一种抑制SARS-CoV-2病毒感染的糖肽复配物及其应用

本发明涉及生物医药领域，具体涉及一种抑制sars-cov-2病毒感染的糖肽复配物及其应用。

背景技术：

1、sars-cov-2基因组编码四种主要结构蛋白：刺突(s)蛋白、核衣壳(n)蛋白、膜(m)蛋白和包膜(e)蛋白，sars-cov-2主要利用s糖蛋白入侵宿主细胞。该蛋白质有两个功能域：一个是s1受体结合结构域(rbd)，另一个是介导病毒和宿主细胞膜融合的s2结构域。sars-cov-2s蛋白首先通过s1受体结合结构域与人血管紧张素转化酶2(hace2)受体结合，随后s1受体结合结构域从病毒表面脱落，促使s2结构域融合到宿主细胞膜上。此外，相关研究发现sars-cov-2还可能与人宿主细胞表面的其他众多受体分子结合。基于上述结合靶点，设计并合成竞争性抑制药物是阻止sars-cov-2入侵的有效手段。尽管目前已经有数种疫苗投入使用，但人们对有效的预防和/或治疗sars-cov-2感染的药物仍然有迫切的需求。

2、硫酸肝素是冠状病毒常用的多糖类受体。硫酸肝素属线性的多糖类物质，通常与细胞表面或细胞外的基质蛋白相结合构成糖蛋白发挥生物学功能。冠状病毒s蛋白与多糖结合的生物学意义越来越受关注。冠状病毒s蛋白结合糖类主要靠s1-ntd(n-端结构域)功能域。最新的研究表明sars-cov-2的s1亚基能够和硫酸肝素结合，并且聚合度及硫酸化对结合非常重要。研究证实由中草药多糖和海藻多糖等多糖制备的黄精寡糖、卡拉胶寡糖、壳寡糖、岩藻寡糖等功能寡糖具有安全无毒、水溶性好等特点，表现出了很好的抗炎、抗菌、抗病毒等活性。

3、生物活性肽是全球新药研发的热点之一，具有特异性强、生物相容性好、易于修饰和便于快速且规模化生产等的优点，抗病毒肽在抗sars-cov-2感染药物开发中占有重要地位。而多糖抗新冠病毒活性仍有待开发。

技术实现思路

1、本发明针对新型冠状病毒sars-cov-2入侵宿主细胞引发肺炎等疾病的问题，提供一种抑制新型冠状病毒sars-cov-2感染的糖肽复配物的应用，该糖肽复配物可与新型冠状病毒的s蛋白及人体细胞表面的肝素分子结合，通过竞争性抑制保护宿主细胞免受新型冠状病毒的侵入，还提供了该糖肽复配物在制备预防和/或治疗新型冠状病毒感染中的应用。

2、本发明的抑制sars-cov-2病毒感染的糖肽复配物，包括多肽与多糖；其中，

3、所述多肽包括多肽p1或多肽p2，二者的共有序列为daefrhdsgyevhhqk(肝素结合域，与硫酸乙酰肝素结合从而避免纤维体的形成)。

4、多肽p1的氨基酸序列如seq id no.1(daefrhdsgyevhhqk)所示；或者，多肽p1的氨基酸序列通过氨基酸替换、缺失或者增加而与如seq id no.1所示序列具有90％以上相似性的序列；

5、多肽p2的氨基酸序列如seq id no.2(daefrhdsgyevhhqklvffaedvgsnkgaiiglmvggvvia)所示；或者，多肽p2的氨基酸序列通过氨基酸替换、缺失或者增加而与如seq idno.2所示序列具有90％以上相似性的序列；

6、所述多糖的结构片段包括：xfuc-n1gal-n1(xfuc-n1)glcnac结构单元的任意一种或两种以上，其中，gal：半乳糖，fuc：岩藻糖，glcnac：n-乙酰氨基葡萄糖；x＝0或1，n1＝1、2、3、4或6。

7、根据本发明所述的糖肽复配物，作为一种选择单不限于，多肽与多糖的重量比为1:1～1:2，例如，多肽与多糖各10μg/ml，或，多肽10μg/ml、多糖20μg/ml等等。

8、根据本发明所述的糖肽复配物，其中，所述多糖的xfuc-n1gal-n1(xfuc-n1)glcnac结构单元中，fuc与gal之间形成的糖苷键为α1型或β1型糖苷键，所述的gal与glcnac之间形成的糖苷键为α1型或β1型糖苷键，fuc与glcnac之间形成的糖苷键为α1型或β1型糖苷键。

9、其中，α1(alpha1)代表该单糖的1位羟基以α(alpha)构型和相邻的单糖形成糖苷键；β1(beta1)代表该单糖的1位羟基以β(beta)构型和相邻的单糖形成糖苷键。

10、根据本发明所述的糖肽复配物，其中优选的，所述多糖为西班牙盐盒菌胞外多糖(hheps)或那屈肝素(nadropain)。

11、具体的，本发明的糖肽复配物进一步优选但不限于包括一下组合：p1+hheps，p1+nadropain，p2+hheps，p2+nadropain。

12、本发明的糖肽复配物中的多肽和多糖，可以使用市售产品进行组合，也可以自行人工合成后进行组合。

13、本发明还提供了上述任一糖肽复配物在预防或治疗sars-cov-2病毒感染的药物制备中的应用；以及

14、本发明上述任一糖肽复配物在非治疗目的的抑制sars-cov-2病毒感染中的应用。

15、相比于现有技术，本发明的有益效果为：

16、(1)本发明的糖肽复配物，一方面可以利用糖链非还原末端含有的特定结构单元与病毒的s1亚基，和/或宿主的dc-sign受体进行特异性结合，从而阻断病毒与宿主受体结合，即多肽结合硫酸乙酰肝素，硫酸乙酰肝素可以辅助s蛋白侵入细胞，多肽结合硫酸乙酰肝素后，可以封闭住辅助位点，进而阻断病毒对呼吸道/肺部的入侵感染，达到专属性防治目的。另一方面可以利用多肽应用于预防和/或治疗新型冠状病毒sars-cov-2感染，可与新型冠状病毒sars-cov-2的s蛋白rbd区结合，直接抑制s蛋白侵入细胞形成多样化的病毒阻断方式。

17、(2)本发明获得了能够抑制新型冠状病毒sars-cov-2感染的糖肽复配物抑制剂，为进一步研发新型冠状病毒sars-cov-2的预防和治疗药物提供重要的理论及应用基础。

技术特征：

1.一种抑制sars-cov-2病毒感染的糖肽复配物，其特征在于，所述糖肽复配物包括多肽与多糖；其中，

2.根据权利要求1所述的糖肽复配物，其特征在于，所述多糖的xfuc-n1gal-n1(xfuc-n1)glcnac结构单元中，fuc与gal之间形成的糖苷键为α1型或β1型糖苷键，所述的gal与glcnac之间形成的糖苷键为α1型或β1型糖苷键，fuc与glcnac之间形成的糖苷键为α1型或β1型糖苷键。

3.根据权利要求2所述的糖肽复配物，其特征在于，所述多糖为西班牙盐盒菌胞外多糖或那屈肝素。

4.一种权利要求1-3任一所述糖肽复配物的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括将多肽与多糖，制成混合物的步骤。

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述多肽与多糖的重量比为1:1～1:2。

6.权利要求1-3任一所述糖肽复配物在预防或治疗sars-cov-2病毒感染的药物制备中的应用。

7.权利要求1-3任一所述糖肽复配物在非治疗目的的抑制sars-cov-2病毒感染中的应用。

技术总结本发明涉及生物医药领域，具体涉及一种抑制SARS‑CoV‑2病毒感染的糖肽复配物。本发明的糖肽复配物，包括多肽与多糖；其中，所述多肽包括多肽P1或多肽P2，多肽P1的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；或者，通过氨基酸替换、缺失或者增加而与如SEQ ID NO.1所示序列具有90％以上相似性的序列；多肽P2的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示；或者，通过氨基酸替换、缺失或者增加而与如SEQ IDNO.2所示序列具有90％以上相似性的序列；所述多糖的结构片段包括：xFuc‑N<subgt;1</subgt;Gal‑N<subgt;1</subgt;(xFuc‑N<subgt;1</subgt;)GlcNAc结构单元的任意一种或两种以上，x＝0或1，N<subgt;1</subgt;＝1、2、3、4或6。本发明的糖肽复配物可与新型冠状病毒的S蛋白及人体细胞表面的肝素分子结合，通过竞争性抑制保护宿主细胞免受新型冠状病毒的侵入。技术研发人员：王琪,许跃强,杜小慧,由昕,杜昱光,未金花,李建军,王倬受保护的技术使用者：大连医科大学附属第二医院技术研发日：技术公布日：2024/6/13