γ-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺单铵盐的制备方法

专利名称：γ-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺单铵盐的制备方法技术领域：本发明涉及一种用作生化检验试剂的芳香胺类有机化合物γ-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺单铵盐(以下用Ⅰ表示)的制备方法。Ⅰ是测定转肽酶的良好底物，临床检验中已有肯定价值。德国专利2259512公开了一种制备方法，以2-硝基-5-氨基苯甲酸与邻苯二甲酰-L-谷氨酸酐(以下用Ⅲ表示)在三-叔丁胺存在下缩合，缩合物再进行肼解，得产品。上述文献中没有提供原料的合成方法及质量要求;缩合及肼解条件不明确;肼解后产品Ⅰ与邻苯二甲酰肼的分离方法未见文献报导;产品Ⅰ的精制方法、质量标准均未见任何资料介绍。本发明的目的是解决上述现有技术尚有不足的问题，给出一种制备Ⅰ的有效方法。Ⅰ 结构式为 (1)以纯度99.5%以上的3-羧基-4-硝基苯胺(以下用Ⅱ表示)为原料之一，其结构式为 (3)将以上两种原料进行缩合。缩合的温度为140℃～142℃，(4)将以上缩合物进行肼解，肼解的温度为40℃～50℃，(5)将所得产品Ⅰ与邻苯二甲酰肼进行分离，分离的条件为 (6)对分离出的产品Ⅰ进行精制，精制溶剂为乙二醇-水-丙酮。(7)用色谱法检测两种原料的纯度，用分光光度法测定成品Ⅰ的含量，用酶法测定成品Ⅰ的活性。实施例，经色谱法检测，取纯度99.5%的Ⅱ11.60g与〔α〕25D-43°的Ⅲ19.20g，在140℃条件下缩合，然后在45℃条件下肼解，所得产品Ⅰ与邻苯二甲酰肼在39℃条件下分离，过程约15小时，将分离出的产品Ⅰ在乙二醇-水-丙酮溶剂中精制，即得纯度ε为1.17×104的成品Ⅰ8.8g。本发明方法制备的产品Ⅰ，经分光光度法测定其纯度ε值为1.17×104，无杂质，与Sigma公司进口产品Ⅰ基本一致，临床应用酶法进行活性检测，在未加激活剂的情况下，相当于Sigma公司产品活性92%。用本发明方法制备的成品Ⅰ经江苏省临床检验中心、南京军区总医院等6家医院试用，证明性能良好。权利要求1.一种用作生化检验试剂的γ-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺单铵盐的制备方法，其特征是(1)、以纯度99.5%以上的3-羧基-4-硝基苯胺为原料之一，(2)、以[α]25D-43°(C1.75，1，4-二氧六环)的邻苯二甲酰-L-谷氨酸酐为原料之二，(3)、将以上两种原料进行缩合，缩合的温度为140℃～142℃，(4)、将以上缩合物进行肼解，肼解的温度为40℃～50℃，(5)、将所得产品与邻苯二甲酰肼进行分离，分离的条件为35℃～39℃，15小时，(6)、对分离出的产品进行精制，精制溶剂为乙二醇-水-丙酮。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征是用色谱法检测两种原料的纯度。3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征是用分光光度法测定成品的含量，用酶法测定成品的活性。全文摘要一种用作生化检验试剂的γ-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺单铵盐的制备方法，以纯度99.5％以上的3-羧基-4-硝基苯胺和[α]文档编号C07C237/02GK1076688SQ9210733公开日1993年9月29日 申请日期1992年3月21日 优先权日1992年3月21日发明者陈文浩, 朱巧庆, 程光炘, 董纯定 申请人:中国药科大学, 珠海经济特区丽珠医药(集团)有限公司