一种抑制血糖的天然化合物提取工艺的制作方法

1.本技术属于天然药物化学技术领域，尤其涉及一种抑制血糖的天然化合物提取工艺。


背景技术：

2.糖尿病是主要表征为体内血糖量长时间维持在高位，是近年来较为常见的一类代谢性疾病，其患者体内糖、脂肪、蛋白质等指标，会发生连锁性的紊乱，易导致高血压、肾脏病变、血管病变等并发症，因其患病量持续走高，已经成为严重威胁人类健康的世界性公共卫生问题。
3.在临床上，又可将糖尿病分为1型和2型，其中占患者的主要组成为2型糖尿病患者，比例可达到全部糖尿病患者的90％。且由于糖尿病自身的属性，利用药品控制易引起体内激素水平的变化，导致疗效有限并长期依赖的情况发生，长期服用断药后迅速复发、长期用药后毒副作用大、可能诱发并加重并发症等缺陷。因此，近年来，为了给临床防治糖尿病及其并发症提供更多的选择，越来越多的学者青睐于通过天然植物资源，辅助糖尿病治疗。
4.其中，根据《千金月令》的记载，黄药子的使用历史可以追溯至唐代，为薯蓣科植物黄独(dioscorea bulbifera l)的块茎，又名黄药、黄药根、黄独等，其内富含甾体皂苷、二萜内酯、黄酮类、多糖、微量元素等成分。性味苦、平，归肝、胃、心、肺经，有消痰软坚、凉血解毒之功，抗缺碘性甲状腺肿、抗瘤、抗病毒、抗菌、止血、抗炎等作用显著，疗效确切。我国黄药子的资源较为丰富，民间药用食用基础深厚，但目前本领域中，对黄药子种质资源、物质基础、质量评价、生物活性等方面的现代研究均起步较晚。而黄药子虽对多种疾病具有独到的治疗作用，但未见于在降血糖方面的使用。
5.因此，亟需一种抑制血糖的天然化合物提取工艺。


技术实现要素：

6.本技术实施方式提供了一种抑制血糖的天然化合物提取工艺，能够克服现有技术中对天然降血糖药物开发不足的技术问题。
7.本技术实施方式，提供了一种抑制血糖的天然化合物提取工艺，包括：
8.醇提，取黄药子(dioscoreaceae)粉碎后，醇提，浓缩提取液，去除溶剂后，得到醇提物；
9.萃取，取醇提物加去离子水混合均匀，采用有机溶剂萃取1-2次，干燥，得到提取物，即为天然降血糖化合物。
10.采用上述方案，能够对黄药子中的降血糖成分进行充分利用，且所得的提取物为天然化合物。
11.可选地，所述醇提步骤中，醇的体积分数为60％-90％，所述黄药子与醇的重量比为1:10-20。
12.进一步地，所述醇提步骤中，醇采用乙醇。
13.进一步地，所述醇提步骤中，醇采用乙醇，醇的体积分数为90％，所述黄药子与醇的重量比为1:15。
14.采用上述方案，能够促进醇提取中，能够尽可能多的包含黄药子中的有效成分，并保证具有较快的醇提取速率。
15.可选地，所述萃取步骤中，有机溶剂采用乙酸乙酯、磷酸三丁脂、正丙醇、正丁醇中的一种或者几种。
16.进一步地，所述有机溶剂采用重量比为1:0.1-0.5:0.1-0.2的乙酸乙酯及磷酸三丁脂、正丙醇混合物。
17.进一步地，所述萃取步骤中，去离子水与醇提物用量的重量比为1:10-50，有机溶剂与醇提物用量的重量比为1:30-80。
18.进一步地，所述萃取步骤中，有机溶剂采用重量比为1:0.3:0.2的乙酸乙酯及磷酸三丁脂、正丙醇混合物，去离子水与醇提物用量的重量比为1:40，有机溶剂与醇提物用量的重量比为1:50。
19.采用上述方案，能够有效去除醇提过程中引入的杂质，并最大限度保留提取物的降血糖效果。
20.可选地，所述抑制血糖的天然化合物提取工艺还包括：层析，取提取物加重量比为1:0.2-0.6去离子水，完全溶解，调溶液ph值至5.0-6.0，采用聚酰胺柱水洗至molish反应阴性，改用6-8倍柱体积的体积分数为20％-25％甲醇洗脱，收集甲醇洗脱部位，浓缩干燥，得到层析物，即为天然降血糖化合物。
21.进一步地，所述层析步骤中，取提取物与去离子水的加重量比为1:0.4，溶液ph值为5.0，甲醇洗脱时，用8倍柱体积的体积分数为21％的甲醇洗脱。
22.采用上述方案，能够进一步纯化所得提取物，得到的层析物中杂质更少，并能够使有效成分充分富集，具有更好的降血糖效果。
23.可选地，所述醇提步骤前还包括：预处理，取干燥鱼尾蕨(polypodium punctatum cv.grandiceps)，研磨，过200目筛，按鱼尾蕨研磨物与乙醇的重量比为1:20，加入甲醇，搅拌至混悬，浓缩提取液，去除溶剂后，得到预醇提物，将黄药子与预醇提物按重量比1:5-20混合，作醇提步骤的提取原料。
24.进一步地，所述预处理步骤中，黄药子与预醇提物按重量比1:10混合，作醇提步骤的提取原料。
25.采用上述方案，所得提取物的毒性能够显著降低。
26.与现有技术相比，本技术实施方式提供了一种抑制血糖的天然化合物提取工艺，由本技术所述的制备方法制备得到的黄药子提取物及黄药子与鱼尾蕨混合物的提取物，能够通过对α-葡萄糖苷酶活性的抑制，具有优异的降血糖作用，并通过进一步的纯化过程，能够使提取物中的有效成分富集，所得黄药子提取物及黄药子与鱼尾蕨混合物的提取物的降血糖效果更加显著。
附图说明
27.为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本
发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
28.图1为本技术一实施方式的流程图；
29.图2为本技术另一实施方式的流程图。
具体实施方式
30.下面将对本技术技术方案的实施方式进行详细的描述。以下实施方式仅用于更加清楚地说明本技术的技术方案，因此只作为示例，而不能以此来限制本技术的保护范围。
31.除非另有定义，本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本技术的技术领域的技术人员通常理解的含义相同；本文中所使用的术语只是为了描述具体的实施方式的目的，不是旨在于限制本技术；本技术的说明书和权利要求书及上述附图说明中的术语“包括”和“具有”以及它们的任何变形，意图在于覆盖不排他的包含。
32.在本技术实施方式的描述中，技术术语“第一”“第二”等仅用于区别不同对象，而不能理解为指示或暗示相对重要性或者隐含指明所指示的技术特征的数量、特定顺序或主次关系。在本技术实施方式的描述中，“多个”的含义是两个以上，除非另有明确具体的限定。
33.在本文中提及“实施方式”意味着，结合实施方式描述的特定特征、结构或特性可以包含在本技术的至少一个实施方式中。在说明书中的各个位置出现该短语并不一定均是指相同的实施方式，也不是与其它实施方式互斥的独立的或备选的实施方式。本领域技术人员显式地和隐式地理解的是，本文所描述的实施方式可以与其它实施方式相结合。
34.在本技术实施方式的描述中，术语“和/或”仅仅是一种描述关联对象的关联关系，表示可以存在三种关系，例如a和/或b，可以表示：单独存在a，同时存在a和b，单独存在b这三种情况。另外，本文中字符“/”，一般表示前后关联对象是一种“或”的关系。
35.实施例1
36.如图1所示，抑制血糖的天然化合物提取工艺：
37.醇提，取黄药子粉碎后，醇提，浓缩提取液，去除溶剂后，得到醇提物；
38.萃取，取醇提物加去离子水混合均匀，采用有机溶剂萃取2次，干燥，得到提取物，即为天然降血糖化合物；
39.其中，醇提步骤，醇采用乙醇，醇的体积分数为90％，黄药子与醇的重量比为1:15，萃取步骤，有机溶剂采用乙酸乙酯，去离子水与醇提物用量的重量比为1:40，有机溶剂与醇提物用量的重量比为1:50。
40.实施例2
41.抑制血糖的天然化合物提取工艺：
42.醇提，取黄药子粉碎后，醇提，浓缩提取液，去除溶剂后，得到醇提物；
43.萃取，取醇提物加去离子水混合均匀，采用有机溶剂萃取2次，干燥，得到提取物，即为天然降血糖化合物；
44.其中，醇提步骤，醇采用乙醇，醇的体积分数为90％，黄药子与醇的重量比为1:15，萃取步骤，有机溶剂采用磷酸三丁脂，去离子水与醇提物用量的重量比为1:40，有机溶剂与醇提物用量的重量比为1:50。
45.实施例3
46.抑制血糖的天然化合物提取工艺：
47.醇提，取黄药子粉碎后，醇提，浓缩提取液，去除溶剂后，得到醇提物；
48.萃取，取醇提物加去离子水混合均匀，采用有机溶剂萃取2次，干燥，得到提取物，即为天然降血糖化合物；
49.其中，醇提步骤，醇采用乙醇，醇的体积分数为90％，黄药子与醇的重量比为1:15，萃取步骤，有机溶剂采用正丙醇，去离子水与醇提物用量的重量比为1:40，有机溶剂与醇提物用量的重量比为1:50。
50.实施例4
51.抑制血糖的天然化合物提取工艺：
52.醇提，取黄药子粉碎后，醇提，浓缩提取液，去除溶剂后，得到醇提物；
53.萃取，取醇提物加去离子水混合均匀，采用有机溶剂萃取2次，干燥，得到提取物，即为天然降血糖化合物；
54.其中，醇提步骤，醇采用乙醇，醇的体积分数为90％，黄药子与醇的重量比为1:15，萃取步骤，有机溶剂采用正丁醇，去离子水与醇提物用量的重量比为1:40，有机溶剂与醇提物用量的重量比为1:50。
55.实施例5
56.抑制血糖的天然化合物提取工艺：
57.醇提，取黄药子粉碎后，醇提，浓缩提取液，去除溶剂后，得到醇提物；
58.萃取，取醇提物加去离子水混合均匀，采用有机溶剂萃取2次，干燥，得到提取物，即为天然降血糖化合物；
59.其中，醇提步骤，醇采用乙醇，醇的体积分数为90％，黄药子与醇的重量比为1:15，萃取步骤，有机溶剂采用乙酸乙酯、磷酸三丁脂，且重量比为1:0.3，去离子水与醇提物用量的重量比为1:40，有机溶剂与醇提物用量的重量比为1:50。
60.实施例6
61.抑制血糖的天然化合物提取工艺：
62.醇提，取黄药子粉碎后，醇提，浓缩提取液，去除溶剂后，得到醇提物；
63.萃取，取醇提物加去离子水混合均匀，采用有机溶剂萃取2次，干燥，得到提取物，即为天然降血糖化合物；
64.其中，醇提步骤，醇采用乙醇，醇的体积分数为90％，黄药子与醇的重量比为1:15，萃取步骤，有机溶剂采用乙酸乙酯、磷酸三丁脂、正丙醇，且重量比为1:0.1:0.1，去离子水与醇提物用量的重量比为1:40，有机溶剂与醇提物用量的重量比为1:50。
65.实施例7
66.抑制血糖的天然化合物提取工艺：
67.醇提，取黄药子粉碎后，醇提，浓缩提取液，去除溶剂后，得到醇提物；
68.萃取，取醇提物加去离子水混合均匀，采用有机溶剂萃取2次，干燥，得到提取物，即为天然降血糖化合物；
69.其中，醇提步骤，醇采用乙醇，醇的体积分数为90％，黄药子与醇的重量比为1:15，萃取步骤，有机溶剂采用乙酸乙酯、磷酸三丁脂、正丙醇，且重量比为1:0.5:0.2，去离子水
与醇提物用量的重量比为1:40，有机溶剂与醇提物用量的重量比为1:50。
70.实施例8
71.抑制血糖的天然化合物提取工艺：
72.醇提，取黄药子粉碎后，醇提，浓缩提取液，去除溶剂后，得到醇提物；
73.萃取，取醇提物加去离子水混合均匀，采用有机溶剂萃取2次，干燥，得到提取物，即为天然降血糖化合物；
74.其中，醇提步骤，醇采用乙醇，醇的体积分数为90％，黄药子与醇的重量比为1:15，萃取步骤，有机溶剂采用乙酸乙酯、磷酸三丁脂、正丙醇，且重量比为1:0.3:0.2，去离子水与醇提物用量的重量比为1:40，有机溶剂与醇提物用量的重量比为1:50。
75.实施例9
76.抑制血糖的天然化合物提取工艺：
77.醇提，取黄药子粉碎后，醇提，浓缩提取液，去除溶剂后，得到醇提物；
78.萃取，取醇提物加去离子水混合均匀，采用有机溶剂萃取2次，干燥，得到提取物，即为天然降血糖化合物；
79.其中，醇提步骤，醇采用乙醇，醇的体积分数为60％，黄药子与醇的重量比为1:10，萃取步骤，有机溶剂采用乙酸乙酯、磷酸三丁脂、正丙醇，且重量比为1:0.3:0.2，去离子水与醇提物用量的重量比为1:10，有机溶剂与醇提物用量的重量比为1:30。
80.实施例10
81.抑制血糖的天然化合物提取工艺：
82.醇提，取黄药子粉碎后，醇提，浓缩提取液，去除溶剂后，得到醇提物；
83.萃取，取醇提物加去离子水混合均匀，采用有机溶剂萃取2次，干燥，得到提取物，即为天然降血糖化合物；
84.其中，醇提步骤，醇采用乙醇，醇的体积分数为90％，黄药子与醇的重量比为1:20，萃取步骤，有机溶剂采用乙酸乙酯、磷酸三丁脂、正丙醇，且重量比为1:0.5:0.2，去离子水与醇提物用量的重量比为1:50，有机溶剂与醇提物用量的重量比为1:90。
85.实施例11
86.抑制血糖的天然化合物提取工艺：
87.醇提，取黄药子粉碎后，醇提，浓缩提取液，去除溶剂后，得到醇提物；
88.萃取，取醇提物加去离子水混合均匀，采用有机溶剂萃取2次，干燥，得到提取物，即为天然降血糖化合物；
89.其中，醇提步骤，醇采用乙醇，醇的体积分数为90％，黄药子与醇的重量比为1:15，萃取步骤，有机溶剂采用乙酸乙酯、磷酸三丁脂、正丙醇，且重量比为1:0.5:0.2，去离子水与醇提物用量的重量比为1:40，有机溶剂与醇提物用量的重量比为1:50，萃取步骤之后还包括步骤，层析，取提取物加重量比为1:0.2的去离子水，完全溶解，调溶液ph值至5.0，采用聚酰胺柱水洗至molish反应阴性，改用6倍柱体积的体积分数为20％甲醇洗脱，收集甲醇洗脱部位，浓缩干燥，得到层析物，即为天然降血糖化合物。
90.实施例12
91.抑制血糖的天然化合物提取工艺：
92.醇提，取黄药子粉碎后，醇提，浓缩提取液，去除溶剂后，得到醇提物；
93.萃取，取醇提物加去离子水混合均匀，采用有机溶剂萃取2次，干燥，得到提取物，即为天然降血糖化合物；
94.其中，醇提步骤，醇采用乙醇，醇的体积分数为90％，黄药子与醇的重量比为1:15，萃取步骤，有机溶剂采用乙酸乙酯、磷酸三丁脂、正丙醇，且重量比为1:0.5:0.2，去离子水与醇提物用量的重量比为1:40，有机溶剂与醇提物用量的重量比为1:50，萃取步骤之后还包括步骤，层析，取提取物加重量比为1:0.4的去离子水，完全溶解，调溶液ph值至6.0，采用聚酰胺柱水洗至molish反应阴性，改用7倍柱体积的体积分数为23％甲醇洗脱，收集甲醇洗脱部位，浓缩干燥，得到层析物，即为天然降血糖化合物。
95.实施例13
96.抑制血糖的天然化合物提取工艺：
97.醇提，取黄药子粉碎后，醇提，浓缩提取液，去除溶剂后，得到醇提物；
98.萃取，取醇提物加去离子水混合均匀，采用有机溶剂萃取2次，干燥，得到提取物，即为天然降血糖化合物；
99.其中，醇提步骤，醇采用乙醇，醇的体积分数为90％，黄药子与醇的重量比为1:15，萃取步骤，有机溶剂采用乙酸乙酯、磷酸三丁脂、正丙醇，且重量比为1:0.5:0.2，去离子水与醇提物用量的重量比为1:40，有机溶剂与醇提物用量的重量比为1:50，萃取步骤之后还包括步骤，层析，取提取物加重量比为1:0.4的去离子水，完全溶解，调溶液ph值至5.0，采用聚酰胺柱水洗至molish反应阴性，改用8倍柱体积的体积分数为21％甲醇洗脱，收集甲醇洗脱部位，浓缩干燥，得到层析物，即为天然降血糖化合物。
100.实施例14
101.抑制血糖的天然化合物提取工艺：
102.醇提，取黄药子粉碎后，醇提，浓缩提取液，去除溶剂后，得到醇提物；
103.萃取，取醇提物加去离子水混合均匀，采用有机溶剂萃取2次，干燥，得到提取物，即为天然降血糖化合物；
104.其中，醇提步骤，醇采用乙醇，醇的体积分数为90％，黄药子与醇的重量比为1:15，萃取步骤，有机溶剂采用乙酸乙酯、磷酸三丁脂、正丙醇，且重量比为1:0.5:0.2，去离子水与醇提物用量的重量比为1:40，有机溶剂与醇提物用量的重量比为1:50，萃取步骤之后还包括步骤，层析，取提取物加重量比为1:0.6的去离子水，完全溶解，调溶液ph值至5.0，采用聚酰胺柱水洗至molish反应阴性，改用8倍柱体积的体积分数为25％甲醇洗脱，收集甲醇洗脱部位，浓缩干燥，得到层析物，即为天然降血糖化合物。
105.实施例15
106.如图2所示，抑制血糖的天然化合物提取工艺：
107.醇提，取黄药子粉碎后，醇提，浓缩提取液，去除溶剂后，得到醇提物；
108.萃取，取醇提物加去离子水混合均匀，采用有机溶剂萃取2次，干燥，得到提取物，即为天然降血糖化合物；
109.其中，醇提步骤，醇采用乙醇，醇的体积分数为90％，黄药子与醇的重量比为1:15，萃取步骤，有机溶剂采用乙酸乙酯、磷酸三丁脂、正丙醇，且重量比为1:0.5:0.2，去离子水与醇提物用量的重量比为1:40，有机溶剂与醇提物用量的重量比为1:50，萃取步骤之后还包括步骤，层析，取提取物加重量比为1:0.4的去离子水，完全溶解，调溶液ph值至5.0，采用
聚酰胺柱水洗至molish反应阴性，改用8倍柱体积的体积分数为21％甲醇洗脱，收集甲醇洗脱部位，浓缩干燥，得到层析物，即为天然降血糖化合物，醇提步骤前还包括：预处理，取干燥鱼尾蕨，研磨，过200目筛，按鱼尾蕨研磨物与乙醇的重量比为1:20，加入甲醇，搅拌至混悬，浓缩提取液，去除溶剂后，得到预醇提物，将黄药子与预醇提物按重量比1:5混合，作醇提步骤的提取原料。
110.实施例16
111.抑制血糖的天然化合物提取工艺：
112.醇提，取黄药子粉碎后，醇提，浓缩提取液，去除溶剂后，得到醇提物；
113.萃取，取醇提物加去离子水混合均匀，采用有机溶剂萃取2次，干燥，得到提取物，即为天然降血糖化合物；
114.其中，醇提步骤，醇采用乙醇，醇的体积分数为90％，黄药子与醇的重量比为1:15，萃取步骤，有机溶剂采用乙酸乙酯、磷酸三丁脂、正丙醇，且重量比为1:0.5:0.2，去离子水与醇提物用量的重量比为1:40，有机溶剂与醇提物用量的重量比为1:50，萃取步骤之后还包括步骤，层析，取提取物加重量比为1:0.4的去离子水，完全溶解，调溶液ph值至5.0，采用聚酰胺柱水洗至molish反应阴性，改用8倍柱体积的体积分数为21％甲醇洗脱，收集甲醇洗脱部位，浓缩干燥，得到层析物，即为天然降血糖化合物，醇提步骤前还包括：预处理，取干燥鱼尾蕨，研磨，过200目筛，按鱼尾蕨研磨物与乙醇的重量比为1:20，加入甲醇，搅拌至混悬，浓缩提取液，去除溶剂后，得到预醇提物，将黄药子与预醇提物按重量比1:10混合，作醇提步骤的提取原料。
115.实施例17
116.抑制血糖的天然化合物提取工艺：
117.醇提，取黄药子粉碎后，醇提，浓缩提取液，去除溶剂后，得到醇提物；
118.萃取，取醇提物加去离子水混合均匀，采用有机溶剂萃取2次，干燥，得到提取物，即为天然降血糖化合物；
119.其中，醇提步骤，醇采用乙醇，醇的体积分数为90％，黄药子与醇的重量比为1:15，萃取步骤，有机溶剂采用乙酸乙酯、磷酸三丁脂、正丙醇，且重量比为1:0.5:0.2，去离子水与醇提物用量的重量比为1:40，有机溶剂与醇提物用量的重量比为1:50，萃取步骤之后还包括步骤，层析，取提取物加重量比为1:0.4的去离子水，完全溶解，调溶液ph值至5.0，采用聚酰胺柱水洗至molish反应阴性，改用8倍柱体积的体积分数为21％甲醇洗脱，收集甲醇洗脱部位，浓缩干燥，得到层析物，即为天然降血糖化合物，醇提步骤前还包括：预处理，取干燥鱼尾蕨，研磨，过200目筛，按鱼尾蕨研磨物与乙醇的重量比为1:20，加入甲醇，搅拌至混悬，浓缩提取液，去除溶剂后，得到预醇提物，将黄药子与预醇提物按重量比1:20混合，作醇提步骤的提取原料。
120.实施例18
121.本实施例用于测量实施例1-17所得提取物的得率。
122.按照实施例1-17所提供的方案，分别投入10kg原料进生产后，统计各组干重与原料重的百分比值，具体结果如表1所示。
123.表1实施例1-17所得提取物的得率
124.组别得率(％)
实施例14.7实施例24.9实施例35.2实施例45.3实施例55.3实施例65.7实施例75.7实施例85.9实施例95.6实施例105.3实施例112.3实施例122.2实施例132.5实施例142.1实施例153.2实施例163.1实施例173.4
125.由表1数据可知，在不添加层析及预处理的实施例1-10中具有较优得率的配方为实施例8所提供方案。在添加层析步骤后，如实施例11-13所示，由于层析步骤去除较多杂质，提取物的得率存在明显下降，符合发明人的预期。但是在同时添加预处理及层析步骤后，提取物的得率反而具有较明显上浮，对此，发明人认为可能是鱼尾蕨在醇提步骤中，提取出更多有效成分，也能够使鱼尾蕨与黄药子混合物在醇提过程中，能够提升黄药子中有效成分的提出，便于工业生产中使用。
126.实施例19
127.本实施例用于验证实施例8-17所得提取物，对实验性糖尿病症小鼠的血糖变化的影响。
128.实验动物：取标准实验sd鼠，鼠龄2个月，体质量(20
±
2)g。
129.方法：取小鼠先在实验环境下给普通饲料适应性喂养，观察7天，随机取10只作为正常组，随机取10只作为对照组，随机取10只作为对比组，剩余小鼠为试验组。
130.分组开始实验，除正常组给普通饲料喂养外，其余各组均给予高糖饲料喂养。连续饲养五周暂不给药。第六周开始灌胃给药，正常组给予ph4.4柠檬酸缓冲液40mg/kg腹腔注射4次，每天1次，对照组、对比组及试验组给予stz(链脲佐菌素)溶液40mg/kg腹腔注射4次，每天1次，继续用同样的饲料喂养各组。stz注射1周后，小鼠尾静脉取血，测定血糖值，将血糖值在11.1mmol/l以上的定为实验性糖尿病小鼠。
131.试验组进行灌胃给药，给药剂量为200mg/(kg
·
d)，对照组和正常组灌胃生理盐水；对比组给予阳性对照药二甲双胍，剂量为200mg/(kg
·
d)。每天灌胃给药1次，连续4周。每周称量体重1次，根据体重调整给药剂量。于实验结束前1天，大鼠禁食12h，取血测空腹血糖值，进行统计学处理。
132.试验组分为10组，每组10只小鼠，分别给药情况如下：试验组1-10分别给予实施例
8-17所得具有降血糖作用的提取物。
133.结果见表2，对照组与正常组比较：p＜0.01；对比组与试验组比较，p＜0.05。
134.表2实施例8-17所得提取物对糖尿病小鼠空腹血糖的影响
[0135][0136]
由表2数据可知实施例8-17制备得到具有降血糖作用的黄药子或黄药子及鱼尾蕨混合物的提取物具有很好的降血糖作用，其在用药4周后能明显降低小鼠的空腹血糖。
[0137]
此外，从表2中还可以发现，实施例11-14的具有降血糖作用提取物是为加设层析步骤所得，相比于实施例8-10仅采用醇提及萃取步骤所得提取物，其降血糖效果更为明显。其次，根据实施例8与对比组数据可知，本技术所提供提取物的降血糖效果能够达到与阳性药二甲双胍对小鼠降血糖效果相近的程度，并根据实施例11-14的数据，在添加层析步骤后所得提取的降血糖效果明显优于阳性药二甲双胍，其降血糖作用更强。
[0138]
进一步，根据实施例15-17的数据可知，添加预处理步骤后，所得提取物在降血糖作用方面与未添加预处理步骤时的效果相近，可认为添加预处理步骤不会对所得提取物的降血糖效果造成影响。
[0139]
实施例20
[0140]
实施例8-17所得提取物体外抑制α-葡萄糖苷酶活性测试：
[0141]
反应系统为67mmol/l磷酸钾缓冲液(37℃，ph6.8)1.0ml，3mmol/l谷胱甘肽溶液25μl，64013nkat/lα-葡萄糖苷酶溶液25μl，分别与100μl提取物1.0mg、5.0mg、10.0mg、20.0mg相当生药/ml，(阳性药阿卡波糖浓度、加量与提取物平行)混匀，37℃水浴保温10min后，加
入20mmol/l pnpg溶液15μl，再置原水浴中继续保温10min后，加入0.01mol/l na2co3溶液5ml冷却后，以空白管调零，于波长400nm处测定在酶的作用下释放出对硝基酚(pnp)的吸光度(a)。α-葡萄糖苷酶管除不加提取物、空白管内加α-葡萄糖苷酶不加pnpg外，均由蒸馏水补足体积，其他反应同前。空白管其提取物浓度、加量与提取物管平行，其他操作同空白管。α-葡萄糖苷酶抑制率计算公式如下：
[0142]
酶活性抑制率(i％)＝[酶管a-(提取物管a-空白管a)]/酶管a
×
100
[0143]
提取物对α-葡萄糖苷酶活性的影响结果见表3。
[0144]
表3实施例8-17所得提取物对α-葡萄糖苷酶活性的影响
[0145][0146][0147]
由表3数据可知，实施例8-17制备得到具有降血糖作用的提取物具有很好的α-葡萄糖苷酶抑制活性，且抑制率均大于常用的α-葡萄糖苷酶抑制剂阿卡波糖的抑制率。其中实施例8-10制备得到的提取物在用量为20mg/l的情况下对α-葡萄糖苷酶的抑制率大于80％，具有良好抑制效果。
[0148]
且表3中实施例11-17的数据可知，添加层析步骤后，所得提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制效果得到进一步提升，提取物在用量为10mg/l的情况下对α-葡萄糖苷酶的抑制率大于90％，
[0149]
进一步，实施例15-17与实施例11-14的数据对比可知，添加预处理后所得的提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制率任然维持在90％以上，且与未添加预处理步骤时所得提取物的α-葡萄糖苷酶的抑制率相近。故在原料中混入鱼尾蕨并不会对所得提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制率造成显著负面影响。
[0150]
实施例21
[0151]
本实施例用于验证实施例11-17所得产物，对小鼠肝功能的影响。
[0152]
实验动物：取标准实验sd鼠，鼠龄2个月，体质量(20
±
2)g。
[0153]
小鼠给药剂量：30.0mg/kg。
[0154]
方法：取小鼠先在实验环境下给普通饲料适应性喂养，观察7天，随机取10只作为正常组，剩余小鼠为试验组。
[0155]
分组开始实验，除正常组给普通饲料喂养外，其余各组均给予本技术所得提取物。连续饲养五周暂不给药。第六周开始灌胃给药，正常组灌胃生理盐水，试验组进行灌胃给药，给药剂量为200mg/(kg
·
d)。每天灌胃给药1次，连续4周。每周称量体重1次，根据体重调整给药剂量。于实验结束前1天，大鼠禁食12h，取血测空腹血清甘油三酯及天冬氨酸转氨酶水平，进行统计学处理。
[0156]
试验组分为7组，每组10只小鼠，分别给药情况如下：试验组11-17分别给予实施例11-17所得具有降血糖作用的提取物。
[0157]
结果见表4，正常组与试验组比较，p＜0.05。
[0158]
表4实施例11-17所得提取物对小鼠肝功能的影响
[0159]
组别血清甘油三酯(mmol/l)天冬氨酸转氨酶(u/l)正常组0.69
±
0.2496.4
±
18.9试验组113.21
±
0.39215.1
±
21.7试验组122.92
±
0.57176.3
±
38.8试验组132.47
±
0.34132.6
±
25.8试验组143.01
±
0.31145.6
±
34.6试验组151.56
±
0.39112.3
±
27.3试验组161.39
±
0.27107.7
±
17.0试验例170.98
±
0.23102.0
±
15.2
[0160]
由表4数据可知，实施例11-14所得提取物处理后的小鼠体内，血清甘油三酯及天冬氨酸转氨酶水平存在明显提升，对小鼠肝功能造成一定破坏。实施例15-17所得提取物处理后的小鼠体内，血清甘油三酯及天冬氨酸转氨酶水平与正常小鼠相近，故采用预处理步骤引入鱼尾蕨后能够对黄药子提取物的肝损伤副作用进行中和，并且根据表2及表3的数据可知，也能够维持对血糖具有较高的抑制能力。
[0161]
最后应说明的是：以上各实施方式仅用以说明本技术的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施方式对本技术进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施方式所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本技术各实施方式技术方案的范围，其均应涵盖在本技术的权利要求和说明书的范围当中。尤其是，只要不存在结构冲突，各个实施方式中所提到的各项技术特征均可以任意方式组合起来。本技术并不局限于文中公开的特定实施方式，而是包括落入权利要求的范围内的所有技术方案。