宠物口腔修护洁齿水及其制备方法与流程

1.本发明涉及宠物口腔修护领域。更具体地说，本发明涉及一种宠物口腔修护洁齿水及其制备方法。


背景技术：

2.世界小动物兽医师协会(wsava)发布的《世界小动物兽医师协会全球牙科指南》中指出，70％的猫和80％的犬在2岁时就会开始出现口腔问题，宠物口腔问题就诊原因多与口腔炎症或牙结石相关，而在诊疗过程中相关操作极其容易形成创面或导致感染，目前只能在伤口处涂抹药物减少炎症感染，但宠物配合度较低，药物效果不佳。因此，如何设计宠物口腔修护药物的配方，以获得抗击炎症和促进创口愈合的有益效果是值得深思的。


技术实现要素：

3.本发明的一个目的是解决至少上述问题，并提供至少后面将说明的优点。
4.为了实现根据本发明的这些目的和其它优点，提供了一种宠物口腔修护洁齿水，包括以下组分：包含有甘草根提取物、尿囊素、白薇提取物的复合抗炎剂，包含有β-葡聚糖、重组蛋白、愈创木薁磺酸钠的复合修复剂，氨丁三醇，功能性助剂，适量的水。
5.优选的是，所述复合抗炎剂的含量为甘草根提取物0.1～1.0wt％、尿囊素0～0.05wt％、白薇提取物1.0～5.0wt％，所述复合修复剂的含量为β-葡聚糖0.1～1.0wt％、重组蛋白0.1～1.0wt％、愈创木薁磺酸钠0.1～1.0wt％，所述氨丁三醇的含量为0～1.0wt％，所述功能性助剂的含量为1.2～7.01wt％，余量为水。
6.优选的是，所述功能性助剂按质量百分比计包括：
7.复合防腐剂0.2～2.0％，所述复合防腐剂包括1，2-己二醇0.1～1.0％、对羟基苯乙酮0.1～1.0％；
8.复合适口剂0.1～1.01％，所述复合适口剂包括磷酸盐0～0.5％、复合氨基酸盐0.1～0.5％、牛肉香精0～0.01％。
9.优选的是，所述功能性助剂还包括甘油1.0～5.0wt％，大麻叶提取物0.1～1.0wt％、柿子提取物0.1～1.0wt％。
10.优选的是，所述磷酸盐为焦磷酸钠、六偏磷酸钠、三聚磷酸钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠中的一种或多种。
11.优选的是，所述复合氨基酸盐为l-谷氨酸钠，组氨酸盐酸盐，脯氨酸盐酸盐，胱氨酸盐中的一种或多种。
12.优选的是，所述β-葡聚糖分子量为200～250万道尔顿。
13.提供一种宠物口腔修护洁齿水的制备方法，包括以下步骤：
14.步骤一、将所述复合修复剂中的β-葡聚糖、重组蛋白和水升温至80～90℃，并搅拌混合30～45min，待温度降至30～45℃时加入所述复合抗炎剂搅拌至溶解，再加入所述功能性助剂，搅拌至透明粘稠，得到液体1；
15.步骤二、在液体1中加入所述复合修复剂中的愈创木薁磺酸钠，搅拌均匀，再加入氨丁三醇，搅拌均匀得到宠物口腔修护洁齿水。
16.提供一种宠物口腔修护洁齿水用于制备治疗宠物口腔炎症的产品。
17.提供一种宠物口腔修护洁齿水用于制备治疗宠物口腔创面的产品。
18.本发明至少包括以下有益效果：
19.第一、与现有技术相比，本发明提供的宠物口腔修护洁齿水中的甘草根提取物、尿囊素以及白薇提取物一起协同组合可以起到舒缓炎症的作用，并且不受病原菌侵害，快速修复伤口，提高抗敏能力。
20.第二、本发明提供的宠物口腔修护洁齿水中的β-葡聚糖、重组蛋白、愈创木薁磺酸钠一起协同作用，提高愈创木薁磺酸钠的稳定性，使其药剂效能得以充分发挥，达到优良的抗菌、抗炎及伤口修复功能。
21.第三、相比于现有技术通过伤口处涂抹药物减少炎症感染，本发明提供的宠物口腔修护洁齿水成分安全，无毒性，宠物可直接通过漱口或服用修复伤口，本发明提供的宠物口腔修护洁齿水即使在宠物配合度不高的情况下，通过宠物自行服用也可改善炎症。
22.本发明的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现，部分还将通过对本发明的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。
具体实施方式
23.下面结合实施例对本发明做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。
24.需要说明的是，下述实施方案中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法，所述试剂和材料，如无特殊说明，均可从商业途径获得。
25.《实施例1》
26.宠物口腔修护洁齿水，包括以下组分：包含有甘草根提取物、尿囊素、白薇提取物的复合抗炎剂，包含有β-葡聚糖、重组蛋白、愈创木薁磺酸钠的复合修复剂，氨丁三醇，功能性助剂，适量的水。
27.所述复合抗炎剂的含量为甘草根提取物0.1wt％、白薇提取物1.0wt％，所述复合修复剂的含量为β-葡聚糖0.1wt％、重组蛋白0.1wt％、愈创木薁磺酸钠0.1wt％，所述功能性助剂的含量为1.5wt％，水97.1wt％。
28.所述功能性助剂按质量百分比计包括：
29.复合防腐剂0.2％，所述复合防腐剂包括1，2-己二醇0.1％、对羟基苯乙酮0.1％；
30.复合适口剂0.1％，所述复合适口剂包括复合氨基酸盐0.1％。
31.所述功能性助剂还包括甘油1.0wt％，大麻叶提取物0.1wt％、柿子提取物0.1wt％。
32.按照以下步骤制备宠物口腔修护洁齿水：
33.步骤一、将所述复合修复剂中的β-葡聚糖、重组蛋白和水升温至80℃，并搅拌混合30min，待温度降至30℃时加入复合抗炎剂搅拌至溶解，再加入所述功能性助剂，搅拌至透明粘稠，得到液体1；
34.步骤二、在液体1中加入所述复合修复剂中的愈创木薁磺酸钠，搅拌均匀，搅拌均
匀得到宠物口腔修护洁齿水。
35.《实施例2》
36.宠物口腔修护洁齿水，包括以下组分：包含有甘草根提取物、尿囊素、白薇提取物的复合抗炎剂，包含有β-葡聚糖、重组蛋白、愈创木薁磺酸钠的复合修复剂，氨丁三醇，功能性助剂，适量的水。
37.所述复合抗炎剂的含量为甘草根提取物0.5wt％、尿囊素0.025wt％、白薇提取物2.5wt％，所述复合修复剂的含量为β-葡聚糖0.5wt％、重组蛋白0.5wt％、愈创木薁磺酸钠0.5wt％，所述氨丁三醇的含量为0.5wt％，所述功能性助剂的含量为5.005wt％，水89.97wt％。
38.所述功能性助剂按质量百分比计包括：
39.复合防腐剂1％，所述复合防腐剂包括1，2-己二醇0.5％、对羟基苯乙酮0.5％；
40.复合适口剂0.505％，所述复合适口剂包括磷酸盐0.25％、复合氨基酸盐0.25％、牛肉香精0.005wt％。
41.所述功能性助剂还包括甘油2.5wt％，大麻叶提取物0.5wt％、柿子提取物0.5wt％。
42.按照以下步骤制备宠物口腔修护洁齿水：
43.步骤一、将所述复合修复剂中的β-葡聚糖、重组蛋白和水升温至85℃，并搅拌混合47min，待温度降至37℃时加入所述复合抗炎剂搅拌至溶解，再加入所述功能性助剂，搅拌至透明粘稠，得到液体1；
44.步骤二、在液体1中加入所述复合修复剂中的愈创木薁磺酸钠，搅拌均匀，再加入氨丁三醇，搅拌均匀得到宠物口腔修护洁齿水。
45.《实施例3》
46.宠物口腔修护洁齿水，包括以下组分：包含有甘草根提取物、尿囊素、白薇提取物的复合抗炎剂，包含有β-葡聚糖、重组蛋白、愈创木薁磺酸钠的复合修复剂，氨丁三醇，功能性助剂，适量的水。
47.所述复合抗炎剂的含量为甘草根提取物1.0wt％、尿囊素0.05wt％、白薇提取物5.0wt％，所述复合修复剂的含量为β-葡聚糖1.0wt％、重组蛋白1.0wt％、愈创木薁磺酸钠1.0wt％，所述氨丁三醇的含量为1.0wt％，所述功能性助剂的含量为10.01wt％，水79.94wt％。
48.所述功能性助剂按质量百分比计包括：
49.复合防腐剂2.0％，所述复合防腐剂1，2-己二醇1.0％、对羟基苯乙酮1.0％；
50.复合适口剂1.01％，所述复合适口剂包括磷酸盐0.5％、复合氨基酸盐0.5％、牛肉香精0.01％。
51.所述功能性助剂还包括甘油5.0wt％，大麻叶提取物1.0wt％、柿子提取物1.0wt％。
52.按照以下步骤制备宠物口腔修护洁齿水：
53.步骤一、将所述复合修复剂中的β-葡聚糖、重组蛋白和水升温至90℃，并搅拌混合45min，待温度降至45℃时加入所述复合抗炎剂搅拌至溶解，再加入所述功能性助剂，搅拌至透明粘稠，得到液体1；
54.步骤二、在液体1中加入所述复合修复剂中的愈创木薁磺酸钠，搅拌均匀，再加入氨丁三醇，搅拌均匀得到宠物口腔修护洁齿水。
55.《产品毒性测试》
56.接种人牙龈成纤维细胞至24孔板，在37℃、5％co2的培养箱中孵育过夜，设置一系列梯度浓度按照实施例3制备的宠物口腔修护洁齿水、一定浓度的地塞米松、空白溶液并给药于人牙龈成纤维细胞，利用噻唑蓝(mtt)比色法检测细胞相对活力，对其毒性进行测试，测试数据经处理得到的结果如下表1所示，其中，组内结果分析用平均值和标准差表示，各组间比较采用t-test统计分析：
57.表1 mtt检测结果
[0058][0059]
根据表1的mtt检测结果所知，本发明所研制的宠物口腔修护洁齿水基于人牙龈成纤维细胞，在5％浓度范围内细胞相对活力未出现明显下降，因此，分析出本发明提供的宠物口腔修护洁齿水在5％浓度范围内未表现出细胞毒性。
[0060]
《对比例1》
[0061]
宠物口腔修护洁齿水的组分、含量以及制备方法与实施例3相同，其中，不同的在于所述抗炎剂的含量为尿囊素0.05wt％、白薇提取物6.0wt％，而不含甘草根提取物。
[0062]
《对比例2》
[0063]
宠物口腔修护洁齿水的组分、含量以及制备方法与实施例3相同，其中，不同的在于所述抗炎剂的含量为甘草根提取物1.0wt％、白薇提取物5.05wt％，而不含尿囊素。
[0064]
《产品抗炎性能测试》
[0065]
1、测试方法
[0066]
(1)接种：按4
×
104个/孔的接种密度接种人牙龈成纤维细胞至24孔板，在37℃、5％co2的培养箱中孵育过夜。
[0067]
(2)配液：按下表2的测试方案配置1ng/ml的促炎细胞因子溶液(1l-1α)、0.01％(v/v)的地塞米松作为阳性对照组溶液、5％(v/v)对比例1、5％(v/v)对比例2以及5％(v/v)实施例3所制备的宠物口腔修护洁齿水作为样品组溶液。
[0068]
表2测试方案
[0069]
组别样品名称样品浓度诱导条件空白组///阴性对照组//1l-1α阳性对照组地塞米松0.01％(v/v)1l-1α对比例1对比例1中的宠物口腔修护洁齿水5％(v/v)1l-1α
对比例2对比例2中的宠物口腔修护洁齿水5％(v/v)1l-1α实施例3实施例3中的宠物口腔修护洁齿水5％(v/v)1l-1α
[0070]
(3)给药及刺激：待24板孔中细胞铺板率达到40％～50％时，根据表1的测试方案进行分组刺激及给药，每孔给药量为1ml，每组设置3个复孔，在37℃、5％co2的培养箱中继续孵育24h。
[0071]
(4)收集细胞上清液：培养24h后，收集细胞上清液于微型离心管，置于-80℃冰箱冷冻保存。
[0072]
(5)酶联免疫吸附剂测定(elisa)：根据il-6elisa试剂盒、il-8elisa试剂盒的操作说明检测细胞上清液中表达炎症反应的促炎因子(il-6、il-8)含量变化。
[0073]
2、测试结果
[0074]
2.1对各组作用后的人牙龈成纤维细胞进行上清收样，依据试剂盒说明书，开展il-6含量的检测，检测数据经处理后如下表3所示，其中，组内结果分析用标准差表示，各组间比较采用t-test统计分析(与空白组相比，显著性以#表示，p-value＜0.05表示为#，p-value＜0.01表示为##；与阴性对照相比，显著性以*表示，p-value＜0.05表示为*，p-value＜0.01表示为**)：
[0075]
表3 il-6测试结果表
[0076]
组别平均浓度(pg/ml)标准差p-value值空白组57.847.45/阴性对照组54971.121889.640.0000##阳性对照组11550.74535.850.0000**对比例150987.471221.230.00**对比例239590.831315.510.00**实施例310972.66332.840.0000**
[0077]
根据表3数据可知，与空白对照组相比，阴性对照组的il-6分泌水平极显著升高(p＜0.01)，表明1l-1α刺激可以极显著提高il-6的分泌量，说明本次测试1l-1α刺激条件有效；与阴性对照组相比，阳性对照组的il-6分泌水平极显著下降(p＜0.01)，说明本次测试阳性对照有效；与阴性对照组相比，对比例1、对比例2、实施例3的的il-6分泌水平同样极显著下降(p＜0.01)，其中，实施例3的效果更加优异，分析原因可能是甘草根提取物、白薇提取物、尿囊素三者协同作用形成的复合抗炎剂达到了舒缓炎症的作用，实施例3的下降效果甚至比阳性对照组中现有的抗炎药地塞米松效果更佳，说明宠物口腔修护洁齿水能够达到有效抗炎的效果。
[0078]
2.2对空白组、阴性对照组、阳性对照组、实施例3作用后的人牙龈成纤维细胞进行上清收样，依据试剂盒说明书，开展il-8含量的检测，检测数据经处理后如下表4所示，其中，组内结果分析用标准差表示，各组间比较采用t-test统计分析(与空白组相比，显著性以#表示，p-value＜0.05表示为#，p-value＜0.01表示为##；与阴性对照相比，显著性以*表示，p-value＜0.05表示为*，p-value＜0.01表示为**)：
[0079]
表4 il-8测试结果表
[0080]
组别平均浓度(pg/ml)标准差p-value值空白组98.523.64/
阴性对照组138339.795600.680.000##阳性对照组56633.901766.310.000**实施例392336.071448.510.000**
[0081]
根据表4数据可知，与空白对照组相比，阴性对照组的il-8分泌水平极显著升高(p＜0.01)，表明1l-1α刺激可以极显著提高il-8的分泌量，说明本次测试1l-1α刺激条件有效；与阴性对照组相比，阳性对照组的il-8分泌水平极显著下降(p＜0.01)，说明本次测试阳性对照有效；与阴性对照组相比，实施例3的il-8分泌水平同样极显著下降(p＜0.01)，同样可以说明宠物口腔修护洁齿水能够达到有效抗炎的效果。
[0082]
《对比例3》
[0083]
宠物口腔修护洁齿水的组分、含量以及制备方法与实施例3相同，其中，不同的在于所述复合修复剂的含量为愈创木薁磺酸钠3.0wt％，而不含β-葡聚糖和重组蛋白。
[0084]
《对比例4》
[0085]
宠物口腔修护洁齿水的组分、含量以及制备方法与实施例3相同，其中，不同的在于所述复合修复剂的含量为β-葡聚糖3.0wt％，而不含愈创木薁磺酸钠和重组蛋白。
[0086]
《对比例5》
[0087]
宠物口腔修护洁齿水的组分、含量以及制备方法与实施例3相同，其中，不同的在于所述复合修复剂的含量为重组蛋白3.0wt％，而不含β-葡聚糖和愈创木薁磺酸钠。
[0088]
《产品修复性能测试》
[0089]
将实施例1、实施例2、实施例3、对比例3、对比例4、对比例5制备的宠物口腔修护洁齿水进行动物试验以对比其促进伤口愈合效果，具体试验方案为：
[0090]
将大鼠的背部脱毛，在背部脊柱两侧旁1cm，头尾两端平行于脊柱各标记一个直径1.6cm，面积2cm2的圆形切口线。经碘伏消毒皮肤后，用剪刀沿标记线剪除至浅层皮肤，形成2个圆形创面。左侧创伤采用实施例或对比例制备的宠物口腔修护洁齿水外敷，右侧创伤不进行处理作为对照组，均用纱布覆盖包扎。在处理之后的第1、2、4、6、8、10天的观察中，两侧的创伤面积相对于第一天创伤面积比例见表5：
[0091]
表5小鼠两侧的创伤面积相对于第一天创伤面积比例(％)
[0092][0093]
[0094]
从表5的数据可知，实施例与对比例相比，实施例中的β-葡聚糖、重组蛋白、愈创木薁磺酸钠配合形成的复合修复剂使用效果更好，优选的范围，实施例3与实施例1、实施例2相比，具有更好的促进伤口修复效果。因此，可以分析出本发明的宠物口腔修护洁齿水可以快速修复口腔伤口损伤，促进创口生长愈合。
[0095]
尽管本发明的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用，它完全可以被适用于各种适合本发明的领域，对于熟悉本领域的人员而言，可容易地实现另外的修改，因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下，本发明并不限于特定的细节和这里示出与描述的实施例。