盐酸法舒地尔及其有关物质的检测方法与流程

1.本发明涉及医药领域。具体地，本发明涉及盐酸法舒地尔及其有关物质的检测方法。


背景技术：

2.盐酸法舒地尔是一种具有广泛药理作用的新型药物，它的分子结构如下式所示，为rho激酶抑制物，通过增加肌球蛋白轻链磷酸酶的活性扩张血管，降低内皮细胞的张力，改善脑组织微循环，不产生和加重脑的盗血，同时可拮抗炎性因子，保护神经抗凋亡，促进神经再生。
[0003][0004]
有关物质主要是在生产过程中带入的起始原料、中间体、聚合体、副反应产物、储藏过程中的降解产物等。有关物质的研究是药品质量研究中关键性的项目之一，其含量不仅反映药品纯度的直接指标，而且有重要的安全意义。
[0005]
目前，针对盐酸法舒地尔及其有关物质的检测方法存在有关物质与主峰以及各有关物质之间分离度低、灵敏度较差、检测峰形较差等缺点，尤其是无法分离检测出异喹啉、异喹啉-5-磺酸、法舒地尔二聚体、n,n-二甲基异喹啉-5-磺酰胺、盐酸法舒地尔8位异构体、异喹啉-8-磺酸、n-氧化物和n-羟基法舒地尔这些有关物质。因此，开发一种灵敏度高、检测限低、分离度高、稳定性好的盐酸法舒地尔检测方法显得很有必要。


技术实现要素：

[0006]
本发明旨在至少在一定程度上解决现有技术中存在的技术问题至少之一。为此，本发明提出了检测盐酸法舒地尔的方法和盐酸法舒地尔质量控制方法，该检测盐酸法舒地尔的方法可以有效地分离检测出盐酸法舒地尔及其有关物质，具有准确性强、分离度好、检测限低、稳定性强、操作简便、快捷、效率高等优点，适于广泛应用。
[0007]
在本发明的一个方面，本发明提出了一种检测盐酸法舒地尔的方法。根据本发明的实施例，所述方法包括：将盐酸法舒地尔样品进行高效液相色谱检测，其中，所述高效液相色谱检测采用的流动相包括：流动相a和流动相b，所述流动相的ph值为3.0～4.0，所述流动相a选自磷酸二氢铵溶液，所述流动相b选自甲醇。
[0008]
发明人采用高效液相色谱法检测盐酸法舒地尔时发现，流动相的组成会显著影响盐酸法舒地尔的分离效果，若流动相选择不当，会导致盐酸法舒地尔与有关物质之间不能
分开，从而无法实现准确分离检测目的，进一步更难以确定具体含量。进而，发明人经过深入研究分析及优化筛选发现，以磷酸二氢铵溶液和甲醇作为流动相，且流动相的ph值为3.0～4.0可以有效地分离检测盐酸法舒地尔及有关物质。进一步地，根据所得到的液相色谱图可以计算盐酸法舒地尔有关物质的含量。由此，根据本发明实施例的方法检测结果准确性强、灵敏度高、稳定性强，并且，操作简便、快捷，效率高，适于规模化应用。
[0009]
根据本发明的实施例，上述检测盐酸法舒地尔的方法还可以具有下列附加技术特征：
[0010]
根据本发明的实施例，所述磷酸二氢铵溶液的浓度为0.05～0.15mol/l。
[0011]
根据本发明的实施例，所述高效液相色谱检测采用如下梯度洗脱方式：
[0012]
时间/min02030455560采用的流动相中流动相a含量(％)808050508080采用的流动相中流动相b含量(％)202050502020
[0013]
根据本发明的实施例，所述高效液相色谱检测使用的色谱柱为welch xtimate c18，尺寸为4.6
×
250mm，5μm。
[0014]
根据本发明的实施例，所述高效液相色谱检测采用的检测波长为260～290nm。
[0015]
根据本发明的实施例，所述高效液相色谱检测采用的柱温为20～40℃。
[0016]
根据本发明的实施例，所述高效液相色谱检测采用的流动相流速为0.8～1.2ml/min。
[0017]
根据本发明的实施例，所述方法包括分离盐酸法舒地尔样品中的有关物质，所述有关物质包括下列至少之一：异喹啉、异喹啉-5-磺酸、法舒地尔二聚体、n,n-二甲基异喹啉-5-磺酰胺、盐酸法舒地尔8位异构体、异喹啉-8-磺酸、n-氧化物和n-羟基法舒地尔。
[0018]
根据本发明的实施例，所述盐酸法舒地尔样品选自盐酸法舒地尔注射液。
[0019]
在本发明的另一方面，本发明提出了一种盐酸法舒地尔质量控制方法。根据本发明的实施例，所述方法包括：将盐酸法舒地尔样品进行稀释，得到待测液；将所述待测液进行高效液相色谱检测，确定盐酸法舒地尔含量或者有关物质至少之一的含量：异喹啉、异喹啉-5-磺酸、法舒地尔二聚体、n,n-二甲基异喹啉-5-磺酰胺、盐酸法舒地尔8位异构体、异喹啉-8-磺酸、n-氧化物和n-羟基法舒地尔；当所述盐酸法舒地尔不小于盐酸法舒地尔含量阈值且所述有关物质不大于有关物质含量阈值时，则判定所述盐酸法舒地尔注射液符合要求；其中，所述高效液相色谱检测采用的流动相包括：流动相a和流动相b，所述流动相的ph值为3.0～4.0，所述流动相a选自磷酸二氢铵溶液，所述流动相b选自甲醇。由此，采用根据本发明实施例的方法可以准确判断出盐酸法舒地尔样品是否符合要求，从而有效地把控质量。
[0020]
根据本发明的实施例，所述磷酸二氢铵溶液的浓度为0.05～0.15mol/l。
[0021]
根据本发明的实施例，所述高效液相色谱检测采用如下梯度洗脱方式：
[0022]
时间/min02030455560采用的流动相中流动相a含量(％)808050508080采用的流动相中流动相b含量(％)202050502020
[0023]
根据本发明的实施例，所述高效液相色谱检测使用的色谱柱为welch xtimate c18，尺寸为4.6
×
250mm，5μm。
[0024]
根据本发明的实施例，所述高效液相色谱检测采用的检测波长为260～290nm。
[0025]
根据本发明的实施例，所述高效液相色谱检测采用的柱温为20～40℃。
[0026]
根据本发明的实施例，所述高效液相色谱检测采用的流动相流速为0.8～1.2ml/min。
[0027]
本发明的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变得明显，或通过本发明的实践了解到。
附图说明
[0028]
本发明的上述和/或附加的方面和优点从结合下面附图对实施例的描述中将变得明显和容易理解，其中：
[0029]
图1显示了根据本发明实施例1的液相色谱图，其中最高峰为主峰，峰7为有关物质e降解物；
[0030]
图2～图4分别显示了根据本发明对比例1的液相色谱图；
[0031]
图5～图7分别显示了根据本发明实施例3的液相色谱图。
具体实施方式
[0032]
下面详细描述本发明的实施例。下面描述的实施例是示例性的，仅用于解释本发明，而不能理解为对本发明的限制。
[0033]
本发明提出了检测盐酸法舒地尔的方法和盐酸法舒地尔质量控制方法，下面将分别对其进行详细描述。
[0034]
检测盐酸法舒地尔的方法
[0035]
在本发明的一个方面，本发明提出了一种检测盐酸法舒地尔的方法。根据本发明的实施例，该方法包括：将盐酸法舒地尔样品进行高效液相色谱检测，其中，所述高效液相色谱检测采用的流动相包括：流动相a和流动相b，所述流动相的ph值为3.0～4.0，所述流动相a选自磷酸二氢铵溶液，所述流动相b选自甲醇。
[0036]
发明人发现，以磷酸二氢铵溶液和甲醇作为流动相，且流动相的ph值为3.0～4.0可以有效地分离检测盐酸法舒地尔及有关物质。进一步地，根据所得到的液相色谱图可以计算盐酸法舒地尔有关物质的含量。然而，采用其他流动相，例如三乙胺水溶液和甲醇，存在有关物质主要分布在主峰附近导致盐酸法舒地尔及有关物质分离效果不佳等问题。若采用ph值在6.0-～8.0之间，会存在杂质e(n-羟基法舒地尔)的降解物与主峰及杂质a(盐酸法舒地尔8位异构体)无法分开。由此，根据本发明实施例的方法检测结果准确性强、灵敏度高、稳定性强，并且，操作简便、快捷，效率高，适于规模化应用。
[0037]
根据本发明的实施例，磷酸二氢铵溶液的浓度为0.05～0.15mol/l。由此，可以有效地分离检测盐酸法舒地尔及各有关物质，分离度高，各有关物质间及有关物质与主峰的分离度均不小于1.5。同时，可避免出现因峰形不好导致无法计算峰面积、分离度低或者出峰重叠在一起而导致无法有效分离等问题。
[0038]
根据本发明的实施例，高效液相色谱检测采用如下梯度洗脱方式：
[0039]
时间/min02030455560采用的流动相中流动相a含量(％)808050508080
采用的流动相中流动相b含量(％)202050502020
[0040]
发明人最初采用等度洗脱方式进行检测，虽然盐酸法舒地尔和有关物质之间可以分开，但是，某些有关物质之间的分离度偏低，不能明显分开。进而，发明人尝试采用梯度洗脱方式，并对洗脱条件进行优化，得到上述较佳的洗脱条件。由此，可以有效地分离检测盐酸法舒地尔及各有关物质，分离度高，各有关物质间及有关物质与主峰的分离度均不小于1.5。同时，可避免出现因峰形不好导致无法计算峰面积、分离度低或者出峰重叠在一起而导致无法有效分离等问题。
[0041]
根据本发明的实施例，高效液相色谱检测使用的色谱柱为welch xtimate c18，尺寸为4.6
×
250mm，5μm。发明人发现，色谱柱类型，尤其是色谱柱长度会影响检测效果。当采用250mm色谱柱，尤其是上述型号和尺寸的色谱柱，可以有效地分离检测盐酸法舒地尔及各有关物质，分离度高，各有关物质间及有关物质与主峰的分离度均不小于1.5。同时，可避免出现因峰形不好导致无法计算峰面积、分离度低或者出峰重叠在一起而导致无法有效分离等问题。
[0042]
根据本发明的实施例，高效液相色谱检测采用的检测波长为260～290nm。由此，可以有效地分离检测盐酸法舒地尔及各有关物质，分离度高。
[0043]
根据本发明的实施例，高效液相色谱检测采用的柱温为20～40℃。由此，可以有效地分离检测盐酸法舒地尔及各有关物质，分离度高。
[0044]
根据本发明的实施例，高效液相色谱检测采用的流动相流速为0.8～1.2ml/min。由此，可以有效地分离检测盐酸法舒地尔及各有关物质，分离度高。
[0045]
根据本发明的实施例，该方法包括分离盐酸法舒地尔样品中的有关物质，有关物质包括下列至少之一：异喹啉、异喹啉-5-磺酸、法舒地尔二聚体、n,n-二甲基异喹啉-5-磺酰胺、盐酸法舒地尔8位异构体、异喹啉-8-磺酸、n-氧化物和n-羟基法舒地尔。采用本发明的方法可以实现上述有关物质的定性和定量检测，各有关物质间及有关物质和主峰的分离度均不小于1.5。
[0046]
根据本发明的实施例，盐酸法舒地尔样品选自盐酸法舒地尔注射液。
[0047]
盐酸法舒地尔质量控制方法
[0048]
在本发明的另一方面，本发明提出了一种盐酸法舒地尔质量控制方法。根据本发明的实施例，该方法包括：将盐酸法舒地尔样品进行稀释，得到待测液；将所述待测液进行高效液相色谱检测，确定盐酸法舒地尔含量或者有关物质至少之一的含量：异喹啉、异喹啉-5-磺酸、法舒地尔二聚体、n,n-二甲基异喹啉-5-磺酰胺、盐酸法舒地尔8位异构体、异喹啉-8-磺酸、n-氧化物和n-羟基法舒地尔；当所述盐酸法舒地尔不小于盐酸法舒地尔含量阈值且所述有关物质不大于有关物质含量阈值时，则判定所述盐酸法舒地尔注射液符合要求；其中，所述高效液相色谱检测采用的流动相包括：流动相a和流动相b，所述流动相的ph值为3.0～4.0，所述流动相a选自磷酸二氢铵溶液，所述流动相b选自甲醇。由此，采用根据本发明实施例的方法可以准确判断出盐酸法舒地尔样品是否符合要求，从而有效地把控质量。
[0049]
需要说明的是，本发明对于盐酸法舒地尔含量阈值和有关物质含量阈值的具体值不做严格限定，可以根据实际需要灵活选择。例如，盐酸法舒地尔含量阈值为90％、95％、99％、99.99％等，各有关物质含量阈值为5％、1％、0.1％、0.01％等。
[0050]
还需要说明的是，前面针对检测盐酸法舒地尔的方法中所描述的流动相组成、梯度洗脱条件、色谱柱、检测波长、柱温、流动相流速所描述的特征和优点，同样适用于该盐酸法舒地尔质量控制方法，在此不再赘述。
[0051]
下面将结合实施例对本发明的方案进行解释。本领域技术人员将会理解，下面的实施例仅用于说明本发明，而不应视为限定本发明的范围。实施例中未注明具体技术或条件的，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。
[0052]
实施例1
[0053]
在该实施例中，按照下列方法检测盐酸法舒地尔注射液：
[0054]
1、准备样液
[0055]
空白溶液：水。
[0056]
混合对照品溶液：取异喹啉约10mg置于20ml容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，作为异喹啉对照品溶液。分别取杂质15、法舒地尔二聚体、杂质10、杂质a、杂质b、杂质d、杂质e各4mg置于不同的10ml容量中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为各杂质对照品溶液。取以上8个杂质对照品溶液100μl置于同一10ml容量瓶中，加入盐酸法舒地尔对照品4mg，加水溶解并定容至刻度，摇匀，作为混合对照溶液。(各杂质名称见表1)
[0057]
表1杂质名称
[0058]
序号杂质名称1异喹啉2杂质15(异喹啉-5-磺酸)3法舒地尔二聚体4杂质10(n,n-二甲基异喹啉-5-磺酰胺)5杂质a(盐酸法舒地尔8位异构体)6杂质b(异喹啉-8-磺酸)7杂质d(n-氧化物)8杂质e(n-羟基法舒地尔)
[0059]
2、分别将空白溶液、混合对照品溶液进行高效液相色谱检测，检测条件如下：
[0060]
色谱柱：welch xtimate c18 4.6*250mm,5μm；
[0061]
检测波长：275nm；
[0062]
进样量：20μl；
[0063]
柱温：30℃；
[0064]
流速：1.0ml/min；
[0065]
流动相：0.1mol/l磷酸二氢铵溶液(用磷酸调节ph至3.5)为流动相a，甲醇为流动相b，按照以下梯度进行洗脱：
[0066]
时间/min02030455560采用的流动相中流动相a含量(％)808050508080采用的流动相中流动相b含量(％)202050502020
[0067]
结果如图1所示。各杂质间及杂质与主峰的分离度均不小于1.5且灵敏度高，具体结果见下表2。由此，表明本发明的方法可以有效地检测盐酸法舒地尔注射液中盐酸法舒地
尔和各杂质。
[0068]
表2实施例1检测结果
[0069]
序号杂质名称与相邻峰的分离度理论塔板数1杂质157.3195902杂质b8.8197433杂质d10.9158014异喹啉11.059715法舒地尔6.1117946杂质a11.3181847杂质e降解物6.7248698杂质e14.21952249杂质1034.842131010法舒地尔二聚体/101024
[0070]
对比例1
[0071]
在该对比例中，研究不同流动相组成对检测盐酸法舒地尔注射液的影响，具体步骤如下：
[0072]
1、准备样液
[0073]
空白溶液：水。
[0074]
混合对照品溶液：取异喹啉约10mg置于20ml容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，作为异喹啉对照品溶液。分别取杂质15、法舒地尔二聚体、杂质10、杂质a、杂质b、杂质d、杂质e各4mg置于不同的10ml容量中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为各杂质对照品溶液。取以上8个杂质对照品溶液100μl置于同一10ml容量瓶中，加入盐酸法舒地尔对照品4mg，加水溶解并定容至刻度，摇匀，作为混合对照溶液。(各杂质名称见表1)
[0075]
2、分别将空白溶液、混合对照品溶液进行高效液相色谱检测，检测条件如下：
[0076]
色谱柱：welch xtimate c18 4.6*250mm,5μm；
[0077]
检测波长：275nm；
[0078]
进样量：20μl；
[0079]
柱温：30℃；
[0080]
流速：1.0ml/min；
[0081]
流动相：具体参见表3。
[0082]
表3不同流动相对检测的影响
[0083][0084]
采用流动相1测定的方法主峰保留时间短，色谱图参见图2，峰3为杂质e降解物。杂质4主要分布在主峰附近，无法与主峰分开。出峰数目少于添加的杂质和盐酸法舒地尔的总和，表明有一个杂质峰与其他杂质峰或者主峰重合，无法分离。
[0085]
基于采用流动相1测定的方法存在上述缺陷，发明人尝试将流动相中1.0％三乙胺水溶液和甲醇的配比改为60:40。检测结果如图3所示。可以看出，将盐酸法舒地尔与附近的
杂质5无法分开，分离度达不到要求。
[0086]
采用流动相2测定的方法所得色谱图如图4所示，出峰数目少于添加的杂质和盐酸法舒地尔的总和，表明有一个杂质峰与其他杂质峰或者主峰重合，无法分离。并且，峰3、4和5选择性差。
[0087]
实施例2
[0088]
在该实施例中，研究不同色谱柱对检测盐酸法舒地尔注射液的影响，具体步骤如下：
[0089]
1、准备样液
[0090]
空白溶液：水。
[0091]
氧化破坏供试品溶液：取盐酸法舒地尔注射液1.00ml置于50ml容量瓶中，加入1.0ml30％过氧化氢，摇匀，放置30分钟后用水稀释至刻度，摇匀。作为氧化破坏供试品溶液。
[0092]
2、分别将空白溶液、氧化破坏供试品溶液进行高效液相色谱检测，检测条件如下：
[0093]
色谱柱：welch ultimate aq-c18 150
×
4.6mm，5μm或者welch xtimate c18 250
×
4.6mm，5μm；
[0094]
检测波长：275nm；
[0095]
进样量：20μl；
[0096]
柱温：30℃；
[0097]
流速：1.0ml/min；
[0098]
流动相：1.0％三乙胺水溶液(用磷酸调节ph值至7.0)—甲醇(50:50)。
[0099]
对不同类型的色谱柱检测的理论塔板数进行分析，结果如表4所示。welch xtimate c18250
×
4.6mm，5μm色谱柱的柱效高(理论塔板数高)，故选择welch xtimate c18 250
×
4.6mm，5μm色谱柱。
[0100]
表4不同色谱柱类型对检测影响
[0101]
项目ultimate aq-c18 150
×
4.6mm，5μmxtimate c18 250
×
4.6mm，5μm主峰出峰时间6.687min4.283min理论塔板数917313565
[0102]
实施例3
[0103]
在该实施例中，研究不同洗脱条件对检测盐酸法舒地尔注射液的影响，具体步骤如下：
[0104]
1、准备样液
[0105]
空白溶液：水。
[0106]
混合对照品溶液：取异喹啉约10mg置于20ml容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，作为异喹啉对照品溶液。分别取杂质15、法舒地尔二聚体、杂质10、杂质a、杂质b、杂质d、杂质e各4mg置于不同的10ml容量中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为各杂质对照品溶液。取以上8个杂质对照品溶液100μl置于同一10ml容量瓶中，加入盐酸法舒地尔对照品4mg，加水溶解并定容至刻度，摇匀，作为混合对照溶液。(各杂质名称见表1)
[0107]
2、分别将空白溶液、混合对照品溶液进行高效液相色谱检测，检测条件如下：
[0108]
色谱柱：welch xtimate c18 4.6*250mm,5μm；
[0109]
检测波长：275nm；
[0110]
进样量：20μl；
[0111]
柱温：30℃；
[0112]
流速：1.0ml/min；
[0113]
流动相：0.1mol/l磷酸二氢铵(用磷酸调节ph值至3.5)-甲醇。
[0114]
洗脱方式参见表5。采用等度洗脱方式，色谱图如图4所示，出峰数目少于添加的杂质和盐酸法舒地尔的总和，表明有一个杂质峰与其他杂质峰或者主峰重合，无法分离。并且，峰3、4和5选择性差。
[0115]
调整为梯度洗脱方式后，各杂质间以及杂质和主峰间的分离度不小于1.5，分离效果较佳。
[0116]
表5不同洗脱条件对检测的影响
[0117][0118]
为了研究梯度洗脱下不同洗脱条件对检测结果的影响，如下比较了另外几种洗脱条件：
[0119]
流动相1：以0.1mol/l磷酸二氢铵溶液(用磷酸调节ph至3.5)为流动相a、甲醇为流动相b，按照以下梯度进行洗脱：
[0120]
时间/min01010.0128355151.0160采用的流动相中流动相a含量(％)8888808045458888采用的流动相中流动相b含量(％)1212202055551212
[0121]
检测结果如图5所示，峰7可能为杂质e降解物。可以看出，采用上述梯度洗脱条件，主峰与各杂质峰分离良好，但是基线干扰积分，从而无法准确地确定各峰的峰面积。
[0122]
流动相2：以磷酸盐缓冲液(ph7.0)(磷酸二氢钾5.44g 氢氧化钠0.65g到2000ml，用2mol/l氢氧化钠调节ph至7.0)-甲醇(85:15)为流动相a，磷酸盐缓冲液(ph7.0)-甲醇(40:60)为流动相b，按照以下梯度进行洗脱：
[0123]
时间/min03050657085采用的流动相中流动相a含量(％)858510108585采用的流动相中流动相b含量(％)151590901515
[0124]
检测结果如图6所示。可以看出，采用上述流动相以及梯度洗脱方式，主峰与各杂质峰分离良好，但杂质a峰形差且主峰拖尾严重。
[0125]
对比例2
[0126]
在该实施例中，研究不同洗脱条件对检测盐酸法舒地尔注射液的影响，具体步骤如下：
[0127]
1、准备样液
[0128]
空白溶液：水。
[0129]
混合对照品溶液：取异喹啉约10mg置于20ml容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，作为异喹啉对照品溶液。分别取杂质15、法舒地尔二聚体、杂质10、杂质a、杂质b、杂质d、杂质e各4mg置于不同的10ml容量中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为各杂质对照品溶液。取以上8个杂质对照品溶液100μl置于同一10ml容量瓶中，加入盐酸法舒地尔对照品4mg，加水溶解并定容至刻度，摇匀，作为混合对照溶液。(各杂质名称见表1)
[0130]
2、分别将空白溶液、混合对照品溶液进行高效液相色谱检测，检测条件如下：
[0131]
色谱柱：welch xtimate c18 4.6*250mm,5μm；
[0132]
检测波长：275nm；
[0133]
进样量：20μl；
[0134]
柱温：30℃；
[0135]
流速：1.0ml/min；
[0136]
流动相：以0.1mol/l磷酸二氢铵溶液(用磷酸调节ph至7.0)为流动相a、甲醇为流动相b，按照以下梯度进行洗脱：
[0137]
时间/min02030455560采用的流动相中流动相a含量(％)808050508080采用的流动相中流动相b含量(％)202050502020
[0138]
检测结果如图7所示，主峰右侧为峰5和峰6，两者无法分开，峰5为杂质e降解物，其与主峰之间无法分开。
[0139]
在本说明书的描述中，参考术语“一个实施例”、“一些实施例”、“示例”、“具体示例”、或“一些示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不必须针对的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。此外，在不相互矛盾的情况下，本领域的技术人员可以将本说明书中描述的不同实施例或示例以及不同实施例或示例的特征进行结合和组合。
[0140]
尽管上面已经示出和描述了本发明的实施例，可以理解的是，上述实施例是示例性的，不能理解为对本发明的限制，本领域的普通技术人员在本发明的范围内可以对上述实施例进行变化、修改、替换和变型。