从猪脾中提取转移因子的方法

专利名称：从猪脾中提取转移因子的方法技术领域：本发明涉及一种从猪脾中提取转移因子的方法。转移因子(TransferFactor)系从正常动物白细胞或致敏淋巴组织中提取的可透析的物质。其主要成份为多核甘酸或多肽。它含有12种氨基酸和3至4种硷基，可将供体的细胞免疫反应性转移给受体，能特异性和非特异性地激发和增强人体细胞的免疫功能。以往提取转移因子的方法是，将去净脂肪和门静脉的猪脾冷冻后一次绞碎，然后加入室温生理盐水进行组织捣碎，装入透析袋内置于盛有室温生理盐水的不锈钢桶内，盖上盖后放入4℃冰箱内透析24小时。这种方法的不足之处是，受透析液腐败因素的制约，透析时间短，透析液中转移因子含量低，仅为每毫升0.4至0.5毫克。本发明的目的是提供一种从猪脾中提取转移因子的方法。采用这种方法，可以显著延长透析时间，提高透析液中转移因子的含量。本发明是这样实现的从猪脾中提取转移因子的方法，包括将去除脂肪、门静脉的猪脾进行冷冻、绞碎，加入生理盐水进行组织捣碎，捣碎而成的组织匀浆置于透析袋中并将透析袋放入盛有生理盐水的容器内，置于冰箱中进行透析，它与以有技术的不同之处是首先将去除脂肪、门静脉的猪脾直接进行绞碎，此后进行冷冻，随后进行第二次绞碎，再加入2℃至0℃的生理盐水进行组织捣碎;捣碎而成的组织匀浆装入透析袋后放入盛有4℃至0℃的生理盐水的直口玻璃瓶内，加盖密闭，将直口玻璃瓶置于冰柜中冷冻到0℃至-0.52℃，再放入冰箱中透析，透析时间冬季为70至80小时，夏季为60至70小时。采用本发明的方法，在透析液不腐败的前题下，透析时间可以延长2.5至3.3倍，据实测结果，透析液中转移因子的含量达每毫升0.7毫克多，比已有技术提高40%至75%。此外，本发明采用直口玻璃瓶为容器，有利于生理盐水完全浸没透析袋，提高透析率，同时便于观察。下面结合实施例对本发明予以详细说明。实施例一将新鲜(未过水)猪脾去净脂肪和门静脉，用生理盐水冲洗表面，沥净水后置绞肉机内绞成馅状物，然后放入低温冰柜(-12℃至-18℃)中冷冻。冷冻后再取出，等稍融化以后，进行第二次绞碎。然后称量，以1∶1比例加入2℃的生理盐水，置组织捣碎机内以15000转/分的速度进行组织捣碎，时间为3至5分钟。捣碎成的组织匀浆装入透析袋内，扎紧两头，放入装有4℃生理盐水的直口玻璃瓶内加盖密封，置于冰柜中冷冻到0℃，再放入4℃的冰箱中透析。夏季透析时间为60小时，得到的结果是，透析液中含转移因子为每毫升0.708毫克。实施例二进行组织捣碎时加入的生理盐水温度为0℃，直口玻璃瓶所盛生理盐水的温度为0℃，此后冷冻至-0.52℃，冬季透析时间为80小时，其余工艺同实施例一，结果透析液中含转移因子为每毫升0.717毫克。实施例三进行组织捣碎时加入的生理盐水温度为1℃，直口玻璃瓶所盛生理盐水的温度为2℃，此后冷冻至0℃，夏季透析时间为70小时，其余工艺同实施例一，结果透析液中含转移因子为每毫升0.711毫克。权利要求1.一种从猪脾中提取转移因子的方法，它包括将去除脂肪、门静脉的猪脾进行冷冻、绞碎，加入生理盐水进行组织捣碎，捣碎而成的组织匀浆置于透析袋中并将透析袋放入盛有生理盐水的容器内，置于冰箱中进行透析，其特征在于A、首先将去除脂肪、门静脉的猪脾直接进行绞碎，此后进行冷冻，随后进行第二次绞碎，再加入2℃至0℃的生理盐水进行组织捣碎；B、捣碎而成的匀浆装入透析袋后，放入盛有4℃至0℃的生理盐水的直口玻璃瓶内，加盖密封；C、将直口玻璃瓶置于冰柜中冷冻到0℃至-0.52℃，再放入冰箱中透析，透析时间冬季为70至80小时，夏季为60至70小时。全文摘要本发明涉及一种从猪脾中提取转移因子的方法。首先将去除脂肪、门静脉的猪脾直接进行绞碎，此后进行冷冻，随后进行第二次绞碎，再加入2℃至0℃的生理盐水进行组织捣碎；捣碎而成的匀浆装入透析袋后将透析袋放入盛有温度为4℃至0℃的生理盐水的直口玻璃瓶内加盖密闭，置于冰柜中冷冻到0℃至-0.52℃，再放入冰箱中透析，透析时间冬季为70至80小时，夏季为60至70小时。该方法可以提高转移因子产率40％至75％。文档编号C07H1/08GK1087520SQ9211351公开日1994年6月8日 申请日期1992年12月3日 优先权日1992年12月3日发明者黄显泰, 郭代红 申请人:中国人民解放军第三○九医院