一种橡胶树HCN快速检测方法及其应用与流程

一种橡胶树hcn快速检测方法及其应用
技术领域
1.本发明涉及生物化学检测技术领域，特别涉及一种橡胶树hcn快速检测方法及其应用。


背景技术：

2.天然橡胶在弹性、耐磨性和延展性等方面具有合成橡胶不可替代的优势，在一些重要工业领域(如航空、航天和重型汽车等制造业)具有广泛的应用。巴西橡胶树(hevea brasiliensis，简称橡胶树)是天然橡胶的主要来源。巴西橡胶树是大戟科植物，也是我国热带地区主要的经济作物。巴西橡胶树传统育种周期约为30年，早期产量预测是缩短育种周期的关键。
3.巴西橡胶树是典型的产氰植物，其树叶、树干以及种子等所有组织中都累积了相当数量的亚麻苦苷和亚麻苦苷酶，能强烈生氰。对不同产胶潜力橡胶树品系的生氰潜力比较发现，产胶潜力与树叶的生氰潜力成正比。因此，可通过检测橡胶树幼苗子代的氰化氢含量预测其产胶潜力，从而缩短育种周期。
4.由上述可知，我国天然橡胶生产中亟需一种灵敏度高、携带方便、检测时间短、使用安全、成本低的hcn检测方法。


技术实现要素：

5.鉴以此，本发明的目的在于提出一种橡胶树hcn快速检测方法，用于检测橡胶树树叶的氰化氢含量，该检测方法灵敏度高、携带方便、检测时间快速、使用安全、成本低，可用于天然橡胶生产的现场检测。
6.本发明的技术方案是这样实现的：
7.以氯仿溶解n,n,n',n'
‑
四甲基
‑
4,4'
‑
二氨基二苯甲烷和乙酰乙酸乙酯铜，可制成一定浓度的显色液，显色液与氰化氢结合反应可生成蓝色的化合物，采用滤纸浸泡显色液可用于橡胶树叶具有挥发性氰化氢含量的检测。滤纸纤维与有机溶剂的亲和力较弱，需要浸泡一定时间有利于浸透滤纸内部，但浸泡时间过长则容易将滤纸浸湿变软，影响显色效果。一定浓度的显色液可充分地与橡胶树叶的hcn作用，若显色液浓度过高，蓝色化合物易被显色液成分覆盖，出现不显色的现象，若显色液浓度过低，不易与hcn反应，出现不显色或显色情况不明显的现象。
8.钠离子和钾离子易与磷酸溶液反应生成缓冲溶液，同时锌离子在常温下可在物体表面生成一层保护膜，三种金属离子溶液可起到稳定显色液中的组分作用，同时钾离子具有碱性，可对酸性的氰化氢气体具有一定的吸附作用。
9.一种橡胶树hcn快速检测方法，包括以下检测步骤：
10.(1)按质量比为1～2：1～2，取n,n,n',n'
‑
四甲基
‑
4,4'
‑
二氨基二苯甲烷和乙酰乙酸乙酯铜，混合均匀，加入氯仿溶解，制成质量浓度为0.5～2.5％的显色液；
11.(2)将滤纸浸入显色液，浸泡3
‑
5min，取出，晾干，滤纸表面喷施稳定剂，再次晾干，
得到检测试纸；
12.(3)取橡胶树叶放入样品盒中，将检测试纸盖于样品盒顶部，静置5min后，完成橡胶树hcn含量检测。
13.进一步说明，所述稳定剂由金属离子溶液和质量浓度为30～50g/l的磷酸溶液按体积比为2～3：2～3混合而成。
14.进一步说明，所述金属离子溶液中含有zn
2
、na

和k

离子。
15.进一步说明，金属离子溶液由锌离子溶液、钠离子溶液和钾离子溶液按照体积比为2～3：2～3：1～3混合制得。
16.进一步说明，所述稳定剂喷施量为0.25～0.3ml/cm2。
17.与现有技术相比，本发明的有益效果为：本发明的hcn的检测方法具有灵敏度高、携带方便、检测时间快速、使用安全、成本低的特点，可用于橡胶树的氰化氢含量的检测。
18.另外，本发明采用稳定剂改善检测试纸，可在更低的显色液浓度下，使处理后的检测试纸能够更好地显色，检出限更低，灵敏度更高；本发明采用金属离子溶液和磷酸溶液制备稳定剂，在含显色液的滤纸表面形成金属离子层，可促进滤纸对氰化氢的吸收，使氰化氢充分地与显色液结合，金属离子与磷酸生成的缓冲溶液还可起到稳定显色液的作用，可进一步提高显色液的显色程度，检测的灵敏度明显提高。
附图说明
19.图1为本发明可大量检测橡胶树叶hcn含量的容器示意图
20.图2为本发明实验组1检测橡胶树叶hcn含量的显色效果图，t1h
‑
i和t1h
‑
o为显色液浓度0.1％、t1t
‑
i和t1t
‑
o为显色液浓度0.25％、t2h
‑
i和t2h
‑
o为显色液浓度0.5％、t2t
‑
i和t2t
‑
o为显色液浓度0.83％、t3h
‑
i和t3h
‑
o为显色液浓度1％、t3t
‑
i和t3t
‑
o为显色液浓度1.25％、t4h
‑
i和t4h
‑
o为显色液浓度2.5％和t4t
‑
i和t4t
‑
o为显色液浓度5％。
具体实施方式
21.为了更好理解本发明技术内容，下面提供具体实施例，对本发明做进一步的说明。
22.本发明实施例所用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。
23.本发明实施例所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
24.一、实验方法
25.实验组1：
26.(1)按质量比1：1，取n,n,n',n'
‑
四甲基
‑
4,4'
‑
二氨基二苯甲烷5g和乙酰乙酸乙酯铜5g，混合均匀，加入氯仿溶解，分别制得质量浓度为0.1％、0.25％、0.5％、0.83％、1％、1.25％、2.5％和5％的显色液；
27.(2)将滤纸浸入显色液，浸泡3min，取出，晾干，滤纸表面喷施稳定剂，再次晾干，得检测试纸；
28.(3)取橡胶树叶放入样品盒中，将检测试纸盖于样品盒顶部，静置5min后，完成橡胶树hcn含量检测。
29.所述稳定剂，按体积比为2：3，由金属离子溶液20ml和质量浓度为40g/l的磷酸溶液30ml搅拌混合而成，稳定剂喷施量为0.28ml/cm2。
30.所述金属离子溶液，按体积比为2：2：1，由8ml的znso4、8ml的nacl和4ml的kcl溶液，混合而成。
31.实验组2：
32.(1)按质量比1：2，取n,n,n',n'
‑
四甲基
‑
4,4'
‑
二氨基二苯甲烷5g和乙酰乙酸乙酯铜10g，混合均匀，加入氯仿溶解，分别制成质量浓度为0.1％、0.25％、0.5％、0.83％、1％、1.25％、2.5％和5％的显色液；
33.(2)将滤纸浸入显色液，浸泡5min，取出，晾干，滤纸表面喷施稳定剂，再次晾干，得检测试纸；
34.(3)取橡胶树叶放入样品盒中，将检测试纸盖于样品盒顶部，静置5min后，完成橡胶树hcn含量检测。
35.所述稳定剂，按体积比为2：2，由金属离子溶液40ml和质量浓度为50g/l的磷酸溶液40ml搅拌混合而成，稳定剂喷施量为0.28ml/cm2。
36.所述金属离子溶液，按体积比为2：3：3，由10ml的zncl2、15ml的nacl和15ml的kcl溶液，混合而成。
37.实验组3：
38.(1)按质量比2：1，取n,n,n',n'
‑
四甲基
‑
4,4'
‑
二氨基二苯甲烷10g和乙酰乙酸乙酯铜5g，混合均匀，加入氯仿溶解，分别制成质量浓度为0.1％、0.25％、0.5％、0.83％、1％、1.25％、2.5％和5％的显色液；
39.(2)将滤纸浸入显色液，浸泡5min，取出，晾干，滤纸表面喷施稳定剂，再次晾干，得检测试纸；
40.(3)取橡胶树叶放入样品盒中，将检测试纸盖于样品盒顶部，静置5min后，完成橡胶树hcn含量检测。
41.所述稳定剂，按体积比为3：2，由金属离子溶液30ml和质量浓度为30g/l的磷酸溶液20ml搅拌混合而成，稳定剂喷施量为0.3ml/cm2。
42.所述金属离子溶液，按体积比为2：2：2，由10ml的zncl2、10ml的nacl和10ml的k2so4溶液，混合而成。
43.对比组1：按质量比3：1，取n,n,n',n'
‑
四甲基
‑
4,4'
‑
二氨基二苯甲烷15g和乙酰乙酸乙酯铜5g，混合均匀，加入氯仿溶解分别制得质量浓度为0.1％、0.25％、0.5％、0.83％、1％、1.25％、2.5％和5％的显色液；其余步骤同实验组1。
44.对比组2：稳定剂按体积比为1：2，由金属离子溶液30ml和质量浓度为60g/l的磷酸溶液60ml搅拌混合而成，稳定剂喷施量为0.28ml/cm2，金属离子溶液，按体积比为1：1：3，由6ml的znso4、6ml的nacl和18ml的kcl溶液，混合而成；其余步骤同实验组1。
45.对比组3：将滤纸浸入显色液，浸泡3min，取出，晾干，喷施清水，再次晾干，得检测试纸，喷施量为0.28ml/cm2；其余步骤同实验组1。
46.对照组：将滤纸浸入清水，浸泡3min，取出，晾干，喷施清水，再次晾干，得检测试纸，喷施量为0.28ml/cm2；其余步骤同实验组1。
47.二、实验结果
48.1、根据上述试验方法，分别取橡胶树叶10mg，检测不同显色液浓度下的滤纸的显色情况，结果如表1：
[0049][0050]
由上表可知，实验组在显色液浓度为0.5％～2.5％时，均表现出显色效果；对比组1在显色液浓度为1％以上时显色；对比组2在显色液浓度为0.83～1.25％时显色；对比组3的滤纸仅在显色液浓度为2.5％时显色。
[0051]
2、取实施验组制得的显色液浓度0.5％和2.5％，分别检测不同橡胶树叶量的滤纸的显色情况，结果如表2：
[0052][0053]
由上表可知，样品量5～35mg分别在显色液浓度0.5％和2.5％时，表现出不同的显色效果。样品量15～35mg时，实验组的滤纸均表现出显色效果；对比组1在显色液浓度为2.5％时，表现良好的显色效果，0.5％浓度时25mg和35mg样品量才显色；对比组2在不同显色液浓度下的样品量有不同的显色效果；对比组3的样品量5～25mg在0.5％浓度的显色液时均不显色，在显色液浓度为2.5％时，样品量35mg才显色。
[0054]
实验表明，检测橡胶树树叶的hcn含量时，橡胶树叶用量最低为10mg；添加稳定剂可改善显色效果，使检测试纸检出限更低、灵敏度更高。
[0055]
综上所述，本发明采用特定配比制备显色液，并通过添加稳定剂，可获得用于检测橡胶树叶的氰化氢含量的hcn检测试纸，该hcn检测试纸具有呈色效果好、检出限低和灵敏度高等优点，可实现橡胶树叶氰化氢含量的快速检测。
[0056]
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。