益母草总碱的提取工艺的制作方法

专利名称：益母草总碱的提取工艺的制作方法技术领域：本发明涉及一种中药的提取工艺，特别是涉及一种益母草总碱的提取工艺。背景技术：本发明是在已申请专利(专利号为02117432.6的《益母草总碱的提取工艺及其新用途》)的基础上对其中的纯化方法做了进一步的改进。《益母草总碱的提取工艺及其新用途》的主要技术方案为取益母草饮片，加水煎煮2-3次，每次加水8-14倍量，合并煎液，过120目筛，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.08～1.10(60℃)的清膏，加入乙醇使含醇量为60％-80％，冷藏静置24小时，滤过，取滤液减压回收乙醇，并浓缩至药液浓度为1ml含生药1-3g，用盐酸调pH至2～3，滤过，取滤液加于酸性阳离子交换树脂柱上，加完药液后，以去离子水继续冲洗，至水洗脱液pH6～7，弃去；再用5％-25％酸或者5％～28％的氨水洗脱，以10％硅钨酸试剂检查至沉淀反应阴性为止，收集洗脱液，加固体氢氧化钠调pH6～7，滤过，滤液减压浓缩，至析出大量固体，移入容器中，呈中性的药液常规干燥；取干燥品用乙醇提取生物碱至完全，滤过，滤液减压回收乙醇，并继续减压浓缩至稠膏，将稠膏减压干燥，得益母草总生物碱提取物。《益母草总碱的提取工艺及其新用途》的已申请专利，其纯化方法中采用10％HCl洗脱离子交换柱上的生物碱，虽然有一定优点(由于酸浓度高，故所需洗脱液用量较少，洗脱较快)，但存在明显的缺点酸浓度过高导致---对操作人员有刺激，主要是需用大量的碱中和过量的酸而生成大量的NaCl，给后续提纯总生物带来麻烦。为解决上述问题，本发明对离子交换柱的洗脱工艺做了进一步的优选改进。技术内容本发明目的在于提供一种益母草总碱的提取工艺。本发明目的是通过如下技术方案实现的在经过益母草水提取、醇沉精制、酸化上柱过程后，益母草总碱的提取工艺的纯化方法为用1％-4％盐酸洗脱，以2％-3％为佳，并需每小时洗脱量应为柱体积的6-8倍；或用1％-4％硫酸洗脱，并以2％-3％硫酸洗脱为佳，并需每小时洗脱量应为柱体积的6-8倍。其盐酸洗脱液可用氢氧化钠等碱中和，而硫酸洗脱液宜以生石灰或氢氧化钙中和为佳。上柱药液为pH4-5为佳。离子交换柱的柱径∶柱高＝1∶11-15。本发明使提取工艺成本下降，更加易于操作，使其更适合工业大生产。本实验例的实验条件采用申请号02117432.6的《益母草总碱的提取工艺及其新用途》的已申请专利中的工艺条件。实验例1盐酸洗脱浓度优选将已交换于阳离子交换柱上(浓度为每1ml药液2g生药材的药液100ml，湿树脂重100g，柱径∶柱高＝1∶10)的总生物碱分别采用不同浓度盐酸进行洗脱(以10％硅钨酸作检查，洗脱液浓缩后以薄层色谱鉴别生物碱)，结果如下盐酸浓度 洗脱体积10％ 300ml5％ 510ml2％ 960ml0.5％ 2000ml以上结果表明0.5％盐酸洗脱能力差，洗脱液生物碱反应弱，即使用2000ml仍不能将生物碱洗脱完全。而2％盐酸洗脱较好，易于操作，酸浓度较低，使加氢氧化钠中和生成的NaCl较少，后续纯化总碱很易进行，更适合工业大生产。(原工艺采用的10％盐酸洗脱，由于酸浓度高刺激性较大给操作带来麻烦，且需加更大量的碱中和，使生成大量的NaCl给后续纯化带来不便)实验例2、洗脱速度洗脱速度对洗脱效果有明显影响，原工艺未作详细研究，因此须以高浓度盐酸洗脱，通过实验优选，加快洗脱速度，就可用较低浓度盐酸达到洗脱目的，即用2％盐酸洗脱需每小时洗脱量应为柱体积的6-8倍。将已交换于阳离子交换柱上(浓度为每1ml药液2g生药材的药液100ml，湿树脂重100g，柱径∶柱高＝1∶12)以2％盐酸采用不同洗脱速度进行工艺优选，结果见下表洗脱速度 洗脱体积(每小时洗脱量为柱体积的倍数)3-4 2000ml以上仍未达终点，生物碱颜色反应弱6-8900ml，洗脱完全10-12 1500--1800结果表明，可能是洗脱速度慢(3-4倍)，局部可供交换的H+浓度低而不能有效地将生物碱洗脱，洗脱效果差；而洗脱速度过快(10-12倍)，可能是离子交换的时间不充分，使洗脱体积增大了近一倍，也给后续工艺带来麻烦。因此采用适宜洗脱速度，既省时又可将生物碱洗脱完全，同时洗脱体积适宜，即可用较少量的碱中和，后续工艺简便易行。实验例3硫酸洗脱工艺的优选将已交换于阳离子交换柱上(1ml 2g药液100ml，湿树脂重100g，柱径∶柱高＝1∶10)的总生物碱分别采用不同浓度硫酸进行洗脱，结果如下硫酸浓度洗脱体积12％ 320ml5％ 500ml2％ 1060ml0.5％2000ml以上由于硫酸的刺激性比盐酸强，因此原工艺12％硫酸洗脱未作详细研究，通过按上述要求控制洗脱速度，实验发现低浓度的2％硫酸仍可与2％盐酸有同样洗脱能力。其硫酸洗脱液加生石灰或氢氧化钙中和至pH约为7，生成不溶性的硫酸钙，滤过，洗涤沉淀，洗涤液与滤液合并，浓缩干燥即得总生物碱。由于益母草总碱是水溶性的，该工艺中和得到的是不溶性的硫酸钙，经滤过而除去，而使纯化工艺更简便。总之，二种酸洗工艺均经济易行，硫酸洗脱工艺比盐酸洗脱工艺更简便易行，适于提取纯化益母草总生物碱，用于口服、直肠、阴道等给药途径；但可能带入微量Ca2+离子，作为注射给药不宜，注射给药可采用盐酸洗脱工艺。实施例1取益母草饮片100kg，加水煎煮二次，第一次加12倍量水，第二次加9倍量水，各煎1.5小时，合并煎液，过120目筛，滤过，滤液浓缩至相对密度约为1.08～1.10(60℃)的清膏，加入乙醇使含醇量为70％，冷藏静置24小时，滤过，取滤液在60～70℃，-0.08Mpa下减压回收乙醇，并浓缩至相当于每1ml含2g生药。用盐酸调pH至4，滤过，取滤液加于已处理好的H型强酸性阳离子交换树脂柱，湿法装柱，湿树脂重约50kg，柱径∶柱高＝1∶12，水流出液pH3～4，加完药液后，以去离子水继续冲洗，至水洗脱液pH6～7，弃去；用3％盐酸洗脱，并需每小时洗脱量应为柱体积的7倍；，以10％硅钨酸试剂检查至沉淀反应阴性为止，收集洗脱液，加氢氧化钠调pH6～7，滤过，滤液70～80℃，-0.08Mpa下减压浓缩，至析出大量固体，移入瓷盘中，70～80℃，-0.08Mpa下减压干燥。取干燥品加95％乙醇回流提取二次使提取生物碱至完全，滤过，滤液60～70℃，-0.08Mpa下减压回收乙醇，并继续减压浓缩至稠膏，将稠膏60～70℃，-0.08Mpa下减压干燥，得益母草总生物碱提取物约500g。实施例2取益母草饮片200kg，加水煎煮二次，第一次加12倍量水，第二次加9倍量水，各煎1.5小时，合并煎液，过120目筛，滤过，滤液浓缩至相对密度约为1.08～1.10(60℃)的清膏，加入乙醇使含醇量为70％，冷藏静置24小时，滤过，取滤液在60～70℃，-0.08Mpa下减压回收乙醇，并浓缩至相当于每1ml含2g生药。用盐酸调pH至4，滤过，取滤液加于已处理好的H型强酸性阳离子交换树脂柱，湿法装柱，湿树脂重约50kg，柱径∶柱高＝1∶14，水流出液pH3～4，加完药液后，以去离子水继续冲洗，至水洗脱液pH6～7，弃去；用3％硫酸洗脱，并需每小时洗脱量应为柱体积的7倍；，以10％硅钨酸试剂检查至沉淀反应阴性为止，收集洗脱液，加生石灰调pH6～7，滤过，洗涤沉淀，滤液70～80℃，-0.08Mpa下减压浓缩，并70～80℃，-0.08Mpa下减压干燥。取干燥品加95％乙醇回流提取二次使提取生物碱至完全，滤过，滤液60～70℃，-0.08Mpa下减压回收乙醇，并继续减压浓缩至稠膏，将稠膏60～70℃，-0.08Mpa下减压干燥，得益母草总生物碱提取物约1000g。实施例3取益母草饮片200kg，加水煎煮二次，第一次加12倍量水，第二次加9倍量水，各煎1.5小时，合并煎液，过120目筛，滤过，滤液浓缩至相对密度约为1.08～1.10(60℃)的清膏，加入乙醇使含醇量为70％，冷藏静置24小时，滤过，取滤液在60～70℃，-0.08Mpa下减压回收乙醇，并浓缩至相当于每1ml含2g生药。用硫酸调pH至5，滤过，取滤液加于已处理好的H型强酸性阳离子交换树脂柱，湿法装柱，湿树脂重约50kg，柱径∶柱高＝1∶11，水流出液pH3～4，加完药液后，以去离子水继续冲洗，至水洗脱液pH6～7，弃去；用2％硫酸洗脱，并需每小时洗脱量应为柱体积的8倍；，以10％硅钨酸试剂检查至沉淀反应阴性为止，收集洗脱液，加氢氧化钙调pH6～7，滤过，洗涤沉淀，滤液70～80℃，-0.08Mpa下减压浓缩，移入瓷盘中，70～80℃，-0.08Mpa下减压干燥。取干燥品加95％乙醇回流提取二次使提取生物碱至完全，滤过，滤液60～70℃，-0.08Mpa下减压回收乙醇，并继续减压浓缩至稠膏，将稠膏60～70℃，-0.08Mpa下减压干燥，得益母草总生物碱提取物约1000g。实施例4取益母草药材50kg置3M3多功能提取罐中，加入12倍量水，开蒸汽加热，保持微沸1.5h，滤过，经120目滤网管道过滤器注入贮罐中；另再加入9倍量水，保持微沸1.5h，滤过，滤液备用；将上述煎液浓缩至相对密度d＝1.09，将浓缩液置醇沉罐中冷却，边加乙醇边搅拌，至含醇量达70％，冷藏24h，虹吸上清液，沉淀离心，并用70％乙醇洗涤，合并液注入1M3球形罐内60～70℃，-0.08Mpa下减压回收乙醇，水液继续浓缩至每1ml含3g生药，将浓缩液加盐酸调pH约4，搅匀，用纸浆板过滤，酸化滤液备用；Na型阳离子交换树脂(济宁抗生素厂产品)25kg，7％盐酸浸泡1小时，去离子水漂洗至近中性，加8％氢氧化钠漂洗1小时，去离子水漂洗至近中性，加3倍量7％盐酸浸泡3h，去离子水漂洗至pH3；装柱柱径20cm，柱高260cm，加入已处理好的湿树脂；将酸化滤液连续加于柱上端，柱下口流出液以10％硅钨酸试剂检查至阴性，以去离子水洗至pH6～7，弃去；用2％盐酸洗脱，并需每小时洗脱量应为柱体积的8倍；以10％硅钨酸试剂检至沉淀反应变为阴性为止；将酸洗脱液加固体氢氧化钙中和至pH6～7，搅匀，用纸浆板过滤，滤液浓缩干燥将滤液置球形罐中70～80℃，-0.08Mpa下浓缩，至析出大量结晶，移至瓷盘中60～70℃，-0.08Mpa下真空干燥，将干燥物粉碎成细粉加95％乙醇超声洗脱2次，至以10％硅钨酸试剂检查阴性，减压回收乙醇，过滤，滤液减压浓缩再真空干燥，得总生物碱约350g。权利要求1.一种益母草总碱的制备方法，在经过益母草水提取、醇沉精制、酸化上柱过程后其特征在于其纯化工艺为用1％-4％盐酸洗脱，并需每小时洗脱量应为柱体积的6-8倍；或用1％-4％硫酸洗脱，并需每小时洗脱量应为柱体积的6-8倍，以生石灰或氢氧化钙中和；上柱药液为pH4-5为佳；离子交换柱的柱径∶柱高1∶11-15。2.如权利要求1所述益母草总碱的制备方法，其特征在于其中洗脱以2％-3％盐酸；或用2％-3％硫酸并以生石灰或氢氧化钙中和为佳。3.如权利要求1所述益母草总碱的制备方法，其特征在于该方法为取益母草饮片100-200重量份，加水煎煮二次，第一次加12倍量水，第二次加9倍量水，各煎1.5小时，合并煎液，过120目筛，滤过，滤液浓缩至相对密度约为1.08～1.10(60℃)的清膏，加入乙醇使含醇量为70％，冷藏静置24小时，滤过，取滤液在60～70℃，-0.08Mpa下减压回收乙醇，并浓缩至相当于每1ml含2g重量份生药；用盐酸调pH至4-5，滤过，取滤液加于已处理好的H型强酸性阳离子交换树脂柱，湿法装柱，湿树脂重约50kg，柱径∶柱高＝1∶11-15，水流出液pH3～4，加完药液后，以去离子水继续冲洗，至水洗脱液pH6～7，弃去；用1-4％盐酸洗脱，并需每小时洗脱量应为柱体积的6-8倍或用1％--4％硫酸洗脱，并需每小时洗脱量应为柱体积的6-8倍；以10％硅钨酸试剂检查至沉淀反应阴性为止，收集洗脱液，加碱或生石灰或氢氧化钙调pH6～7，滤过，滤液70～80℃，-0.08Mpa下减压浓缩，并70～80℃，-0.08Mpa下减压干燥；取干燥品加95％乙醇回流提取二次使提取生物碱至完全，滤过，滤液60～70℃，-0.08Mpa下减压回收乙醇，并继续减压浓缩至稠膏，将稠膏60～70℃，-0.08Mpa下减压干燥，得益母草总生物碱提取物约0.4-1.8重量份。4.如权利要求3所述益母草总碱的制备方法，其特征在于该方法为取益母草饮片100重量份，加水煎煮二次，第一次加12倍量水，第二次加9倍量水，各煎1.5小时，合并煎液，过120目筛，滤过，滤液浓缩至相对密度约为1.08～1.10(60℃)的清膏，加入乙醇使含醇量为70％，冷藏静置24小时，滤过，取滤液在60～70℃，-0.08Mpa下减压回收乙醇，并浓缩至相当于每1ml含2g生药；用盐酸调pH至4，滤过，取滤液加于已处理好的H型强酸性阳离子交换树脂柱，湿法装柱，湿树脂重约50kg，柱径∶柱高＝1∶12，水流出液pH3～4，加完药液后，以去离子水继续冲洗，至水洗脱液pH6～7，弃去；用3％盐酸洗脱，并需每小时洗脱量应为柱体积的7倍；，以10％硅钨酸试剂检查至沉淀反应阴性为止，收集洗脱液，加氢氧化钠调pH6～7，滤过，滤液70～80℃，-0.08Mpa下减压浓缩，至析出大量固体，移入瓷盘中，70～80℃，-0.08Mpa下减压干燥；取干燥品加95％乙醇回流提取二次使提取生物碱至完全，滤过，滤液60～70℃，-0.08Mpa下减压回收乙醇，并继续减压浓缩至稠膏，将稠膏60～70℃，-0.08Mpa下减压干燥，得益母草总生物碱提取物约0.5重量份。5.如权利要求3所述益母草总碱的制备方法，其特征在于该方法为取益母草饮片100重量份，加水煎煮二次，第一次加12倍量水，第二次加9倍量水，各煎1.5小时，合并煎液，过120目筛，滤过，滤液浓缩至相对密度约为1.08～1.10(60℃)的清膏，加入乙醇使含醇量为70％，冷藏静置24小时，滤过，取滤液在60～70℃，-0.08Mpa下减压回收乙醇，并浓缩至相当于每1000ml含2重量份生药；用盐酸调pH至4，滤过，取滤液加于已处理好的H型强酸性阳离子交换树脂柱，湿法装柱，湿树脂重约50kg，柱径∶柱高＝1∶14，水流出液pH3～4，加完药液后，以去离子水继续冲洗，至水洗脱液pH6～7，弃去；用3％硫酸洗脱，并需每小时洗脱量应为柱体积的7倍；，以10％硅钨酸试剂检查至沉淀反应阴性为止，收集洗脱液，加生石灰调pH6～7，滤过，洗涤沉淀，滤液70～80℃，-0.08Mpa下减压浓缩，并70～80℃，-0.08Mpa下减压干燥；取干燥品加95％乙醇回流提取二次使提取生物碱至完全，滤过，滤液60～70℃，-0.08Mpa下减压回收乙醇，并继续减压浓缩至稠膏，将稠膏60～70℃，-0.08Mpa下减压干燥，得益母草总生物碱提取物约0.8重量份。6.如权利要求3所述益母草总碱的制备方法，其特征在于该方法为取益母草饮片200重量份，加水煎煮二次，第一次加12倍量水，第二次加9倍量水，各煎1.5小时，合并煎液，过120目筛，滤过，滤液浓缩至相对密度约为1.08～1.10(60℃)的清膏，加入乙醇使含醇量为70％，冷藏静置24小时，滤过，取滤液在60～70℃，-0.08Mpa下减压回收乙醇，并浓缩至相当于每1ml含2重量份生药；用盐酸调pH至5，滤过，取滤液加于已处理好的H型强酸性阳离子交换树脂柱，湿法装柱，湿树脂重约50kg，柱径∶柱高＝1∶11，水流出液pH3～4，加完药液后，以去离子水继续冲洗，至水洗脱液pH6～7，弃去；用2％硫酸洗脱，并需每小时洗脱量应为柱体积的8倍；，以10％硅钨酸试剂检查至沉淀反应阴性为止，收集洗脱液，加氢氧化钙调pH6～7，滤过，洗涤沉淀，滤液70～80℃，-0.08Mpa下减压浓缩，并70～80℃，-0.08Mpa下减压干燥；取干燥品加95％乙醇回流提取二次使提取生物碱至完全，滤过，滤液60～70℃，-0.08Mpa下减压回收乙醇，并继续减压浓缩至稠膏，将稠膏60～70℃，-0.08Mpa下减压干燥，得益母草总生物碱提取物约1.1重量份。全文摘要本发明公开一种益母草总碱的提取工艺，益母草总碱的提取工艺为益母草在经过水提取、醇沉精制、酸化上柱过程后，用1％－4％盐酸洗脱，或用1％－4％硫酸洗脱，并需每小时洗脱量应为柱体积的6－8倍，加碱中和，而用硫酸洗脱液宜以生石灰或氢氧化钙中和，最后得益母草总生物碱提取物。文档编号C07C279/02GK1519229SQ0310059公开日2004年8月11日 申请日期2003年1月20日 优先权日2003年1月20日发明者张黎, 张 黎 申请人:张黎, 张 黎