一种解脂耶氏酵母杂合启动子及其应用的制作方法

技术特征：
1.一种解脂耶氏酵母杂合启动子，其特征在于，所述杂合启动子为将至少一个解脂耶氏酵母的xpr2基因的上游激活序列uas1b和解脂耶氏酵母烯醇酶基因启动子串联得到。2.如权利要求1所述的解脂耶氏酵母杂合启动子，其特征在于，所述解脂耶氏酵母的xpr2基因的上游激活序列uas1b小于等于32个重复单元。3.如权利要求2所述的解脂耶氏酵母杂合启动子，其特征在于，所述解脂耶氏酵母的xpr2基因的上游激活序列uas1b为4、8、12、16、20、24、28或32个重复单元。4.如权利要求1
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3任一所述的解脂耶氏酵母杂合启动子，其特征在于，所述解脂耶氏酵母烯醇酶基因启动子为解脂耶氏酵母烯醇酶基因的起始密码子向前截取小于等于1300bp且大于等于100bp的任意长度。5.如权利要求4所述的解脂耶氏酵母杂合启动子，其特征在于，所述解脂耶氏酵母烯醇酶基因启动子为解脂耶氏酵母烯醇酶基因的起始密码子向前截取100bp、125bp、150bp、175bp、200bp、300bp、400bp、700bp、1000bp或1300bp的序列。6.如权利要求1
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5任一所述的解脂耶氏酵母杂合启动子用于启动异源目的基因表达的应用。7.如权利要求6所述的应用，其特征在于，所述应用具体为：将所述解脂耶氏酵母杂合启动子依次与报告基因和异源目的基因连接，以启动目的基因表达。8.如权利要求7所述的应用，其特征在于，所述报告基因为绿色荧光蛋白基因。9.如权利要求6或7所述的应用，其特征在于，所述异源目的基因为脂肪酶基因。10.如权利要求9所述的应用，其特征在于，所述脂肪酶基因为疏棉状嗜热丝胞菌脂肪酶基因。

技术总结
本发明属于基因工程技术领域，更具体地，涉及一种解脂耶氏酵母杂合启动子及其应用。本发明通过将不同数量的启动子上游激活序列和解脂耶氏酵母烯醇酶基因启动子串联，构建了一系列解脂耶氏酵母杂合启动子，并将置于报告基因及目的基因上游，控制基因表达以获取特定的最终产物产量，证实了烯醇酶杂合启动子用于解脂耶氏酵母中重组蛋白高效生产的可行性。本发明获得的杂合启动子具有大于或小于解脂耶氏酵母中现有启动子的强度，可适用于异源蛋白高效生产等应用，有助于解决解脂耶氏酵母中的杂合启动子可用性不足的问题，为该宿主的基因工程改造和合成生物学研究与应用提供了新的有效元件。效元件。效元件。


技术研发人员：闫云君 李文娟 周清华 焦梁成 李云翀 朱梦琴 杨敏
受保护的技术使用者：华中科技大学
技术研发日：2021.10.28
技术公布日：2022/1/4