红根草邻醌类化学修饰物及它们的用途的制作方法

专利名称：：红根草邻醌类化学修饰物及它们的用途的制作方法技术领域：：本发明涉及天然产物及它的半合成。红根草系唇形科丹参属植物(SalviaprionitisHance)，民间将其全草用于治疗腹泻、菌痢、急慢性扁桃腺炎；咽喉炎并有抗结核活性(药学通报，15，428)，杨保津等[植物学报1988，30(5)524—527]研究红根草的化学成分，从红根草中分离得到新天然产物红根草邻醌(化合物I)化合物I对P388白血病细胞有很强的抑制活性，在1μg/ml浓度时，抑制率为92.7％，在100-1000μg/ml时，对革兰氏阳性菌(例枯草杆菌，金黄色葡萄球菌等)有明显拮抗作用，但该化合物还有一定缺点。本发明设计以有生物活性的红根草邻醌作为先导化合物，然后设计出一系列红根草邻醌类化学修饰物。本发明是通过下列步骤完成1.将红根草的乙醇提取物经氯仿——水分配，得氯仿提取物，将该提取物进行硅胶柱层析及制备薄层层析(展开剂为二氯甲烷∶环乙烷＝1∶1V/V)纯化后即得化合物I。2.化合物I用相应的卤化剂(例NBS等)使R1卤化，分离得化合物II其中R1＝F、Cl、Br、IR2＝OH3.化合物II在K2CO3存在下脱HR1后，得化合物III4.化合物III经水解得化合物IV5.化合物IV由相应的酰化试剂的存在下，使R1的羟基被相应的酰基取代，分别得化合物V—XI。化合物R1R2IIBr(F、Cl、I)OHIIIR1—R2＝0IVOHOHVOCOCH3OHVIOCOCH2CH3OHVIIOCO(CH2)2CH3OHVIIIOCOCH＝CH2OHIXOHXOCO(CH2)2COOHOHXIHH该类二萜类化合物进行抗肿瘤的药理试验证明其对P388淋巴白血病细胞株和SGC7901人体胃癌细胞、A549人体肺癌细胞具有明显抑制作用，体内对小鼠Lewis肺癌有效。人体癌细胞抑制试验采用MTT法，P388小鼠淋巴白血病细胞采用排染法，体外药理试验结果由表1所示。表1，红根草邻醌化学修饰物对P388淋巴白血病细胞株的抑制作用(抑制％)</tables>表2，化合物IV对人体癌细胞的抑制率(9％)小鼠体内实验，选用平均体重为17.29的小鼠，瘤型为Lewis肺癌，剂量为20mg/kg腹腔注射化合物V，对照组小鼠瘤重分别为(克)1.98，2.08，2.73，3.16，2.48，2.37，2.96，1.93，1.95，1.50；注射化合物V后的瘤重则明显减小，分别为(克)1.38，1.04，1.64，1.20，1.22，1.35，1.24抑制率为42.7％。选用裸鼠品系为BALB/C—nn/nμundemice，(由中国科学院上海药物研究所提供)鼠重平均为25克，每批用鼠30只，其中给药组，对照组和阳性对照组各10只，瘤型为A549和LAX-83人体肺癌，A549是由美国引进的人体肺癌细胞株，然后接种于裸小鼠体内，成为裸小鼠人体肺癌移植瘤模型，LAX-83是中国科学院上海药物研究所裸鼠实验室于1983年建立的人体肺癌裸小鼠移植瘤模型，实验方法采用采块法，随机分组，接种48小时后腹腔给药，隔天一次，共三周，阳性对照药为MMC，2mg/kg，停药后48小时处死动物，分别称取体重和瘤重，按公式[(C-T)/C]×100计算肿瘤抑制率。结果由表3、表4所示。表3，化合物IV对裸鼠A549人体肺癌模型的抑制作用表4，化合物IV对裸鼠LAX—83人体肺癌模型的抑制作用下面用实施例进一步说明本发明的实施实施例1化合物(II)的制备在一三角瓶中加入红根草邻醌200mg(0.68mmol)，用叔丁醇溶解后，加水7ml，冰水冷却至12℃以下，加入NBS140mg(0.78mmol)，搅拌10分钟后，撤去冰水冷却浴，继续搅拌3小时，反应混合物于50℃以下蒸除有机溶剂，残余物以乙醚提取，乙醚提取液以无水MgSO4干燥，柱层析纯化，得化合物II200mg(75％)，C20H25BrO3，[M]+m/z394(392)，366(364)(M-CO)，267，227，211，200，183，171，155，141，128，115，1HNMR(400MHz，CDCl3)δ1.14，1.16(各3H，d，J＝7.0Hz，CH3-16，17)，1.32，1.37(各3H，s，CH3-18，19)，1.85(2H，m，H-2)，3.00(1H，m，H-15)，3.16(2H，m，H-1)，4.32(1H，dd，J＝11.0，1.9Hz，H-3)，7.06(1H，d，J＝8.2Hz，H-7)，7.07(1H，s，H-14)，7.36(1H，d，J＝8.2Hz，H-6)。实施例2化合物III的制备60mg化合物II加甲醇溶解，加入K2CO31.0g，室温搅拌2.5小时，反应混合物减压蒸除甲醇后，加水稀释，乙醚提取，乙醚提取液以无水MgSO4干燥，纯化得III(28mg，61％)，C20H24O3，[M]+m/z312，1HNMR(400MHz，CDCl3)δ1.10，1.15(各3H，d，J＝7.0Hz，CH3-16，17)，1.25，1.30(各3H，s，CH3-18，19)，1.68(1H，m，H-2)，1.79(1H，m，H-2)，2.37(3H，s，C5-CH3)，2.92(1H，m，H-15)，3.11(1H，m，H-1)，3.28(1H，m，H-3)，7.05(1H，d，J＝7.8Hz，H-7)，7.07(1H，s，H-14)，7.36(1H，d，J＝7.8Hz，H-6)。实施例3化合物IV，C20H26O4，[M]+m/z330，1HNMR(400MHz，CDCl3)δ1.12，1.13(各3H，d，J＝6.0Hz，CH3-16，17)，1.13，1.20(各3H，s，CH3-18，19)，1.46(1H，m，H-2)，1.77(1H，m，H-2)，2.39(3H，s，C5-CH3)，3.02(1H，m，H-15)，3.08(1H，m，H-1)，3.25(1H，m，H-1)，3.54(1H，dd，J＝10.2，1.2Hz，H-3)，7.05(1H，d，J＝7.7Hz，H-7)，7.07(1H，s，H-14)，7.36(1H，d，J＝7.7Hz，H-6)。实施例4化合物V的制备130mg化合物IV，5ml醋酐和0.5ml吡啶，置45℃水浴上过夜，反应混合物冷至室温后，倒入碎冰。冰冷下以1096NaHCO3中和，乙醚提取，纯化，得化合物4(95mg，65％)，C22H28O5，[M]+m/z372，1HNMR(400MHz，CDCl3)δ1.14，1.15(各3H，宽的单峰，CH3-16，17)，1.21，1.23(各3H，s，CH3-18，19)，1.46(1H，m，H-2)，1.86(1H，m，H-2)，2.19(3H，s，OCOCH3)，2.34(3H，s，C5-CH3)，3.00(3H，m，H-1，H-15)，5.00(1H，dd，J＝9.5，2.1Hz，H-3)，7.04(1H，d，J＝7.7Hz，H-7).7.06(1H，s，H-14)，7.35(1H，d，J＝7.7Hz，H-6)。同法还可制得化合物V—IX。权利要求1.一类结构式如下的红根草邻醌修饰物其中R1为卤素或羟基或取代酰基R2为H或OH。2.根据权利要求1所述的化合物，其特征在于它由以下步骤制备(1)红根草邻醌化合物(化合物I)用相应的卤化剂使R1卤化得化合物(II)(2)R1卤化的化合物在K2CO3存在下脱去卤化氢后，得化合物(III)(3)化合物(III)经水解得羟基化合物(IV)(4)化合物(IV)由相应的酰化试剂存在下，酰化R1的羟基分别得化合物(V—XI)。3.根据权利要求1所述的红根草邻醌化学修饰物，其特征在于它们具有抗肿瘤活性可用于治疗肿瘤疾病。全文摘要从红根草中分离得红根草邻醌，对其进行化学结构修饰得红根草邻醌类化学修饰物，经药理试验证明它们对P388淋巴白血病细胞，小鼠Lewis肺癌，人体肺癌有较好的效果。文档编号C07C50/12GK1127742SQ9511152公开日1996年7月31日申请日期1995年1月25日优先权日1995年1月25日发明者张金生,丁健,乐秀芳申请人:中国科学院上海药物研究所