Ifi47的过表达质粒在抗丝状支原体丝状亚种感染中的应用

本发明涉及一种抗丝状支原体丝状亚种感染的新药物，特别涉及ifi47的过表达质粒在抗丝状支原体丝状亚种感染中的应用。本发明属于生物。

背景技术：

1、牛传染性胸膜肺炎（contagious bovine pleuropneumonia，cbpp）是由丝状支原体丝状亚种（mycoplasma mycoides subsp. mycoides，mmm）引发的各品种牛易感的一种严重呼吸道疾病。由于其高发病率和高死亡率曾被世界动物卫生组织（world organizationfor animal health，woah）列为a类应上报传染病，目前该病仍是woah认证的六大重点疾病之一。自16世纪下半叶起，cbpp在中欧和北欧流行，19世纪后半叶开始在全球范围内传播。目前许多国家通过扑杀或免疫后扑杀策略根除了cbpp，但在撒哈拉以南非洲地区仍然流行。一些亚洲国家的疫情不明，但据内部资料显示，巴基斯坦旁遮普省的流行率达到8%。我国在20世纪50年代通过高密度接种自主研制的弱毒疫苗并结合严格的防控措施，自1989年后再无发现临床病例，2011年经woah认证成为无cbpp国家。然而，由于cbpp目前仍在我国邻近的东南亚和非洲地区流行，我国仍面临该病再次传入和流行的风险。虽然我国利用自主研制的异体传代的弱毒疫苗成功地根除了cbpp，但是随着国家生物安全法律法规的逐渐完善，该类传统疫苗面临着生产工艺及生物安全问题等诸多局限性，已被禁止生产和使用。因此，挖掘新型的抗cbpp药物，是应对cbpp再次传入和流行风险的快速而有效的手段。

2、干扰素γ诱导蛋白47（interferon gamma inducible protein 47，ifi47）是宿主细胞因子ifn-γ介导表达的一种大小为47 kd的具有免疫学重要性的蛋白质。该蛋白在宿主感染一些病原体后会高水平表达，被推测可能在宿主抵抗感染和调节免疫系统中发挥着重要作用。然而，有关该蛋白是否具有抗cbpp的作用仍不清楚。本发明通过转染、westernblot、taqman qpcr和间接免疫荧光（ifa）等方法分析ifi47在抗cbpp中的作用。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供ifi47的过表达质粒在抗丝状支原体丝状亚种感染中的应用。

2、为了达到上述目的，本发明采用了以下技术手段：

3、本发明分别构建了ifi47过表达和敲低的两种宿主细胞模型。taqman qpcr检测结果表明过表达细胞ifi47基因后，mmm（ben1和mu1菌株）黏附于ebl上的数量与对照组相比减少；而敲低ifi47基因，mmm黏附数量与对照组相比增加。通过ifa检测ifi47过表达和敲低的两种宿主细胞模型的绿色荧光值，结果表明过表达细胞ifi47基因后，两种mmm菌株感染ebl的数量与对照组相比减少；而敲低ifi47基因，mmm感染数量与对照组相比增加。以上结果说明促进ifi47表达后能够抑制mmm的黏附和感染。

4、因此，在上述研究的基础上，本发明提出了ifi47的过表达质粒在制备抗丝状支原体丝状亚种感染的药物中的应用。

5、其中，优选的，所述的ifi47的核苷酸序列为seq id no.1所示。

6、进一步的，本发明还提出了ifi47的过表达质粒在制备治疗由丝状支原体丝状亚种感染导致疾病的药物中的应用。

7、其中，优选的，所述的疾病为牛传染性胸膜肺炎。

8、其中，优选的，所述的ifi47的核苷酸序列为seq id no.1所示。

9、相较于现有技术，本发明的有益效果是：

10、本发明提出了一种抗丝状支原体丝状亚种感染的新药物，该药物为ifi47的过表达质粒。ifi47的过表达质粒通过抑制丝状支原体丝状亚种的黏附和感染达到治疗由丝状支原体丝状亚种感染导致的疾病，特别是牛传染性胸膜肺炎的目的。本发明的提出为牛传染性胸膜肺炎的治疗提供了新的技术手段。

技术特征：

1.ifi47（interferon gamma inducible protein 47，ifi47）的过表达质粒在制备抗丝状支原体丝状亚种（mycoplasma mycoides subsp. mycoides，mmm）感染的药物中的应用。

2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的ifi47的核苷酸序列为seq id no.1所示。

3.ifi47的过表达质粒在制备治疗由丝状支原体丝状亚种感染导致疾病的药物中的应用。

4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述的疾病为牛传染性胸膜肺炎（contagious bovine pleuropneumonia，cbpp）。

5.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述的ifi47的核苷酸序列为seq id no.1所示。

技术总结本发明公开了Ifi47的过表达质粒在抗丝状支原体丝状亚种（Mycoplasma mycoides subsp.mycoides，Mmm）感染中的应用。本发明分别构建了Ifi47过表达和敲低的两种宿主细胞模型。TaqMan qPCR检测结果表明过表达Ifi47基因，Mmm黏附于EBL上的数量与对照组相比减少；而敲低细胞Ifi47基因后，Mmm黏附于EBL上的数量与对照组相比增加。通过IFA检测Ifi47过表达和敲低的两种宿主细胞模型的绿色荧光值，结果表明过表达Ifi47基因，感染EBL的Mmm数量与对照组相比减少；而敲低细胞Ifi47基因后，感染EBL的Mmm数量与对照组相比增加。以上结果说明促进Ifi47表达后能够抑制Mmm的黏附和感染。本发明的提出为牛传染性胸膜肺炎的治疗提供了新的技术手段。技术研发人员：潘巧,辛九庆,徐青元,李媛,王秀梅受保护的技术使用者：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所（中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心）技术研发日：技术公布日：2024/6/13