5-取代的吡咯并[2，3-d]嘧啶的制备方法

专利名称：5-取代的吡咯并[2，3-d]嘧啶的制备方法本申请是序列编号为07/951515(1992年9月25日申请)的申请的部分继续申请。本发明涉及药学和有机化学领域，本发明提供5-取代的吡咯并[2，3-d]嘧啶衍生物的制备方法，它在基于治疗活性的吡咯并[2，3-d]嘧啶抗叶酸药的制备中可用作中间体。已知的具有抗叶酸活性的化合物是公认的治疗癌症的化学治疗剂。其中甲氨蝶呤是目前最广泛使用的抗癌药之一;在化学和医学文献中还合成、试验和讨论了许多其它叶酸类化合物。这些化合物在酶水平上具有各种活性。特别地，它们抑制酶类，例如二氢叶酸还原酶、叶酸聚谷氨酸酯合成酶、甘氨酰胺核苷酸甲酰基转移酶和胸苷酸合成酶。最近，公开了一系列4-羟基吡咯并[2，3-d]嘧啶-L-谷氨酸衍生物，它们被证明是特别有用的抗叶酸盐药，参见例如Akimoto等人的欧洲专利公开0434426。式(Ⅰ)5-取代的吡咯并[2，3-d]嘧啶化合物结构如下 式中R是NHC＊H(COOR′)CH2CH2COOR′或OR′各R′是H或相同或不同的羧基保护基团;标★的碳原子的构型是L;n是0或1;且 是可被取代的芳基基团。该化合物可用来制备各种基于5-取代的吡咯并[2，3-d]嘧啶的治疗剂;或者当R是NHC＊H(COOR′)CH2CH2COOR′并且各R′是氢时，其盐可用作治疗剂。本发明提供制备5-取代的吡啶并[2，3-d]嘧啶的配向性方法;该化合物尤其可用作制备药学活性的吡咯并[2，3-d]嘧啶化合物的中间体，或者可用作治性化合物。本发明还提供制备5-取代的吡咯并[2，3-d]嘧啶化合物的配向性方法，其中所述方法在同一容器中进行。本发明提供式(Ⅰ)5-取代的吡咯并[2，3-d]嘧啶或其盐的制备方法;式(Ⅰ)如下 式中R是NHC＊H(COOR′)CH2CH2COOR′或OR′各R′是H或相同或不同的羧基保护基团;标有★的碳原子的构型是L;n是0或1;且 是可被取代的芳基基团，它包括a)将2，4-二氨基-6-羟基嘧啶与下述式(Ⅱ)卤代醛反应 式中Y是溴、氯或碘;且 ，R;R′，n和★定义如上;和b)可选地将步骤(a)的产品成盐。本发明还提供式(Ⅰ)5-取代的吡咯并[2，3-d]嘧啶或其盐的制备方法，式(Ⅰ)如下 式中R，R′， ，n和☆定义如上，它包括a)将卤化剂与下式(Ⅲ)化合物反应， 式中R，R′， ，n和★定义如上，且R是选自式(Ⅳ)，(Ⅴ)或(Ⅵ)的取代基，OHC-CH2-CH2(Ⅳ)R3-CH＝CH-CH2(Ⅴ) 式中R3是OR4，其中R4是羟基保护基团;OCOR5，其中R5是C1-6烷基、苯基、苄基或C3-6环烷基，NR6R7，其中R6和R7各自是C1-6烷基、C3-6环烷基，或者与氮原子一起，还可包括氧原子，构成5元到6元饱和单环基团，该基团可被一个或两个选自C1-4烷基和C1-4烷氧基的取代基取代;或者R8和R9均为C1-4烷基，或者与氧原子一起形成一个5元到6元饱和单环基团，该基团可被一个或二个选自羟基、C1-4烷基和C1-4烷氧基的取代基取代;b)将步骤a)的反应产物与2，4-二氨基-6-羟基嘧啶反应;和c)可选地将步骤b)的反应产物成盐。本文中，所有的温度均是摄氏度并且除以体积单位表示的溶剂或其混合物外，所有比例、百分数等均以重量单位表示。“C1-4烷基”是指1-4个碳原子的直链或支链脂肪链，例如甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基和叔丁基。“C1-6烷基”是指C1-4烷基加上5-6个碳原子的直链或支链脂肪链，例如正戊基，异戊基，异戊基、新戊基、正己基、异己基、3-甲基戊基、2，3-二甲基丁基等。在描述式(Ⅰ)、(Ⅱ)、(Ⅲ)和(Ⅶ)所示的环状结构时，“芳基”一词是指5元至6元芳香族残基，包括含有不超过3个杂原子(例如N，O和S)的杂环基团，例如苯基，尤其是1，4-亚苯基、噻吩基、吡啶基、呋喃基等。这样的基团除了可被COR基团取代之外，还可被一个或两个选自卤素、羟基、C1-4烷基和C1-4烷氧基取代基取代。除了未取代的1，4-亚苯基之外， 在相对于1-位COR官能团的2-位上再次单取代的情况是优选的。“C1-4烷氧基”是指通过氧桥连接的1-4个碳原子的烷基，例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基等。“卤素”是指溴、氯、氟和碘。“C3-6环烷基”是指具3-6个碳原子的饱和烃环基团，例如环戊基和环己基。在本文中，羧基保护基团R′(R′不是H)和羟基保护基团R4代表这样的基团它们通常不存在于最终的治疗化合物中，但在合成过程的某一步中有意引入，以便在化学操作过程中保护那些如果不保护就有可能反应的基团，它们随后被除去。由于带有一个或多个保护基团的化合物主要用作重要的化学中间体(尽管某些被保护的衍生物也表现出生物活性)，其准确结构并不关键。在许多标准著作中都描述了众多的生成和除去所述保护基团的反应，包括例如Protective Groups in Organic Chemistry，第3章(McOmie编辑，Plenum Press，1973);Green，Protective Groups in Organic Synthesic 第2章(John Wiley，1981)和Schrooder与Lubke的The Peptides 第Ⅰ卷(Academic Press，1965)。羧基可被保护成酯基团，酯基团可在足够温和的条件下选择性地除去，以便不破坏期望的分子结构。适用于保护羧基的酯包括支链的C1-6烷基酯，例如叔丁酯，和(ⅰ)被C1-4烷氧基取代的酯，例如甲氧基甲酯、1-甲氧基乙酯等;(ⅱ)被C1-6烷硫基取代的酯，例如甲硫基甲酯、1-乙硫基乙酯等;(ⅲ)被卤素取代的酯，例如2，2，2-三氯乙酯、2-溴乙酯、2-碘乙氧基羰基酯等;(ⅳ)被1-3个苯基取代的酯，其中苯基又可被C1-6烷基、C1-4烷氧基、羟基和硝基一、二或三取代，例如4-硝基苄基酯;或(Ⅴ)被芳酰基取代的酯，例如苯甲酰甲酯。当有一个以上羧基时，各羧基保护基团可相同或不同。各保护基团最好相同。优选的保护基团是C1-6烷基酯，例如甲酯或乙酯。优选的羟基保护基团包括醚基团，例如C1-4烷基醚、苯基醚和甲硅烷基醚。特别有用的甲硅烷基醚包括例如三异丙基甲硅烷基醚，三甲基甲硅烷基醚、三乙基甲硅烷基醚和叔丁基二甲基甲硅烷基醚(参见例如，Colvin，E.W.Silicon Reagents in Organic Synthesis，Academic Press，1988)。式(Ⅰ)化合物以与相应4(3H)-氧代化合物互变平衡的形式存在。下面举例说明吡咯并嘧啶环体系的平衡及其编号 为方便起见，4(3H)-氧代形式在式(Ⅰ)中描述，并在说明书全文中使用相应的术语。但是应当理解，这样的描述包括相应的互变4-羟基形式。本发明方法需要在对环化有利的条件下，将2，4-二氨基-6-羟基嘧啶与式(Ⅱ)卤代醛在溶剂中反应。本发明方法使用的2，4-二氨基-6-羟基嘧啶原料可购得，而式(Ⅱ)卤代醛(其中R是OR′和R′是H或羧基保护基团)的制备是本领域，公知的(参见，例如Degraw等人J.Med.Chem.，25∶1227-1230(1982))。De Graw讲述了 是1，4-亚苯基，n是O、R是OR′且R′是H的式(Ⅱ)化合物的制备。羧酸基团的保护方法和n是1的式(Ⅱ)化合物的制备方法是公知的。式(Ⅱ)化合物的另一原料是用常规缩合技术，将式(Ⅶ)烯醇醚与式(Ⅷ)化合物反应制得的。式(Ⅶ)及式(Ⅷ)如下 式中 是可被取代的芳基;R是OR′;R′是H或羧基保护基团;n是0或1;R3是OR4;而R是上文De Graw一般性描述的羟基保护基团;各R′是相同或不同的羧基保护基团，标有★的碳原子的构型是L。当式(Ⅱ)化合物的R是H时，Taylor等人在美国专利第4684653号中讲述了一种优选的缩合方法。另外，式(Ⅱ)化合物应当在缩合前首先去保护。缩合完成后，反应产物按已知方法(参见，例如上述Dekimpe的方法)用适当的卤化剂卤化，得到式(Ⅱ)原料化合物，其中R是NHC＊H(COOR′)CH2CH2COOR′，Y是溴，氯或碘，R′，n和★定义如上。特别适宜的囟化剂包括，例如单质溴、氯和碘，N-溴、N-氯和N-碘代琥珀酰亚胺，N-溴、N-氯和N-碘代邻苯二甲酰亚胺等。因此，本发明的第一方面是提供式(Ⅰ)5-取代的吡咯并[2，3-d]嘧啶或其盐的制备方法，式(Ⅰ)如下 式中R是NHC＊H(COOR′)CH2CH2COOR′或OR′各R′是H或是相同或不同的羧基保护基团;标有★的碳原子的构型是L;n是0或1;且 是可被取代的芳基;它包括a)将2，4-二氨基-6-羟基嘧啶与式(Ⅱ)卤代醛反应，式(Ⅱ)如下 式中Y是溴、氯或碘;且 ，R，R′，n和★如上文定义;和b)可选地将步骤a)的反应产物成盐。上述反应在适当溶剂中进行，所述溶剂包括，例如C1-4醇、乙腈、二甲基甲酰胺(DMF)、二甲亚砜(DMSO)、二甲基乙酰胺、N-甲基吡咯烷酮、水及其混合物。优选溶剂的混合物，包括乙醇和水或乙腈和水的混合物。该反应进行完全所需的时间是本领域普通技术人员知道的。层析技术如TLC和HPLC有助于该反应的测定和完成。该步骤所用的温度应足以有效地完成该反应，通常优选约25-100℃的温度范围，而特别优选约70-90℃的温度范围。另外，该方法制得的式(Ⅰ)化合物很容易用常规技术分离，用作中间体时不必进一步分离。本发明的另一方面是5-取代的式(Ⅰ)吡咯并[2，3-d]嘧啶的制备方法，它包括a)将卤化剂与下式(Ⅲ)化合物反应， R，R′， n和★定义如上，且R2是选自式(Ⅳ)，(Ⅴ)或(Ⅵ)的取代基，OHC-CH2-CH2(Ⅳ)R3-CH＝CH-CH2(Ⅴ) 式中R3是OR4，其中R4是羟基保护基团;OCOR5，其中R5是C1-6烷基、苯基、苄基或C3-6环烷基，NR6R7，其中R6和R7各自是C1-6烷基、C3-6环烷基，或者与氮原子一起，还可包括氧原子，构成5元到6元饱和单环基团，该基团可被一个或两个选自C1-4烷基和C1-4烷氧基的取代基取代;或者R8和R9均为C1-4烷基，或者与氧原子一起形成一个5元到6元饱和单环基团，该基团可被一个或二个选自羟基、C1-4烷基和C1-4烷氧基的取代基取代;b)将步骤a)的反应产物与2，4-二氨基-6-羟基嘧啶反应;和c)可选地将步骤b)的反应产物成盐。式(Ⅲ)(其中R2是式(Ⅳ)取代基)醛的制备是本领域公知的(参见，例如Taylor等人，J.Med.Chem.，553222-3227(1990))Taylor讲述了R是OR′、R′是甲基、n是1或1且R2是式(Ⅳ)取代基的式(Ⅲ)化合物的制备。式(Ⅲ)醛可用有机化学领域公知的方法将其转变为烯胺、烯醇酯、烯醇醚(其中R2是式(Ⅴ)取代基)和乙醛(其中R2是式(Ⅵ)取代基)。因而，本发明这一方面的原料包括式(Ⅲ)化合物的醛、烯醇醚、烯醇酯、烯胺和缩醛形式。优选的式(Ⅲ)原料是取代基如下定义的式(Ⅲ)烯醇醚R是OR′，R′是羧基保护基团，R2是式(Ⅴ)取代基，R3是OR4，R4是羟基保护基团(特别是甲基)。或者，式(Ⅲ)烯醇醚原料可通过将上述最好是式(Ⅲ)烯醇醚与上述式(Ⅷ)化合物缩合制备。在缩合前，最好将R是OR′(R′是羧基保护基团)的式(Ⅲ)化合物去保护。但是，最好在本发明方法进行完毕后再进行该缩合。一旦选定了式(Ⅲ)原料并加至适宜的溶剂中后，它首先与卤化剂反应，第一步的反应产物再与2，4-二氨基-6-羟基嘧啶反应。这一步骤的反应应产物还可以用常规方法成盐。该方法的适宜和优选的溶剂、温度、反应时间和分离方法与上述将式(Ⅱ)化合物环化为式(Ⅰ)化合物的相同。在用本发明方法制备式(Ⅰ)化合物时，各步可独立地进行，其中各步的反应产物经分离和纯化;或者最好用原位反应的方法进行，即该方法的每一步依次在同一容器中进行。式(Ⅰ)化合物尤其是制备治疗活性的吡咯并[2，3-d]嘧啶抗叶酸剂的有用的中间体，所述式(Ⅰ)中，当R是OR′时，R′是H或羧基保护基团，或当R是NHC＊H(COOR′)CH2CH2(COOR′)时，R′是相同或不同的羧基保护基团。当R是OR′且R′是H时，或者在优选的去保护步骤后当R′是羧基保护基团时，式(Ⅰ)化合物必须先与上述式(Ⅷ)化合物缩合。缩合后，如果R′是H，则产物便是可直接药用的最终形式。如果R′是羧基保护基团，则可除去这样的保护基团，所得产物是治疗活性抗叶酸素。类似地，式(Ⅰ)化合物，当R是NHC＊H(COOR′)CH2CH2(COOR′)且R′是H时，作为本发明方法的反应产物也具有治疗活性。另外，当R′是羧基保护基团时，也必须用标准方法将其除去，以提供治疗活性化合物。一旦制得了治疗活性的吡咯并[2，3-d]嘧啶抗叶酸素，将其转变为成盐的形式便得到药学上更易接受的化合物。下述实施例是说明本发明的具体例子，并无意限定其范围，并且也不应这样认为。制备14-(4-三甲基甲硅烷氧基-3-丁烯基)苯甲酸甲酯于-15℃和氮气氛中，将3.89g(19.5mmol)三甲基甲硅烷基碘加至3.65g(17.7mmol)4-(4-甲酯基苯基)丁醛和3.43g(21.2mmol)1，1，1，3，3，3-六甲基二硅氮烷在177ml二氯甲烷中的溶液，2分钟加完。将混合物搅拌10分钟，自然升温至室温。2小时后，加入100ml水使过量的试剂骤冷。分出水层，有机层用硫酸钠干燥。真空浓缩除去溶剂，得5.0g 4-(4-三甲基甲硅烷氧基-3-丁烯基)苯甲酸甲酯，收率100%。薄层层析(TLC)分析(二氧化硅;己烷-乙酸乙酯3∶2)表明，上述产物基本上是纯品。b.p.170℃(0.12乇)1H NMR(CDCl3)δ 0.15(s，9H)，2.41(q，J＝7.2Hz，2H)，2.69(m，2H)，3.89(s，3H)，4.47(q，J＝7.2 Hz，1H)，6.15(m，1H)，7.25(d，J＝8.2 Hz，2H)，7.93(d，J＝8.2 Hz，2H);13C NMR(CDCl3)δ -0.60，25.0，35.9，51.8，109.8，128.4，128.5，129.6，138.6，148.0，167.1;FDMS 279(90)，278(M+，100%)280，251，226;闪层析(二氧化硅;己烷-乙酸乙酯3∶2)制得分析试样。元素分析理论值(C15H22O3Si)C，64.71;H，7.96;实测值C，64.90;H，8.05。制备22-溴-4-(4-甲酯基苯基)丁醛在-20℃下，将溴(2.56g，16mmol)的四氯化碳(16ml)溶液缓慢加至制备1制得的4-(4-三甲基甲硅烷氧基-3-丁烯基)苯甲酸甲酯(4.46g，16mmol)的四氯化碳(16ml)溶液中，4小时加完。混合物静置升温至室温，滗晰除去少量不溶物。旋转蒸发除去溶剂，得4.60g 2-溴-4-(4-甲酯基苯基)丁醛。将上述产物层析纯化(二氧化硅;己烷-乙酸乙酯7∶3)，得4.0g纯化产物，收率87.8%。1H NMR(CDCl3) δ 2.24(m，1H)，2，36(m，1H)，2.81(m，1H)，2.90(m，1H)，3.90(s，3H)，4.16(m，1H)，7.27(d，J＝8.2 Hz，2H)，7.97(d，J＝8.2 Hz，2H)，9.46(d，J＝2.1 Hz，1H);13C NMR(CDCl3)δ 32.5，32.7，51.7，54.3，128.3，128.4，129.8，145.0，166.6，192.0.实施例34-(2-[2-氨基-4-氧代-3，7-二氢吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-基]乙基)苯甲酸甲酯在80℃下，制备2制得的2-溴-4-(4-甲酯基苯基)丁醛(3.82g，13.4mmol)的甲醇(7ml)溶液加至2，4-二氨基-6-羟基嘧啶(1.69g，13.4mmol)、乙酸钠(2.20g，26.8mmol)和水(20ml)的混合物中，5分钟加完。将混合物于80℃保温5分钟，冷却至室温，搅拌30分钟。将混合物过滤，水洗，在10乇和50℃下干燥18小时，得3.32g 4-(2-[2-氨基-4-氧代-3，7-二氢吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-基]乙基)苯甲酸甲酯(m.p.〉220℃)，收率79.4%。将剩下的滤液冷却至5℃，过滤，又得0.069g上述产物，总收率为81%。1H NMR(DMSO-d6)δ 2.80(m，2H)，2.93(m，2H)，3.78(s，3H)，5.97(s，2H)，6.26(d，J＝2.0 Hz，1H)，7.28(d，J＝8.2 Hz，2H)，7.80(d，J＝8.2 Hz，2H)，10.12(s，1H)，10.58(s，1H);FDMS 312(M+)，元素分析C16H16N4O3，理论值C，61.53;H，5.16;N，17.94;实测值C，61.79;H，5.33;N，17.66.制备44-[2-(2-氨基-4，7-二氢-4-氧代-3H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-基)乙基]苯甲酸将3.17g(10.15mmol)4-[2-(2-氨基-4，7-二氢-4-氧代-3H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-基)乙基]苯甲酸甲酯(实施例3制得)、30ml 1N氢氧化钠水溶液和5ml甲醇的混合物于室温搅拌20小时。加四氢呋喃(5ml)，搅拌4小时，然后用30ml 1N盐酸水溶液中和。过滤分离所得沉淀物，水(20ml)洗，在50℃烘箱中真空干燥，得2.65g上述产物，收率87%。1H NMR(DMSO-d6)δ 2.45(m，2H)，2.91(m，2H)，5.99(s，2H)，6.27(d，J＝2.0 Hz，1H)，7.27(d，J＝8.2 Hz，2H)，7.79(d，J＝8.2 Hz，2H)，10.14(s，1H)，10.59(d，J＝2.0 Hz，1H)，13.2(bs，1H).制备5N-[4-[2-[2-氨基-4，7-二氢-4-氧代-3H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-基]乙基]苯甲酰基]谷氨酸二甲酯在氮气氛中，将1.40g(13.8mmol)N-甲基吗啉和11.7g(6.70mmol)4-氯-2，6-二甲氧基三嗪加至4-[2-(2-氨基-4，7-二氢-4-氧代-3H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-基)乙基]苯甲酸(2.00g，6.74mmol，制备4制得)的二甲基甲酰胺(23ml)溶液中。活性酯的生成通过等分试样的HPLC分析监控。室温下40分钟后，先后加入0.70(6.9mmol)N-甲基吗啉和1.56g(7.37mmol)L-谷氨酸二甲酯盐酸盐。30分钟后，HPLC分析表明活性酯基本消耗完毕。并且生成了N-[4-[2-[2-氨基-4，7-二氢-4-氧代-3H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-基]乙基]苯甲酰基]谷氨酸二甲酯，过滤反应混合物，将上述产物浓缩，用二氧化硅层析纯化(洗脱剂，甲醇-二氯甲烷1∶4)。合并纯馏分，得1.30g上述产物，收率43%。1H NMR(DMSO-d6)δ 2.01(m，2H)，2.40(t，J＝7.4 Hz，2H)，2.80(m，2H)，2.92(m，2H)，3.53(s，3H)，3.59(s，3H)，4.40(m，1H)，5.99(s，2H)，6.26(d，J＝1.9 Hz，1H)，7.23(d，J＝8.2 Hz，2H)，7.73(d，J＝8.2 Hz，2H)，8.62(d，J＝7.5 Hz，1H)，10.15(s，1H)，10.57(d，J＝1.9 Hz，1H).制备6N-[4-[2-[2-氨基-4，7-二氢-4-氧代-3H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-基]乙基]苯甲酰基]谷氨酸在室温下，将0.50g(1.1mmol)N-[4-[2-[2-氨基-4，7-二氢-4-氧代-3H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-基]乙基]苯甲酰基]谷氨酸二甲酯(制备5制得)和3.3ml 2N氢氧化钠水溶液的混合物搅拌48小时，用6M盐酸水溶液中和至PH5。滤出沉淀物，水洗，干燥，得0.277g上述产物，收率59%。制备71-甲氧基-4-(4-羧甲基苯基)-1-丁烯在0℃和氮气氛中，将11ml(11mmol)1M叔丁醇钾的四氢呋喃溶液加到氯化甲氧基甲基三苯基鏻(3.77g，11mmol)的甲苯(10ml)溶液中，20分钟加完。将所得溶液搅拌10分钟，然后用15分钟的时间加3-(4-羧甲基苯基)丙醛(1.92g，10mmol)的甲苯(10ml)溶液。将混合物搅拌20分钟后，加40ml乙醚。用硅藻土过滤所得沉淀物，收集之，依次用20ml水和20ml饱和氯化钠洗涤，用9∶1的硫酸钠/饱和氯化钠的混合物干燥。将滤液真空浓缩，残余物用己烷研制，得1.72g 1-甲氧基-4-(4-羧甲基苯基)-1-丁烯。将上述产物层析(硅胶，8∶2己烷∶乙酸乙酯)得1.0g上述产物的几何异物构体混合物(Z/E-6∶4)，总收率45%，b.p.140℃(0.07乇)1H NMR(CDCl3)δ 2.23(dq，J＝1.0，8.1 Hz)，2.40(dq，J＝1.3，8.0 Hz)total 2H，2.70(t，J＝8.1 Hz)，2.71(t，J＝8.0 Hz)，total 2H，3.48(s)，3.55(s)，total 3H，3.89(s)，3.90(s)，total 3H，4.32(q，J＝6.2 Hz)，4.71(dt，J＝7.3，12.6 Hz)，total 1H，5.87(dt，J＝1.3，6.2 Hz)，6.28(dt，J＝1.0，12.6 Hz)，total 1H，7.23(d，J＝8.2 Hz)，7.27(d，J＝8.2 Hz)，total 1H，7.94(d，J＝8.2 Hz)，7.95(d，J＝8.2 Hz)，total 2H;13C NMR(CDCl3)δ 25.2，29.3，36.0，37.4，51.9，56.0，59.5，101.8，101.9，105.5，127.9，128.0，128.5，128.6，129.6，129.7，146.9，147.5，147.9，148.0，167.1，167.2;IR(CHCl3)3025，2954，1716，1656，1610，1437，1284，1112 cm-1;MS(FD) m/z 220(M+).实施例84-(2-[2-氨基-4(1H)-氧代-4，7-二氢吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-基]乙基)苯甲酸甲酯将10ml水加到制备7制得的1-甲氧基-4-(4-羧甲基苯基)-1-丁烯(1.10g，5.0mmol)的乙腈(10ml)溶液中。将所得混合物冷却至10℃，加0.63g(5.0mmol)2，4-二氨基-6-羟基嘧啶，搅拌混合物并温热至80℃，40分钟后，将混合物冷却至室温，加20ml水。用5N氢氧化钠将所得浆液的PH值调至6。滤集沉淀物，水洗，干燥(50℃，10乇)得1.44g上述产物，收率92%。实施例94-(2-[2-氨基-4(1H)-氧代-4，7-二氢吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-基]乙基)苯甲酰基-L-谷氨酸二乙酯将300mg(0.766mmol)N-4-(1-甲氧基-1-丁烯-4-基)苯甲酰基-L-谷氨酸二乙酯、3.0ml乙腈和3.0ml水于室温下搅拌，加122mg(0.766mmol)溴在1ml乙腈中的溶液。向该溶液中加188mg(2.3mmol)乙酸钠和0.97mg(0.77mmol)2，4-二氨基-6-羟基嘧啶，将所得混合物加热至60℃，保温18小时，冷却，真空浓缩。将所得残余物研制(2×5ml水)，滗晰。加乙醇(5ml)和440mg(2.3mmol)对甲苯磺酸-水合物。加热回流20分钟后，将混合物冷却至室温，过滤。沉淀物用乙醇(2×5ml)洗涤，干燥，得标题化合物的对甲苯磺酸盐。前面已经详述了本发明，包括其优选的实施方案。但是，应当明白，考虑到本发明公开的内容，本领域技术人员可在下述权利要求书的精神范围内对本发明进行改变和/或改进。权利要求1.式(Ⅰ)5-取代的吡咯并[2，3-d]嘧啶或其盐的制备方法，式(Ⅰ)如下式中R是NHC*H(COOR′)CH2CH2COOR′或OR′各R′是H或相同或不同的羧基保护基团；标有★的碳原子的构型是L；n是0或1；且是可被取代的芳基基团，它包括a)将2，4-二氨基-6-羟基嘧啶与下述式(Ⅱ)卤代醛反应式中Y是溴、氯或碘；且，R；R′，n和★定义如上；和b)可选地将步骤(a)的产品成盐。2.按照权利要求1的方法，其中R是OR′，R′是H或羧基保护基团，n是0并且是1，4-亚苯基。3.按照权利要求2的方法，其中Y是氯或溴。4.按照权利要求1的方法，其中R是NHC＊H(COOR′)CH2CH2COOR′，各R′是H或是相同或不同的羧基保护基团，n是0并且是1，4-亚苯基。5.按照权利要求4的方法，其中Y是氯或溴。6.式(Ⅰ)5-取代的吡咯并[2，3-d]嘧啶或其盐的制备方法，式(Ⅰ)如下式中R是NHC＊H(COOR′)CH2CH2COOR′或OR′各R′是H或相同或不同的羧基保护基团;标有★的碳原子的构型是L;n是0或1;且是可被取代的芳基基团;它包括a)将卤化剂与下式(Ⅲ)化合物反应，式中R，R′，，n和★定义如上，且R2是选自式(Ⅳ)，(Ⅴ)或(Ⅵ)的取代基，OHC-CH2-CH2(Ⅳ)R3-CH＝CH-CH2(Ⅴ)式中R3是OR4，其中R4是羟基保护基团;OCOR5，其中R5是C1-6烷基、苯基、苄基或C3-6环烷基，NR6R7，其中R6和R7各自是C1-6烷基、C3-6环烷基，或者与氮原子一起，还可包括氧原子，构成5元到6元饱和单环基团，该基团可被一个或两个选自C1-4烷基和C1-4烷氧基的取代基取代;或者R8和R9均为C1-4烷基，或者与氧原子一起形成一个5元到6元饱和单环基团，该基团可被一个或二个选自羟基、C1-4烷基和C1-4烷氧基的取代基取代;b)将步骤a)的反应产物与2，4-二氨基-6-羟基嘧啶反应;和c)可选地将步骤b)的反应产物成盐。7.按照权利要求6的方法，其中R是OR′，R′是H或羧基保护基团，R2是式(Ⅴ)取代基，R3是OR4，R4是羟基保护基团，n是0并且是1，4-亚苯基。8.按照权利要求7的方法，其中卤化剂是溴或氯。9.按照权利要求6的方法，其中R是NHC＊H(COOR′)CH2CH2COOR′，各R′是氢或是相同或不同的羧基保护基团，R2是式(Ⅴ)取代基，R3是OR4，R4是羟基保护基团，n是0并且是1，4-亚苯基。10.按照权利要求9的方法，其中卤化剂是溴或氯。全文摘要本发明公开了制备5-取代的吡咯并[2，3，-d]嘧啶的方法。该化合物可用作制备吡咯并[2，3-d]嘧啶抗肿瘤药的中间体，或者可直接用作抗肿瘤药。文档编号C07D487/06GK1087910SQ9311829公开日1994年6月15日 申请日期1993年9月24日 优先权日1992年9月25日发明者C·J·巴列特, T·M·威尔逊 申请人:伊莱利利公司