一种植物乳杆菌胞外多糖的制备方法及其应用

技术特征：
1.一种植物乳杆菌胞外多糖的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：s1、菌种活化：将植物乳杆菌pa01活化后得到种子发酵液；s2、扩大培养：将步骤s1中的种子发酵液按体积比3:100接入扩大培养基中，静置培养，得到发酵液；s3、除菌体：将步骤s1中的发酵液离心，除去菌体沉淀，保留上清液；s4、除蛋白：向步骤s3中所得上清液中加入三氯乙酸试剂，4℃过夜，经离心，保留上清液；s5、醇沉：向步骤s4中所得上清液中加入乙醇，静置后离心取沉淀，收集沉淀溶于水得到粗多糖液，并将粗多糖液进行透析冻干，得到粗胞外多糖；s6、将步骤s5中的粗胞外多糖配置成30mg/ml溶液，经deae-cellulose52离子交换柱洗脱，其中，洗脱液为0.1mol/l nacl溶液，然后再减压浓缩，经过真空冷冻干燥，得到胞外多糖冻干粉。2.根据权利要求1所述的一种植物乳杆菌胞外多糖的制备方法，其特征在于：所述步骤s2中的培养条件为：ph为6.2-6.8，发酵温度34
±
3℃，接种量3％，发酵时间为36h。3.根据权利要求1所述的一种植物乳杆菌胞外多糖的制备方法，其特征在于：所述步骤s5中的上清液与乙醇的体积比为1:3。4.根据权利要求1所述的一种植物乳杆菌胞外多糖的制备方法，其特征在于：所述步骤s5中的粗多糖液与sevag试剂的体积比为25:1。5.根据权利要求1所述的一种植物乳杆菌胞外多糖的制备方法，其特征在于：所述步骤s5中的乙醇为95％的乙醇。6.根据权利要求1所述的一种植物乳杆菌胞外多糖的制备方法，其特征在于：所述胞外多糖冻干粉中的单糖组成为甘露糖：葡萄糖：半乳糖：阿拉伯糖：氨基葡萄糖＝74.06：14.53：6.16：3.41：1.84。7.根据权利要求1所述的一种植物乳杆菌胞外多糖的制备方法，其特征在于：所述胞外多糖冻干粉中的糖苷键为t-manp、
→
2,6)-manp-(1
→
、
→
2)-manp-(1
→
、
→
2)-glcp-(1
→
、3-glcp-(1
→
和
→
6)-manp-(1
→
，含量分别为36.186％、25.953％、10.589％、5.295％、4.534％、4.235％。8.根据权利要求1所述的植物乳杆菌胞外多糖的应用，其特征在于：植物乳杆菌pa01胞外多糖在制备免疫增强剂中的应用。

技术总结
本发明公开了一种植物乳杆菌胞外多糖的制备方法及其应用，包括以下步骤：S1、菌种活化：将植物乳杆菌PA01活化后得到种子发酵液；S2、扩大培养：将步骤S1中的种子发酵液按体积比3:100接入扩大培养基中，静置培养，得到发酵液；S3、除菌体：将步骤S1中的发酵液离心，除去菌体沉淀，保留上清液；S4、除蛋白：向步骤S3中所得上清液中加入三氯乙酸试剂，4℃过夜，经离心，保留上清液，本发明的有益效果是：本发明通过将植物乳杆菌PA01活化，接种至液体发酵培养基进行扩大发酵培养，获得发酵液，并对发酵液进行除菌体、除蛋白、醇沉、透析，并经离子交换柱洗脱，得到胞外多糖，其具有新的结构，组分均一，并且其具有良好的免疫调节效果。并且其具有良好的免疫调节效果。并且其具有良好的免疫调节效果。


技术研发人员：杨欣
受保护的技术使用者：西北农林科技大学
技术研发日：2022.02.28
技术公布日：2022/6/1