一种大豆萌发期耐莠去津鉴定方法

本发明涉及种子培育，更具体地说，它涉及一种大豆萌发期耐莠去津鉴定方法。

背景技术：

1、莠去津(2-chloro-4-ethylamino-6-isopropylamino-s-triazine)又名阿特拉津，是一种人工合成的三嗪类除草剂，因为其低成本和高效率被广泛应用于玉米、高粱和甘蔗等作物田的各种阔叶杂草及禾本科杂草防治。莠去津是一种抑制光系统ⅱ的除草剂，土壤中残留的莠去津可以被植物根部吸收，并迅速传导到植物分生组织及叶部，与植物光系统ⅱ中的质体醌结合蛋白结合，导致氧化损伤，最终导致植物死亡。莠去津性质比较稳定，具有长期的环境残留特性，在土壤中残留期长达一年左右。

2、莠去津残留会直接或间接胁迫植物，进而抑制种子萌发和植株生长，导致其他农作物减产，严重者导致农作物致死绝收。其中，豆科作物对莠去津较为敏感，极易受到土壤中残留的莠去津的影响。大豆受莠去津药害影响表现为受害大豆叶片失绿变黄，产生大面积锈色枯斑，生长受抑制，继而叶斑在叶脉扩展，边缘干枯至全叶枯死、脱落，严重者生长点死亡至全株枯死。土壤莠去津的残留会导致后茬大豆种植中出现出苗率显著降低的现象，其株高、地上部分及地下部分的干重受到显著抑制，明显抑制菜豆植株地上部分高度和根系活性。陈乐等人的研究结果表明，当土壤中的莠去津含量达到500g hm-2时，30d内大豆幼苗的生长就会产生抑制现象，直至枯死。有研究表明莠去津处理过的大豆幼苗植株鲜重降低，但干物质量影响较小，说明受莠去津影响大豆幼苗的保水能力降低。

3、玉米大豆轮作是我国较多地区应用广泛的栽培措施，是保持地力的可持续种植方式，轮作可以防治病害、虫害、草害，均衡利用土壤养分，调节土壤肥力，然而莠去津不合理施用使其在玉米耕层土壤中残留量最大已达0.431mg·kg-1，会显著影响大豆产量和品质。目前，大豆受玉米莠去津除草剂伤害已经成为生产中被重视并急需解决的问题。因此，建立大豆莠去津室内鉴定方法，筛选优异的耐莠去津大豆种质资源，选育耐除草剂莠去津大豆品种，是解决大豆莠去津残留药害问题，促进大豆种业发展的重要途径。

4、现有技术多为莠去津对大豆苗期的药害鉴定，鉴定耗时长，且田间或温室环境不稳定，环境影响因素较大。。

技术实现思路

1、本发明的目的是为了解决上述问题，提供一种大豆萌发期耐莠去津鉴定方法，通过建立大豆对莠去津耐受性快速鉴定的室内生物测定方法，探究159份大豆种质资源对莠去津耐药性，明确了不同大豆对莠去津的耐性程度，旨在筛选出耐莠去津的优异大豆种质资源，为进一步研究大豆莠去津耐性机理、培育耐莠去津大豆新品种奠定了材料基础及技术支撑。

2、本发明的上述技术目的是通过以下技术方案得以实现的：一种大豆萌发期耐莠去津鉴定方法，包括以下步骤：

3、s1：选取大小、形状、色泽一致且饱满成熟无病、虫害的种子，清水冲洗干净，吸水纸吸干水分；

4、s2：用75％的酒精将种子浸泡消毒，再用无菌水冲洗3次；

5、s3：将s2处理的种子每10粒置于1个底侧铺有2层灭菌滤纸的无菌9cm培养皿中，并分别添加无菌水及不同浓度梯度的莠去津溶液8ml，重复添加3次；

6、s4：将培养皿置于黑暗培养箱进行发芽培养，培养过程中每天记录不同种质大豆发芽种子数，以芽长达到种脐1/2为发芽标准，第3天统计发芽势，第7天统计发芽率，第7天选取每个培养皿中重复的5株测量根长，并计算平均值。

7、s5：通过s4处理4份种质所得的莠去津适宜浓度对159份大豆种质进行筛选。

8、本发明进一步设置为：所述s3中的莠去津溶液共设八个浓度梯度，分别为：1.0、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0、4.5和5.0ml l-1。

9、本发明进一步设置为：所述s4中黑暗培养箱的培养温度为27℃±1℃。

10、本发明进一步设置为：所述s5中筛选方法包括以下步骤：

11、s51：计算各综合指标的权重，计算公式为：

12、wj＝pj/∑nj＝1pj，j＝1，j＝1，2，3，…，n(1)

13、式中，pj为第j个入选的综合指标贡献率，表示第j个指标在所有指标中的重要程度；所述综合指标包括发芽势、发芽率、发芽指数、活力指数、根长和发芽胁迫率，计算公式分别为：

14、发芽势(％)＝3d发芽种子数/供试种子数×100；

15、发芽率(％)＝7d发芽种子数/供试种子数×100；

16、发芽指数(gi)＝∑(gt/dt)式中，gt为在不同时间(t)的发芽种子数，dt为对应的发芽天数；

17、活力指数(vi)＝s∑gt/dt式中，s为根长，gt和dt同上；

18、发芽相对莠去津胁迫率(％)＝(对照发芽率–处理发芽率)/对照发芽率×100；

19、s52：计算各种质所有综合指标的隶属函数值r(kj)，计算公式为：

20、r(kj)＝(kj–kj,min)/(kj,max–kj,min)，j＝1，2，3，…，n(2)

21、式中，kj表示j个综合指标的测定值；kj,min、kj,max分别表示第j个综合指标的最小值和最大值；

22、s53：计算各种质的莠去津综合耐性度量值(t)，计算公式为：

23、t＝∑nj＝1[r(kj×wj)]，j＝1，2，3，…，n(3)。

24、综上所述，本发明具有以下有益效果：

25、通过建立大豆对莠去津耐受性快速鉴定的室内生物测定方法，探究159份大豆种质资源对莠去津耐药性，明确了不同大豆对莠去津的耐性程度，旨在筛选出耐莠去津的优异大豆种质资源，为进一步研究大豆莠去津耐性机理、培育耐莠去津大豆新品种奠定了材料基础及技术支撑。

技术特征：

1.一种大豆萌发期耐莠去津鉴定方法，其特征是：包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种大豆萌发期耐莠去津鉴定方法，其特征是：所述s3中的莠去津溶液共设八个浓度梯度，分别为：1.0、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0、4.5和5.0ml l-1。

3.根据权利要求1所述的一种大豆萌发期耐莠去津鉴定方法，其特征是：所述s4中黑暗培养箱的培养温度为27℃±1℃。

4.根据权利要求1所述的一种大豆萌发期耐莠去津鉴定方法，其特征是：所述s5中筛选方法包括以下步骤：

技术总结本发明公开了一种大豆萌发期耐莠去津鉴定方法，涉及种子培育技术领域，其技术方案要点是：包括以下步骤：S1：选取优质种子，清水冲洗干净，吸水纸吸干水分；S2：将种子浸泡消毒，再用无菌水冲洗3次；S3：将种子每10粒置于1个培养皿中，并分别添加无菌水及不同浓度梯度的莠去津溶液；S4：将培养皿置于黑暗培养箱进行发芽培养。S5：处理4份种质所得的莠去津适宜浓度对159份大豆种质进行筛选。本发明通过建立大豆对莠去津耐受性快速鉴定的室内生物测定方法，探究159份大豆种质资源对莠去津耐药性，明确不同大豆对莠去津的耐性程度，筛选出耐莠去津的优异种质资源，为进一步研究大豆莠去津耐性机理、培育耐莠去津大豆新品种奠定材料基础及技术支撑。技术研发人员：邱丽娟,李晓菲,高华伟,广慧,石宇欣,谷勇哲,齐照明受保护的技术使用者：中国农业科学院作物科学研究所技术研发日：技术公布日：2024/6/5