一种岗松组培工厂化育苗方法与流程

本发明涉及植物组织培养，特别涉及一种岗松组培工厂化育苗方法。

背景技术：

1、岗松(baeckeafrutescensl.)是桃金娘科岗松属的小乔木或灌木状植物。嫩枝纤细，多分枝；叶小无柄，或有短柄，叶片狭线形或线形，先端尖，上面有沟，下面突起，有透明油腺点，干后褐色；花小，为白色，单生于叶腋内，苞片早落，萼管钟状，萼齿细小三角形，先端急尖，花瓣圆形，基部狭窄成短柄；蒴果小；种子扁平有角；花期7-8月；果期9-11月。因其叶如松针较短，故而得名。其属阳性植物，性喜高温、湿润、向阳之地，生长适宜温度为22-32℃，日照为70％-100％，生长缓慢，耐热、耐旱、耐风，栽培介质以腐殖土或沙质壤土为佳，常生于低丘及荒山草坡与灌丛中。

2、岗松种子的发芽率相对较低，这限制了大规模生产对种苗的需求。由于发芽率低下，传统的繁育方法无法满足大规模种植的需要，一般繁殖方式有播种、扦插繁殖和高压法，种子繁殖的后代在药效成分上可能存在差异，这种差异不利于岗松优良品种的推广和种植，并且岗松种子的发芽率相对较低，生长周期长；岗松的生根能力相对较弱，插穗生根需要一定的时间和条件，扦插繁殖的苗木在生长过程中容易感染病虫害，特别是如果插穗本身带有病原体或生长环境不卫生时。病虫害的发生可能导致苗木生长受阻甚至死亡；虽然高压法对于某些植物来说是一种有效的繁殖方法，但它也有一些固有的缺点，特别是在应用于岗松这类植物时，环剥过程中可能会损伤枝条，特别是如果操作不当或植物本身较为脆弱时，成活率并不稳定；因此，在开发岗松资源时，应采取科学、合理的开发和保护策略，确保岗松资源的可持续利用。

技术实现思路

1、鉴于此，本发明提出一种岗松组培工厂化育苗方法，解决上述问题。

2、本发明的技术方案是这样实现的：一种岗松组培工厂化育苗方法：包括以下步骤：

3、s1、外植体的采集与处理：选择生长健壮、无病虫害的岗松植株，切取其幼嫩的侧枝或叶片作为外植体，将外植体清洗干净，去掉多余的叶片和枝条，切成的切片或小段，放入无菌容器中，浸泡于植物生长调节剂中充分吸收，浸泡时间20-40min；

4、s2、消毒与接种：将外植体进行表面消毒处理，以去除表面的微生物，消毒处理后，将外植体取出，用无菌水冲洗干净，然后接种至培养基中，每瓶所述培养基接种1-3个茎段；

5、s3、培养：将接种好的外植体放入恒温培养箱中进行诱导培养2-3周；

6、s4、分化与增殖：将诱导培养产生的丛生芽进行增殖培养3-4周，培养期间，定期对外植体进行继代培养；

7、s5、生根培养：剪取高1.5厘米的丛生芽进行生根诱导培养，培养3-6周，形成生根苗；

8、s6、移栽与驯化：将生根苗从培养基中取出，清洗干净，移栽至温室或大田中适应性驯化2-3个月，驯化培养期间，定期观察幼苗的生长情况，调整培养条件，以保证幼苗的正常生长和发育，同时对幼苗进行必要的护理和修剪。

9、进一步的，所述s1植物生长调节剂包括以下重量份原料：吲哚乙酸10-50份、赤霉素8-12份、细胞分裂素5-10份、油菜素内酯3-5份、茉莉酸4-6份。

10、进一步的，所述s2消毒处理是先用酒精进行处理，再用0.1-0.3wt％的氯化汞消毒处理5-12min，且使用氯化汞消毒时在中加入3-5滴椰油，最后使用无菌水冲洗4-6次。

11、进一步的，所述s2的培养基为包括ms基础培养基、蔗糖10-30g/l、n-乙酰天冬氨酸0.1-0.3mg/l、磷酸二氢钾0.8-1.5mg/l、维生素b10.1-0.3mg/l、维生素b20.3-0.8mg/l、玉米素0.8-1.5mg/l、植物多肽液0.1-0.3mg/l。

12、进一步的，所述植物多肽液为体积为(8-10):(4-7):(1-3)的山药肽液、茶多肽液和银杏肽液。

13、进一步的，所述茶多肽液为红茶多肽、毛山茶多肽、鹧鸪茶多肽中任意一种经过蛋白酶酶解后得到的小分子水溶性肽，所述茶多肽和蛋白酶的质量比为25-38:2。

14、进一步的，所述蛋白酶为质量比为(1-3):(0.2-0.8):(5-8)的木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶。

15、进一步的，所述s3中诱导培养的条件为：温度为25-30℃，光照为1500-2000lux，光照时间10-18h/d，湿度为70-80％。

16、进一步的，所述s4中增殖培养的条件为：温度为25-30℃，光照为3000-4000lux，光照时间10-18h/d，湿度为60-70％。

17、进一步的，所述s6中适应性驯化培养的条件为：温度为20-30℃，光照为5000-6000lux，光照时间10-18h/d，湿度为50-60％。

18、与现有技术相比，本发明的有益效果是：

19、本发明的岗松组培工厂化育苗方法通过组织培养技术，可以在短时间内获得大量的优质苗木，相较于传统的扦插或种子繁殖，组培方法繁殖速度快，且不受季节限制，从而大大提高了育苗效率；在组培过程中，可以通过无性繁殖保持母本的优良性状，避免因有性繁殖可能导致的遗传变异。这样可以确保生产的苗木在生长速度、抗病性、产量等方面具有一致性；

20、本发明通过严格的无菌操作和环境控制，在外植体消毒时，加入椰油与氯化汞协同作用，减少病虫害的发生。相较于传统育苗方法，组培苗木的病虫害发生率较低，有利于提高苗木的存活率和生长质量；本发明通过调整培养基的配方等条件，优化外植体的生长环境。可以提高苗木的生长速度、根系发达程度、抗逆性等方面的质量，从而提高生根率和成活率。

21、本发明的岗松组培工厂化育苗方法具有高效、快速、提高质量、便于规模化生产和减少病虫害等优点，对于实现岗松的规模化种植和产业发展具有重要意义。

技术特征：

1.一种岗松组培工厂化育苗方法，其特征在于：包括以下步骤：

2.如权利要求1所述的一种岗松组培工厂化育苗方法，其特征在于：所述s1植物生长调节剂包括以下重量份原料：吲哚乙酸10-50份、赤霉素8-12份、细胞分裂素5-10份、油菜素内酯3-5份、茉莉酸4-6份。

3.如权利要求1所述的一种岗松组培工厂化育苗方法，其特征在于：所述s2消毒处理是先用酒精进行处理，再用0.1-0.3wt％的hgcl2消毒处理5-12min，且使用氯化汞消毒时在氯化汞中加入3-5滴椰油，最后使用无菌水冲洗4-6次。

4.如权利要求1所述的一种岗松组培工厂化育苗方法，其特征在于：所述s2的培养基为包括ms基础培养基、蔗糖10-30g/l、n-乙酰天冬氨酸0.1-0.3mg/l、磷酸二氢钾0.8-1.5mg/l、维生素b10.1-0.3mg/l、维生素b20.3-0.8mg/l、玉米素0.8-1.5mg/l、植物多肽液0.1-0.3mg/l。

5.如权利要求4所述的一种岗松组培工厂化育苗方法，其特征在于：所述植物多肽液为体积为(8-10):(4-7):(1-3)的山药肽液、茶多肽液和银杏肽液。

6.如权利要求5所述的一种岗松组培工厂化育苗方法，其特征在于：所述茶多肽液为红茶多肽、毛山茶多肽、鹧鸪茶多肽中任意一种经过蛋白酶酶解后得到的小分子水溶性肽，所述茶多肽和蛋白酶的质量比为25-38:2。

7.如权利要求6所述的一种岗松组培工厂化育苗方法，其特征在于：所述蛋白酶为质量比为(1-3):(0.2-0.8):(5-8)的木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶。

8.如权利要求1所述的一种岗松组培工厂化育苗方法，其特征在于：所述s3中诱导培养的条件为：温度为25-30℃，光照为1500-2000lux，光照时间10-18h/d，湿度为70-80％。

9.如权利要求1所述的一种岗松组培工厂化育苗方法，其特征在于：所述s4中增殖培养的条件为：温度为25-30℃，光照为3000-4000lux，光照时间10-18h/d，湿度为60-70％。

10.如权利要求1所述的一种岗松组培工厂化育苗方法，其特征在于：所述s6中适应性驯化培养的条件为：温度为20-30℃，光照为5000-6000lux，光照时间10-18h/d，湿度为50-60％。

技术总结本发明提供一种岗松组培工厂化育苗方法，包括以下步骤：S1外植体的采集与处理、S2消毒与接种、S3培养、S4分化与增殖、S5生根培养、S6移栽与驯化等的组织培养技术，通过过严格的无菌操作和环境控制，对外植体消毒处理再进行接种，培养过程中严格控制培养环境，并且调整培养基的配方等条件，有效提供了必要的营养和生长条件，促进外植体生根，增加根的数量和长度，从而提高其生根率和移栽成活率；对使岗松苗木的组培方法繁殖速度快，且不受季节限制，从而大大提高了育苗效率。技术研发人员：温军,周保彪,曾月川,钟日妹,李南楠,黄庆,陈俊杰,庞惠丹,叶彦均,黄任泽,周晓艺,黄鑫,陈宁,梁华英受保护的技术使用者：湛江市林业良种繁育场（湛江市林木种苗管理站）技术研发日：技术公布日：2024/6/5