促癌细胞凋亡纳米药物的制备

本发明主要涉及癌细胞的研究与治疗，具体涉及一种促进癌细胞凋亡纳米药物mpegn-gflgavpiaqdevd-dox&dox的制备方法。

背景技术：

1、目前，癌症是临床常见疾病之一，是世界上除心血管疾病外导致人类死亡的第一大原因，也是世界上大多数地区的主要死亡原因之一。除了治疗癌症的几种常用传统方法，手术：对大多数早期和较早期实体肿瘤，手术为首选治疗方法；化疗：被广泛应用于转移性癌的治疗；放疗：可造成正常组织细胞的损害，产生一些副反应；除此之外科学家还在研究一些新的治疗方法及技术。然而，常规化疗放疗的有效性和敏感性往往受到肿瘤耐药性的限制，导致治疗失败和癌症复发。一旦产生抗药性，那对于癌症的治疗就会受到限制。

2、聚乙二醇被广泛应用，亲水性和柔韧性好，生物相容性较高，便于与紫杉醇、 cpt和dox结合，以改善其水溶性、血浆清除率和生物分布的应用。

3、阿霉素(dox)是应用最为广泛的小分子化疗药物之一，但由于水溶性很差、药物分布的无选择性等缺陷，使阿霉素进入体内后对正常组织产生十分严重的毒副作用。同时，如果长期使用阿霉素，还会诱导肿瘤细胞对其产生出很强的耐药性，即癌细胞对同等剂量的阿霉素的敏感性降低，导致抗癌效果不佳。

技术实现思路

1、本发明的第一个目的是结合肿瘤部位特殊微环境响应，构建了一种促癌细胞凋亡的新型嵌段聚合物mpegn-gflgavpiaqdevd-dox。

2、本发明的第二个目的是根据嵌段聚合物合成了包载dox的纳米胶束 mpegn-gflgavpiaqdevd-dox&dox，并提供纳米胶束的制备方法。

3、本发明的技术方案概述如下：

4、一种促进癌细胞凋亡的嵌段聚合物mpegn-gflgavpiaqdevd-dox，具有如式(i)所示的结构：

5、

6、其中n＝23-364

7、优选地：n＝79

8、一种促癌细胞凋亡的嵌段聚合物mpegn-gflgavpiaqdevd-dox的制备方法，包括如下步骤：

9、(1)将mpegn-cooh、nhs和dcc(摩尔比为1∶1.2∶1.2)溶解于dmso中，在室温下反应4h。

10、(2)将多肽gflgavpiaqdevd溶解在dmso中，并加入步骤(1)所得液体中，反应24h，所述多肽gflgavpiaqdevd简称为pep，在室温下反应得到mpegn-pep；

11、(3)将mpegn-pep、nhs和dcc(摩尔比为1∶1.2∶1.2)溶于dmf，室温下反应4小时，得到mpegn-pep-nhs；

12、(4)向mpegn-pep-nhs中加入脱盐的阿霉素(摩尔比为1∶2)，室温下反应24h，经透析、冷冻干燥得到化合物mpegn-pep-dox；所述dox为阿霉素的简称。

13、本发明的优点：

14、(1)本发明用甲氧基聚乙二醇作为亲水段聚合物，延长纳米药物在血液中的循环时间，减少网状内皮系统对纳米药物的清除。

15、(2)本发明的纳米药物具有组织蛋白酶b敏感和促进细胞凋亡的双重响应。纳米药物通过epr效应到达肿瘤组织部位时，肿瘤微环境中高浓度的组织蛋白酶b能够将多肽在g和a之间的特定位点处响应性切断，实现了细胞响应性去 peg化；剩余部分通过胞吞进入细胞内，胶束中部分物理包载dox被释放，诱导肿瘤细胞凋亡，激活细胞中凋亡酶caspase-3的活性，使多肽devd断裂，使胶束离散，释放出化疗药物dox以及促凋亡肽avpiaq，促凋亡肽能与细胞质里的iaps结合，抑制iaps抗凋亡活性，实现促凋亡肽与化疗药物协同治疗，提高癌症的治疗疗效。

16、(3)凋亡抑制蛋白(iaps)因其调控程序性细胞死亡和诱导肿瘤细胞凋亡而成为肿瘤治疗的有吸引力的靶点。所有iap蛋白都含有1-3个抗凋亡活性所必需的bir结构域，avpiaq作为促凋亡肽，对iaps的抑制活性最强smac(avpiaq) 通过n端前四个氨基酸avpi与iap家族的bir结构域表面凹槽结合，从而解除对caspase的抑制，发挥促凋亡作用。

技术特征：

1.一种促癌细胞凋亡的嵌段聚合物mpegn-gflgavpiaqdevd-dox，其特征是用式(i)所示：

2.根据权利要求1所述的促癌细胞凋亡的纳米药物，其特征是所述n＝79。

3.权利要求1或2的一种促癌细胞凋亡的mpegn-gflgavpiaqdevd-dox&dox化合物的制备方法，其特征是包括如下

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于mpeg使用降低毒副作用，延长体内循环时间。

5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征是步骤1中(1)所述的mpegn-cooh、nhs、dcc摩尔比为1∶1.2∶1.2。

6.根据权利要求3所述的制备方法，其特征是步骤1中(2)所述的。mpegn-nhs和多肽gflgavpiaqdevd的摩尔比为1∶1.2。

7.根据权利要求3所述方法，其特征是步骤1中(4)所述的mpegn-gflgavpiaqdevd-nhs与盐酸阿霉素的摩尔比为1∶2。

8.根据权利要求3所述方法，其特征是步骤2中(1)所述的mpegn-gflgavpiaqdevd-dox和dox质量比为10∶1，所制备的胶束颗粒大小均一。

技术总结本发明主要涉及癌细胞的研究与治疗，具体涉及一种促癌细胞凋亡纳米药物的制备方法。该方法包括以下步骤：(1)嵌段聚合物mPEG<subgt;79</subgt;‑GFLGAVPIAQDEVD‑DOX的制备；(2)用薄膜水化法制备mPEG<subgt;79</subgt;‑GFLGAVPIAQDEVD‑DOX&DOX胶束，最终得到具有促癌细胞凋亡的纳米药物。此方法具有对设备要求低，操作简单。该方法制备出的载体是一种同时具有体内长循环、对肿瘤微环境具有特异性响应、药物在胞内快速释放等特点的新一代纳米胶束，能够大大提高化疗药物在体内的传递效率，提高抗肿瘤治疗效果。技术研发人员：万冬,赵玉,潘杰受保护的技术使用者：天津工业大学技术研发日：技术公布日：2024/6/11