将假木贼碱、雾化剂、香精和水混合，得到涂布液。
59.本发明对将假木贼碱、雾化剂、香精和水混合的操作没有特殊的限定，采用本领域技术人员熟知的制备混合物料的技术方案即可。
60.本发明将填充物、胶黏剂和植物纤维混合后制浆，再抄造成基片。
61.在本发明中，所述填充物在使用前优选对所述填充物进行粉碎。本发明对所述粉碎的操作没有特殊的限定，将填充物粉碎至满足使用要求即可。
62.本发明将填充物、胶黏剂和植物纤维混合的操作没有特殊的限定，采用本领域技术人员熟知的制备混合物料的技术方案即可。本发明对所述制浆和抄造的操作没有特殊的限定，采用本领域技术人员熟知的操作即可。
63.得到涂布液和基片后，本发明将所述涂布液涂布到基片上，再经造纸法或干法造纸法，得到固态薄片。
64.本发明对所述涂布的操作没有特殊的限定，采用本领域技术人员熟知的涂布操作
即可。本发明对所述造纸法和干法造纸法的具体操作没有特殊的限定，采用本领域技术人员熟知的操作即可。
65.本发明提供的制备方法工艺简单，适用于工业化生产。
66.下面将结合本发明中的实施例，对本发明中的技术方案进行清楚、完整地描述。显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
67.实施例1
68.固态薄片由以下质量百分比的原料制备得到：假木贼碱1％、雾化剂15％、填充物60％、胶粘剂5％、植物纤维3％、香精2％和余量的水；
69.其中，雾化剂为丙三醇和丙二醇(质量比为2：1)；填充物为绿茶；胶粘剂为羧甲基纤维素；植物纤维为木浆纤维；香精为草莓香精和薄荷香精(质量比为1：1)；
70.所述固态薄片的制备方法为如下步骤：
71.将假木贼碱、雾化剂、粉碎后的填充物、胶粘剂、植物纤维、香精和水混合后，经辊压和干燥，得到固态薄片。
72.采用ceti8 v3.0电子烟吸烟机抽吸实施例1制备得到的固态薄片，电子烟抽吸，采用coresta推荐的电子烟抽吸模式(固定抽吸持续时间为3s，抽吸频率为30s，抽吸容量为55ml，方波抽吸曲线)，采用剑桥滤片捕集气溶胶总粒相物，经gc-fid分析，加热非燃烧设备中假木贼碱释放量达到100μg/puff。
73.实施例2
74.固态薄片由以下质量百分比的原料制备得到：假木贼碱3％、雾化剂10％、填充物60％、胶粘剂5％、植物纤维3％、香精2％和余量的水；
75.其中，雾化剂为丙三醇和丙二醇(质量比为3：1)；填充物为绿茶和薄荷(质量比为5：1)；胶粘剂为聚阴离子纤维素和羧甲基纤维素(体积比为1：1)；植物纤维为木浆纤维；香精为草莓香精和苹果香精(质量比为2：1)；
76.所述固态薄片的制备方法为如下步骤：
77.将假木贼碱、雾化剂、粉碎后的填充物、胶粘剂、植物纤维、香精和水混合后形成浆状物，均匀地铺在循环的金属带上，再进行干燥，剥制成固态薄片。
78.采用ceti8 v3.0电子烟吸烟机抽吸实施例2制备得到的固态薄片，电子烟抽吸，采用coresta推荐的电子烟抽吸模式(固定抽吸持续时间为3s，抽吸频率为30s，抽吸容量为55ml，方波抽吸曲线)，采用剑桥滤片捕集气溶胶总粒相物，经gc-fid分析，加热非燃烧设备中假木贼碱释放量达到180μg/puff。
79.实施例3
80.固态薄片由以下质量百分比的原料制备得到：假木贼碱5％、雾化剂10％、填充物60％、胶粘剂5％、植物纤维3％、香精2％和余量的水；
81.其中，雾化剂为丙三醇；填充物为绿茶和咖啡(质量比为5：1)；胶粘剂为羧甲基纤维素；植物纤维为木浆纤维；香精为草莓香精和凉味剂(质量比为1.5：1)；
82.所述固态薄片的制备方法为如下步骤：
83.(1)将假木贼碱、雾化剂、香精和水混合，得到涂布液；
84.(2)将粉碎后的填充物、胶黏剂和植物纤维混合后制浆，再抄造成基片；
85.(3)将所述步骤(1)得到的涂布液涂布到所述步骤(2)得到的基片上，再经造纸法，得到固态薄片。
86.采用ceti8 v3.0电子烟吸烟机抽吸实施例3制备得到的固态薄片，电子烟抽吸，采用coresta推荐的电子烟抽吸模式(固定抽吸持续时间为3s，抽吸频率为30s，抽吸容量为55ml，方波抽吸曲线)，采用剑桥滤片捕集气溶胶总粒相物，经gc-fid分析，加热非燃烧设备中假木贼碱释放量达到205μg/puff。
87.性能测试：
88.通过对sd大鼠的急性吸入毒性试验来计算假木贼碱(ana)的气溶胶吸入性的半数致死剂量(lc50)和无明显损害作用剂量(noael)，并与尼古丁(nic)急性吸入毒性结果进行比较。在急性吸入毒性试验结果基础上，进一步开展ana的亚急性毒性试验研究，评价ana经呼吸道进入动物机体后对呼吸道组织及全身的损伤和危害程度，为ana在电子递送产品的应用提供安全性评价。
89.1.材料与方法
90.1.1受试物
91.ana，纯度≥98％，浅黄色油状液体；nic，纯度≥95％，黄色油状液体；丙二醇(pg)；蔬菜甘油(vg)
92.1.2供试品的配制及试验分组
93.空白对照组(sham control)吸入空气；阴性对照组(vehicle control)供试品按照质量比pg：vg＝50：50配制；1％ana按照质量比ana：pg：vg＝1：49.5：49.5配制；5％ana按照质量比ana：pg：vg＝5：47.5：47.5配制；10％ana按照质量比ana：pg：vg＝10：45：45配制；15％ana按照质量比ana：pg：vg＝15：42.5：42.5配制；20％ana按照质量比ana：pg：vg＝20：40：40配制。1％nic按照质量比nic：pg：vg＝1：49.5：49.5配制；3％nic按照质量比nic：pg：vg＝3：48.5：48.5配制；5％nic按照质量比nic：pg：vg＝5：47.5：47.5配制；10％nic按照质量比nic：pg：vg＝10：45：45配制。
94.1.3试验动物及饲养环境
95.spf级sd大鼠，雌雄各半。引入动物后进行适应检查，适应期每笼2只动物，适应时间12～13d，引入当天进行健康检查，并称量体重。饲料为灭菌全价营养粉料，自由饮水，动物房温度为20～25℃，湿度为45％～70％，光周期自动控制，每天明暗各12h。
96.1.4试验仪器
97.hrh-bag1撞击式液体气溶胶发生器，hrh-mne3026小动物单浓度口鼻暴露系统，北京慧荣和科技有限公司；3321药物气溶胶粒径普仪系统，美国tsi公司。
98.1.5急性毒性实验
99.参照oecd化学品测试指南的急性吸入毒性试验(no.403，2009)要求，雌雄大鼠各5只，将动物分别放入hrh-mne3026小动物单浓度口鼻暴露系统固定器内，将固定器安装到毒气柜上，然后密封毒气柜，暴露于空白对照组(sham control)、阴性对照组(vehicle control)、4个ana供试品气溶胶(5mg/l)和4个nic供试品气溶胶(5mg/l)，大鼠暴露染毒时间均为4h。染毒期间进行临床观察，分别统计各组动物的死亡、存活数目。存活大鼠随后连续观察14d。分别计算气ana和nic吸入性的lc50和noael值。
100.1.6亚急性毒性实验
101.在ana急性毒性实验综合评价基础上，采用ana吸入性noael为最大暴露染毒剂量，根据体重采用随机分组法分为5组：空白对照组(sham control)、阴性对照组(vehicle control)和ana高、中、低剂量组，每组10只动物，雌雄各半。分组时候组内动物的体重不超过平均体重的
±
20％。将动物分别放入hrh-mne3026小动物单浓度口鼻暴露系统固定器内，将固定器安装到毒气柜上，然后密封毒气柜，进行暴露染毒，每天1次，持续28d。
102.临床症状观察：在28天鼻部吸入暴露期内，观察实验动物刺激性、发病率和死亡率，定期测量动物体重和进食量。
103.病理学检查：试验末期对全部存活动物进行大体解剖。解剖时对动物进行全面仔细的肉眼观察，包括呼吸系统和代谢系统(肺、肝脏、肾脏等)，详细记录每只动物的大体病理变化。
104.1.7数据处理和结果分析
105.分别统计各组动物的数目、症状、死亡、存活及大体解剖和病理组织学检查时各类病变发生频率；计算不同组及不同性别动物上述各项的发生率及不同时间的体重均值和标准差。
106.实验结果
107.2.1 nic吸入性急性毒性实验
108.暴露期间染毒柜的气溶胶浓度、nic吸入性剂量和粒径分布见表1。
109.表1.气溶胶浓度、nic吸入性剂量和粒径分布
[0110][0111]
注：表1中，mmad为气溶胶质量中位数空气动力学直径，gsd为几何标准差。
[0112]
临床症状观察：在nic气溶胶吸入性剂量分别为：87mg/kg、43.5mg/kg、26.1mg/kg、8.7mg/kg暴露染毒期间出现死亡和濒死动物率分别达到92.7％、67.3％、10.6％、2.5％(如图1所示，图1为在nic气溶胶吸入性剂量为87mg/kg、43.5mg/kg、26.1mg/kg、8.7mg/kg暴露染毒期间的大鼠死亡率)。未死亡动物连续观察14d至试验结束没有异常改变。
[0113]
根据吸入剂量与大鼠死亡率结果统计，采用graphpadprism 9.0进行非线性拟合(如图2所示，图2为nic吸入剂量与大鼠死亡率结果的非线性拟合曲线)，计算得到sd大鼠的nic气溶胶吸入性lc50值为37.8mg/kg，sd大鼠的nic气溶胶吸入性noael剂量是7.14mg/kg/day，根据人体等效剂量(hed)换算系数计算出人体等效剂量(hed)是1.13mg/kg/day。
[0114]
2.2 ana吸入性急性毒性实验
[0115]
暴露期间染毒柜的气溶胶浓度、ana吸入性剂量和粒径分布见表2。
[0116]
表2.气溶胶浓度、ana吸入性剂量和粒径分布
[0117][0118]
临床症状观察：在ana气溶胶吸入性剂量分别为174mg/kg、130mg/kg、87mg/kg、43.5mg/kg暴露染毒期间出现死亡和濒死动物率分别达到84.3％、52.0％、6.0％、1.5％(如图3所示，图3为在ana气溶胶吸入性剂量为174mg/kg、130mg/kg、87mg/kg、43.5mg/kg暴露染毒期间的大鼠死亡率)。未死亡动物连续观察14d至试验结束没有异常改变。
[0119]
根据吸入剂量与大鼠死亡率结果统计，采用graphpadprism 9.0进行非线性拟合(如图4所示，图4为ana吸入剂量与大鼠死亡率结果的非线性拟合曲线)，计算得到sd大鼠的ana气溶胶吸入性lc50值为125mg/kg。sd大鼠的ana气溶胶吸入性noael剂量是23.6mg/kg/day，根据人体等效剂量(hed)换算系数计算出人体等效剂量(hed)是3.75mg/kg/day。
[0120]
2.3亚急性毒性实验
[0121]
暴露期间染毒柜的ana气溶胶吸入最大剂量采用noael(23.6mg/kg/day)，每次染毒63min，每天1次，持续28d。气溶胶浓度、ana吸入性剂量和粒径分布见表3。
[0122]
表3.气溶胶浓度、ana吸入剂量和粒径分布
[0123][0124]
亚急性吸入毒性：在28天给药期中，雌雄试验大鼠各剂量组的体重变化情况如图5和6所示(图5为ana亚急性毒性实验过程中雄性大鼠体重变化情况；图6为ana亚急性毒性实验过程中雌性大鼠体重变化情况)，进食变化如图7和8所示(图7为ana亚急性毒性实验过程
中雄性大鼠进食变化情况；图8为ana亚急性毒性实验过程中雌性大鼠进食变化情况)，器官重量变化如表4和5所示。
[0125]
通过图5～8以及表4和5可以看出，亚急性吸入毒性，在28天给药期中，雌雄试验大鼠各剂量组在体重、进食、器官重量等变化上均无统计学显著性差异(p》0.05)。
[0126]
表4.对雄性大鼠脏器重量的影响(g)
[0127][0128][0129]
表5.对雌性大鼠脏器重量的影响(g)
[0130][0131]
支气管肺泡灌洗液
[0132]
对雌雄试验大鼠各剂量组支气管肺泡灌洗液中am(肺泡巨噬细胞)、mono(单核细胞)、lym(淋巴细胞)和neut(中性粒细胞)、tp(总蛋白)、alp(碱性磷酸酶)、ldh(乳酸脱氢酶)等进行检测，与对照组相比未见指标有统计学差异(p》0.05)。检测数据见表6和表7。
[0133]
表6.对雄性大鼠balf细胞的影响
[0134][0135][0136]
表7.对雌性大鼠balf细胞的影响
[0137]
指标shamcontrolvehiclecontrol1％ana5％ana10％anaam(106)4.20
±
0.4474.19
±
0.0894.19
±
0.0674.19
±
0.1064.18
±
0.120ldh(u/l)56.3
±
5.4856.1
±
2.4056.7
±
2.5156.7
±
1.5956.9
±
1.92alp(u/l)78.2
±
6.2378.6
±
4.0478.5
±
3.1978.6
±
1.0578.8
±
2.61acp(u/dl)0.60
±
0.1130.61
±
0.0890.61
±
0.1110.61
±
0.0780.61
±
0.055mono83.29
±
2.3483.20
±
1.5382.51
±
1.2882.13
±
1.0982.07
±
1.78lym5.15
±
1.305.14
±
1.035.14
±
1.215.14
±
1.175.13
±
1.06neut12.29
±
1.7512.50
±
2.3712.51
±
1.9012.51
±
2.2912.52
±
3.54tch(mmol/l)0.07
±
0.0210.07
±
0.0120.07
±
0.0210.08
±
0.0040.08
±
0.029tp(g/l)0.80
±
0.0430.81
±
0.0300.81
±
0.1160.81
±
0.7030.82
±
0.099alb(g/l)0.21
±
0.0420.21
±
0.0150.20
±
0.0220.20
±
0.0400.20
±
0.038
[0138]
血液学指标
[0139]
对雌雄试验动物不同剂量组血液学各项进行检查，各项指标均未见明显差异(p》0.05)，结果见表8和表9。
[0140]
表8.对雄性大鼠血液学检查结果的影响
[0141][0142][0143]
表9.对雌性大鼠血液学检查结果的影响
[0144][0145][0146]
组织病理学检查
[0147]
试验结束后，将试验动物组织进行制片，对肝脏、心脏、脾脏、肺脏、肾脏等组织染色进行病理学检查，结果如图9所示，图9为ana受试动物组织病理学检查结果，其中，放大倍数为100倍，he染色，从图9可以看出，对照组(sham control和vehicle control)和高剂量组(10％ana)动物组织均未见明显病理性改变。
[0148]
综上，不同组别的大鼠在体重、进食、器官重量等均无统计学显著性差异(p》0.05)，血液、尿液、支气管肺泡灌洗液、组织病理学等检查均未显示与受试物相关的异常改变。
[0149]
通过假木贼碱和尼古丁吸入性暴露毒理研究结果综合比较，发现人体对假木贼碱吸入性耐受性剂量是3.75mg/kg/day，对nic吸入性耐受性剂量是1.13mg/kg/day。说明假木贼碱的生物毒性与尼古丁相比较低，假木贼碱在电子递送产品中使用较尼古丁生物安全性更高。
[0150]
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应
视为本发明的保护范围。