异羟肟酸衍生物的制作方法

专利名称：异羟肟酸衍生物的制作方法技术领域：本发明涉及异羟肟酸衍生物。本发明提供的异羟肟酸衍生物是通式如下的化合物及其药学上可接受的盐 其中，R1代表1-7个C的烷基;R2代表氢、1-6C烷基或化学式为-(CH2)n-芳基或-(CH2)n-Het的基团，其中n代表1-4，Het代表5-或6-元N-杂环，该环(a)通过N原子相连，(b)任选地含有N、O和/或S作为在不与连接N原子相邻的位置上的额外的杂原子，(c)在与连接N原子相邻的一个或两个C原子上被氧取代，和(d)任选地在苯并稠合或者任选地在一个或多个其它碳原子上被1-6C烷基或氧取代，以及/或在任何额外的N原子上被1-6C烷基取代;R3代表天然的或非天然的α-氨基酸的特征基团，其中存在的任何官能基都可以被保护，条件是R3不代表氢;R4代表羧基，(1-6C烷氧基)羰基，氨基甲酰基或(1-6C烷基)氨基甲酰基;R5代表天然存在的α-氨基酸的特征基团，其中存在的任何官能基均可被保护;R6代表氢;或者R4、R5和R6各自分别代表氢或1-6C烷基。式Ⅰ化合物具有价值的药理性质。特别是，它们是间质金属蛋白酶抑制剂，可以用来控制或预防关节变性病，例如类风湿性关节炎和骨关节炎，或者用来治疗侵入性(invasive)肿瘤、动脉粥样硬化或多发性硬化症。本发明的目的是式Ⅰ化合物及其药学上可接受的盐本身以及作为治疗活性物质的应用;制造该化合物及盐的方法;适用于该方法的中间体;含有该化合物及其盐的药物和这些药物的制造;以及该化合物及盐在控制或预防疾病或增进健康方面的用途，尤其是在控制或预防关节变性病或治疗侵入性肿瘤或动脉粥样硬化方面的用途，或者用来制造药物，以便控制或预防关节变性病或者治疗侵入性肿瘤、动脉粥样硬化或多发性硬化症。1-6C或1-7C烷基本身或者在其结合体(例如烷氧基)中，以含有最多4个C原子为佳。它可以是直链或支链。例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基等。(1-6C烷氧基)羰基的实例有甲氧基羰基、乙氧基羰基、正丙氧基羰基、异丙氧基羰基等，(1-6C烷基)氨基甲酰基可以是甲基氨基甲酰基、乙基氨基甲酰基、正丙基氨基甲酰基、异丙基氨基甲酰基等。-(CH2)n-芳基的芳基部分可以是苯基或萘基，它们可以任意被取代，例如被卤素(即氟、氯、溴或碘)、1-6C烷基、1-6C烷氧基、三氟甲基等取代。天然的或非天然的α-氨基酸的特征基团是化学式为H2N-CH(R)-COOH的天然或非天然α-氨基酸中的R基。来自天然α-氨基酸的这类特征基团的实例如下，在其后的括号中列出的是对应的天然α-氨基酸氢(甘氨酸)，甲基(丙氨酸)，异丙基(缬氨酸)，异丁基(亮氨酸)，苄基(苯丙氨酸)，对羟基苄基(酪氨酸)，羟甲基(丝氨酸)，巯基甲基(半胱氨酸)，1-羟乙基(苏氨酸)，2-甲硫基乙基(甲硫氨酸)，羧甲基(天冬氨酸)、2-羧乙基(谷氨酸)和4-氨基丁基(赖氨酸)。来自非天然α-氨基酸的这类特征基团的实例如下，在其后的括号中列出的是相应的非天然α-氨基酸乙基(α-氨基正丁酸)，正丙基(α-氨基正丙酸)，正丁基(α-氨基正己酸)，叔丁基(α-氨基新己酸)，新戊基(α-氨基新庚酸)，正庚基(α-氨基正壬酸)，环己基甲基(环乙基丙氨酸)，苯基(α-氨基苯基乙酸)，2-苯基乙基(高苯基丙氨酸)，1-萘基(α-氨基-1-萘基乙酸)，2-萘基(α-氨基-2-萘基乙基)，苯乙基(α-氨基-3-苯基丁酸)，α-甲基苄基(β-甲基苯丙氨酸)，α，α-二甲基苄基(β，β-二甲基苯丙氨酸)等。R3和R5中存在的任何官能基(活性基)均可用肽化学中已知的方式保护。例如，氨基可以用叔丁氧基羰基、苄氧基羰基、甲酰基、三苯甲游基、三氟乙酰基、2-(联苯基)异丙氧基羰基或异冰片基氧羰基或者以苯二甲酰亚氨基的形式保护，羧基可以用例如容易裂解的酯基的形式保护，例如甲酯、乙酯、叔丁酯、苄酯或类似的酯。羟基的保护可以采用醚的形式，例如甲醚、叔丁醚、苄醚或四氢吡喃醚，或者以酯的形式，例如乙酸酯，巯基可以用例如叔丁基、苄基或类似的基团保护。式Ⅰ化合物与碱，例如与碱金属氢氧化物(如氢氧化钠和氢氧化钾)、碱土金属氢氧化物(如氢氧化钙和氢氧化镁)、氢氧化铵等，形成药学上可接受的盐。碱性的式Ⅰ化合物与酸形成药学上可接受的盐。作为这类盐，不仅考虑与无机酸，例如与氢卤酸(如盐酸和氢溴酸)、硫酸、硝酸、磷酸等形成的盐，而且也包括与有机酸形成的盐，例如乙酸、酒石酸、丁二酸、富马酸、马来酸、苹果酸、水杨酸、柠檬酸、甲磺酸、对甲苯磺酸等。式Ⅰ化合物包括至少二个不对称的碳原子，因此可以以旋光对映体、非对映异构体或外消旋物的形式存在。本发明包括所有这些形式。在以上的式Ⅰ化合物中，R1最好代表乙基、异丙基、正丁基或正己基，尤其是乙基。R2最好代表氢，甲基，化学式-(CH2)n-芳基的基团，其中的芳基为苯基，或是化学式(CH2)n-Het的基团，其中n的意义与前面给出的相同，Het代表5-或6-元N-杂环，它可以任选地含有一个或二个N原子、一个N原子和一个氧原子或一个O原子作为额外的杂原子。Het最好代表化学式如下的一个基团 其中，R7和R8各自代表氢，或者一起代表一个附加键或稠合苯环的其余部分;R9代表氢或1-6C烷基;X代表-CO-、-CH2-、-CH(1-6C烷基)-、-C(1-6C烷基)2-、-NH2-、-N(1-6C烷基)-或-O-;Y代表-O-、-NH-或-N(1-6C烷基)-。在一特别优选的实施方案中，Het代表一个式(b)基团，特别是苯二甲酰亚氨基，或是式(c)基团，特别是3-甲基-2，5-二氧代-1-咪唑烷基。关于符号n，当R2代表式-(CH2)n-Het基团时它最好是1，当R2代表式-(CH2)n-芳基时它最好是3。R3最好代表甲基、异丁基、叔丁基、保护的4-氨基丁基、新戊基、正庚基、环己基甲基、苄基、α-甲基苄基或α，α-二甲基苄基。4-苯二甲酰亚氨基丁基是优选的被保护的4-氨基丁基。最好是，R4代表(1-6C烷基)氨基甲酰基，尤其是甲基氨基甲酰基乙基氨基甲酰基，R5代表异丁基，R6代表氢，或者R4、R5和R6各自代表氢，或者R4和R5各自代表氢，R6代表叔丁基，或者R4、R5和R6各自代表甲基。特别优选的式Ⅰ化合物是[4-(N-羟氨基)-2(R或S)-庚基丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺，[4-(N-羟氨基)-2(R或S)-壬基丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺，[4-(N-羟氨基)-2(R或S)-庚基-3(S)-甲基丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺，[4-(N-羟氨基)-2(R)-庚基-3(R或S)-(苯二甲酰亚氨基甲基)-丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺，[4-(N-羟氨基)-2(RS)-壬基丁二酰]-L-叔丁基甘氨酸甲基酰胺，[4-(N-羟氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-苯丙氨酸甲基酰胺，[4-(N-羟氨基)-2(R)-庚基-3(R或S)-(苯二甲酰亚氨基甲基)-丁二酰]-L-叔丁基甘氨酸甲基酰胺，和[4-(N-羟氨基)-2(R)-庚基-3(R或S)-(3-苯丙基)-丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺。其它有意义的式Ⅰ化合物和实例是[4-(N-羟氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-亮氨酸甲基酰胺，[4-(N-羟氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-亮氨酸新戊基酰胺，[4-(N-羟氨基)-2(R或S)-庚基丁二酰]-L-丙氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺，[4-(N-羟氨基)-2(R或S)-庚基丁二酰]-L-(Nε-邻苯二甲酰)-赖氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺，[4-(N-羟氨基)-2(RS)-十一烷基丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺，[4-(N-羟氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-苯丙氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺，[4-(N-羟氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-壬氨酰(nonalyl)-L-亮氨酸乙基酰胺，[4-(N-羟氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-苯基丙氨酸叔丁基酰胺，[4-(N-羟氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-叔丁基甘氨酸甲基酰胺，[4-(N-羟氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-新戊基甘氨酸甲基酰胺，[4-(N-羟氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-高苯基丙氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺，[4-(N-羟氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-环己基丙氨酸甲基酰胺，[4-(N-羟氨基)-2(RS)-异辛基丁二酰]-L-苯丙氨酸甲基酰胺，[4-(N-羟氨基)-2(R)-庚基丁二酰]-L-新戊基甘氨酸甲基酰胺，[4-(N-羟氨基)-2(R)-庚基丁二酰]-(D或L)-β，β-二甲基苯丙氨酸甲基酰胺，[4-(N-羟氨基)-2(R)-庚基丁二酰]-(D或L)-苏-β-甲基苯丙氨酸甲基酰胺，[4-(N-羟氨基)-2(R)-庚基丁二酰]-DL-赤-β-甲基苯基丙氨酸甲基酰胺，和[4-(N-羟氨基)-2(R)-庚基-3(R或S)-[(3-甲基-2，5-二氧代-1-咪唑烷基)甲基]丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺。根据本发明提供的方法，上述的式Ⅰ化合物及其药学上可接受的盐用以下方法制造(a)通式(Ⅱ)化合物催化加氢 其中R1、R2、R3、R4、R5和R6具有前面给出的含义，Bz代表苄基;(b)通式(Ⅲ)的一种酸或其活性酯与通式(Ⅳ)的一种化合物反应，若有必要，将反应产物中存在的任何二苯基(低级烷基)甲硅烷基裂解掉， 其中R1、R2、R3、R4、R5和R6具有前面给出的含义，其中Z代表氢、三(1-6C烷基)甲硅烷基或二苯基(1-6C烷基)甲硅烷基;和如果需要，将式Ⅰ化合物转化成药学上可接受的盐。根据本方法实施方案(a)的式Ⅱ化合物的催化加氢可以按本身已知的方式进行;例如在惰性有机溶剂中于贵金属催化剂存在下用氢进行。合适的惰性有机溶剂有例如1-6C链烷醇，如甲醇、乙醇等。关于催化剂，可以是例如铂、钯或铑催化剂，它们可以承载在合适的载体材料上。钯/碳是优选的催化剂，温度和压力不很严格，但为方便起见，最好在室温和大气压下进行催化加氢。根据本方法实施方案(b)的式Ⅲ酸或其活性酯与式Ⅳ化合物的反应可以按已知方式进行。例如，当使用酸时，可以方便地在惰性有机溶剂(例如二甲基甲酰胺等)中使用羟基苯并三唑在缩合剂(例如1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)-碳化二亚胺盐酸盐)存在和约0℃至室温下进行。当使用式Ⅲ酸的酯时，可以方便地在惰性有机溶剂(例如四氢呋喃)中于约0℃至室温下进行。优选的式Ⅳ化合物是其中的Z代表氢、叔丁基二甲基甲硅烷或叔丁基二苯基甲硅烷基的那些化合物。当采用其中的Z代表三(1-6C烷基)甲硅烷基的式Ⅳ化合物时，此基团在反应和整理加工期间裂解掉，直接得到式Ⅰ化合物。另一方面，当使用其中的Z代表二芳基(1-6C烷基)甲硅烷基的式Ⅳ化合物时，此基团保留在反应产物中，无须随后按已知方式裂解掉，例如用氟离子。式Ⅰ化合物可以用碱处理转化成药学上可接受的盐，式Ⅰ的碱性化合物可以用酸处理转化成药学上可接受的盐。这类处理可以按常规方式进行。在本发明方法中作为起始使用的式Ⅱ和式Ⅲ化合物是新化合物，它们也是本发明的一个目的。它们可以用例如以下方法制备将通式Ⅴ的化合物与通式Ⅵ的化合物缩合 其中R1和R2具有前面给出的含义，R10代表一个保护基， 其中R6具有前述含义，R30、R40和R50分别具有前述的R3、R4和R5的含义，但是所存在的任何官能基均被保护;将缩合产物通式Ⅶ中用R10表示的保护基裂解掉，得到通式Ⅲa化合物 其中R1、R2、R6、R10、R30、R40和R50具有前述含义， 其中R1、R2、R6、R30、R40和R50具有前述含义以及，(ⅰ)当需要式Ⅱ化合物时，可以任选地在裂解掉R30、R40和R50中存在的保护基之前或以后，用O-苄基羟胺与式Ⅲa化合物缩合，或者(ⅱ)当需要其中在R30、R40和R50存在的官能基不被保护的式Ⅲ化合物时，将式Ⅲa化合物中存在的保护基裂解掉。式Ⅴ中的R10可以代表任何常用的羧基保护基团;例如甲基、乙基、苄基，最好是叔丁基。式Ⅴ化合物与式Ⅵ化合物的缩合可以根据在肽化学中本身已知的方法进行;例如用酰基卤、酰基叠氮、酸酐、活性酰胺、混合碳酸酐或活性酯法进行。从式Ⅶ缩合产物中裂解掉保护基R10可以按照已知方式进行;例如用水解法，或者在叔丁基保护基的情形用无水三氟乙酸处理，最好是在R30、R40和R50中存在的保护基可以伴随地裂解掉，这取决于这些基团的本性。式Ⅲa化合物与O-苄基羟胺的反应可以按常规方式进行;例如象前面就式Ⅴ化合物与式Ⅵ化合物的缩合所述的方法。在前面关于式Ⅱ和式Ⅲ起始物制备的说明中提到的R30、R40和R50中保护基的裂解可以根据肽化学中的已知方法进行;例如根据保护基团的本性采用皂化法、用无水三氟乙酸处理或者氢解。式Ⅲ的酸可以用已知的方式转化成活性酯，例如在二环己基碳化二亚胺存在下与N-羟基丁二酰亚胺反应得到N-羟基丁二酰亚胺酯，这些酯也是新化合物，构成了本发明的另一目的。上述的式Ⅴ和式Ⅵ化合物，在它们不是已知化合物或已知化合物的类似物的情况下，可以按照后面实施例中所述或以类似方法得到。如上所述，本发明提供的异羟肟酸衍生物是间质金属蛋白酶抑制剂。采用下面介绍的步骤可以证实其对于这类酶中的两个酶[间质细胞溶素(Stromelysin)和明胶酶]的对抗活性。间质细胞溶素(试验A)间质细胞溶素原(Prostromelgsin)由人成纤维细胞培养介质中用间质细胞溶素原抗体亲合色谱法纯化[Ganja-Smith Z，Nagase H，Woessner J F Jr.，Biochem J.1989，258(1)，PP 115-119]。隐性酶原用胰蛋白酶(5毫克/毫升)在25℃培育2小时活化，然后用10倍过量的大豆胰蛋白酶抑制剂使胰蛋白酶失活。上述异羟肟酸衍生物的抑制剂活性用14C乙酰化的b-酪蛋白底物测定。将5nm(纳摩尔)的间质细胞溶素加到底物在25nm的Tris(三羟甲基氨基甲烷)盐酸烷冲液(4毫克/毫升)中，缓冲液的pH为7.5，含有10nm CaCl2和0.05%的Brij。将所得的溶液在37℃培育20小时。加入45%三氯乙酸使底物的酶消化终止，在10000g下离心0.25小时使未消化底成团。抽吸清液，用液体闪烁光度计测定14C活性。IC50是在酶消化中使底物的分解减少到单用酶时的50%的异羟肟酸衍生物浓度。间质细胞溶素(试验B)隐性酶原(30微克/毫升)用胰蛋白酶(0.5微克/毫升)在25℃培育30分钟活化，然后用20倍过量的胰蛋白酶抑制剂使胰蛋白酶失活。异羟肟衍生物和抑制活性用荧光肽底物(7-甲氧基香豆素-4-基)-乙酰-L-脯氨酰-L-亮氨酰-L-丙氨酰-L-壬基-[3-(2，4-二硝基苯基)-L-2，3-二氨基丙基]-L-精氨酰-L-精氨酸。将间质细胞溶素加到底物(4mM)和不同浓度羟胺衍生物在50mM Tris HCl缓冲液中的溶液里，使最终浓度为35纳克/毫升，缓冲液的pH为7.5，含有200mM NaCl，10mM CaCl2、0.05%Brij 35和5%甲醇。将此溶液在37℃培育16小时。用分光荧光计测定产物形成，采用激发波长为325纳米，发射波长为395纳米。IC50是将底物分解减小到单用酶时的50%的羟胺衍生物浓度。明胶酶(试验C)羟胺衍生物对由人体中性白细胞得到的明胶酶B的体外抑制活性可以用以下试验步骤证实。从人体中性白细胞中纯化明胶酶B原，先用密度离心和葡聚糖沉降从人血中分离出中性白细胞。用0.05%TritonX-100和超声结合处理，使分离出的中性白细胞破裂。然后高速离心除掉细胞碎片。用明胶琼脂糖亲合色谱从清液中将明胶酶B原纯化，用10%的二甲基亚砜/缓冲液洗，从亲合基质上洗脱下结合的酶原。纯化过的物质的十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析显示单独的一个蛋白质谱带，分子量为95000道尔顿。将明胶原B在37℃用1mM对氨基苯基乙酸汞培育过夜。用合成的底物N-乙酰基-Pro-Gln-Gly-Leu-Leu-Gly乙酯测定本发明羟胺衍生物对这种酶的抑制活性。将明胶酶加到0.25mM的底物在50mM硼酸盐缓冲液(pH7.5)中，缓冲液中含有1mM氯化钙和已知浓度的羟胺衍生物。所得的溶液在37℃培育16小时。加入等体积的浓度为2%(W/V)的碳酸氢钠在50%甲醇水溶液中的溶液，溶液中含有0.05%(W/V)间三硝基苯基磺酸，从而使酶的活动终止。将所得溶液在37℃再培育1小时，然后用1N盐酸酸化，使反应终止和稳定。用分光光度计在335纳米测定形成的三硝基苯基-Leu-Leu-Gly乙酯的浓度。IC50是将底物的分解减少到单用酶时的50%的羟胺衍生物的浓度。用本发明提供的典型的异羟肟酸进行的上述实验的结果列在下表中表 ＊号代表IC50值受到酶的相互消耗的限制。化合物A[4-(N-羟氨基)-2(R或S)-庚基丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺。化合物B[4-(N-羟氨基)-2(R或S)-壬基丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺。化合物C[4-(N-羟氨基)-2(R或S)-庚基-3(S)-甲基丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺。化合物D[4-(N-羟氨基)-2(R)-庚基-3(R或S)-(苯二甲酰亚氨基甲基)丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺。化合物E[4-(N-羟氨基)-2(RS)-壬基丁二酰]-L-叔丁基甘氨酸甲基酰胺。化合物F[4-(N-羟氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-苯丙氨酸甲基酰胺。化合物G[4-(N-羟氨基)-2(R)-庚基-3-(R或S)-(苯二甲酰亚氨基甲基)-丁二酰]-L-叔丁基甘氨酸甲基酰胺。化合物H[4-(N-羟氨基)-2(R)-庚基-3-(R或S)-(3-苯基丙基)丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺。式Ⅰ化合物及其药学上可接受的盐可以作为药物使用，例如以药物制剂的形式使用。药物制剂可以口服，例如以片剂、糖衣片剂、糖衣药丸、硬和软明胶胶囊、溶液、乳状液或悬浮液等形式服用。但是它们也可以通过直肠施药，例如以栓剂的形式，或是非肠道施药，例如以注射液的形式。为了制造药物制剂，可以将式Ⅰ化合物及其药学上可接受的盐与治疗上呈惰性的无机或有机形体一起配制。例如，乳糖、玉米淀粉或其衍生物、滑石粉、硬脂酸或其盐，可以作为片剂、糖衣片剂、糖衣药丸和硬明胶胶囊的载体。软明胶胶囊的载体有例如植物油、蜡、脂肪、半固态和液态的多元醇等。但是，在软明胶胶囊的情形一般不需要载体，这取决于活性组分的本性。制造溶液和糖浆用的合适的载体有水、多元醇、蔗糖、转化糖、葡萄糖等。适合制造注射液的载体有水、醇、多元醇、甘油、植物油等。天然油和硬化油、蜡、脂肪、半液态的多元醇等是制造栓剂的合适载体。药物制剂还可以含有防腐剂、稳定剂、润湿剂、乳化剂、甜味剂、着色剂、香味剂、调节渗透压用的盐、缓冲剂、包衣剂或抗氧化剂。含有式Ⅰ化合物或其药学上可接受的盐和治疗上可接受的载体的药物以及制造这类药物的方法，也是本发明的目的。这一方法包括将式Ⅰ化合物或其药学上可接受的盐与治疗上惰性的载体物质相混合，并将混合物制成盖林制剂的施药形式。如上所述，式Ⅰ化合物及其药学上可接受的盐可以用来控制或预防疾病，特别是控制或预防关节变性病或治疗扩散性肿瘤、动脉粥样硬化或多发性硬化症，药的剂量可以在很广的范围内变化，当然要调节到各个具体情形的个别需要。一般来说，在对成年人给药的情形，日剂量约5至30毫克，最好是约10至15毫克，应该是合适的，但是上限可以超过，如果发现这样做有利的话。此日剂量可以单独一次服用或分几次服用。以下实施例说明了本发明。产物的结构用NMR谱及质谱证实。薄层色谱体系的组成如下体系A:氯仿:甲醇:乙酸:水120:15:3:2体系B:氯仿:甲醇:乙酸:水240:24:3:2另外，所有温度均为摄氏度。实施例1将0.10克(0.17毫摩尔)[4-(N-苄氧基氨基)-2(R或S)-庚基丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺(异构体1)在10毫升甲醇中于0.05克5%钯/碳存在下氢化1小时。将混合物过滤，滤液蒸发，残余物用乙醚洗，真空干燥，得到0.083克(98%)[4-(N-羟氨基)-2(R或S)-庚基丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺，为白色吸湿性固体;Rf(体系A)0.54;MS(M+H)+485。元素分析C25H48H4O50.6H2O计算值C，60.60;H，10.01;N，11.31%实验值C，60.62;H，9.75;N，11.39%作为起始物使用的[4-(N-苄氧基氨基)-2(R或S)庚基丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺制备如下(A)将29.95克(0.15毫摩尔)DL-α-氨基壬酸溶解在900毫升乙酸中，温热至40℃。在6小时内逐滴加入20.7克(0.3摩尔)亚硝酸钠，在已经加了三分之一亚硝酸钠后停止加热。将混合物在室温下搅拌16小时，蒸发，加水，用乙醚萃取所得之油(2×200毫升)。将合并的醚萃取液用无水硫酸钠干燥，蒸发，得到31.9克透明的褐色油状物。将此油溶解在150毫升甲醇中，加入18克氢氧化钠在150毫升水中的溶液，将混合物在室温下搅拌2小时。蒸发走甲醇，加水，用38毫升浓盐酸将溶液酸化。产物用乙醚萃取(2×150毫升)，萃取液用硫酸镁干燥，蒸发形成固体。从120毫升60-80℃的石油醚中重结晶得到20.58克(产率79%)2(RS)-羟基壬酸，熔点67-69℃。(B)将21.4克(0.123摩尔)2(RS)-羟基壬酸溶在240毫升乙酸乙酯中。加入17.3毫升(0.123摩尔)的三乙胺和14.8毫升(0.123摩尔)苄基溴，将混合物加热回流3小时。混合物冷却，过滤，用2M盐酸、水和5%碳酸氢钠溶液洗，然后用无水硫酸镁干燥。蒸发走溶剂，得到25.4克(78%)2(RS)-羟基壬酸苄酯，为油状物;Rf(乙酸乙酯/己烷1∶1)0.68。(C)在半小时内于搅拌下将24.3克(92毫摩尔)2(RS)-羟基壬酸苄酯和8.9毫升(110毫摩尔)吡啶在150毫升无水二氯甲烷中的溶液加到温度为0℃的18.6毫升(110毫摩尔)三氟甲磺酸酐在200毫升干燥二氯甲烷中的溶液里。将混合物在0℃再搅拌1小时。加入3.7毫升(46毫摩尔)吡啶和7.7毫升(46毫摩尔)三氟甲磺酸酐在100毫升无水二氯甲烷中的溶液。将混合物在0℃搅拌1小时，用水洗(2×100毫升)，用硫酸镁干燥，蒸发，得到油状物。在硅胶柱上用乙酸乙酯/己烷(1∶9)作洗脱液进行层析，得到26.7克(73%)2(RS)-三氟甲烷磺酰氧壬酸苄酯;Rf(己烷/乙酸乙酯3∶1)0.66。(D)在0℃下将26.5克(67毫摩尔)2(RS)三氟甲烷磺酰氧壬酸苄酯在100毫升无水二氯甲烷中的溶液逐滴加到2.11克(70毫摩尔)80%的氢化钠和16.75克(67毫摩尔)苄基叔丁基丙二酸酯在170毫升干燥二甲基甲酰胺中的悬浮液里。将混合物在0℃下搅拌2小时，室温下搅拌16小时，用二氯甲烷稀释，依次用水、5%碳酸氢钠溶液和饱和氯化钠溶液洗，用硫酸镁干燥，蒸发，得到含有3-叔丁氧基羰基-2(RS)-庚基丁二酸二苄酯的油(34.6克);Rf(乙酸乙酯/己烷3∶1)0.49，将此油溶在549毫升异丙醇中，在0.5克5%钯/碳存在下氢化2小时。将混合物过滤，滤液蒸发，加入甲苯，将混合物蒸发除掉痕量的异丙醇。残余物(27.8克)在400毫升甲苯和9.1毫升(65毫摩尔)三乙胺中回流2小时，蒸发，将残余物溶在乙酸乙酯中。溶液用0.5M盐酸(2×80毫升)和水洗，用硫酸镁干燥，蒸发，得到17.55克(96%)4-叔丁基2(RS)-庚基丁二酸酯;Rf(乙酸乙酯)0.63;MS∶(M+H)+273。(E)将1.5克(4毫摩尔)N-叔丁氧基羰基-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙酸酰胺溶解在20毫升4M的HCl/乙酸乙酯溶液中，在室温下搅拌0.75小时，残余物真空干燥。将残余物置于10毫升无水二甲基甲酰胺中，在0℃下依次用0.51毫升(4毫摩尔)N-乙基吗啉、1.1克(4毫摩尔)4-叔丁基 2(RS)-庚基丁二酸酯在5毫升二氯甲烷中的溶液、0.82克(6毫摩尔)羟基苯并三唑和0.92克(4.4毫摩尔)二环己基碳化二亚胺处理。将混合物在0℃下搅拌1小时，室温下搅拌16小时。加入几滴2-二甲基氨基乙胺，将悬浮液冷至0℃3小时，过滤，蒸发。残余物溶在乙酸乙酯内，依次用5%柠檬酸溶液、水、5%碳酸氢钠溶液和氯化钠饱和溶液洗，用硫酸镁干燥，蒸发。在硅胶上层析，用乙酸乙酯/己烷(2∶1)作洗脱液，得到1.5克(71%)[4-叔丁氧基2(RS)-庚基丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺，为白色固体;Rf(二氯甲烷/甲醇19∶1)0.3;MS∶(M+H)+526。(F)将0.8克(1.5毫摩尔)[4-叔丁氧基2(RS)-庚基丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺溶解在15毫升三氟乙酸中，将溶液搅拌2小时，蒸发。残余物用甲苯蒸发三次，然后溶解在10毫升无水二氯甲烷中，冷却到0℃。加入0.37毫升(4.5毫摩尔)吡啶和0.64克(1.5毫摩尔)二(1-苯并三唑基)碳酸酯(70%)，将混合物在0℃下搅拌1小时。加入0.22毫升(1.8毫摩尔)O-苄基羟胺，混合物在0℃搅拌1小时，室温下搅拌16小时。将形成的悬浮液过滤，固体依次用二氯甲烷、5%碳酸氢钠溶液、水、2M盐酸和水洗，然后真空干燥。在硅胶上层析，用甲醇/二氯甲烷(1∶19)洗脱，得到0.21克(24%)[4-(N-苄氧基氨基)-2(R或S)-庚基丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺(异构体1);Rf(甲醇/二氯甲烷1∶19)0.21;MS;(M+H)+575;高效液相色谱[ODS(十八烷基硅烷/表面多孔硅胶)反相柱，用60%乙腈/三乙胺磷酸盐缓冲液(pH2.5)洗脱]Rt6.4分。将二氯甲烷滤液依次用5%碳酸氢钠溶液、2M盐酸、5%碳酸氢钠溶液和氯化钠饱和溶液洗，在硫酸镁上干燥，蒸发。在硅胶上层析，用甲醇/二氯甲烷(1∶40)洗脱，得到0.42克(49%)[4-(N-苄氧基氨基)-2(R或S)-庚基丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺，为异构体的混合物。Rf(甲醇/二氯甲烷1∶19)0.20;MS(M+H)+575;高效液相色谱(ODS反相柱，用60%乙腈/三乙胺磷酸盐缓冲液)(pH2.5)洗脱)Rt6.4和11.3分;异构体1/异构体2之比为1∶3.7。元素分析C32H54N4O5(547.81)计算值C，66.87;H，9.47;N，9.75%实验值C，66.51;H，9.41;N，9.68%实施例20.5克(1.12毫摩尔)[4-(N-苄氧基氨基)2(RS)-庚基丁二酰]-L-亮氨酸甲基酰胺在10毫升甲醇中于0.01克5%钯/炭存在下氢化2小时。将混合物过滤，滤液蒸发，残余物真空干燥，得到0.36克(90%)[4-(N-羟氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-亮氨酸甲基酰胺，为白色粉末，Rf(甲醇/二氯甲烷1∶19)0.47和0.39;MS∶(M+H)+358。元素分析C18H35N3O4(357.50)计算值C，60.48;H，9.87;N，11.75%实验值C，60.71;H，9.93;N，11.34%起始物制备如下(A)将1.08克苄氧基羰基-L-亮氨酸甲基酰胺在20毫升含3.7毫升1M盐酸的甲醇中于0.05克5%钯/炭存在下氢化2小时。将混合物过滤，滤液蒸发，残余物再用甲苯蒸发，然后真空干燥。将残余物溶在10毫升二甲基甲酰胺中，冷却到0℃，用0.5毫升(3.9毫摩尔)N-乙基吗啉中和。加入1.01克(3.7毫摩尔)4-叔丁基氢2(RS)-庚基丁二酸酯在20毫升二甲基甲酰胺中的溶液，接着加入0.6克(4.4毫摩尔)羟基苯并三唑和0.84克(4.08毫摩尔)二环己基碳化二亚胺。将混合物在0℃下搅拌1小时，室温下搅拌16小时，然后蒸发。残余物溶在二氯甲烷中，过滤，滤液依次用两份5%碳酸氢钠溶液、水、0.5M盐酸和水洗，用硫酸镁干燥，蒸发，得到油状物。在硅胶上层析，用甲醇/二氯甲烷(3∶97)洗脱，得到0.99克(67%)[叔丁氧基2(RS)-庚基丁二酰]-L-亮氨酸甲基酰胺，为油状物;Rf(乙酸乙酯)0.47和0.55;MS(M+H)+399。(B)将0.96克(2.4毫摩尔)[叔丁氧基2(RS)庚基丁二酰]-L-亮氨酸甲基酰胺溶解在20毫升三氟乙酸中，在室温下搅拌2小时，蒸发。将残余物用甲苯蒸发三次，然后溶解在10毫升二甲基甲酰胺中，冷却到0℃。加入0.61毫升(4.8毫摩尔)N-乙基吗啉将溶液中和。加入0.39克(2.89毫摩尔)羟基苯并三唑和0.57克(2.97毫摩尔)1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)-碳化二亚胺盐酸盐。将溶液在0℃下搅拌1小时。加入0.35克(2.8毫摩尔)O-苄基羟胺在5毫升二氯甲烷中的溶液，将混合物在0℃下搅拌1小时，在室温下搅拌过夜，然后蒸发。将油状物分配在5%碳酸氢钠溶液的二氯甲烷之间，有机层依次用水、2M盐酸和氯化钠饱和溶液洗，用硫酸镁干燥，蒸发，得到固体。在硅胶上层析，用甲醇/己烷(1∶9)洗脱，得到0.56克(52%)[4-(N-苄氧基氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-亮氨酸甲基酰胺，为白色固体;Rf(乙酸乙酯)0.24和0.36;MS(M+H)+448。实施例3按照与实施例2第一段中所述的类似方式，由[4-(N-苄氧基氨基)-2(RS)庚基丁二酰基]-L-亮氨酸新戊基酰胺制备[4-(N-羟氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-亮氨酸新戊基酰胺，为泡沫状物;Rf(甲醇/二氯甲烷1∶9)0.52;MS(M+H)+414。起始物制备如下利用与实施例1(E-F)中所述的类似方法，由N-叔丁氧基羰基-L-亮氨酸新戊基酰胺得到[4-(N-苄氧基氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-亮氨酸新戊基酰胺，为白色泡沫状物Rf(甲醇/二氯甲烷1∶19)0.59;MS(M+H)+504。实施例4按照与实施例2第一段中所述的类似方式，由[4-(N-苄氧基氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-丙氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺制得[4-(N-羟氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-丙氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺，白色固体;MS(M+H)+443。元素分析C22H42N4O5(442.60)计算值C，59.70;H，9.57;N，12.66%实验值C，59.95;H，9.59;N，12.25%起始物制备如下利用与实施例2(A-B)中所述的类似方法，由N-苄氧基羰基-L-丙氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺得到[4-(N-苄氧基氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-丙氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺，为玻璃状固体;Rf(甲醇/二氯甲烷1∶19)0.25和0.41;MS(M+H)+533。实施例5按照与实施例2第一段中所述的类似方式，由[4-(N-苄氧基氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-(Nε-邻苯二甲酰)赖氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺得到[4-(N-羟氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-(Nε-邻苯二甲酰)-赖氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺，为白色固体;Rf(甲醇/二氯甲烷1∶19)0.30;MS(M+H)+630。起始物制备如下采用与实施例2(A-B)中所述的类似方法，由Nα-苄氧基羰基-Nε-邻苯二甲酰-L-赖氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺得到[4-(N-苄氧基氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-(Nε-邻苯二甲酰)-赖氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺，为泡沫状体;Rf(甲醇/二氯甲烷1∶19)0.41和0.50;MS(M+H)+720。实施例60.2克(0.33毫摩尔)[4-(N-苄氧基氨基)-2(R或S)-壬基丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺(异构体1)在20毫升甲醇中在0.07克5%钯/炭催化剂存在下氢化80分钟。将混合物过滤，滤液蒸发，残余物真空干燥，得到0.166克(98%)[4-(N-羟氨基)-2(R或S)-壬基丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺，为白色固体;Rf(体系B)0.35;MS(M+H)+513。元素分析C27H52N4O5(512.74)计算值C，63.25;H，10.22;N，10.93%实验值C，62.83;H，10.14;N，10.74%起始物制备如下(A)将6.25毫升(25毫摩尔)丙二酸二苄酯在氮气下溶在25毫升干燥的二甲基甲酰胺中，在10分钟内加入0.75克80%氢化钠。将混合物搅拌0.5小时，冷却到0℃，加入4.75毫升(25毫摩尔)1-溴壬烷在10毫升无水二甲基甲酰胺中的溶液。在0℃下继续搅拌1小时，混合物在室温下放置64小时。将溶液蒸发，残余物溶在乙醚中。有机相用水和氯化钠饱和溶液洗，用硫酸镁干燥，蒸发。在硅胶上层析，用乙酸乙酯/己烷(1∶5)洗脱，得到5.85克(56%)油状的壬基丙二酸二苄酯;Rf(乙酸乙酯/己烷1∶3)0.58。(B)按照(A)中所述的方法，用0.43克(14毫摩尔)80%氢化钠和2.33毫升(14毫摩尔)溴乙酸叔丁酯处理5.85克(14毫摩尔)壬基丙二酸二苄酯，在硅胶上层析，用乙酸乙酯/己烷(1∶19)洗脱。得到6.24克(83%)苄基4-叔丁基氢(2-壬基-2-苄氧基羰基)丁二酸酯，为油状物;Rf(乙酸乙酯/己烷1∶19)0.74。(C)将(B)中的苄基4-叔丁基氨(2-壬基-2-苄氧基羰基)-丁二酸酯溶在80毫升异丙醇中，在0.2克5%钯-炭存在下氢化1小时，将悬浮液过滤，滤液蒸发，加入100毫升甲苯，混合物回流3小时。蒸发后得到3.5克(97%)油状4-叔丁基氢2(RS)-壬基丁酸酯;Rf(体系A)0.73。(D)将1.5克(4.0毫摩尔)叔丁氧基羰基-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺溶在20毫升4M的盐酸/乙酸乙酯溶液中，在室温下搅拌0.5小时，蒸发，用乙醚洗，真空干燥。将固体溶在10毫升无水二甲基甲酰胺中，用0.6毫升(4.7毫摩尔)的N-乙基吗啉、1.2克(4.0毫摩尔)4-叔丁基氢2(RS)-壬基丁二酸酯、0.66克(4.9毫摩尔)羟基苯并三唑和0.78克(4.0毫摩尔)1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)碳化二亚胺盐酸盐处理。将混合物在0℃下搅拌1小时，在室温下放置16小时并蒸发之。残余物溶在乙酸乙酯中，依次用5%碳酸氢钠溶液、水、5%柠檬酸溶液、水、5%碳酸氢钠溶液和氯化钠饱和溶液洗，然后蒸发，得到固体。在硅胶上层析，用乙酸乙酯洗脱，得到1.9克(86%)白色固体状[4-叔丁氧基2(RS)-壬基丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺;Rf(乙酸乙酯)0.60;MS(M+H)+554。(E)将0.95克(1.7毫摩尔)[4-叔丁氧基2(RS)-壬基丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺溶在15毫升三氟乙酸中，在室温下搅拌溶液2小时，蒸发之。残余物用甲苯蒸发，溶在二氯甲烷中，用水洗，用硫酸镁干燥，蒸发。将残余物在-15℃下溶在10毫升二甲基甲酰胺中，用0.22毫升(1.7毫摩尔)N-乙基吗啉和0.22毫升(1.7毫摩尔)氯甲酸异丁酯处理。10分钟后在-15℃下加入0.42毫升(3.4毫摩尔)O-苄基羟胺，混合物在0℃下搅拌1小时，在室温放置过夜，用水将混合物稀释，滤出分离出的固体，依次用5%柠檬酸溶液、水和5%碳酸氢钠溶液洗，然后真空干燥。残余物在硅胶上层析，用甲醇/二氯甲烷(3∶97)洗脱，得到0.55克(54%)白色固体状[4-(N-苄氧基氨基)-2(RS)-壬基丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺;Rf(甲醇/二氯甲烷1∶19)0.47;MS(M+H)+603;高效液相色谱(ODS反相柱，用70%乙腈/三甲铵磷酸盐缓冲液(pH2.5)洗脱)Rt4.7和7.7分。异构体分离如下将1.0克(1.66毫摩尔)混合物溶解在10毫升热的二氯甲烷中，溶液在室温下放置2小时，在4℃下16小时。滤出固体，用二氯甲烷洗，真空干燥，得到0.41克(41%)[4-(N-苄氧基氨基)-2(R或S)-壬基丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺(异构体1)固体;Rf(体系B)0.46高效液相色谱Rt4.6分。将母液蒸发，得到0.47克(47%)[4-(N-苄氧基氨基)-2(R或S)-壬基丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺(异构体2)固体;Rf(体系B)0.52;高效液相色谱Rt7.5分。实施例7按照与实施例6第一段中所述的类似方法，由[4-(N-苄氧基氨基)-2(R或S)-壬基丁二酰]-L-叔丁基甘氨酸甲基酰胺制得[4-(N-羟氨基)-2(RS)-壬基丁二酰]-L-叔丁基甘氨酸甲基酰胺，为白色泡沫状物;Rf(体系A)0.58和0.64;MS(M+H)+386。元素分析C20H39N3O40.4CH3OH计算值C，61.51;H，10.27;N，10.55%实验值C，61.50;H，10.13;N，10.27%起始物制备如下按照与实施例6(D-E)中所述的类似方式，但是用L-叔丁基甘氨酸甲基酰胺代替去保护的叔丁氧基羰基-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺作为起始物，得到泡沫状的[4-(N-苄氧基氨基)-2(RS)-壬基丁二酰]-L-叔丁基甘氨酸甲基酰胺;Rf(甲醇/二氯甲烷1∶19)0.27和0.34;MS(EI)M+475。实施例8按照与实施例6第一段中所述的类似方式，由[4-(N-苄氧基氨基)-2(RS)-十一烷基丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺制得泡沫状的[4-(N-羟氨基)-2(RS)-十一烷基丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺;Rf(体系A)0.62和0.66;MS(M+H)+541。起始物制备如下按照与实施例6(A-E)中所述的类似方式，但是使用1-溴代十一烷代替1-溴代壬烷，得到凝胶状的[4-(N-苄氧基氨基)-2(RS)-十一烷基丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺;Rf(甲醇/二氯甲烷1∶9)0.70;MS(M+H)+631。实施例90.3克(0.536毫摩尔)[4-(N-苄氧基氨基)-2(R或S)-庚基-3(S)甲基丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺(非对映异构体1)在50毫升甲醇中在0.1克5%钯/炭存在下氢化1.5小时。将混合物过滤，滤液蒸发，残余物与乙醚一起研制，得到0.23克[4-(N-羟氨基)-2(R或S)-庚基-3(S)-甲基丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺(非对映异构体1)，为白色固体;MS499(M+H)+。元素分析C26H50N4O50.4H2O计算值C，61.72;H，10.12;N，11.08%实验值C，61.92;H，10.05;N，10.85%起始物制备如下(A)将2.0克(0.11摩尔)L-乳酸苄基酯和10.8毫升(0.13摩尔)吡啶在220毫升二氯甲烷中的溶液在0.5小时内于0℃下加到三氟甲烷磺酸酐在250毫升二氯甲烷中的溶液里。又过0.5小时之后，用水洗溶液两次，每次250毫升，用250毫升氯化钠饱和溶液洗，然后在无水硫酸镁上干燥。接着在0℃下于0.5小时内将溶液加到钠代丙二酸二叔丁酯(0.11摩尔，由22.8克丙二酸二叔丁酯和3.48克80%氢化钠/油制备)在250毫升二甲基甲酰胺中的溶液里。将混合物温热至室温放置地过夜，蒸发掉溶剂。残余物分配在200毫升乙酸乙酯和200毫升5%碳酸氢钠溶液之间。用水洗有机层(2×200毫升)，用无水硫酸镁干燥，蒸发后得到黄色油。在硅胶上用闪色谱分离，用10%乙酸乙酯的己烷溶液洗脱，得到35.4克(88%)无色油状的1-苄基4-叔丁基3(RS)-叔丁氧基羰基-2(S)-甲基丁二酸酯;Rf(30%的乙酸乙酯/己烷溶液)0.63。(B)将952毫克80%氢化钠在搅拌下加到10克1-苄基-4-叔丁基3(RS)-叔丁氧基羰基-2(S)-甲基丁二酸酯在100毫升干燥二甲基甲酰胺中的溶液里。将溶液在室温下搅拌2小时，然后加入6.23毫升1-溴庚烷。将混合物加热到60℃4小时，然后在室温下搅拌过夜。将溶剂蒸发，残余物溶在乙酸乙酯中。溶液依次用5%碳酸氢钠溶液、水和氯化钠饱和溶液洗，然后在无水硫酸镁上干燥。将溶剂蒸发，残余物用闪色谱法纯化，用5%的乙酸乙酯己烷溶液洗脱，得到6.83克无色油状的3，3(RS)-二叔丁氧基羰基-2(S)-甲基癸酸苄酯;Rf(10%乙酸乙酯/己烷)0.5。(C)将6.8克3，3(RS)-二叔丁氧基羰基-2(S)-甲基癸酸苄酯在20毫升三氟乙酸中于室温下搅拌1小时，将溶剂蒸发，残余物自甲苯(2×25毫升)中再蒸发，留下橙色的油状物。将油重新溶解在100毫升甲苯中，用3.64毫升N-乙基吗啉处理，回流加热1小时。溶液依次用2M盐酸、水和氯化钠溶液洗，用无水硫酸镁干燥，蒸发后留下褐色油状物。用闪色谱法纯化，使用2%的甲醇/二氯甲烷溶液洗脱，得到3.02克黄色油状1-苄基-3(RS)-羧基-2(S)-甲基癸酸酯;Rf(5%甲醇/二氯甲烷)0.47，0.52;MS321(M+H)+。(D)按照与实施例1(D)-(F)名所述的类似方式，由1.5克3(RS)-羧基-2(S)-甲基癸酸苄酯得到0.315克灰白色固体[4-(N-苄氧基氨基)-2(R或S)-庚基-3(S)-甲基丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺(非对映异构体1)。实施例100.25克[4-(N-苄氧基氨基)-2(R)-庚基-3(R或S)-(苯二甲酰亚氨基甲基)丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺(非对映异构体1)在100毫升二甲基甲酰胺中于100毫克10%钯。炭存在下氢化24小时。将催化剂滤掉，蒸发溶剂。残余物与乙醚一直研制，得到0.17克灰色粉末状[4-(N-羟氨基)-2(R)-庚基-3(R或S)-(苯二甲酰亚氨基甲基)丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺(非对映异构体1);Rf(10%甲醇/二氯甲烷)0.5;MS644(M+H)+。元素分析C34H53N5O70.8H2O计算值C，62.04;H，8.36;N，10.64实验值C，61.99;H，8.04;N，10.60起始物制备如下(A)按照与实施例1(A)-(D)中所述的类似方法，由20克D-α-氨基壬酸得到10.28克3(RS)-叔丁氧基羰基-2(R)-庚基丁二酸二苄酯，为浅黄色油状物;Rf(10%乙酸乙酯/己烷)0.32。(B)8.2克3(RS)-叔丁氧基羰基-2(R)-庚基丁二酸二苄酯在100毫升干燥的二甲基甲酰胺中用0.49克80%氢化钠分散体处理。2小时后将混合物冷却到0℃，分批加入4.18克N-溴甲基邻苯二甲酰亚胺。将混合物在0℃下再搅拌1小时，然后在室温下搅拌过夜。蒸走溶剂，将残余物分配在乙酸乙酯和5%碳酸氢钠溶液之中。有机相用水和氯化钠饱和溶液洗，然后用无水硫酸镁干燥。蒸走溶剂，残余物用闪色谱法在硅胶上纯化，用20%乙酸乙酯/己烷洗脱，得到6.42克3(RS)-叔丁氧基羰基-2(R)-庚基-3(RS)-(苯二甲酰亚氨基甲基)丁二酸二苄酯。(C)3.5克3(RS)-叔丁氧基羰基-2(R)-庚基-3(RS)-(苯二甲酰亚氨基甲基)丁二酰二苄酯在50毫升乙醇中于0.35克5%钯/炭存在下氢化。将催化剂滤掉，溶剂蒸发。残余物溶在50毫升甲苯中，用0.58毫升N-乙基吗啉处理并加热回流2小时。将溶液依次用2M盐酸、水和氯化钠饱和溶液洗，然后用无水硫酸镁干燥。残余物在硅胶上用闪色谱法纯化，用4%甲醇/二氯甲烷溶液洗脱，得到1.54克油状的4-叔丁基氢2(R)-庚基-3(RS)-(苯二甲酰亚氨基甲基)丁二酸酯;Rf(5%甲醇/二氯甲烷)0.3。(D)按着与实施例1(E)-(F)中所述的类似方式，由0.6克4-叔丁基2(R)-庚基-3(RS)-(苯二甲酰亚氨基甲基)丁二酸酯得到0.27克[4-(N-苄氧基氨基)-2(R)-庚基-3(R或S)-(苯二甲酰亚氨基甲基)丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺(非对映异构体1)，为白色固体;MS734(M+H)+。元素分析C41H59N5O70.6H2O计算值C，66.12;H，8.15;N，9.4实验值C，66.08;H，8.08;N，9.53。实施例11按照与实施例2中第一段所述的类似方式，从[4-(N-苄氧基氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-苯丙氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺制得[4-(N-羟氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-苯丙氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺，为白色固体;Rf(甲醇/二氯甲烷1∶19)0.28和0.43;MS(M+H)+519。元素分析C28H46N4O50.3H2O计算值C，64.17;H，8.96;N，10.69%实验值C，64.07;H，8.77;N，10.64%起始物制备如下采用与实施例1(E-F)中所述的类似方法，由N-叔丁氧基羰基-L-苯丙氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺得到[4-(N-苄氧基氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-苯丙氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺，为白色固体;Rf(甲醇/二氯甲烷1∶19)0.64;MS(M+H)+609。实施例12按照与实施例2第一段是所述的类似的方式，由[4-(N-苄氧基氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-壬氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺制得[4-(N-羟氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-壬氨酰基-L-亮氨酸乙基酰胺，为白色固体;MS(M+H)+527。元素分析C28H54N4O5(526.76)计算值C，63.84;H，10.33;N，10.64%实验值C，63.64;H，10.39;N，10.63%起始物制备如下采用与实施例1(E-F)中所述的类似方法，由N-叔丁氧基羰基-L-壬氨酰基-L-亮氨酸乙基酰胺制得[4-(N-苄氧基氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-壬氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺，为白色固体;Rf(甲醇/二氯甲烷1∶19)0.55和0.62;MS(M+H)+617。实施例13按照与实施例2第一段中所述的类似方式，由[4-(N-苄氧基氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-苯丙氨酸叔丁基酰胺制得[4-(N-羟氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-苯丙氨酸叔丁基酰胺，为吸湿性泡沫状物;Rf(甲醇/氯仿1∶19)0.31;MS(M+H)+434。起始物制备如下采用与实施例1(E-F)中所述的类似方法，由N-叔丁氧基羰基-L-苯丙氨酸叔丁基酰胺得到[4-(N-苄氧基氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-苯丙氨酸叔丁基酰胺，为白色固体;Rf(乙酸乙酯)0.75;MS(M+H)+524。实施例14按照与实施例2第一段中所述的类似方式，由[4-(苄氧基氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-苯丙氨酸甲基酰胺制得[4-(N-羟氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-苯丙氨酸甲基甲酰胺，为白色固体;Rf(甲醇/二氯甲烷1∶19)0.16和0.21;MS(M+H)+392。起始物制备如下采用与实施例1(E-F)中所述的类似方法，由N-叔丁氧基羰基-L-苯丙氨酸甲基酰胺得到[4-(N-苄氧基氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-苯丙氨酸甲基酰胺，为白色固体;Rf(甲醇/氯仿1∶19)0.29和0.36。元素分析C28H39N3O4(481.64)计算值C，69.83;H，8.16;N，8.72%实验值C，69.56;H，8.05;N，9.00%实施例15按照与实施例2第一段中所述的类似方法，由[4-(N-苄氧基氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-叔丁基甘氨酸甲基酰胺制得[4-(N-羟氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-叔丁基甘氨酸甲基酰胺，为泡沫状物;Rf(甲醇/二氯甲烷1∶19)0.23和0.29;MS(M+H)+358。元素分析C18H35N3O4·0.3CH3OH计算值C，59.87;H，9.94;N，11.45%实验值C，59.80;H，9.76;N，11.44%起始物制备如下按照与实施例1(E-F)中所述的类似方法，但是用L-叔丁基甘氨酸甲基酰胺代替去保护的苄氧基羰基-L-亮氨酸甲基酰胺作起始物，制得白色泡沫状的[4-(N-苄氧基氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-叔丁基甘氨酸甲基酰胺;Rf(甲醇/氯仿1∶19)0.29和0.36;MS(M+H)+448。实施例16按照与实施例2第一段中所述的类似方式，由[4-(N-苄氧基氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-新戊基甘氨酸甲基酰胺制得[4-(N-羟氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-新戊基甘氨酸甲基酰胺，为白色固体;MS(M+H)+372。元素分析C13H37N3O4(371.52)计算值C，61.43;H，10.04;N，11.31%实验值C，61.04;H，9.93;N，11.13%起始物制备如下采用与实施例1(E-F)中所述的类似方法，由N-叔丁氧基羰基-L-新戊基甘氨酸甲基酰胺得到[4-(N-苄氧基氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-新戊基甘氨酸甲基酰胺，为白色泡沫状物;Rf(甲醇/氯仿1∶19)0.47和0.55;MS(M+H)+462。元素分析C26H43N3O4(461.65)计算值C，67.65;H，9.39;N，9.10%实验值C，67.57;H，9.12;N，9.02%实施例17按照与实施例2第一段中所述的类似方式，由[4-(N-苄氧基氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-高苯丙氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺制得[4-(N-羟氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-高苯丙氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺，为白色吸湿性粒状粉末;MS(M+H)+533。元素分析C29H48N4O5·0.4H2O计算值C，64.51;H，9.11;N，10.38%实验值C，64.59;H，8.94;N，10.14%起始物制备如下采用与实施例2(A-B)中所述的类似方法，由N-苄氧基羰基-L-高苯丙氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺制得[4-(N-苄氧基氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-亮苯丙氨酸-L-亮氨酸乙基酰胺固体;Rf(甲醇/氯仿1∶19)0.55;MS(M+H)+623。元素分析C36H54N4O5(622.85)计算值C，69.42;H，8.74;N，9.00%实验值C，69.02;H，8.85;N，8.87%实施例18按照与实施例2第一段中所述的类似方式，由[4-(N-苄氧基氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-环己基丙氨酸甲基酰胺制得[4-(N-羟氨基)-2(RS)庚基丁二酰]-L-环己基丙氨酸甲基酰胺，为白色固体;MS(M+H)+398。元素分析C21H39N3O4(397.56)计算值C，63.45;H，9.89;N，10.57%实验值C，63.24;H，10.04;N，10.33%起始物制备如下采用与实施例1-(E-F)中所述的类似方法，由N-叔丁氧基羰基-L-环己基丙氨酸甲基酰胺制得[4-(N-苄氧基氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-环己基丙氨酸甲基酰胺，为白色固体;Rf(甲醇/二氯甲烷1∶9)0.30和0.37;MS(M+H)+488。实施例19将0.6克(1.14毫摩尔)[4-叔丁氧基2(RS)-庚基丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺[在实施例1(E)中制得]溶在10毫升三氟乙酸中，将溶液搅拌3小时，蒸发之。残余物自甲苯中蒸发四次，然后溶在含有5毫升甲醇的200毫升二氯甲烷中，用水洗两次，用硫酸镁干燥，蒸发之。将残余物在0℃下溶在1毫升二甲基甲酰胺和10毫升1，2-二甲氧基乙烷中。加入0.135克(1.17毫摩尔)N-羟基丁二酰亚胺和0.243克(1.17毫摩尔)二环己基碳化二亚胺，混合物在0℃下搅拌1小时，4℃下搅拌16小时，过滤，蒸发，得到粘性固体状的N-羟基丁二酰亚胺酯粗品。将此酯悬浮在5毫升四氢呋喃中，用0.178克(2.56毫摩尔)羟胺盐酸盐和0.094克(2.35毫摩尔)氢氧化钠在5毫升水中的溶液处理，在室温下搅拌16小时，过滤，蒸发。用水洗形成的胶状物，倾析，用甲苯蒸发干燥。在硅胶上层析，先用1%的甲醇/二氯甲烷。然后用2%、3%和5%的甲醇/二氯甲烷洗脱，蒸发后得到[4-(N-羟氨基)-2(R或S)-庚基丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺的异构体1和2，为白色固体。Rf(甲醇/二氯甲烷1∶12.5)0.34(异构体2)和Rf0.26(异构体1)。将异构体1用二氯甲烷和乙酸乙酯洗，然后干燥，得到0.083克(15%)[4-(N-羟氨基)-2(R或S)-庚基丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺(异构体1)，与实施例1中制得的相同。Rf(体系A)0.54。MS(M+H)+485。元素分析C25H48N4O5·0.2H2O计算值C，61.50;H，9.99;N，11.47%实验值C，61.41;H，10.09;N，11.48%实施例200.30克(0.2毫摩尔)[4-(N-苄氧基氨基)-2(RS)-异辛基丁二酰]-L-苯丙氨酸甲基酰胺在200毫升甲醇中于0.1克10%钯/炭存在下氢化3小时。将混合物过滤，滤液蒸发，得到0.20(81%)白色固体状[4-(N-羟氨基)-2(RS)-异辛基丁二酰]-L-苯丙氨酸甲基酰胺;MS(M+H)+406。元素分析C22H35N3O4(405.54)计算值C，65.16;H，8.70;N，10.36%实验值C，65.04;H，8.75;N，10.20%作为起始物使用的[4-(N-苄氧基氨基)-2(RS)-异辛基丁二酰]-L-苯丙氨酸甲基酰胺制备如下(A)在0.5小时内将13.03(60毫摩尔)乙酰氨基丙二酸二乙酯在50毫升无水二甲基甲酰胺中的溶液在氮气氛和0℃下加到2.16克(72毫摩尔)80%氢化钠在50毫升干燥的二甲基甲酰胺中的悬浮液里。将混合物在室温下搅拌3小时。加入15.05克(78毫摩尔)1-溴-6-甲基庚烷在50毫升干燥的二甲基甲酰胺中的溶液，将混合物搅拌64小时，蒸发形成油状物。用乙酸乙酯萃取该油两次，合并的萃取物用水洗，在硫酸镁上干燥，蒸发。残余物在6M盐酸(180毫升)中回流4小时，冷却，滤出蜡状固体。将粗产品在120毫升50%乙醇水溶液中过滤，加入7毫升吡啶，混合物在水中冷却，得到6.49克(57%)DL-异辛基甘氨酸，为灰白色细粉。(B)将6.45克(34.5毫摩尔)DL-异辛基甘氨酸在室温下悬浮于200毫升乙酸中。在3小时内逐滴加入4.8克(69毫摩尔)亚硝酸钠。将透明的溶液在室温下搅拌16小时，蒸发，加水和乙醚，混合物过滤。将醚溶液用硫酸镁干燥，蒸发得到油。将回收和干燥了的起始物(1.76克)按照上述步骤再循环，得到可溶于醚的油。将合并的产物(7.43克)溶在16毫升甲醇中。加入3.9克氢氧化钠在33毫升水中的溶液，将混合物在室温下搅拌2小时。将甲醇蒸发，加水，溶液用乙醚萃取，并且用浓盐酸酸化。将产物用乙醚萃取，在蒸发之后得到5.88克(91%)2(RS)-羟基异辛酸，为透明的油状物，在放置时固化。(C)将5.84克(31.3毫摩尔)2(RS)-羟基异辛酸溶在60毫升乙酸乙酯中。加入4.4毫升(31.3毫摩尔)三乙胺和3.8毫升(31.3毫摩尔)苄基溴，混合物回流加热3小时。将混合物冷却，过滤，依次用2M盐酸、水和5%碳酸氢钠溶液洗，用硫酸镁干燥并蒸发之。在硅胶上层析，用乙酸乙酯/己烷(3∶7)洗脱，得到5.55克(64%)2(RS)-羟基异辛酸苄酯，为油状物，Rf(乙酸乙酯/己烷1∶1)0.50。(D)在0℃下将5.45克(19.6毫摩尔)2(RS)-羟基异辛酸苄酯和1.91毫升(23.5毫摩尔)吡啶在35毫升无水二氯甲烷中的溶液于搅拌下在0.5小时内加到4毫升(23.5毫摩尔)三氟甲磺酸酐在40毫升无水二氯甲烷中的溶液里。将混合物在0℃搅拌1小时，室温下搅拌1小时。溶液用水洗两次，用硫酸镁干燥，蒸发后得到7.32克(95%)2(RS)-三氟甲烷磺酰氧异辛酸苄酯;Rf(乙酸乙酯/己烷1∶4)0.73。(E)将7.31克(18.55毫摩尔)2(RS)-三氟甲烷磺酰氧异辛酸苄酯在30毫升无水二氯甲烷中的溶液在0℃下于1小时内逐滴加到0.58克(19.5毫摩尔)80%氢化钠和4.64克(18.55毫摩尔)苄基叔丁基丙二酸酯在50毫升无水二甲基甲酰胺中的悬浮液里。将混合物在室温下搅拌6小时，室温下放置16小时，蒸发成油状物。将残余物在二氯甲烷中用水和氯化钠饱和溶液洗二次，用硫酸镁干燥，蒸发。经硅胶层析，用乙酸乙酯/己烷(1∶4)洗脱，得到6.08克(64%)浅琥珀色油状3(RS)-叔丁氧羰基-2(RS)-异辛基丁二酸二苄酯;Rf(乙酸乙酯/己烷1∶3)0.49。(F)将(E)中的6.02克(11.8毫摩尔)三酯在90毫升异丙醇中于0.2克10%钯/炭存在下氢化16小时。将混合物过滤，滤液蒸发，加入甲苯，将混合物蒸发除掉痕量的异丙醇。残余物在75毫升甲苯和1.65毫升(11.8毫摩尔)三乙胺中回流2小时，蒸发，残余物溶在乙酸乙酯中，溶液用0.5M盐酸和水洗，用硫酸镁干燥，蒸发后得到3.23克(96%)油状4-叔丁基氢2(RS)-异辛基丁二酸酯。(G)将1.25克(4.5毫摩尔)N-叔丁氧基羰基-L-苯丙氨酸甲基酰胺溶解在15毫升4MHCl/乙酸乙酯中，在室温下搅拌1小时，蒸发并且真空干燥。将残余物在10毫升无水二甲基甲酰胺中冷却到0℃，用0.6毫升(4.7毫摩尔)N-乙基吗啉、0.86克(3毫摩尔)4-叔丁基氢2(RS)-异辛基丁二酸酯在15毫升二氯甲烷中的溶液、0.49克(3.6毫摩尔)羟基苯并三唑和0.72克(3.75毫摩尔)1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)-碳化二亚胺盐酸盐处理。将混合物在0℃搅拌1小时，在4℃放置16小时，蒸发之。残余物在二氯甲烷中依次用5%柠檬酸溶液、水、5%碳酸氢钠溶液和氯化钠饱和溶液洗，用硫酸镁干燥。经硅胶层析，用乙酸乙酯洗脱，得到1.17克(87%)[4-叔丁氧基2(RS)-异辛基丁二酰]-L-苯丙氨酸甲基酰胺油状物它在放置时固化，Rf(乙酸乙酯/己烷1∶1)0.34和0.44。(H)1.02克(2.28毫摩尔)[4-叔丁氧基2(RS)-异辛基丁二酰)-L-苯丙氨酸甲基酰胺溶在10毫升三氟乙酸中，将溶液搅拌1.5小时，蒸发。残余物用甲苯蒸发三次，溶在氯仿中，用水洗二次，干燥，蒸发后得到固体。将此固体溶在15毫升二甲基甲酰胺中，冷却至0℃，用0.6毫升(4.6毫摩尔)N-乙基吗啉、0.37克(2.7毫摩尔)羟基苯并三唑、0.54克(2.8毫摩尔)1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)-碳化二亚胺盐酸盐和0.42克(3.4毫摩尔)O-苄基羟胺处理。将混合物在0℃下搅拌1小时，室温下搅拌16小时，蒸发，加水。分离出的固体依次用5%碳酸氢钠溶液、水、5%柠檬酸溶液、水、5%碳酸氢钠溶液和水洗，然后真空干燥。将所得的固体溶在甲醇/氯仿(1∶1)中，在加入乙醚之后，得到0.71克(63%)白色固体的[4-(N-苄氧基氨基)-2(RS)-异辛基丁二酰]-L-苯丙氨酸甲基酰胺;MS(M+H)+496。元素分析C29H41N3O4·0.2CH3OH计算值C，69.85;H，8.39;N，8.37%实验值C，69.81;H，8.34;N，8.40%实施例211.0克(2.17毫摩尔)[4-(N-苄氧基氨基)-2(R)-庚基丁二酰]-L-新戊基甘氨酸甲基酰胺在50毫升甲醇中于0.33克5%钯/炭存在下氢1.5小时。将混合物过滤，滤液蒸发。得到0.8克(99%)[4-(N-羟氨基)-2(R)-庚基丁二酰]-L-新戊基甘氨酸甲基酰胺，为白色固体;MS(M+H)+372。元素分析C19H37N3O4·(371.52)计算值C，61.43;H，10.04;N，11.31%实验值C，61.21;H，10.17;N，11.35%作为起始物使用的[4-(N-苄氧基氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-新戊基甘氨酸甲基酰胺制备如下(A)将5.6克(22.8毫摩尔)叔丁氧基羰基-L-新戊基甘氨酸在0℃下溶解在50毫升二氯甲烷中。加入1.85毫升(22.8毫摩尔)吡啶和9.67克(22.8毫摩尔)70%二(1-苯并三唑基)碳酸酯，将混合物在0℃下搅拌1小时。加入3.94毫升(45.6毫摩尔)40%甲胺水溶液，混合物在0℃下搅拌1小时，室温下搅拌16小时。溶液依次用5%碳酸氢钠溶液、水、2M盐酸溶液、水、5%碳酸氢钠溶液和饱和的氯化钠溶液洗，用硫酸镁干燥，蒸发。自乙酸乙酯中重结晶，得到5.26克(89%)白色固体状叔丁氧基羰基-L-新戊基甘氨酸甲基酰胺;Rf(乙酸乙酯)0.47。(B)将4.84克(18.8毫摩尔)叔丁氧基羰基-L-新戊基甘氨酸甲基酰胺与50毫升4M的HCl/乙酸乙酯溶液一起在室温下搅拌1小时并蒸发之。加入乙酸乙酯，将溶液蒸发，残余物真空干燥。将得到的胺的盐酸盐溶解在0℃的15毫升干燥二甲基甲酰胺中，加入3.58毫升(28.2毫摩尔)N-乙基吗啉中和，再将此溶液加到4.25克(15.6毫摩尔)4-叔丁基氢2R-庚基丁二酸酯(按照与实施例1(A-D)的类似方式由D-α-氨基壬酸制得)、2.87克(18.8毫摩尔)羟基苯并三唑水合物和3.74克(19.5毫摩尔)1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)-碳化二亚胺盐酸盐在50毫升无水二氯甲烷中的冰冷的(0℃)溶液中。将混合物在0℃下搅拌1小时，室温下16小时，然后蒸发成油状物。残余物在乙酸乙酯中用5%柠檬酸溶液、水、5%碳酸氢钠溶液和饱和的氯化钠溶液洗，用硫酸镁干燥，蒸发成油状物。经硅胶层析，用乙酸乙酯/己烷(1∶1)作洗脱液，得到5.13克(80%)[4-叔丁氧基2(R)-庚基丁二酰]-L-新戊基甘氨酸甲基酰胺，为油状物;Rf(乙酸乙酯/己烷1∶1)0.49;MS(M+H)+413。(C)5.1克(12.4毫摩尔)[4-叔丁氧基2(R)-庚基丁二酰]-L-新戊基甘氨酸甲基甲酰胺溶在50毫升三氟乙酸中，将溶液搅拌2.5小时，然后蒸发。残余物用甲苯蒸发两次，溶解在二氯甲烷中。将溶液用水洗三次，用饱和的氯化钠溶液洗，在硫酸镁上干燥并蒸发之。残余物在25毫升干燥的二氯甲烷中于0℃下用3.2毫升(25毫摩尔)N-乙基吗啉、2.28克(14.9毫摩尔)羟基苯并三唑水合物和3.0克(15.6毫摩尔)1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)-碳化二亚胺盐酸盐处理，溶液在0℃下搅拌1小时。加入3.05克(24.8毫摩尔)O-苄基羟胺，混合物在0℃下搅拌1小时，室温下搅拌16小时，然后蒸发。加水，所得的固体依次用2M盐酸、水、5%碳酸氢钠溶液、水和己烷洗，真空干燥。将所得的固体与乙醚一起加热，在加入己烷并且冷却之后，得到5.2克(91%)吸湿性凝胶状的[4-(N-苄氧基氨基)-2(R)-庚基丁二酰]-L-新戊基甘氨酸甲基酰胺，将其在真空下干燥;MS(M+H)+462。元素分析C26H43N3O4·0.6H2O计算值C，66.10;H，9.43;N，8.89%实验值C，66.13;H，9.39;N，8.74%实施例220.09克(0.177毫摩尔)[4-(N-苄氧基氨基)-2(R)-庚基丁二酰]-(D或L)-β，β-二甲基苯基氨酸甲基酰胺(异构体1)在10毫升甲醇中于30毫克5%钯/炭存在下氢化1.5小时，将混合物过滤，滤液蒸发，残余物真空干燥，得到0.075克(100%)[4-(N-羟氨基-2(R)-庚基丁二酰]-(D或L)-β，β-二甲基苯基丙氨酸甲基酰胺，为白色泡沫状物;MS(M+H)+420。元素分析C23H37N3O4·0.4H2O计算值C，64.73;H，8.93;N，9.85%实验值C，64.81;H，8.77;N，10.14%作为起始物使用的[4-(N-苄氧基氨基)-2(R)-庚基丁二酰]-(D或L)β，β-二甲基苯丙氨酸甲基酰胺(异构体1)制备如下(A)将2.3克(11.9毫摩尔)DL-β，β-二甲基苯丙氨酸在0℃和搅拌下溶在含有0.48克(12毫摩尔)氢氧化钠的9毫升水中。在0.3小时内逐滴加入6.0毫升4M氢氧化钠溶液和3.4毫升(23.8毫摩尔)氯甲酸苄酯。将混合物在0℃下搅拌1小时，室温下16小时。用乙醚萃取溶液，用浓盐酸酸化至pH2，将产物萃取到乙酸乙酯中。用氯化钠饱和溶液洗此有机溶液，在硫酸镁上干燥，蒸发，得到3.86克(99%)油状的N-苄氧基羰基-DL-β，β-二甲基苯丙氨酸;Rf(体系A)0.54;MS(M+H)+328。(B)按照实施例21(A)中所述的步骤，将3.8克(11.6毫摩尔)N-苄氧基羰基-DL-β，β-二甲基苯丙氨酸转化成2.45克(62%)N-苄氧基羰基-DL-β，β-二甲基苯丙氨酸甲基酰胺;Rf(乙酸乙酯)0.61;MS(M+H)+341。(C)将2.4克(7.06毫摩尔)N-苄氧基羰基-DL-β，β-二甲基苯丙氨酸甲基酰胺悬浮在30毫升甲醇和3.5毫升2M盐酸中，在0.24克5%钯/炭存在下氢化2小时。将混合物过滤，滤液蒸发，残余物用甲苯蒸发三次，然后真空干燥，得到1.75克DL-β，β-二甲基苯丙氨酸甲基酰胺盐酸盐，其中含有痕量的甲苯;Rf(体系A)0.31;MS(M+H)+207。(D)0.485克(2毫摩尔)DL-β，β-二甲基苯丙氨酸甲基酰胺盐酸盐溶在2毫升无水二甲基甲酰胺中，将溶液冷却到0℃。加入0.35毫升(2.8毫摩尔)N-乙基吗啉、0.544克(2毫摩尔)4-叔丁基氢2(R)-庚基丁二酸酯和0.46克(2.4毫摩尔)1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)-碳化二亚胺盐酸盐，将混合物在0℃下搅拌1小时，4℃下搅拌64小时。向悬浮液中加水，滤出白色固体，依次用2M盐酸、水、5%碳酸氢钠溶液和水洗，真空干燥，得到0.72克(78%)[4-叔丁氧基2(R)-庚基丁二酰]-DL-β，β-二甲基苯丙氨酸甲基酰胺;Rf(乙酸乙酯)0.56和0.61;MS(M+H)+461。(E)将0.71克(1.54毫摩尔)[4-叔丁氧基2(R)-庚基丁二酰]-DL-β，β-二甲基苯丙氨酸甲基酰胺溶在7毫升三氟乙酸中，搅拌溶液2.5小时，蒸发。将残余物用甲苯蒸发两次，溶在30毫升二氯甲烷中。溶液用水洗，用硫酸镁干燥，蒸发。残余物在5毫升二甲基甲酰胺中于0℃下用0.31克(2.02毫摩尔)羟基苯并三唑水合物和0.37克(1.93毫摩尔)1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳化二亚胺处理，溶液在0℃下搅拌1小时。加入0.38克(3.08毫摩尔)O-苄基羟胺，将混合物在0℃下搅拌1小时，室温下搅拌16小时，然后蒸发。残余物在乙酸乙酯中依次用5%碳酸氢钠溶液、水、2M盐酸、水、5%碳酸氢钠溶液和氯化钠饱和溶液洗，用硫酸镁干燥，蒸发。在硅胶上层析，依次用乙酸乙酯/己烷(2∶1)、乙酸乙酯/己烷(3∶1)和乙酸乙酯洗脱，得到[4-(N-苄氧基氨基)2(R)-庚基丁二酰](D或L)-β，β-二甲基苯丙氨酸甲基酰胺的两种异构体。异构体1(0.18克;23%)Rf(乙酸乙酯/己烷2∶1)0.32;MS(M+H)+510;异构体(0.27克;34%)Rf(乙酸乙酯/己烷2∶1)0.22;MS(M+H)+510。实施例230.09克(0.18毫摩尔)[4-(N-苄氧基氨基)-2(R)-庚基丁二酰]-(D或L)-苏-β-甲基苯丙氨酸甲基酰胺(异构体1)在10毫升甲醇中于0.03克5%钯/炭存在下氢化4小时。将混合物过滤，滤液蒸发，残余物真空干燥，得到0.07克(98%)白色吸湿性泡沫状的[4-(N-羟氨基)-2(R)-庚基丁二酰]-(D或L)-苏-β-甲基苯丙氨酸甲基酰胺。MS(M+H)+406。元素分析C22H35N3O4·0.15H2O计算值C，64.73;H，8.72;N，10.29%实验值C，64.69;H，8.93;N，10.09%作为起始物使用的[4-(N-苄氧基氨基)2(R)-庚基丁二酰](D或L)-苏-β-甲基苯丙氨酸甲基酰胺(异构体1)是根据实施例22(A)-(E)中所述的步骤由N-苄氧基羰基-DL-苏-β-甲基苯丙氨酸制备的。异构体用硅胶色谱分离，依次用1%甲醇/二氯甲烷、2%甲醇/二氯甲烷和3%甲醇/二氯甲烷洗脱。异构体1的Rf(甲醇/二氯甲烷1∶19)为0.51，MS(M+H)+496;异构体2的Rf(甲醇/二氯甲烷1∶19)为0.41;MS(M+H)+496。实施例24按照与实施例22中第一段所述的类似方式，由[4-(N-苄氧基氨基)-2(R)-庚基丁二酰]-DL-赤-β-甲基苯丙氨酸甲基酰胺制备[4-(N-羟氨基)-2(R)-庚基丁二酰]-DL-赤-β-甲基苯丙氨酸甲基酰胺，为白色吸湿性泡沫状物;Rf(体系B)0.22和0.29;MS(M+H)+406。元素分析C22H35N3O4·0.3H2O计算值C，64.30;H，8.73;N，10.23%实验值C，64.29;H，8.64;N，10.09%起始物制备如下按照与实施例22(B-E)中所述的类似方式，但是用N-苄氧基羰基-DL-赤-β-甲基苯丙氨酸作起始物，得到白色固体状的[4-(N-苄氧基氨基)-2(R)-庚基丁二酰]-DL-赤-β-甲基苯丙氨酸甲基酰胺。Rf(甲醇/二氯甲烷7∶93)0.40和0.45;MS(M+H)+496。实施例25将按照与实施例10(A)-(D)中所述的类似方式，制得的0.12克[4-(N-苄氧基氨基)-2(R)-庚基-3(R或S)-(邻苯二甲酰亚胺基甲基)丁二酰]-L-叔丁基甘氨酸甲基酰胺(非对映异构体1)在10毫升甲醇中于50毫克10%钯/炭存在下氢化16小时。滤掉催化剂，滤液蒸发后得到胶状固体。在硅胶上纯化，用5%甲醇/二氯甲烷洗脱，得到0.06克白色固体的[4-(N-羟氨基)-2(R)-庚基-3(R或S)-(邻苯二甲酰亚氨基甲基)-丁二酰]-L-叔丁基甘氨酸甲基酰胺(非对映异构体1);Rf(10%甲醇/二氯甲烷)0.34;MS(M+H)+517。实施例260.17克[4-(N-苄氧基氨基)-2(R)-庚基-3(R或S)-(3-苯丙基)丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺(非对映异构体1)在10毫升甲醇中于55毫克钯/炭催化剂存在下氢化3小时。滤掉催化剂，滤液蒸发后得到0.13克白色固体的[4-(N-羟氨基)-2(R)-庚基-2(R或S)-(3-苯丙基)丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺(非对映异构体1);Rf(10%甲醇/二氯甲烷)0.36;MS(M+H)+603。元素分析C34H58N4O5(602.83)计算值C，67.74;H，9.70;N，9.30%实验值C，68.00;H，9.93;N，9.20%起始物制备如下按照与实施例10(B)-(D)中所述的类似方式，由2.0克3(RS)-叔丁氧基羰基-2(R)-庚基丁二酸二苄酯和0.84克肉桂酰溴得到0.17克[4-(N-苄氧基氨基)-2(R)-庚基-3(R或S)-(3-苯丙基)丁二酰]-L-亮氨酰]-L-亮氨酸乙基酰胺(非对映异构体1)，为灰白色固体;Rf(5%甲醇/二氯甲烷)0.47;MS(M+H)+693。实施例270.25克[4-(N-苄氧基氨基)-2(R)-庚基-3(R或S)-[(3-甲基-2，5-二氧代-1-咪唑烷基)甲基]丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺(非对映异构体1)在25毫升甲醇中于100毫克5%钯/炭存在下氢化6小时。滤掉催化剂，滤液蒸发后得到0.16克[4-(N-羟基氨基)-2(R)-庚基-3(R或S)-[(3-甲基-2，5-二氧代-1-咪唑烷基)甲基]丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺(非对映异构体1)，为白色固体;Rf(10%甲醇/二氯甲烷)0.25;MS(M+H)+611。元素分析C30H54N6O7·0.6H2O计算值C，57.91;H，8.95;N，13.51%实验值C，58.17;H，8.99;N，13.23%起始物制备如下按照与实施例10(B)-(D)中所述的类似方式，由2.0克3(RS)-叔丁氧基羰基-2(R)-庚基丁二酸二苄酯和0.88克3-溴甲基-1-甲基乙内酰脲得到0.28克[4-(N-苄氧基氨基)-2(R)-庚基-3(R或S)-[(3-甲基-2，5-二氧代-1-咪唑烷基)甲基]丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺(非对映异构体1);Rf(10%甲醇/二氯甲烷)0.7;MS(M+H)+701。以下实施例说明了含有本发明提供的异羟肟衍生物的药物制剂实施例A含有以下组分的片剂可以按常规方式制备组分每片异羟肟酸衍生物10.0毫克乳糖125.0毫克玉米淀粉75.0毫克滑石粉4.0毫克硬脂酸镁1.0毫克总重215.0毫克实施例B含有以下组分的胶囊可以按常规方式制备组分每个胶囊异羟肟酸衍生物10.0毫克乳糖165.0毫克玉米淀粉20.0毫克滑石粉5.0毫克胶囊填充重量200.0毫克权利要求1.通式Ⅰ的化合物及其药学上可接受的盐其中，R1代表1-7C烷基；R2代表氢、1-6C烷基或化学式为-(CH2)n-芳基或-(CH2)n-Het的基团，其中n代表1-4，Het表示一个5元或6元N-杂环，它(a)通过N原子相连，(b)任选地含有N、O和/或S作为额外的杂原子，它们处在不与连接N原子相邻的位置上，(c)在与连接N原子相邻的一个或两个C原子上被氧取代，和(d)任选地苯并稠合，或者任选地在一个或多个其它碳原子上被1-6C烷基或氧取代，以及/或在任何额外的N原子上被1-6C烷基取代；R3代表天然的或非天然的α-氨基酸的特征基团，其中存在的任何官能基都可以被保护，条件是R3不代表氢；R4代表羧基，(1-6C烷氧基)羰基，氨基甲酰基或(1-6C烷基)氨基甲酰基；R5代表天然存在的α-氨基酸的特征基团，其中存在的任何官能基均可被保护；R6代表氢；或者R4、R5和R6各自分别代表氢或1-6C烷基。2.根据权利要求1的化合物，其中R2代表氢、1-6C烷基或是化学式为-(CH2)n-Het的基团，R6代表氢。3.根据权利要求1或2的化合物，其中R1代表乙基、异丙基、正丁基或正己基。4.根据权利要求3的化合物，其中R1代表乙基。5.根据权利要求1至4中任何一项的化合物，其中R2代表氢，甲基，一个化学式为-(CH2)n-芳基的基团，其中芳基为苯基，或是化学式为-(CH2)n-Het的基团，其中Het表示一个5元或6元N-杂环，该杂环任选地还含有一个或二个N原子、一个N原子和一个O原子或是一个O原子作为额外的杂原子。6.根据权利要求5的化合物，其中Het代表以下一组化学式其中R7和R8各自代表氢，或者一起代表一个额外的键或一个稠合苯环的其余部分;R9代表氢或1-6C烷基;X代表-CO-、-CH2-、-CH(1-6C烷基)-、-C(1-6C烷基)2-、-NH-、-N(1-6C烷基)-或-O-;和Y代表-O-、-NH-或-N(1-6C烷基)-。7.根据权利要求6的化合物，其中Het代表式(b)或式(c)基团。8.根据权利要求7的化合物，其中Het代表邻苯二甲酰亚氨基或3-甲基-2，5-二氧代-1-咪唑烷基。9.根据权利要求1至8中任何一项的化合物，其中当R1代表式-(CH2)n-Het基团时，n为1;当R1代表式-(CH2)n-芳基时，n为3。10.根据权利要求1至9中任何一项的化合物，其中R3代表甲基、异丁基、叔丁基、被保护的4-氨基丁基、新戊基、正庚基、环己基甲基、苄基、α-甲基苄基或α，α-二甲基苄基。11.根据权利要求10的化合物，其中被保护的4-氨基丁基是4-邻苯二甲酰亚氨基丁基。12.根据权利要求1至11中任何一项的化合物，其中R4代表(1-6C烷基)氨基甲酰基，R5代表异丁基，R6代表氢。13.根据权利要求12的化合物，其中R4代表甲基氨基甲酰基或乙基氨基甲酰基。14.根据权利要求1至11中任何一项的化合物，其中R4、R5和R6各自代表氢;或者R4和R5各自代表氢，R6代表叔丁基;或者R4、R5及R6均代表甲基。15.[4-(N-羟氨基)-2(R或S)-庚基丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺。16.[4-(N-羟氨基)-2(R或S)-壬基丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺。17.[4-(N-羟氨基)-2(R或S)-庚基-3(S)-甲基丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺。18.[4-(N-羟氨基)-2(R)-庚基-3(R或S)-(邻苯二甲酰亚氨基甲基)丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺。19.[4-(N-羟氨基)-2(RS)-壬基丁二酰]-L-叔丁基甘氨酸甲基酰胺。20.[4-(N-羟氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-苯丙氨酸甲基酰胺。21.[4-(N-羟氨基)-2(R)-庚基-3(R或S)-(邻苯二甲酰亚氨基甲基)丁二酰]-L-叔丁基甘氨酸甲基酰胺。22.[4-(N-羟氨基)-2(R)-庚基-3(R或S)-(3-苯丙基)丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺。23.根据权利要求2的化合物，选自[4-(N-羟氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-亮氨酸甲基酰胺，[4-(N-羟氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-亮氨酸新戊基酰胺，[4-(N-羟氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-丙氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺，[4-(N-羟氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-(Nε-邻苯二甲酰)-赖氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺，[4-(N-羟氨基)-2(RS)-十一烷基丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺，和[4-(N-羟氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-苯丙氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺。24.根据权利要求1的化合物，选自[4-(N-羟氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-壬氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺，[4-(N-羟氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-苯丙氨酸叔丁基酰胺，[4-(N-羟氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-叔丁基甘氨酸甲基酰胺，[4-(N-羟氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-新戊基甘氨酸甲基酰胺，[4-(N-羟氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-高苯丙氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺，[4-(N-羟氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-环己基丙氨酸甲基酰胺，[4-(N-羟氨基)-2(RS)-异辛基丁二酰]-L-苯丙氨酸甲基酰胺，[4-(N-羟氨基)-2(R)-庚基丁二酰]-L-新戊基甘氨酸甲基酰胺，[4-(N-羟氨基)-2(R)-庚基丁二酰]-(D或L)-β，β-二甲基苯丙氨酸甲基酰胺，[4-(N-羟氨基)-2(R)-庚基丁二酰]-(D或L)-苏-β-甲基苯丙氨酸甲基酰胺，[4-(N-羟氨基)-2(R)-庚基丁二酰]-DL-赤-β-甲基苯丙氨酸甲基酰胺，和[4-(N-羟氨基)-2(R)-庚基-3(R或S)-[(3-甲基-2，5-二氧代-1-咪唑烷基)甲基]丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺。25.通式如下的化合物其中R1、R2、R3、R4、R5和R6的定义同权利要求1中定义，Bz代表苄基。26.通式如下的化合物及其活性酯其中R1、R2、R3、R4、R5和R6的定义同权利要求1中定义。27.权利要求1-24中任何一项的化合物，用作治疗活性物质。28.权利要求1-24中任何一项的化合物，用于控制或预防关节变性病或治疗侵入性肿瘤、动脉粥样硬化或多发性硬化症。29.权利要求1-24中任何一项要求授权的化合物的制造方法，该方法包括(a)将通式(Ⅱ)的化合物催化加氢其中R1、R2、R3、R4、R5和R6具有权利要求1的定义，Bz代表苄基;或者(b)将通式(Ⅲ)的酸或其活性酯与通式(Ⅳ)的化合物反应，若有必要，将反应产物中存在的任何二苯基(1-6C烷基)甲硅烷基裂解掉，其中R1、R2、R3、R4、R5和R6具有权利要求1的定义，其中Z代表氢、三(1-6C烷基)甲硅烷基或二苯基(1-6C烷基)甲硅烷基;若有必要，将得到的式Ⅰ化合物转化成药学上可接受的盐。30.一种药物，其中含有权利要求1-24中任何一项的化合物和治疗上惰性的载体物质。31.一种用于控制或预防关节变性病或治疗侵入性肿瘤、动脉粥样硬化或多发性硬化症的药物，该药物含有权利要求1-24中任何一项的化合物和治疗上惰性和载体物质。32.权利要求1-24中任一项的化合物用于控制或预防疾病。33.权利要求1-24中任一项的化合物用于控制或预防关节变性病或治疗侵入性肿瘤、动脉粥样硬化或多发性硬化症。34.权利要求1-24中任一项的化合物用于制造药物，以用来控制或预防关节变性病或治疗侵入性肿瘤、动脉粥样硬化或多发性硬化症。全文摘要本发明涉及化学式(I)的异羟肟酸及其药学上可接受的盐其中R文档编号C07D239/88GK1082027SQ93107609公开日1994年2月16日 申请日期1993年6月23日 优先权日1992年6月25日发明者M·J·布罗德赫斯特, P·A·布朗, W·H·约翰逊, G·劳顿 申请人:霍夫曼-拉罗奇有限公司