一种赤霉素处理提高红掌2n雄配子发生率的方法与流程

：本发明涉及植物育种，尤其涉及一种赤霉素处理提高红掌2n雄配子发生率的方法。

背景技术

0、背景技术：

1、红掌(anthurium andraeanum lind.)属天南星科花烛属常绿宿根草本花卉，是世界著名切花和室内盆栽花卉(et al.,2021；褚云霞等,2023)，销量仅次于热带兰花(saidi.,2018)。

2、多倍体具有花大，重瓣性强，花色艳丽，花期长，花朵对称好，抗性强等特点，多倍体育种是观赏植物育种的主要方法。2n配子途径是自然界植物多倍体进化的主要途径，也是观赏植物多倍体育种有效途径，但植物中2n配子自然发生频率一般比较低，因此多采用物理和化学方法诱导植物产生2n配子。

3、秋水仙素处理能诱导植物产生2n配子，但秋水仙素有剧毒，会导致植物花蕾畸形(张凡等，2019)，肉穗花序死亡(徐洪伟，2015)。高温或低温也是诱导植物产生2n配子的常用方法，但红掌既不耐高温，也不耐低温。因此采用温度和秋水仙素处理均不利于红掌育种。

4、赤霉素是一种重要的植物内源激素，能够调节开花植物的雄蕊发育(pharis&king，1985)，在拟南芥中，赤霉素通过促进细胞伸长，调节拟南芥的雄蕊发育，影响小孢子发生和花粉形成(cheng et al.，2004；plackett et al.，2014；liu et al.，2017)，使用100μm赤霉素外源处理拟南芥导致了减数分裂异常，产生2n花粉(liu et al.，2017)。在杨树中，使用赤霉素注射及喷洒处理杨树花芽成功诱导出杨2n花粉(赵一帆等，2023；zhao etal.,2023)。与其它诱导剂相比，赤霉素相对安全温和、成本低廉。利用赤霉素处理提高红掌2n雄配子发生率的方法，尚未见任何文献报道。

技术实现思路

0、技术实现要素：

1、本发明了提供一种赤霉素处理提高红掌2n雄配子发生率的方法，解决了现有技术在处理红掌获得2n雄配子过程中出现的花蕾畸形、花序死亡和红掌不耐高、低温的问题。

2、本发明是通过以下技术方案予以实现的：

3、一种赤霉素处理提高红掌2n雄配子发生率的方法，该方法包括如下步骤：

4、s1.处理材料选择：以中部小花处于花粉母细胞时期、减ⅰ时期或者减ⅱ时期的红掌肉穗花序为材料；

5、s2.赤霉素处理：对材料注射赤霉素，赤霉素浓度为10-300μmol/l；

6、s3.雄配子鉴定：采集红掌雄蕊成熟时的新鲜花粉，进行雄配子鉴定。

7、优选地，所述红掌，其品种为“圣火”红掌。

8、优选地，所述红掌肉穗花序为发育正常、中部小花处于花粉母细胞减ⅱ时期的肉穗花序，此时佛焰苞包裹肉穗花序有轻微松动。

9、优选地，所述赤霉素的种类为ga3。

10、优选地，所述赤霉素的浓度为90-110μmol/l。

11、优选地，所述注射赤霉素的方法为，采用1ml一次性注射器，向花苞内注射至赤霉素溶液浸润整个肉穗花序，且佛焰苞底部有液体滴下。

12、优选地，所述注射赤霉素的时间为早上9点，连续处理3天。

13、优选地，所述采集的新鲜花粉来源于当天伸出的花药。

14、优选地，所述雄配子鉴定的方法为：将采集的花粉使用醋酸洋红染色，制片，在leica dm2500显微镜下观察并拍照；使用image j软件统计花粉直径，随机选取三个肉穗花序，制片3个，每个片子随机选取10个视野，计算2n雄配子发生率。

15、当一个花粉直径为正常花粉(n花粉)直径的1.4倍时，则该花粉为2n花粉。2n雄配子发生率为2n花粉占统计花粉粒总数的比率。

16、本发明具的有益效果是：

17、1)本发明采用赤霉素溶液处理处于不同时期的红掌肉穗花序，可显著提高红掌2n雄配子发生率，使通过2n配子途径进行红掌有性多倍体育种成为可能。

18、2)本发明所用的赤霉素溶液安全温和、成本低，避免了秋水仙素处理红掌时产生的花蕾畸形、花序死亡的问题，以及进行温度处理时红掌不耐高、低温的问题。

技术特征：

1.一种赤霉素处理提高红掌2n雄配子发生率的方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述红掌，其品种为“圣火”红掌。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述红掌肉穗花序为发育正常、中部小花处于花粉母细胞减ⅱ时期的肉穗花序，此时佛焰苞包裹肉穗花序有轻微松动。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述赤霉素的种类为ga3。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述赤霉素的浓度为90-110μmol/l。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述注射赤霉素的方法为，采用1ml一次性注射器，向花苞内注射至赤霉素溶液浸润整个肉穗花序，且佛焰苞底部有液体滴下。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述注射赤霉素的时间为早上9点，连续处理3天。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述采集的新鲜花粉来源于当天伸出的花药。

9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述雄配子鉴定的方法为：将采集的花粉使用醋酸洋红染色，制片，在leica dm2500显微镜下观察并拍照；使用image j软件统计花粉直径，随机选取三个肉穗花序，制片3个，每个片子随机选取10个视野，计算2n雄配子发生率。

技术总结本发明公开了一种赤霉素处理提高红掌2n雄配子发生率的方法。通过采用赤霉素为诱导剂处理不同时期的红掌肉穗花序，可显著提高红掌2n雄配子发生率，相较于现有技术的高温和秋水仙碱诱导方法，本发明采用的赤霉素安全温和、价格经济，避免了秋水仙素处理红掌时产生的花蕾畸形、花序死亡和温度处理时红掌不耐高、低温的问题，使通过2n配子途径进行红掌有性多倍体育种成为可能。技术研发人员：牛文霞,柯利贞,夏晴,袁赟,张志胜,曾瑞珍,易懋升受保护的技术使用者：广州花卉研究中心技术研发日：技术公布日：2024/6/13