氨基酸取代的苯甲酰胍，其制备方法，用途及含有它们的药物的制作方法

专利名称：氨基酸取代的苯甲酰胍，其制备方法，用途及含有它们的药物的制作方法技术领域：本发明涉及式I的苯甲酰基胍和其药学上可接受的盐 其中三个取代基R(1)、R(2)和R(3)之一为—Y—4—〔(CH2)k—CHR(7)—(C＝O)R(8)〕—苯基，—Y—3—〔(CH2)k—CHR(7)—(C＝O)R(8)〕—苯基，或—Y—2—〔(CH2)k—CHR(7)—(C＝O)R(8)〕—苯基，其中每个苯基被1—2个选自F、Cl、—CF3、甲基、羟基、甲氧基和—NR(37)R(38)的取代基取代或未取代；R(37)和R(38)相互独立地为氢或—CH3；Y为一键、氧、—S—或—NR(9)；R(9)为氢或—(C1-4)烷基；R(7)为—OR(10)或—NR(10)R(11)；R(10)和R(11)相互独立地为氢、—(C1-8)烷基、—(C1-8)烷酰基、—(C1-8)—烷氧羰基、苄基、苄氧羰基；或R(10)为三苯甲基；R(8)为—OR(12)或—NR(12)R(13)；R(12)和R(13)相互独立地为氢、—(C1-8)烷基或苄基；k为0、1、2、3或4；R(1)、R(2)和R(3)的其它基团相互独立地为—(C1-8)烷基、—(C2-8)链烯基或—(CH2)mR(14)；m为0、1或2；R(14)为—(C3-8)环烷基或苯基，它被选自F、Cl、—CF3、甲基、甲氧基和—NR(15)R(16)的1—3个取代基取代或未取代；R(15)和R(16)为氢或—CH3；或R(1)、R(2)和R(3)的其它基团相互独立地为R(18)R(19)N(C＝Y’)NH—SO2—；Y’为氧，—S—或—N—R(20)；R(18)和R(19)相互独立地为氢、—(C1-8)烷基、—(C3-6)链烯基或—(CH2)t—R(21)；t为0、1、2、3或4；R(21)为—(C5-7)环烷基或苯基，它被选自F、Cl、—CF3、甲氧基和—(C1-4)烷基的1—3个取代基取代或未取代；或R(18)和R(19)一起为亚丁基或亚戊基，其中一个CH2基团可被氧、—S—、—NH—、—N—CH3或—N—苄基代替；R(20)如R(18)所定义或为脒；或R(1)、R(2)和R(3)的其它基团相互独立地为氢、F、Cl、Br、I、—CN、X—(CH2)p—(CqF2q＋1)、R(22)—SOu—、R(23)R(24)N—CO—、R(25)—CO—或R(26)R(27)N—SO2—，其中全氟烷基为直链或支链；X为一键、氧、—S—，或—NR(28)；u为0、1或2；p为0、1或2；q为1、2、3、4、5或6；R(22)、R(23)、R(25)和R(26)相互独立地为—(C1-8)烷基、—(C3-6)链烯基、—(CH2)n—R(29)或—CF3；n为0、1、2、3或4；R(28)为氢或—(C1-3)烷基；R(29)为—(C3-7)环烷基或苯基，它可被选自F、Cl、—CF3、甲基、甲氧基和—NR(30)R(31)的1—3个取代基取代或未取代；R(30)和R(31)为氢或—(C1-4)烷基；或R(23)、R(25)和R(26)为氢；R(24)和R(27)相互独立地为氢或—(C1-4)烷基；或R(23)和R(24)和R(26)和R(27)一起为亚丁基或亚戊基，其中一个CH2基团可被氧、—S—、—NH—、—N—CH3或—N—苄基所代替；或R(1)、R(2)和R(3)的其它基团相互独立地为—OR(35)或—NH(35)R(36)；R(35)和R(36)相互独立地为氢或—(C1-6)烷基；或R(35)和R(36)一起为亚丁基到亚庚基，其中一个CH2基团可被氧、—S—、—NH—、—N—CH3或—N—苄基代替；R(4)和R(5)相互独立地为氢、—(C1-4)烷基、F、Cl、—OR(32)、—NR(33)R(34)或—CrF2r＋1；R(32)、R(33)和R(34)相互独立地为氢或—(C1-3)烷基；r为1、2、3或4。优选这样的式I化合物及其药学上可接受的盐，其中R(1)为—(C1-4)烷基、—(C2-4)链烯基或—(CH2)mR(14)；m为0、1或2；R(14)为—(C5-6)环烷基或苯基，它可被选自F、Cl、—CF3、甲基、甲氧基和—NR(15)R(16)的1—2个取代基取代或未取代；R(15)和R(16)相互独立地为氢或—CH3；或R(1)为R(18)R(19)N—(C＝Y’)—NH—SO2—；Y’为氧、—S—或—N—R(20)；R(18)和R(19)相互独立地为氢、—(C1-4)烷基、—(C3-4)链烯基或—(CH2)t—R(21)；t为0、1或2；R(21)为—(C5-6)环烷基或苯基，它可被选自F、Cl、—CF3、甲氧基和甲苯的1—2个取代基取代或未取代；或R(18)和R(19)一起为亚丁基或亚戊基，其中一个CH2基团可被氧、—S—、—NH—、—N—CH3或N—苄基代替；R(20)如R(18)所定义或为脒；或R(1)为氢、F、Cl、Br、I、—CN、R(22)—SO2—、R(23)R(24)N—CO—，R(25)—CO—或R(26)R(27)N—SO2—；R(22)、R(23)、R(25)和R(26)相互独立地为—(C1-4)烷基、—(C3-4)链烯基、—(CH2)n—R(29)或—CF3；n为0、1或2；R(29)为—(C5-6)环烷基或苯基，它可被选自F、Cl、—CF3、甲基、甲氧基和—NR(30)R(31)的1—2个取代基取代或未取代；R(30)和R(31)相互独立地为氢或甲基；或R(23)、R(25)和R(26)为氢；R(24)和R(27)相互独立地为氢或甲基；或R(23)和R(24)和R(26)和R(27)一起为亚丁基或亚戊基，其中一个CH2基团可被氧、—S—、—NH—、—N—CH3或—N—苄基所代替；或R(1)为—OR(35)或—NR(35)R(36)；R(35)和R(36)相互独立地为氢或—(C1-4)烷基；或R(35)和R(36)一起为亚丁基或亚戊基，其中一个CH2基团可被氧、—S—、—NH—、—N—CH3或—N—苄基代替；取代基R(2)或R(3)之一为—Y—4—〔(CH2)k—CHR(7)—(C＝O)R(8)〕—苯基，—Y—3—〔(CH2)k—CHR(7)—(C＝O)R(8)〕—苯基，或—Y—2—〔(CH2)k—CHR(7)—(C＝O)R(8)〕—苯基，其中每个苯基被选自F、Cl、—CF3、甲基、羟基、甲氧基或—NR(37)R(38)的1—2个取代基取代或未取代；R(37)和R(38)相互独立地为氢或—CH3；Y为一键、氧、—S—或—NR(9)；R(9)为氢或甲基；R(7)为—OR(10)或—NR(10)R(11)；R(10)和R(11)相互独立地为氢、—(C1-5)烷基、(C1-5)烷酰基、一(C1-4)烷氧羰基、苄基、或苄氧羰基；或R(10)为三苯甲基；R(8)为—OR(12)或—NR(12)R(13)；R(12)和R(13)相互独立地为氢、—(C1-4)烷基或苄基；k为0、1或2；R(2)或R(3)取代基的另一个为—(C1-4)烷基、氢、F、Cl、Br或I；R(4)和R(5)相互独立地为氢、甲基、F、Cl、—OR(32)、—NR(33)R(34)或—CH3；R(32)、R(33)和R(34)相互独立地为氢或甲基。特别优选这样的式I化合物和其药学上可接受的盐，其中R(1)为—(C1-4)烷基、—(C2-4)链烯基或—(CH2)mR(14)；m为0、1或2；R(14)为—(C5-6)环烷基或苯基，它可被选自F、Cl、—CF3、甲基、甲氧基和—NR(15)R(16)的1—2个取代基所取代或未取代；R(15)和R(16)相互独立地为氢或甲基；或R(1)为氢、F、Cl、Br、I、—CN、R(22)—SO2—、R(23)R(24)N—CO—、R(25)—CO—或R(26)R(27)N—SO2—；R(22)、R(23)、R(25)和R(26)相互独立地为甲基或—CF3；或R(23)、R(25)和R(26)为氢；R(24)和R(27)相互独立地为氢或甲基；或R(1)为—OR(35)或—NR(35)R(36)；R(35)和R(36)相互独立地为氢或—(C1-4)烷基；或R(35)和R(36)一起为亚丁基或亚戊基，其中一个CH2基团可被氧、—S—、—NH—、—N—CH3、或—N—苄基所代替；取代基R(2)和R(3)之一为—Y—4—〔(CH2)k—CHR(7)—(C＝O)R(8)〕—苯基，—Y—3—〔(CH2)k—CHR(7)—(C＝O)R(8)〕—苯基，或—Y—2—〔(CH2)k—CHR(7)—(C＝O)R(8)〕—苯基，其中每个苯基被选自F、Cl、—CF3、甲基、羟基、甲氧基和—NR(37)R(38)的一个取代基取代或未取代；R(37)和R(38)相互独立地为氢或—CH3；Y为一键、氧、—S—或—NR(9)；R(9)为氢或甲基；R(7)为—NR(10)R(11)；R(10)和R(11)相互独立地为氢、—(C1-4)烷基、—(C1-5)烷酰基、—(C1-4)烷氧羰基、苄基或苄氧羰基；或R(10)为三苯甲基；R(8)为—OR(12)或—NR(12)R(13)；R(12)和R(13)相互独立地为氢、—(C1-4)烷基或苄基；取代基R(2)和R(3)的另一个为—(C1-4)烷基、氢、F或Cl；R(4)和R(5)相互独立地为氢、甲基、F、Cl、—OR(32)、—NR(33)R(34)或—CF3；R(32)、R(33)和R(34)相互独立地为氢或甲基。如果取代基R(1)到R(5)之一含有一个或多个不对称中心，它们可以是S或R构型。化合物可以呈光学异构体、非对映体、外消旋物或其混合物的形式。所述烷基和全氟烷基可以是直链或支链。本发明还涉及化合物I的制备方法，其包括式II化合物与胍反应 其中R(1)到R(5)如上所定义，L为离去基团，容易被亲核取代。式II的活化酸衍生物中，L为烷氧基(优选甲氧基)、苯氧基、苯硫基、甲硫基或2—吡啶基硫基、或氮杂环(优选1—咪唑基)，化合物II最好用已知方法从相应的酰氯(式II、L＝Cl)制得，后者本身又从相应的羧酸(式II，L＝OH)如用亚硫酰氯制得。除式II的酰氯(L＝Cl)外，还可以用已知方法直接从相应的苯甲酸衍生物(式II，L＝OH)制备式II的其它活化酸衍生物，例如用气体HCl在甲醇中处理制得式II的甲酯(L＝OCH3)，用碳酰二咪唑处理制得式II的酰化咪唑〔L＝1—咪唑基，staab，Angew，chem，Int，Ed.Engl.1，351—367(1962)〕，用Cl—COOC2H5或对甲苯磺酰氯在三乙胺存在下在惰性溶剂中处理制得式II的混合酸酐，以及用二环己基碳化二亚胺(DCC)或用O—〔(氰基(乙氧羰基)亚甲基〕氨基〕—1，1，3，3—四甲基脲鎓四氟硼酸盐(TOTU)活化苯甲酸〔Proceedings of the 21st European Peptide Symposium，Peptides 1990，Editors E.Giralt和D. Andrea，Escom，Leiden，1991〕。在J.March，Advanced Organic Chemistry，第3版(John Wiley & Sons，1985)，p 350中的详细参考文献中描述了多种适用制备式II活化羧酸衍生物的方法。式II活化羧酸衍生物与胍的反应按已知方法在质子或非质子极性惰性有机溶剂中进行。在苯甲酸甲酯(II，L＝OMe)与胍的反应中，已证明甲醇、异丙醇或THF及20℃到沸点是适合的。在化合物II与无盐胍的大部分反应中，反应在非质子惰性溶剂如THF、二甲氧基乙烷或二噁烷或异丙醇中进行有利。但是，水也可以用作溶剂。如果L＝Cl，加入酸清除剂来进行反应是有利的，如使用过量的胍以结合氢卤酸。式II的未知化合物可用文献中已知的方法制备，例如用氨或胺将4—卤—3—氯磺酰基苯甲酸转化为3—氨基磺酰基—4—卤—苯甲酸，或用弱还原剂如亚硫酸氢钠处理然后烷基化，转化为3—烷基磺酰基—4—卤—苯甲酸，生成的产物用上述方法之一反应，制得本发明的式I化合物。苯基部分被硫、氧或氮亲核基团取代的苯丙氨酸衍生物的引入，是用文献中已知的芳核上亲核取代的方法进行的。对于苯甲酸衍生物上这种取代，已证明卤离子和三氟甲磺酸根适于作为离去基团。反应最好在极性非质子溶剂如DMF或TMU中于0℃到溶剂沸点的温度下进行，优选从80℃到溶剂的沸点。最好用具有强碱性和低亲核性阴离子的碱金属盐或碱土金属盐如K2CO3或CsCO3作为酸捕获剂。选择已知的标准方法保护氨基酸的功能团。已证明叔丁氧羰基、苄氧羰基、二苯甲基和三苯甲基适于在氮原子上的保护。酸官能团可不保护，或使用适当的酯或适当的酰胺。烷基或芳基取代基的引入按文献已知方法进行，芳香卤化物在钯催化下与如有机锡烷、有机硼酸或有机硼烷或有机锌化合物交联。一般讲，苯甲酰胍I具有弱碱性，可以结合酸形成盐。可能的酸加成盐是所有药理上可接受的酸的盐，例如氢卤酸盐，特别是盐酸盐，乳酸盐，硫酸盐，柠檬酸盐，酒石酸盐，乙酸盐，磷酸盐，甲磺酸盐和对甲苯磺酸盐。化合物I是取代的酰基胍。酰基胍的最主要的代表是吡嗪衍生的氨氯吡咪，它在治疗中用作保钾利尿药。在文献中描述了氨氯吡咪类的许多其它化合物，例如，二甲基氨氯吡咪或乙基异丙基氨氯吡咪。 氨氯吡咪R’、R”＝H二甲基氨氯吡咪R’，R”＝CH3乙基异丙基氨氯吡咪R’＝C2H5，R”＝CH(CH3)2而且，研究表明氨氯吡咪具有抗心律失常作用(Circulation79，1257—63(1989))。但此作用不太明显，而且伴有抗高血压和促尿盐排泄作用，而这些副作用是心律失常治疗中所不希望的，因而妨碍了它作为抗心律失常药的广泛应用。在离体动物心脏中的实验也得到了氨氯吡咪抗心律失常作用的信息〔Eur.Heart J.9(suppl.1)167(1988)(摘录本)〕。例如用大鼠心脏发现，可以用氨氯吡咪完全抑制人工诱导的心室纤颤。在此模型中比氨氯吡咪更有效的是上述氨氯吡咪衍生物乙基异丙基氨氯吡咪。美国专利5091394中描述了在相当于R(1)、R(4)和R(5)的位置处带有氢原子的苯甲酰胍。欧洲公开说明书0556074(HOE 92/F034)描述了苯甲酰胍，但其中取代基没有本发明所要求的含义。没有述及氨基酸衍生物。另外，这些已知苯甲酰胍的水溶性还不令人满意。美国专利3780027要求的酰基胍结构上与式I化合物相似，衍生自市售袢利尿药，如布他美尼。也有这些化合物的强促尿盐排泄活性的报导。因此，令人惊异地是本发明化合物没有所不希望的不利的促尿盐排泄作用，但在如缺氧症状中有非常好的抗心律失常作用。由于它们的药理作用，这些化合物非常适于作为具有心脏保护作用的抗心律失常药物，用于梗塞预防和梗塞治疗及心绞痛的治疗，其中它们预防性地抑制或大大减小局部缺血引起的损伤形成中的病理生理过程，特别是在心脏缺血引起的心律失常的诱发中。由于它们对病理缺氧和局部缺血状况的保护作用，可以使用本发明的式I化合物作为治疗所有由局部缺血引起的急性或慢性损伤或由此引起的原发或继性性疾病的药物，因为它们抑制细胞的Na+/H+交换机制。这关系到它们作为外科手术药物的应用，例如在器官移植中，其中这些化合物不但可用于保护在摘出前或过程中供体中的器官，保护摘出的器官，例如在用生理浴液处理或在其中贮存过程中，而且还可在转入受体过程中保护该器官。这些化合物还是在心脏及外周血管的血管形成的外科手术中有保护作用的有用药物。由于它们对局部缺血引起的损伤有保护作用，这些化合物还适于作为治疗神经系统(特别是CNS)的局部缺血的药物，其中它们适于治疗如中风或脑水肿。另外，式I化合物还适于治疗各种中风，如变应性、心原性、血容量减少性和细菌性中风。另外，本发明的式I化合物的区别性特征是对细胞增殖的强抑制作用，例如对成纤细胞增殖和血管平滑肌细胞的增殖。因此式I化合物适于作为细胞增殖作为原发或继发原因的疾病的有用治疗药，因此可用作抗动脉粥样硬化药，及对抗下列疾病的药物糖尿病晚期并发病、多发性癌、纤维化疾病如肺纤维化、肝纤维化或肾纤维化、器官肥大和增生，特别是前列腺肥大或前列腺增生。本发明化合物是细胞钠—质子泵(Na+/H+交换器)的有效抑制剂，在许多疾病(原发性高血压、动脉粥样硬化、糖尿病等)Na+/H+交换也升高，这在如红细胞、血小板或白细胞中易于测定。因此本发明化合物适于作为优异且简单的科研工具，例如它们用作诊断药，用于某些形式的高血压、以及动脉粥样硬化、糖尿病、增殖性疾病等的确定和区别中。另外，式I化合物适于预防性治疗，预防高血压如原发性高血压的发生。与已知化合物相比，本发明化合物显示水溶性明显改善。因此，它们更适合于静脉内给药。可经口服、肠外、静脉内、直肠或吸入给予含有化合物I的药物，优选的给药方法取决于疾病的具体临床表现。为此，化合物I可单独使用或与药物辅料一起使用，用于兽医和人体医疗中。适于预期药物制剂的辅料是本领域技术人员基于其专业知识所熟悉的。除溶剂、凝胶模型、栓剂基质、片剂辅料和其它活性化合物赋形剂外，还可以使用例如抗氧化剂、分散剂、乳化剂、防泡剂、香味增强剂、防腐剂增溶剂或染料。对于口服给药形式，将活性化合物与适于此目的添加剂如载体、稳定剂或惰性稀释剂混合，按常规方法制成适当的给药形式，如片剂、包衣片剂、硬明胶胶囊、或水性，醇性或油性溶液。可以使用的惰性赋形剂为例如阿拉伯树胶、氧化镁、碳酸镁、磷酸钾、乳糖、葡萄糖或淀粉，特别是玉米淀粉。对此，可制成干粒或湿粒。适宜的油性赋形剂或溶剂例如为植物油或动物油，如葵花油或鱼肝油。对于皮下或静脉内给药，将活性化合物，必要时与常规用于此目的物质如稳定剂、乳化剂或其它辅料一起，制成溶液、悬液或乳液。适合的溶剂例如为水、生理盐水，或醇如乙醇、丙醇、甘油、及糖溶液如葡萄糖或甘露糖醇溶液，或者以上提及的各种溶剂的混合物。适于以含溶胶或喷雾形式给药的药物制剂是，如溶剂、悬液或乳液，其中式I的活性化合物在药学上可接受的溶剂如(特别是)甲醇或水，或这些溶剂的混合物中。如果需要，该制剂还可以含有其它药物辅料如表面活性剂、乳化剂和稳定剂以及推进剂。这种制剂一般含有约0.1—10％，特别是约0.3—3％(重量)浓度的活性化合物。给予式I活性化合物的剂量和给药频率取决于所用化合物作用的效力和持续时间；另外还取决于所要治疗疾病的性质的严重性，以及所要治疗的哺乳动物的性别、年龄、体重和个体反应。平均而言，对于一个约75kg重的病人，式I化合物的日剂量为至少0.001mg/kg，优选0.01mg/kg，到至多10mg/kg，优选1mg/kg体重。在疾病急性发作时，如发生心肌梗塞后的片剂，可能需要更高剂量，特别是更多次给药，例如高达每天给药4次。特别当静脉内给药时，例如在特殊监护病房中梗塞病人可能需要高达100gm/天。MeOH甲醇DMF N，N—二甲基甲酰胺TMU N，N，N’，N’—四甲基脲NBS N—溴琥珀酸亚胺AIBN α，α—偶氮—二—异丁腈EI电子撞击DCI解吸/化学电离RT室温EA乙酸乙酯(EtOAc)DIP二异丙基醚MTB甲基叔丁基醚mp熔点HEP正庚烷DME二甲氧乙烷FAB快速原子轰击CH2Cl2二氯甲烷THF四氢呋喃eq当量ES电子喷雾电离Me甲基Et乙基Bn苄基CNS中枢神经系统盐水饱和NaCl水溶液制备苯甲酰胍(I)的一般步骤方法A从苯甲酸衍生物开始(II，L＝OH)将0.01mol式II苯甲酸衍生物溶于或悬浮于60ml无水THF中，然后加入1.78g(0.011mol)碳酰二咪唑。在室温搅拌2小时后，向反应溶液中加入2.95g(0.05M)胍。搅拌过夜后，减压蒸去THF(旋转蒸发器)，加入水，用2NHCl调节PH6—7，滤出相应的苯甲酰胍(式I)。如此得到的苯甲酰胍用盐酸或其它药理上可接受酸的水溶液、甲醇溶液或醚溶液处理，可转化为相应的盐。制备苯甲酰胍(I)的一般步骤方法B从苯甲酸烷酯开始(II，L＝O—烷基)将5mmol式II苯甲酸烷酯和25mmol胍(游离碱)溶于15ml异丙醇中或悬浮在15ml THF中，加热回流(一般反应2—5小时)直到转化完全(薄层层析检查)。减压蒸去溶剂(旋转蒸发器)，将残余物溶于300ml EA中，溶液每次用50ml NaHCO3溶液洗涤3次。用Na2SO4干燥，真空蒸去溶剂，残余物在硅胶上用适当的洗脱剂(如EA/MeOH 5∶1)层析。(成盐见方法A中)实施例1N—叔丁氧羰基—4—〔(4—胍基羰基—2—甲磺酰基)苯氧基〕苯丙氨酸 1.8g N—叔丁氧羰基—4—〔(4—甲氧羰基—2—甲磺酰基)苯氧基〕苯丙氨酸和1.1g胍按方法B反应，制得700mg无色固体。m.p.＞270℃Rf(丙酮/水10∶1)＝0.37MS(FAB)521(M＋H)+a)N—叔丁氧羰基—4—〔(4—甲氧羰基—2—甲磺酰基)苯氧基〕—苯丙氨酸将4.5g N—叔丁氧羰基—4—〔(4—甲氧羰基—2—甲磺酰基)苯氧基〕—苯丙氨酸苄酯和500mg 10％Pd/C在50ml MeOH中用常压氢气氢化20小时。滤出结晶，真空除去溶剂，用EA/MeOH10∶1进行层析，得到了2.1g无色粘性油。Rf(EA/MeOH 10∶1)＝0.12 MS(DCI)494(M＋H)+b)N—叔丁氧羰基—4—〔(4—甲氧羰基—2—甲磺酰基)苯氧基〕—苯丙氨酸苄酯2.8g N—叔丁氧羰基酪氨酸苄酯、2.2g 4—氟—3—三氟甲基苯甲酸甲酯和4.0g K2CO3在100ml DMF(无水)中于110℃搅拌45分钟。将反应混合物倾入500ml水中，用NaHSO4调节pH至2，用每次200ml EA萃取3次。萃取物用Na2SO4干燥，真空除去溶剂，得到4.2g无色油。Rf(DIP)＝0.12 MS(ES)584(M＋H)+实施例24—〔(4—胍基羰基—2—甲磺酰基)苯氧基)苯丙氨酸 将170mg实施例1的标题化合物悬浮在5ml CH2Cl2中，于RT下加入61μl三氟甲磺酸。在此温度下搅拌90分钟，并倾入50ml饱和K2HPO4水溶液中。用100ml EA萃取3次，萃取物用Na2SO4干燥，真空除去溶剂。得到125mg无定形固体。Rf(EA/MeOH1∶1)＝0.43 MS(ES)421(M＋H)+实施例3N—叔丁氧羰基—4—〔(4—胍基羰基—2—三氟甲基)苯氧基〕苯丙氨酸 按方法B，3.5g N—叔丁氧羰基—4—〔(4—甲氧羰基—2—三氟甲基)苯氧基〕苯丙氨酸用2.2g胍在10ml异丙醇中胍基化。得到1.68g无色固体，m.p.231℃。Rf(丙酮/水20∶1)＝0.30MS(FAB)512(M＋H)+a)N—叔丁氧羰基—4—〔(4—甲氧羰基—2—三氟甲基)苯氧基〕苯丙氨酸将4.6g N—叔丁氧羰基—4—〔(4—甲氧羰基—2—三氟甲基)苯氧基〕苯丙氨酸苄酯和860mg 10％的Pd/活性碳(含水量50％)在100ml甲醇中在常压H2下室温搅拌24h。滤除催化剂后，真空除去挥发性成分。得到3.5g无色油。Rf(EA/MeOH 10∶1)＝0.10MS(ES)484(M＋H)+b)N—叔丁氧羰基—4—〔(4—甲氧羰基—2—三氟甲基)苯氧基〕苯丙氨酸苄酯将4.0g BOC—Tyr—OBn、2.4g 4—氟—3—三氟甲基苯甲酸甲酯和7.0g Cs2CO3在30ml无水四甲基胍中于110℃搅拌2小时。冷却此混合物，用800ml EA稀释，用3×100ml水和3×100ml饱和NaCl溶液洗涤。用Na2SO4干燥有机相，真空除去溶剂。用DIP在硅胶上层析得到4.6g无色油。Rf(DIP)＝0.41MS(FAB)574(M＋H)+实施例44—〔(4—胍基羰基—2—三氟甲基)苯氧基〕苯丙氨酸，二盐酸盐 将0.8g N—叔丁氧羰基—4—〔(4—胍基羰基—2—三氟甲基)苯氧基〕苯丙氨酸溶于50ml CH2Cl2中，在0℃下加入277μl三氟甲磺酸。让混合物升至室温，在此过程中形成了块状沉淀。用50ml DME稀释混合物，室温下搅拌1小时。真空除去溶剂，残余物溶于15ml水中，用饱和NaHCO3水溶液调节混合物pH至7。滤除所形成的沉淀，用CH2Cl2/MEOH/H2O/HOAC 8∶4∶1∶1在硅胶上层析。将产物溶于2ml 4N HCl中，真空除去挥发性成分，得到100mg无色晶体，mp245℃。Rf(CH2Cl2/MeOH/H2O/HOAC 8∶4∶1∶1)＝0.27MS(FAB)411(M＋H)+实施例5N—叔丁氧羰基—4—〔(胍基羰基—2—乙酰基)苯氧基〕苯丙氨酸 按方法B，3.50g N—叔丁氧羰基—4—〔(4—正丁氧羰基—2—乙酰)苯氧基〕苯丙氨酸用200mg胍在2ml异丙醇中胍基化。得到170mg无色无定形固体。Rf(丙酮/水20∶1)＝0.20MS(FAB)485(M＋H)+a)N—叔丁氧羰基—4—〔(4—正丁氧羰基—2—乙酸基)苯氧基〕苯丙氨酸将460mg N—叔丁氧羰基—4—〔(4—正丁氧羰基—2—乙酰基)苯氧基〕苯丙氨酸苄酯和86mg 10％的Pd/活性碳(含水量50％)在10ml甲醇中在常压H2下室温搅拌24h。滤除催化剂后，真空除去挥发性成分。得到350mg无色油。Rf(EA/MeOH 10∶1)＝0.10MS(ES)500(M＋H)+b)N—叔丁氧羰基—4—〔(4—正丁氧羰基—2—乙酰基)苯氧基〕苯丙氨酸苄酯将8.1g BOC—Tyr—OBn、5.1g 4—氟—3—乙酰基苯甲酸正丁酯和14.2g Cs2CO3在60ml无水N—甲基吡咯烷酮中于110℃搅拌2小时。冷却此混合物，用1升EA稀释，用1×200ml水和3×100ml饱和NaCl溶液洗涤。用Na2SO4干燥有机相，真空除去溶剂。在硅胶上用DIP层析，得到8.6g无色油。Rf＝0.25MS(FAB)590(M＋H)+。c)4—氟—3—乙酰苯甲酸正丁酯将12.4g 2—氟—5—溴苯乙酮、30ml三正丁基胺、5.6g乙酸钯和10g 1，3—二(二苯基膦基)丙烷在80ml正丁醇和160mlDMF中于110℃搅拌3小时。将混合物冷却至室温，真空除去挥发性成分。残余物溶解于1升EA中，滤出含钯残余物，滤液用500ml 5％NaHSO4水溶液洗两次，用500ml水洗1次。用Na2SO4干燥混合物，真空除去溶剂，残余物用EA/HEP 1∶4在硅胶上层析，得到7.8g无色油。Rf(EA/HEP 1∶4)＝0.59MS(EI)239(M＋H)+a)2—氟—5—溴苯乙酮将20g 2—氟苯乙酮溶于76ml 96％的H2SO4中，室温下向此溶液中滴加20g二溴氰尿酸的96％ H2SO4(230ml)溶液。室温下搅拌此混合物1小时，然后倾入1公斤冰中，用200ml CH2Cl2萃取3次。混合物用Na2SO4干燥，真空除去溶剂。残余物进行分馏，得到12.4g沸点为70℃(2毫巴)的无色油。Rf(CH2Cl2)＝0.53MS(ES)217(M＋H)+实施例64—〔(4—胍基羰基—2—乙酰基)苯氧基〕苯丙氨酸，二盐酸盐 将80g N—叔丁氧羰基—4—〔(4—胍基羰基—2—乙酰基)苯氧基〕苯丙氨酸溶于5ml CH2Cl2中，在0℃下加入28μl三氟甲磺酸。让混合物升至室温，在此过程中形成了块状沉淀。用5ml DME稀释混合物，室温下搅拌1小时。真空除去溶剂，残余物溶于5ml水中，用饱和NaHCO3水溶液调节混合物pH至7。滤除所形成的沉淀，用CH2Cl2/MEOH/H2O/HOAC 8∶4∶1∶1在硅胶上层析。将产物溶于2ml 4N HCl中，真空除去挥发性成分，得到100mg无色晶体，mp 210℃。Rf(CH2Cl2/MeOH/H2O/HOAC 8∶4∶1∶1)＝0.20MS(FAB)385(M＋H)+实施例7N—叔丁氧羰基—4—〔(胍基羰基—2—异丙基)苯氧基〕苯丙氨酸 按方法B，1.75g N—叔丁氧羰基—4—〔(4—正丁氧羰基—2—异丙基)苯氧基〕苯丙氨酸用1.0g胍在10ml异丙醇中胍基化。得到950mg无色无定形固体。Rf(丙酮/水20∶1)＝0.25MS(FAB)485(M＋H)+a)N—叔丁氧羰基—4—〔(4—正丁氧羰基—2—异丙基)苯氧基〕苯丙氨酸将2.3g N—叔丁氧羰基—4—〔(4—正丁氧羰基—2—异丙基)苯氧基〕苯丙氨酸苄酯和400mg 10％的Pd/活性碳(含水量50％)在50ml甲醇中在常压H2下室温搅拌24h。滤除催化剂后，真空除去挥发性成分。得到1.8g无色油。Rf(EA/MeOH 10∶1)＝0.10MS(ES)500(M＋H)+b)N—叔丁氧羰基—4—〔(4—正丁氧羰基—2—异丙烯基)苯氧基〕苯丙氨酸苄酯将4.2g甲基三苯基鏻碘化物悬浮在100ml THF中，加入1.2g叔丁醇钾，于室温下搅拌3小时。然后注入5.9g N—叔丁氧羰基—4—〔(4—正丁氧羰基—2—乙酰基)苯氧基〕苯丙氨酸苄酯的50ml THF溶液，于室温下搅拌混合物30分钟。将反应混合物倾入100ml饱和NaHCO3水溶液中，用100ml EA萃取3次。萃取物用Na2SO4干燥，真空除去溶剂，残余物用DIP在硅胶上层析，得到2.7g无色油。Rf(DIP)＝0.35MS(FAB)588(M＋H)+实施例84—〔(4—胍基羰基—2—异丙基)苯氧基〕苯丙氨酸，二盐酸盐 将800mg N—叔丁氧羰基—4—〔(4—胍基羰基—2—异丙基)苯氧基〕苯丙氨酸溶于50ml CH2Cl2中，在0℃下加入280μl三氟甲磺酸。让混合物升至室温，在此过程中形成了块状沉淀。用50mlDME稀释混合物，室温下搅拌1小时。真空除去溶剂，残余物溶于50ml水中，用饱和NaHCO3水溶液调节混合物pH至7。滤除所形成的沉淀，用CH2Cl2/MEOH/H2O/HOAC 8∶4∶1∶1在硅胶上层析。将产物溶于20ml 4N HCl中，真空除去挥发性成分，得到320mg无色晶体，mp 230℃。Rf(CH2Cl2/MeOH/H2O/HOAC 8∶4∶1∶1)＝0.30MS(FAB)385(M＋H)+药理数据对家兔红细胞Na+/H+交换器的抑制给予新西兰白兔(Ivanovas)加2％胆固醇的标准食物计6周，以激活Na+/H+交换，并使得能够用火焰光度计测定通过Na+/H+交换进入红细胞的Na+流入。从耳动脉采血，并用25IU的钾—肝素使其不凝集。每个样品的一部分用于两次离心测定血细胞比容。每次100μl等份用于测定红细胞的起始Na+含量。为测定氨氯吡咪敏感性钠流入，每100μl血样在每份5ml高渗盐/蔗糖培养基中(mmol/l140NaCl、3KCl、150蔗糖、0.1哇巴因、20三—羟甲基氨基甲烷)在pH7.4 37℃下孵育。此红细胞用冰冷的MgCl2/哇巴因溶液(mmol/l112MgCl2、0.1哇巴因)洗涤3次，在2.0ml蒸馏水中溶血。用火焰光度法测定细胞内钠含量。从起始钠值和孵育后红细胞的钠含量之间的差计算Na+净流入。从用或不用3×10-4mol/l氨氯吡咪的情况下孵育后红细胞的钠含量之差得到可被氨氯吡咪抑制的钠流入。本发明化合物也用此步骤进行实验。结果Na+/H+交换器的抑制权利要求1.式I化合物或其药学上可接受的盐 其中三个取代基R(1)、R(2)和R(3)之一为—Y—4—〔(CH2)k—CHR(7)—(C＝O)R(8)〕—苯基，—Y—3—〔(CH2)k—CHR(7)—(C＝O)R(8)〕—苯基，或—Y—2—〔(CH2)k—CHR(7)—(C＝O)R(8)〕—苯基，其中每个苯基被1—2个选自F、Cl、—CF3、甲基、羟基、甲氧基和—NR(37)R(38)的取代基取代或未取代；R(37)和R(38)相互独立地为氢或—CH3；Y为一键、氧、—S—或—NR(9)；R(9)为氢或—(C1-4)烷基；R(7)为—OR(10)或—NR(10)R(11)；R(10)和R(11)相互独立地为氢、—(C1-8)烷基、—(C1-8)烷酰基、—(C1-8)—烷氧羰基、苄基、苄氧羰基；或R(10)为三苯甲基；R(8)为—OR(12)或—NR(12)R(13)；R(12)和R(13)相互独立地为氢、—(C1-8)烷基或苄基；k为0、1、2、3或4；R(1)、R(2)和R(3)的其它基团相互独立地为—(C1-8)烷基、—(C2-8)链烯基或—(CH2)mR(14)；m为0、1或2；R(14)为—(C3-8)环烷基或苯基，它被选自F、Cl、—CF3、甲基、甲氧基和—NR(15)R(16)的1—3个取代基取代或未取代；R(15)和R(16)为氢或—CH3；或R(1)、R(2)和R(3)的其它基团相互独立地为R(18)R(19)N(C＝Y’)NH—SO2—；Y’为氧，—S—或—N—R(20)；R(18)和R(19)相互独立地为氢、—(C1-8)烷基、—(C3-6)链烯基或—(CH2)1—R(21)；t为0、1、2、3或4；R(21)为—(C5-7)环烷基或苯基，它被选自F、Cl、—CF3、甲氧基和—(C1-4)烷基的1—3个取代基取代或未取代；或R(18)和R(19)一起为亚丁基或亚戊基，其中一个CH2基团可被氧、—S—、—NH—、—N—CH3或—N—苄基代替；R(20)如R(18)所定义或为脒；或R(1)、R(2)和R(3)的其它基团相互独立地为氢、F、Cl、Br、I、—CN、X—(CH2)p—(CqF2q＋1)、R(22)—SOu—、R(23)R(24)N—CO—、R(25)—CO—或R(26)R(27)N—SO2—，其中全氟烷基为直链或支链；X为一键、氧、—S—，或—NR(28)；u为0、1或2；p为0、1或2；q为1、2、3、4、5或6；R(22)、R(23)、R(25)和R(26)相互独立地为—(C1-8)烷基、—(C3-6)链烯基、—(CH2)n—R(29)或—CF3；n为0、1、2、3或4；R(28)为氢或—(C1-3)烷基；R(29)为—(C3-7)环烷基或苯基，它可被选自F、Cl、—CF3、甲基、甲氧基和—NR(30)R(31)的1—3个取代基取代或未取代；R(30)和R(31)为氢或—(C1-4)烷基；或R(23)、R(25)和R(26)为氢；R(24)和R(27)相互独立地为氢或—(C1-4)烷基；或R(23)和R(24)和R(26)和R(27)一起为亚丁基或亚戊基，其中一个CH2基团可被氧、—S—、—NH—、—N—CH3或—N—苄基所代替；或R(1)、R(2)和R(3)的其它基团相互独立地为—OR(35)或—NH(35)R(36)；R(35)和R(36)相互独立地为氢或—(C1-6)烷基；或R(35)和R(36)一起为亚丁基到亚庚基，其中一个CH2基团可被氧、—S—、—NH—、—N—CH3或—N—苄基代替；R(4)和R(5)相互独立地为氢、—(C1-4)烷基、F、Cl、—OR(32)、—NR(33)R(34)或—CrF2r＋1；R(32)、R(33)和R(34)相互独立地为氢或—(C1-3)烷基；r为1、2、3或4。2.权利要求1的式I化合物，其中R(1)为—(C1-4)烷基、—(C2-4)链烯基或—(CH2)mR(14)；m为0、1或2；R(14)为—(C5-6)环烷基或苯基，它可被选自F、Cl、—CF3、甲基、甲氧基和—NR(15)R(16)的1—2个取代基取代或未取代；R(15)和R(16)相互独立地为氢或—CH3；或R(1)为R(18)R(19)N—(C＝Y’)—NH—SO2—；Y’为氧、—S—或—N—R(20)；R(18)和R(19)相互独立地为氢、—(C1-4)烷基、—(C3-4)链烯基或—(CH2)t—R(21)；t为0、1或2；R(21)为—(C5-6)环烷基或苯基，它可被选自F、Cl、—CF3、甲氧基和甲苯的1—2个取代基取代或未取代；或R(18)和R(19)一起为亚丁基或亚戊基，其中一个CH2基团可被氧、—S—、—NH—、—N—CH3或N—苄基代替；R(20)如R(18)所定义或为脒；或R(1)为氢、F、Cl、Br、I、—CN、R(22)—SO2—、R(23)R(24)N—CO—，R(25)—CO—或R(26)R(27)N—SO2—；R(22)、R(23)、R(25)和R(26)相互独立地为—(C1-4)烷基、—(C3-4)链烯基、—(CH2)n—R(29)或—CF3；n为0、1或2；R(29)为—(C5-6)环烷基或苯基，它可被选自F、Cl、—CF3、甲基、甲氧基和一NR(30)R(31)的1—2个取代基取代或未取代；R(30)和R(31)相互独立地为氢或甲基；或R(23)、R(25)和R(26)为氢；R(24)和R(27)相互独立地为氢或甲基；或R(23)和R(24)和R(26)和R(27)一起为亚丁基或亚戊基，其中一个CH2基团可被氧、—S—、—NH—、—N—CH3或—N一苄基所代替；或R(1)为—OR(35)或—NR(35)R(36)；R(35)和R(36)相互独立地为氢或—(C1-4)烷基；或R(35)和R(36)一起为亚丁基或亚戊基，其中一个CH2基团可被氧、—S—、—NH—、—N—CH3或—N—苄基代替；取代基R(2)或R(3)之一为—Y—4—〔(CH2)k—CHR(7)—(C＝O)R(8)〕—苯基，—Y—3—〔(CH2)k—CHR(7)—(C＝O)R(8)〕—苯基，或—Y—2—〔(CH2)k—CHR(7)—(C＝O)R(8)〕—苯基，其中每个苯基被选自F、Cl、—CF3、甲基、羟基、甲氧基或—NR(37)R(38)的1—2个取代基取代或未取代；R(37)和R(38)相互独立地为氢或—CH3；Y为一键、氧、—S—或—NR(9)；R(9)为氢或甲基；R(7)为—OR(10)或—NR(10)R(11)；R(10)和R(11)相互独立地为氢、—(C1-5)烷基、(C1-5)烷酰基、—(C1-4)烷氧羰基、苄基、或苄氧羰基；或R(10)为三苯甲基；R(8)为—OR(12)或—NR(12)R(13)；R(12)和R(13)相互独立地为氢、—(C1-4)烷基或苄基；k为0、1或2；R(2)或R(3)取代基的另一个为—(C1-4)烷基、氢、F、Cl、Br或I；R(4)和R(5)相互独立地为氢、甲基、F、Cl、—OR(32)、—NR(33)R(34)或—CH3；R(32)、R(33)和R(34)相互独立地为氢或甲基。3.权利要求1或2的式I化合物，其中R(1)为—(C1-4)烷基、—(C2-4)链烯基或—(CH2)mR(14)；m为0、1或2；R(14)为—(C5-6)环烷基或苯基，它可被选自F、Cl、—CF3、甲基、甲氧基和—NR(15)R(16)的1—2个取代基所取代或未取代；R(15)和R(16)相互独立地为氢或甲基；或R(1)为氢、F、Cl、Br、I、—CN、R(22)—SO2—、R(23)R(24)N—CO—、R(25)—CO—或R(26)R(27)N—SO2—；R(22)、R(23)、R(25)和R(26)相互独立地为甲基或—CF3；或R(23)、R(25)和R(26)为氢；R(24)和R(27)相互独立地为氢或甲基；或R(1)为—OR(35)或—NR(35)R(36)；R(35)和R(36)相互独立地为氢或—(C1-4)烷基；或R(35)和R(36)一起为亚丁基或亚戊基，其中一个CH2基团可被氧、—S—、—NH—、—N—CH3、或—N—苄基所代替；取代基R(2)和R(3)之一为—Y—4—〔(CH2)k—CHR(7)—(C＝O)R(8)〕—苯基，—Y—3—〔(CH2)k—CHR(7)—(C＝O)R(8)〕—苯基，或—Y—2—〔(CH2)k—CHR(7)—(C＝O)R(8)〕—苯基，其中每个苯基被选自F、Cl、—CF3、甲基、羟基、甲氧基和—NR(37)R(38)的一个取代基取代或未取代；R(37)和R(38)相互独立地为氢或—CH3；Y为一键、氧、—S—或—NR(9)；R(9)为氢或甲基；R(7)为—NR(10)R(11)；R(10)和R(11)相互独立地为氢、—(C1-4)烷基、—(C1-5)烷酰基、—(C1-4)烷氧羰基、苄基或苄氧羰基；或R(10)为三苯甲基；R(8)为—OR(12)或—NR(12)R(13)；R(12)和R(13)相互独立地为氢、—(C1-4)烷基或苄基；取代基R(2)和R(3)的另一个为—(C1-4)烷基、氢、F或Cl；R(4)和R(5)相互独立地为氢、甲基、F、Cl、—OR(32)、—NR(33)R(34)或—CF3；R(32)、R(33)和R(34)相互独立地为氢或甲基4.权利要求1中要求的式I化合物的制备方法，其包括式II化合物与胍反应 其中R(1)到R(5)如权利要求1所定义，L为容易被亲核取代的离去基团。5.权利要求1中所要求的化合物I用于制备治疗心律失常的药物的用途。6.权利要求1中所要求的化合物I用于制备治疗心绞痛的药物的用途。7.一种治疗心律失常的方法，其包括将有效量的权利要求1所要求式I化合物与常规添加剂混合，并以适当给药形式施用。8.权利要求1中所要求的化合物I用于制备治疗或预防心肌梗塞的药物的用途。9.权利要求1中所要求的化合物I用于制备治疗或预防心绞痛的药物的用途。10.权利要求1中所要求的化合物I用于制备治疗或预防心肌缺血的药物的用途。11.权利要求1中所要求的化合物I用于制备治疗或预防外周和中枢神经系统缺血状态的药物的用途。12.权利要求1中所要求的化合物I用于制备治疗或预防外周器官和肢体缺血的药物的用途。13.权利要求1中所要求的化合物I用于制备治疗中风状态的药物的用途。14.权利要求1中所要求的化合物I用于制备用于外科手术和器官移植的药物的用途。15.权利要求1中所要求的化合物I用于制备用于保存及贮存外科手术移植物的药物的用途。16.权利要求1中所要求的化合物I用于制备用于治疗以细胞增殖为原发或继发原因的疾病的药物的用途，及它们作为抗动脉粥样硬化药，抗糖尿病晚期并发病、多发癌、纤维化病如肺纤维化、肝纤维化或肾纤维化、和肥大增生的药物的用途。17.权利要求1中所要求的化合物用于制备抑制Na+/H+交换器，诊断高血压和增殖性疾病的科研工具的用途。18.含有有效量的权利要求1—3的一种或多种所要求的化合物I的治疗药。全文摘要公开了式I的苯甲酰胍和其药学上可接受的盐，其中R(1)到R(5)的定义见说明书。它们通过化合物II与胍反应制得，适于制备治疗心血管系统疾病的药物。文档编号C07C323/00GK1127749SQ9511626公开日1996年7月31日 申请日期1995年9月6日 优先权日1994年9月9日发明者H-W·克里曼, H-J·朗, J-R·施瓦茨, A·维谢特, W·绍尔茨, U·阿尔布斯 申请人:赫彻斯特股份公司