一种益母草植物快体系建立方法与流程

本申请涉及植物组织培养，尤其涉及一种益母草植物快体系建立方法。

背景技术：

1、益母草(leonurus japonicushoutt.)为唇形科植物，具有活血调经，利尿消肿的功效，用于治疗月经不调、痛经、经闭、恶露不尽、水肿尿少、急疮疡肿毒等，是临床处方常用的大宗药材和制药企业的主要原材料之一。由于在妇科用药等方面具有卓越的功效，全国每年益母草相关的药品的年销售额超过10亿元人民币。近年来，随着科研的深入与大众健康意识的提升，益母草的药用及美容保健价值得到了广泛的认可与关注，从传统的中医药领域逐渐拓展至化妆品、保健品等多个领域。然而，在市场需求激增的同时，益母草的自然生长状态却成为了制约其供应的瓶颈。

2、在自然环境中，益母草种子的发芽率教低。除了种子本身的质量问题，环境因素如土壤湿度、温度、光照等条件的不适宜都可能抑制种子的萌发。此外，益母草的生长速度也相对较慢。即使在适宜的生长条件下，益母草也需要相当长的时间才能达到采收的标准。这导致了生产周期的延长，增加了种植成本，同时也限制了益母草的市场供应量。因此，突破益母草自然生长的限制，提高其产量和质量，以满足市场的迫切需求，成为了当前亟待解决的问题。

3、通过组培技术，可以快速且大量地获取益母草种苗，显著缩短了其漫长的自然生长周期，同时克服了发芽率低的难题，从而有效满足了市场对益母草原料的迫切需求。然而，目前益母草组织培养的研究重心仍聚焦于愈伤组织的前期培养。愈伤组织在特定化学诱导下形成，经过脱分化过程，展现出干细胞的特性，具备高度再生能力，每个细胞都具备发育成完整植株的潜能。

4、尽管愈伤组织在植物组织培养中意义重大，但益母草的组织培养技术仍面临诸多挑战，尤其在愈伤组织的诱导、增殖和分化等方面。因此，我们需要加强对益母草组织培养技术的研究，探索更高效、稳定的愈伤组织培养方法，以提升其繁殖效率和品质。为解决这一问题，本发明提出了组织培养再生技术，通过组培技术获得再生植株，所需要的周期更短、质量与产量更稳定。可以实现植株的批量繁殖，实现全年种苗繁殖，不受季节因素的影响。对于推动益母草产业的可持续发展至关重要，为市场提供更多优质、高效的益母草种苗。

技术实现思路

1、本申请实施例提供一种益母草植物快体系建立方法，以解决相关技术存在的问题，技术方案如下：

2、本申请实施例提供了一种益母草植物快体系建立方法，包括：

3、将预处理并消毒的益母草外植体接种于愈伤组织诱导培养基上，进行初代培养；

4、初代培养得到稳定愈伤组织后，将愈伤组织放入不定芽培养基培养生芽；

5、待不定芽长出，再将不定芽放入生根培养基中生根，得到可以用于快速种植的益母草种苗。

6、上述技术方案在一种实施方式中，所述益母草外植体包括益母草叶片、益母草叶柄、益母草带芽茎段中的一种。

7、上述技术方案在一种实施方式中，所述益母草外植体的预处理并消毒的方法，包括：将益母草外植体用75％乙醇消毒30～60秒，用无菌水清洗三次，再用2％naclo消毒10－15分钟，待消毒完毕之后，再置入无菌水中清洗5～6次，每次3～4分钟，置于滤纸上，在无菌环境中晾干。

8、上述技术方案在一种实施方式中，所述愈伤组织诱导培养基为ms培养基+30g/l蔗糖+6g/l琼脂+1.0mg/l6－ba+0.1mg/l naa。

9、上述技术方案在一种实施方式中，初代培养的条件包括：黑暗条件，空气相对湿度为50％～60％，温度为25±1℃，培养时间为14～16天。

10、上述技术方案在一种实施方式中，不定芽培养基为ms培养基+30g/l蔗糖+6g/l琼脂+1mg/l 6－ba。

11、上述技术方案在一种实施方式中，不定芽的培养条件包括：光照强度5000lx，空气相对湿度为50％～60％，温度为25±1℃，培养时间为14～16天。

12、上述技术方案在一种实施方式中，生根培养基为1/2ms基础培养基+30g/l蔗糖+6g/l琼脂+0.5mg/l naa。

13、上述技术方案在一种实施方式中，生根的培养条件包括：光照强度5000lx，空气相对湿度为50％～60％，温度为25±1℃，培养时间为14～16天。

14、上述技术方案在一种实施方式中，待不定芽长出2～3厘米，再将不定芽放入生根培养基中生根。

15、上述技术方案中的优点或有益效果至少包括：

16、1、本申请首先进行益母草愈伤组织的诱导，在筛选出适合益母草愈伤组织诱导条件的基础上，选择优良的愈伤组织，进一步进行益母草愈伤组织不定芽的增殖与诱导生根培养。利用本申请的方法，能够提高愈伤组织诱导成功率，使得益母草愈伤组织诱导率＞95％，并且能获得有利于不定芽增殖与生根的益母草愈伤组织，从而建立完整且稳定的益母草快繁体系。本申请的方法可大大缩短益母草的生长周期，实现益母草的快速繁殖以满足益母草在市场上的需求以及为益母草的规模化生产提供技术基础。

17、2、本申请所设计的愈伤组织诱导培养基，在诱导益母草愈伤组织生成方面表现出极高的效率。与传统的培养方法相比，其诱导率显著提升，不仅提高了益母草愈伤组织的产量，还极大地提升了其质量。这一技术为益母草育苗和快速繁殖工作提供了可靠的保障。通过应用本申请的愈伤组织诱导培养基，可以更有效地进行益母草的繁育工作，满足市场对益母草原料的需求，进一步推动其在医药、保健、化妆品等领域的应用。

18、3、与现有的组织培养技术相比，本申请通过创新性地调整培养基的组成以及优化光照条件等环境因素，显著提升了益母草组织培养的诱导率、发芽率和生根率。不仅提高了益母草的快繁效率，使其生长周期得以加速，育种时间得以缩短，而且还大大降低了育苗成本。同时还有可能为其他植物的快繁提供新的解决方案，为植物资源的保护和开发做出更大的贡献。

19、上述概述仅仅是为了说明书的目的，并不意图以任何方式进行限制。除上述描述的示意性的方面、实施方式和特征之外，通过参考附图和以下的详细描述，本申请进一步的方面、实施方式和特征将会是容易明白的。

技术特征：

1.一种益母草植物快体系建立方法，其特征在于，包括：

2.根据权利要求1所述的益母草植物快体系建立方法，其特征在于，所述益母草外植体包括益母草叶片、益母草叶柄、益母草带芽茎段中的一种。

3.根据权利要求1所述的益母草植物快体系建立方法，其特征在于，所述益母草外植体的预处理并消毒的方法，包括：将益母草外植体用75％乙醇消毒30～60秒，用无菌水清洗三次，再用2％naclo消毒10－15分钟，待消毒完毕之后，再置入无菌水中清洗5～6次，每次3～4分钟，置于滤纸上，在无菌环境中晾干。

4.根据权利要求1所述的益母草植物快体系建立方法，其特征在于，所述愈伤组织诱导培养基为ms培养基+30g/l蔗糖+6g/l琼脂+1.0mg/l6－ba+0.1mg/lnaa。

5.根据权利要求1所述的益母草植物快体系建立方法，其特征在于，初代培养的条件包括：黑暗条件，空气相对湿度为50％～60％，温度为25±1℃，培养时间为14～16天。

6.根据权利要求1所述的益母草植物快体系建立方法，其特征在于，不定芽培养基为ms培养基+30g/l蔗糖+6g/l琼脂+1mg/l 6－ba。

7.根据权利要求1所述的益母草植物快体系建立方法，其特征在于，不定芽的培养条件包括：光照强度5000lx，空气相对湿度为50％～60％，温度为25±1℃，培养时间为14～16天。

8.根据权利要求1所述的益母草植物快体系建立方法，其特征在于，生根培养基为1/2ms基础培养基+30g/l蔗糖+6g/l琼脂+0.5mg/l naa。

9.根据权利要求1所述的益母草植物快体系建立方法，其特征在于，生根的培养条件包括：光照强度5000lx，空气相对湿度为50％～60％，温度为25±1℃，培养时间为14～16天。

10.根据权利要求1-9任一项所述的益母草植物快体系建立方法，其特征在于，待不定芽长出2～3厘米，再将不定芽放入生根培养基中生根。

技术总结本申请提出一种益母草植物快体系建立方法，包括：将预处理并消毒的益母草外植体接种于愈伤组织诱导培养基上，进行初代培养；初代培养得到稳定愈伤组织后，将愈伤组织放入不定芽培养基培养生芽；待不定芽长出，再将不定芽放入生根培养基中生根，得到可以用于快速种植的益母草种苗。利用本申请的方法，能够提高愈伤组织诱导成功率，使得益母草愈伤组织诱导率＞95％，并且能获得有利于不定芽增殖与生根的益母草愈伤组织，从而建立完整且稳定的益母草快繁体系。本申请的方法可大大缩短益母草的生长周期，实现益母草的快速繁殖以满足益母草在市场上的需求以及为益母草的规模化生产提供技术基础。技术研发人员：来昌冲,范航,白海怡,邢澍褀,凌远强,赵国敏,谢雪华受保护的技术使用者：广东远思南药生物科技有限公司技术研发日：技术公布日：2024/6/5