一步式高效筛选黄曲霉毒素绿色防控材料的方法及其应用与流程

技术特征：
1.一步式高效筛选黄曲霉毒素绿色防控材料的方法，其特征在于：测定黄曲霉毒素绿色防控材料试验处理组和对照组指示分子aft-yjfzp008含量，计算绿色防控材料对指示分子aft-yjfzp008抑制率，根据抑制率结果，高效筛选黄曲霉毒素绿色防控材料，所述的指示分子aft-yjfzp008氨基酸序列如seq id no.1所示。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的黄曲霉毒素绿色防控材料试验处理组和对照组可以但不限于通过如下步骤实现：花生仁粉末、黄曲霉产毒菌孢子、系列候选绿色防控材料混合在培养基中培养一定时间，获得试验处理组，其中用培养基代替候选绿色防控材料培养一定时间则获得对照组。3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述的花生品种不限于中花6号、鲁花8。4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述的培养基是液态的沙氏培养基，或其他具有类似功效的培养基。5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的指示分子aft-yjfzp008含量可以但不限于通过如下步骤实现：a处理组与对照组培养一定时间后，对培养物充分匀浆，制备成待测溶液，加入到孔底包被有指示分子aft-yjfzp008的纳米抗体或单克隆抗体的酶标板孔中，反应，洗板；b加入指示分子aft-yjfzp008多克隆抗体反应，洗板；c加入与指示分子aft-yjfzp008多克隆抗体发生结合反应的辣根过氧化物酶标记抗体，反应，洗板；d加入显色液反应；加入终止液，酶标仪读取并计算待测溶液中aft-yjfzp008的含量；用系列浓度的起标准物质作用的指示分子aft-yjfzp008纯品溶液，替换待测溶液，用于制作标准曲线，再根据酶标仪读数计算指示分子aft-yjfzp008含量；所述的绿色防控材料对指示分子aft-yjfzp008抑制率，通过如下方式计算：抑制率＝(对照组aft-yjfzp008含量-试验处理组aft-yjfzp008含量)/对照组aft-yjfzp008含量
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100％。6.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：所述的孔底包被指示分子aft-yjfzp008的纳米抗体或单克隆抗体的酶标板，其制备方法为：将aft-yjfzp008的纳米抗体或单克隆抗体溶解在elisa包被缓冲液中，形成0.2-8.0μg/ml的包被液，再加入至酶标板中，4℃放置过夜或者37℃放置不少于2h后，去除上述酶标板中包被液，再用elisa常规洗液洗涤酶标板；然后加elisa常规封闭液，放置室温或37℃封闭不少于1h后，再弃去封闭液，再用elisa常规洗液洗涤酶标板。7.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：所述的elisa显色液是指elisa常规的双氧水与tmb显色液。8.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：所述的终止液是指elisa常规的显色终止液2mol/l硫酸水溶液。9.权利要求1-8中任一项所述的方法在筛选黄曲霉毒素绿色防控材料的应用。

技术总结
本发明涉及一步式高效筛选黄曲霉毒素绿色防控材料的方法及其应用。测定黄曲霉毒素绿色防控材料试验处理组和对照组指示分子AFT-YJFZP008含量，计算绿色防控材料对指示分子AFT-YJFZP008抑制率，根据抑制率结果，高效筛选黄曲霉毒素绿色防控材料，所述的指示分子AFT-YJFZP008氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。其可用于一步式筛选出同时抑制黄曲霉毒素源头合成及其产毒菌生长的黄曲霉毒素绿色防控材料，易操作，实用性强，容易推广应用，对发展黄曲霉毒素微生物防控技术与保障食品安全具有重要意义。有重要意义。


技术研发人员：张奇 马飞 岳晓凤 李培武
受保护的技术使用者：中国农业科学院油料作物研究所
技术研发日：2021.09.07
技术公布日：2022/1/7