一种草莓试管苗组培继代扩繁接种方法

本发明专利属于园艺植物组培，特别涉及一种草莓试管苗组培继代扩繁接种方法。

背景技术：

1、草莓(fragaria×ananassa duch.)，果实色泽艳丽、软糯多汁、香甜可口、风味浓郁，被誉为“冬春水果皇后”。草莓种植经济效益高，见效快，在各地设施农业、休闲采摘农业中应用广泛。

2、组培技术的培养条件人为可控，繁殖率高，应用组培技术能够对植物进行大量扩繁是该技术的主要优势之一。近年来，该技术在草莓上的应用也十分广泛。尤其是，随着草莓栽培技术的普及与发展，人们逐渐意识到应用脱毒组培苗可以有效解决病毒积累引起的品种退化问题，比农户长期自留自繁的种苗栽培表现出产量高、品质好的特点。

3、目前，已经由很多关于草莓组培扩繁的研究或文献报道，但大多是关于组培外植体的选择与消毒处理、培养基配方的筛选、瓶外炼苗移栽技术的探索或变异的检测，针对组培继代扩繁操作技术的有关文献鲜有报道。

4、生产中，草莓试管苗的组培继代扩繁主要有两种形式，一是在继代扩繁材料基部切口形成愈伤组织，然后在愈伤组织上诱导形成更多的不定芽苗；二是通过继代扩繁材料基部直接分蘖形成新生的芽苗。后者较前者，生产周期更短，成苗更快，是生产上的主要形式。后者的继代扩繁操作主要流程概括为(以下称之为“常规接种方法”)：首先选取待继代扩繁材料；接着将待继代扩繁材料切除基部愈伤组织，再分离成单株芽苗，然后将单株芽苗外侧弱枝切除，保留至少2叶1心；最后转接入新的培养基中继代扩繁。由此可见，该操作流程繁杂，且待继代扩繁材料往往枝繁叶茂，会挡住视野，只有通过仔细辨别才能准确切割分离成单株，因此，极易引起操作不当，操作效率低下。此外，由于原有的芽苗转接入新的培养基后，对培养基的营养物质吸收利用能力大于继代形成的新生苗，所以，枝叶继续快速生长，造成原有的芽苗也衰老快，继代形成的新生苗长势明显弱于原有的单株芽苗长势，新生苗培养周期长、增殖系数少。

技术实现思路

1、为解决上述问题，本发明提供了一种草莓试管苗继代扩繁接种方法，该方法提供了一种待继代扩繁材料新的处理方式，优化了操作流程，可明显减少待继代扩繁材料遮挡视野对操作的不利影响，操作方便快捷，大幅提高了接种效率。同时，提高了继代增殖系数，缩短了新生芽苗的培养周期。

2、为了实现上述目的，本发明提供以下技术方案：

3、一种草莓试管苗继代扩繁接种方法，包括以下步骤：

4、(1)继代扩繁材料选取：选取组培获得的株高3～6cm的健壮草莓芽苗作为继代扩繁材料；

5、(2)继代扩繁材料处理：在超净工作台内，将选取的芽苗用无菌手术刀片沿基部往上1～2cm处横切，舍弃切下来的上部叶柄和叶片，保留下部材料，并将其切割分离成单株；

6、(3)继代培养：将处理好的单株材料接种到继代扩繁培养基中，放入培养室内培养，经过20～30d培养后，即接种培养的原有材料长出新生叶片，同时从基部萌生出更多的芽苗，从而得以继代扩繁。

7、所述的培养基为ms培养基，其中还含有：6-ba 0.2～1.0mg/l、naa 0.01～0.05mg/l、iba 0.01～0.05mg/l、ga 0.01～0.05mg/l，ph5.8～6.2；

8、其中，关键步骤在于，上述步骤(2)所述的，在超净工作台内，将选取的芽苗用无菌手术刀片沿基部往上1～2cm处横切，舍弃切下来的上部叶柄和叶片，保留下部材料，并将其切割分离成单株。通过此步骤处理后，减少了组培苗枝叶的遮挡，大幅提高接种操作效率，同时有利于草莓芽苗植株基部侧芽萌发，形成更多的芽苗，提高繁殖系数。

9、所述的培养室的培养条件为：温度22～26℃，光照强度3000～5000lm/m2，光照周期12～16h/d。

10、通过上述方案，解决了草莓试管苗继代扩繁过程中继代接种操作速度慢、操作效率低的问题，同时，显著提高了芽苗增殖系数。通过将优化组培芽苗接种处理方式，接种效率提高了51.07％。在相同的培养基和培养条件下，继代增殖系数增加了0.88，新生芽苗培养周期缩短了约10d。该发明与现有技术主要区别在于，本发明提供了一种草莓试管苗组培继代扩繁接种方法，其中最关键的步骤在于对芽苗进行横切处理；可以切除材料大部分的枝叶，明显减少待继代扩繁材料遮挡视野对操作的不利影响，大幅提高接种效率。

11、与现有技术相比，本发明的优点和有益效果为：

12、(1)优化了操作流程，通过横切处理，可以切除材料大部分的枝叶，明显减少待继代扩繁材料遮挡视野对操作的不利影响，大幅提高接种效率。

13、(2)通过舍弃待继代扩繁材料上部的枝叶，降低了原有的芽苗材料对培养基中营养物质的吸收利用能力，使得有更多的营养物质供应萌生形成的新芽苗，提高了继代增殖系数，且新生芽苗培养周期更短。

技术特征：

1.一种草莓试管苗组培继代扩繁接种方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种草莓试管苗继代扩繁接种方法其特征在于，步骤(1)所述的健壮草莓试管苗株高度3～6cm。

3.根据权利要求1所述的一种草莓试管苗继代扩繁接种方法，其特征在于，步骤(3)所述的继代扩繁培养基成分包括：ms培养基、其中添加成分及配比为6-ba 0.2～1.0mg/l、naa0.01～0.05mg/l、iba0.01～0.05mg/l、ga 0.01～0.02mg/l，ph5.8～6.2。

4.根据权利要求1所述的一种草莓试管苗继代扩繁接种方法，其特征在于，步骤(3)所述的试管苗继代扩繁培养条件为：温度22～27℃，光照强度3000～5000lm/m2，光照周期12～16h/d。

5.根据权利要求1所述的一种草莓试管苗继代扩繁接种方法，其特征在于：步骤(2)所述的横切位置为沿试管苗基部往上1～2cm处。

技术总结本发明公开了一种草莓试管苗组培继代扩繁接种方法，步骤是：(1)继代扩繁材料选取：选取组培获得的健壮草莓组培芽苗；(2)继代扩繁材料处理：将选取的组培芽苗沿基部往上1～2cm处用手术刀横切，并将切下来的下部材料分离成单株材料；(3)继代培养：将处理好的单株材料接种到培养基中，经过20～30d培养后，即接种培养的原有材料长出新生叶片，同时从基部萌生出更多的芽苗，从而得以继代扩繁。本方法程序简明，降低了操作难度，提高了草莓试管苗组培继代接种效率，增加了继代增殖系数，缩短了继代培养周期，改善了草莓试管苗继代扩繁组培技术。技术研发人员：王德欢,葛米红,施先锋,梁欢,张昭阳,祝菊红,宋晶,胡江勇,陈祖平,黄萍,李爱成,宋奎林受保护的技术使用者：武汉市农业科学院技术研发日：技术公布日：2024/6/13