肽化合物的制作方法

专利名称：肽化合物的制作方法技术领域：本发明涉及新的肽化合物及其药学上可接受的盐。更具体的，本发明涉及具有药理活性如速激肽拮抗作用特别是物质P拮抗作用、神经激肽A拮抗作用、神经激肽B拮抗作用等新的肽化合物及其药学上可接受的盐，也涉及它的制备方法、含同样化合物的组合物，以及其作为药物的用途。本发明的目的之一就是提供一种新的有用的肽化合物及其药学上可接受的盐，它具有如速激肽拮抗作用特别是物质P拮抗作用、神经激肽A拮抗作用、神经激肽B拮抗作用等。本发明的另一目的就是提供所述肽化合物及其盐的制备方法。本发明进一步目的就是提供含所述肽化合物及其药学上可接受的盐作为活性组分的药物组合物。本发明还进一步的目的就是提供所述的肽化合物或其药学上可接受的盐作为速激肽拮抗剂特别是物质P拮抗剂、神经激肽A拮抗剂或神经激肽B拮抗剂，可用于治疗和防止人或动物中由速激肽调节的疾病，例如呼吸性疾病如气喘、支气管炎、鼻炎、咳嗽、痰等;眼的疾病如结膜炎、春季结膜炎等;皮肤病如接触性皮炎、特应性皮炎、荨麻疹及其它湿疹样皮炎;发炎疾病如类风湿性关节炎、骨关节炎等;疼与痛(如偏头痛、头痛、牙痛、癌性痛、背痛等);等。本发明目的化合物可由下面通式(Ⅰ)表示 其中R1是氢或低级烷基，R2是低级烷基或卤素，R3是氢、低级烷基或卤素，R4是低级烷基，R5是芳(低级)烷基，R6是氨基或任意被保护羟基，及X 是O、S或N-R7，其中R7为N，N-二(低级)烷氨基(低级)烷基。根据本发明，新肽化合物(Ⅰ)可按下述说明的路线制备其中R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7及X各自的定义同前，Ra6是被保护羟基，L是酸残留基，及M是碱金属。关于起始化合物(Ⅱ)、(Ⅲ)及(Ⅳ)，其中一些是新的，可按后面的制备和实施例中所述的方法或按常规的方式制备。整个本说明书的氨基酸、肽、保护基、缩合剂等，按照IUPAC-IUB(CommissiononBiologicalNomenclature)的规定以缩写给出，这是在本领域中常用的。特别的，如果不另外指出，由这种缩写表示的氨基酸及其残留基是指L-构型化合物及其残留基。起始化合物及目的化合物的合适的药学上可接受的盐为常规的无毒盐，包括酸加成盐如有机酸盐(例如乙酸盐、三氟乙酸盐、马来酸盐、酒石酸盐、甲磺酸盐、苯磺酸盐、甲酸盐、甲基苯磺酸盐等)，无机酸盐(如盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、硫酸盐、硝酸盐、磷酸盐等)，或与氨基酸(如精氨酸、天冬氨酸、谷氨酸等)形成的盐，或金属盐如碱金属盐(例如钠盐、钾盐等)及碱土金属盐(例如钙盐、镁盐等)，铵盐，有机碱盐(例如三甲胺盐、三乙胺盐、吡啶盐、甲基吡啶盐、二环己基胺盐、N，N′-二苄基乙二胺盐等)等等。在本说明书前面及后面的叙述中，包含在本发明范围之内的各种定义的合适的实例和说明将详述如下如果不另外说明，术语“低级”指1-6个，优选1-4个，碳原子。合适的“低级烷基”包括直链或支链烷基如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、叔丁基、戊基、己基等，其中最优选的为甲基。合适的“碱金属”包括钠、钾等。合适的“酸残留基”包括卤素(例如氟、氯、溴、碘)、酰氧基(例如甲苯磺酰氧基、甲磺酰氧基等)等等。合适的“芳(低级)烷基”包括用于氨基酸及肽化学领域的常规基团，如单或双或三苯基(低级)烷基(例如三苯甲游基、二苯甲基、苄基、苯乙基等)等等。术语“卤素”指氟、氯、溴、碘。合适的“任意保护的羟基”指羟基可由常规保护基如酰基(例如乙酰基、甲磺酰基等)等保护。合适的“N，N-二(低级)烷基氨基(低级)烷基”包括N，N-二甲基氨基甲基，N，N-二甲基氨基乙基等。特别优选的R1、R2、R3、R4、R5、R6及X定义如下R1是氢;或低级烷基(例如甲基等)，R2是低级烷基(例如甲基、叔丁基等);或卤素(例如氯等)，R3是氢;低级烷基(例如甲基等);或卤素(例如氯等)，R4是低级烷基(例如甲基等)，R5是单或双或三苯基(低级)烷基(例如苄基等)，R6是氨基;或羟基，及X是O;S;或N-R7，其中R7为N，N-(低级)烷基氨基(低级)烷基(例如N，N-二甲基氨基乙基等)。制备目的化合物(Ⅰ)的方法详述如下。方法1目的化合物(Ⅰ)或其盐可通过化合物(Ⅱ)或其氨基上的活性衍生物或其盐，与化合物(Ⅲ)或其羧基上的活性衍生物或其盐反应而制备。合适的化合物(Ⅱ)的氨基活性衍生物包括Schiff′s碱型亚氨或其互变异构烯胺型异构体，它是由化合物(Ⅱ)与羰基化合物如醛、酮等反应形成的;包括甲硅烷衍生物，由化合物(Ⅱ)与甲硅烷化合物如二(三甲基甲硅烷基)乙酰胺、单(三甲基甲硅烷基)乙酰胺、二(三甲基甲硅烷基)脲等反应制得;还包括化合物(Ⅱ)与三氯化磷或光气等形成的衍生物。化合物(Ⅱ)的合适的盐和其活性衍生物是指在化合物(Ⅰ)中例举的那些。合适的化合物(Ⅲ)的羧基活性衍生物包括酰卤，酸酐、活化酰胺、活化酯等。活性衍生物的合适的实例可为酰氯;酸叠氮化物;与酸如取代磷酸[例如二烷基膦酸、苯基膦酸、二苯基膦酸、二苄基膦酸、卤代膦酸等]、二烷基亚磷酸、亚硫酸、硫代硫酸、硫酸、磺酸[例如甲磺酸等]、脂族羧酸[例如乙酸、丙酸、丁酸、异丁酸、新戊酸、戊酸、异戊酸、2-乙基丁酸、三氯乙酸等]或芳香羧酸[例如苯甲酸等]形成的混合酸酐;对称酸酐;与咪唑、4-取代咪唑、二甲基吡咯、三唑或四唑形成的活化酰胺;或活化酯[例如氰基甲基酯、甲氧甲基酯、二甲基亚氨基甲基[(CH3)2N+＝CH-]酯、乙烯基酯、炔丙基酯、对硝基苯基酯、2，4-二硝基苯基酯、三氯苯基酯、五氯苯基酯、甲磺酰基苯基酯、苯偶氮基苯基酯、苯硫酯、对硝基苯硫酯、对羟甲苯基硫酯、羧甲基硫酯、吡喃基酯、吡啶基酯、哌啶基酯、8-喹啉基硫酯等]，或与N-羟基化合物[例如N，N-二甲基羟胺、1-羟基-2-(1H)-吡啶酮、N-羟基琥珀酰亚胺、N-羟基邻苯二甲酰亚胺、1-羟基-1H-苯并三唑等]形成的酯等等。按照使用的化合物(Ⅲ)的类型可从其中任意选取活性衍生物。化合物(Ⅲ)及其活性衍生物也可为碱的盐如碱金属盐[例如钠盐、钾盐等]，碱土金属盐[例如钙盐、镁盐等]，铵盐，有机碱的盐[例如三甲胺盐、三乙胺盐、吡啶盐、甲基吡啶盐、二环己基胺盐、N，N′-二苄基乙二胺盐等]等等，以及如化合物(Ⅰ)所例举的酸加成盐。反应通常在常规溶剂如水、醇[例如甲醇、乙醇等]、丙酮、二噁烷、乙腈、氯仿、二氯甲烷、二氯乙烷、四氢呋喃、乙酸乙酯、N，N-二甲基甲酰胺、吡啶或其它任何对反应无不利影响的有机溶剂中进行。这些浣溶剂也可与水混合使用。在本反应中，当化合物(Ⅲ)采用游离酸或其盐的形式，反应较优选是在常规综合剂的存在下进行如N，N′-二环己基碳化二亚胺;N-环己基-N′-吗啉代乙基碳化二亚胺;N-环己基-N′-(4-二乙基氨基环己基)碳化二亚胺;N，N′-二乙基碳化二亚胺、N，N′-二异丙基碳化二亚胺;N-乙基-N′-(3-二甲基氨基丙基)碳化二亚胺;N，N′-羰基双-(2-甲基咪唑);1，5-亚戊基乙烯酮-N-环己基亚胺;二苯基乙烯酮-N-环己基亚胺;乙氧基乙炔;1-烷氧基-1-氯乙烯;亚磷酸三烷基酯;多磷酸乙酯;多磷酸异丙基酯;三氯氧化磷(磷酰氯);三氯化磷;二苯基磷酰基叠氮化物;亚硫酰二氯;草酰氯;卤代甲酸低级烷基酯[例如氯甲酸乙酯、氯甲酸异丙酯等];三苯膦;2-乙基-7-羟基苯并异噁唑鎓盐;2-乙基-5-(间磺基苯基)异噁唑鎓氢氧化物分子内盐;苯并三唑-1-基-氧代-三-(二甲氨基)六氟化鏻磷酸盐;1-(对氯苯磺酰氧基)-6-氯-1H-苯并三唑;由N，N-二甲基甲酰胺与亚硫酰二氯、光气、氯代甲酸三氯甲基酯、磷酰氯等反应得到，叫作Vilsmeiev的试剂;等等。反应也可以无机碱或有机碱的存在下进行如碱金属的碳酸氢盐、三(低级)烷基胺、吡啶、N-(低级)烷基吗啉、N，N-二(低级)烷基苄基胺等等。反应温度不是关键，反应通常在冷到温热情况下进行。方法2目的化合物(Ⅰ-a)或其盐可通过化合物(Ⅳ)或其盐与化合物(Ⅴ)反应制备。本反应通常在碱的存在下进行，碱如碱金属锂(例如正丁基锂等)、碱金属氢化物(例如氢化钠、氢化钾等)、三(低级)烷基胺(例如三甲胺、三乙胺等)、吡啶或其衍生物(例如甲基吡啶、二甲基吡啶、4-二甲氨基吡啶等)等等。本反应通常在溶剂如二噁烷、二甲亚砜、二甲基甲酰胺、二乙基甲酰胺、二甲基乙酰胺、苯、四氢呋喃或其它任何对该反应无不利影响的溶剂中进行。如果所用的碱为液体，也可作为溶剂使用。如果需要，本反应可采用相转移催化剂(例如鲸蜡基三甲基氯化铵等)。反应温度不是关键，反应通常在冷却、室温或加热情况下进行。方法3目的化合物(Ⅰ-c)或其盐可通过向化合物(Ⅰ-b)或其羟基活性衍生物或其盐引入羟基保护基而制备。反应可按方法1基本上同样的方式进行，因此本反应的反应模式及反应条件[例如溶剂、反应温度等]可参照方法1的叙述。方法4-(ⅰ)化合物(Ⅶ)或其盐可通过化合物(Ⅰ-c)或其盐与化合物(Ⅵ)反应制备。反应通常在常规溶剂如二甲亚砜或其它任意对该反应无不利影响的溶剂中进行。反应温度不是关键，反应通常在温热到加热情况下进行。方法4-(ⅱ)目的化合物(Ⅰ-d)或其盐可通过化合物(Ⅶ)或其盐发生氢化反应制备。该反应通常在三苯膦、坡钯-碳等的存在下进行。反应通常在常规溶剂如醇(例如甲醇、乙醇等)或其它任何对该反应无不利影响的溶剂中进行。反应温度不是关键，通常在冷却到加热情况下进行。上述方法所得的化合物可通常常规方法如粉碎、重结晶、柱层析、再沉淀等分离和纯化。应当注意的是，由于存在不对称碳原子，化合物(Ⅰ)和其它化合物包括一种或多种立体异构体，而所有这样的异构体及其混合物都包括在本发明范围之内。目的化合物(Ⅰ)及其药学上可接受的盐具有药理学活性如如速激肽拮抗作用特别是物质P拮抗作用、神经激肽A拮抗作用或神经激肽B拮抗作用，从而可用于治疗或防止速激肽调节的疾病，例如呼吸性疾病如气喘、支气管炎、鼻炎、咳嗽、痰等;眼的疾病如结膜炎、春季结膜炎等;皮肤疾病如接触性皮炎、特应性皮炎、荨麻疹及其它湿疹样皮炎;发炎的疾病如类风湿性关节炎、骨关节炎等;疼或痛(例如偏头痛、头痛、牙痛、癌性痛、背痛等);等等。进一步地，可以予测本发明目的化合物(Ⅰ)可用于治疗或防止眼科疾病如青光眼、眼色素层炎等;胃肠疾病如溃疡、溃疡性结肠炎、过敏性肠综合症、食物变应性等;发炎的疾病如肾炎等;循环疾病如高血压、心绞痛、心衰竭、血栓等;癫痫;spartic麻痹;频尿;痴呆;早老性痴呆;精神分裂症;慢性午蹈病;类癌瘤综合症等，并可用作免疫抑制剂。本发明化合物(Ⅰ)及其药物上可接受的盐用作治疗目的时，可采用含所说化合物作为活性组分，混合药物上可接受的载体例如适于口服、胃肠外、外部、肠内、静脉、肌内、吸入、鼻内或关节内给药的无机或有机固体或液体赋形剂的药物制剂。这种药物制剂可为胶囊、片剂、糖锭剂、粒剂、溶液、悬浮液、乳化液、软膏等。如果需要，这些制剂中也可含有辅助物质、稳定剂、润湿剂或乳化剂、缓冲液或其它常用的添加剂。化合物(Ⅰ)的剂量取决于病人的年龄和情况，平均单剂量约0.1mg、1mg、10mg、50mg、100mg、250mg、500mg及1000mg的化合物(Ⅰ)对于治疗气喘等是有效的。总的来说，每天服用量在0.1mg/人到约1，000mg/人之间。为了说明目的化合物(Ⅰ)的用途，化合物(Ⅰ)的一些代表性化合物的药理试验数据表示如下试验化合物 (1)3H-物质P受体结合试验方法(a)粗的肺膜的制备雄性Hartly品系豚鼠采用断头法杀死，取出气管和肺采用Polytoron(Kinematica)于缓冲液(0.25M蔗糖，50mMTris-HClPH7.5，0.1mMEDTA)中匀化，匀浆离心后(1000xg)，10min)除去组织凝块，上清液离心(14000xg20min)得到小丸，该小丸再悬浮于缓冲液(5mMTris-HClPH7.5)中用塔夫纶匀化器匀化并离心(14000xg，20min)得到的小丸称之为粗的膜成分。所得的小丸在使用前在-70℃下贮存。(b)3H-物质P结合到所制备的膜上。冷冻的粗膜成分融化并再悬浮于介质1中(50mM Tris-HCl PH7.5，5mM MnCl2，0.02%BSA，2μg/ml抑糜蛋白酶、4μg/ml亮肽酶素、40μg/ml枯草杆菌肽。)，3H-物质P(1nM)与100μl膜制备液在最后容积500μl的介质1中于4℃孵育30分钟。在孵育阶段末，反应混合物通过有吸气装置的Whatman GF/B玻璃漏斗(使用前用0.1%聚乙烯亚胺处理3小时)快速过滤，然后滤渣用5ml缓冲液(50mM Tris-HCl PH7.5)洗涤4次。放射性是用Packerd闪烁计数器(Packerd TRI-CARB4530)在5ml Aquazol-2中测量的。试验结果 下述实施例的目的就是为了更详细地说明本发明。在这些实施例中，除IUPAC-IUB采用的缩写外还采用下述缩写。Ac乙酰基Boc叔丁氧基羰基But叔丁基Bzl苄基DMF二甲基甲酰胺DMSO二甲亚砜HOBTN-羟基苯并三唑Me甲基Ms甲磺酰基HCl/DOX氯化氢于1，4-二噁烷中TEA三乙胺TFA三氟乙酸THF四氢呋喃WSC1-乙基-3-(3′-二甲氨基丙基)碳化二亚胺下述实施例中所采用的起始化合物及所得的目的化合物在下表中给出，其中，每一起始化合物分子式在上而每一目的化合物在下。 制备1在冰浴冷却下，向起始化合物(20.0g)在水(200ml)及丙酮(50ml)的混合溶剂中的悬浮混合物中加入TEA(31.8ml)，向此溶液中加入二叔丁基双碳酸酯(27.9g)的丙酮(50ml)溶液，所得溶液于室温搅拌2.5小时。除去丙酮后，加入水，该含水溶液用乙醚洗涤一次。水层加入6N盐酸酸化到PH2并用乙酸乙酯萃取。萃取液用氯化钠水溶液洗涤并用硫酸镁干燥。蒸发后，残留物通过过滤收集并干燥得到目的化合物(23.4g)。IR(CHCl3)3470，1725，1715，1500cm-1NMR(DMSO-d6，δ)1.33(9H，s)，2.17(6H，s)，2.65-3.0(2H，m)，3.95-4.1(1H，m)，6.9-7.05(4H，m)，12.46(1H，br s)制备2起始化合物(21.9g)及TEA(11.4ml)溶于二氯甲烷(200ml)中，溶液用冰冷却并滴加新戊酰氯(9.88g)，所得的溶液在这个温度下搅拌30分钟，在这个温度12分钟内向其中加入N-甲基苄基胺(9.6ml)，反应混合物在这个温度搅拌1小时并在室温再搅拌1小时。溶液顺序用水、碳酸氢钠溶液、水、1N盐酸及盐水洗涤，并用硫酸镁干燥，蒸去溶剂得到油状目的化合物(30.7g)。IR(纯)3450，3320，1710，1640，1365cm-1NMR(DMSO-d6，δ)1.2-1.4(9H，m)，2.1-2.2(6H，m)，2.65-2.95(5H，m)，4.3-4.7(3H，m)，6.75-7.4(9H，m)制备3向冰浴冷却的起始化合物(30.5g)的乙酸乙酯(152ml)溶液中加入溶在乙酸乙酯中的4N盐酸(192ml)，溶液在这个温度下搅拌10分钟并在室温下再搅拌1个半小时。滤除不溶物质，滤液减压浓缩，残留物在冰浴冷却下用乙醚(100ml)及乙酸乙酯(6ml)的混合溶剂结晶，结晶物通过过滤收集，干燥后得目的化合物(19.5g)。mp96-104℃IR(石蜡)3440，1650，1610，1490，1450，1280cm-1NMR(DMSO-d6，δ)2.1-2.25(6H，m)，2.62(s)and 2.69(3H，s)，2.85-3.2(2H，m)，4.0-4.1 and 4.35-4.65(3H，m)，6.9-7.4(8H，m)，8.49(3H，br s)制备4向冰浴冷却的起始化合物(12.1g)、Boc-(2S，4R)-Pro(4OH)-OH(17.4g)及HOBT(7.06g)的二氯甲烷(120ml)溶液中加入WSC(8.06g)，所得溶液在同样的温度下搅拌1小时并在室温下搅拌过夜。蒸发后，反应混合物用乙酸乙酯萃取，有机层顺序用碳酸氢钠水溶液、水、0.5N盐酸、水及氯化钠水溶液洗涤，并用硫酸镁干燥。蒸发后得到目的化合物(27.4g)为无定形固体。IR(CHCl3)3450-3300，1690-1650，1645-1625，1450，1155 cm-1NMR(DMSO-d6，δ)1.2-1.45(9H，m)，1.6-1.85(1H，m)，1.9-2.2(7H，m)，2.7-3.0(5H，m)，3.15-3.5(2H，m)，4.1-5.1(6H，m)，6.7-7.35(8H，m)，8.25-8.35(1H，m)制备5向冰浴冷却的起始化合物(27g)的二氯甲烷(54ml)溶液中加入三氟乙酸(136ml)，溶液在同样温度下搅拌10分钟并在室温下搅拌40分钟。蒸发后，残留物用乙醚结晶，通过过滤收集并干燥得到目的化合物(0.90g)。mp164-167℃IR(CHCl3)3450-3200，1680，1640，1565，1455 cm-1NMR(DMSO-d6，δ)1.7-1.9(1H，m)，2.1-2.4(7H，m)，2.65-3.15(5H，m)，3.25-3.5(2H，m)，4.2-5.1 and 5.55-5.65(6H，m)，6.8-7.4(8H，m)，9.1-9.3(1H，m)，8.65(1H，br s)，10.0(1H，br s)制备6向起始化合物(18.0g)于水(90ml)中的悬浮混合物中加入1N氢氧化钠水溶液(65.8ml)，溶液温热到37℃并加入1N盐酸调节PH到8.0，然后向该溶液中加入氯化钴(Ⅱ)六水合物(90ml)及酰基转移酶(商标名AcylaseAmano15000)(900mg)。反应混合物于37℃搅拌过夜，其间通过加入1N氢氧化钠水溶液保持PH为7.5。过滤收集沉淀，用水洗涤并干燥得到目的化合物(4.75g)。mp＞192℃IR(石蜡)3400，1605，1584，1512，888，840 cm-1NMR(D2O+NaOD，δ)2.65-3.15(2H，m)，3.49(1H，dd，J＝7.38Hz，5.72Hz)，7.12(1H，dd，J＝8.24Hz，1.70Hz)，7.36(1H，d，J＝1.6Hz)，7.42(1H，d，J＝8.22Hz)制备7在氮气气氛中，向冰浴冷却的起始化合物(4.58g)及碘甲烷(7.8ml)的THF(40ml)溶液中加入60%氢化钠<p> mp103.0-106℃IR(石蜡)3390，1690，1638，814，730，710 cm-1NMR(DMSO-d6，δ)1.21，1.32(9H，s);2.90，2.94(3H，s);2.70-3.05(2H，m);4.40-4.75(3H，m);7.05-7.65(9H，m)制备10目的化合物可按制备2类似的方式得到。mp126-127℃IR(石蜡)1680，1645 cm-1NMR(CDCl3，δ)1.05，1.19，1.22 and 1.37(9H，s);2.18，2.20 and 2.22(6H，s);2.83，2.85 and 2.89(6H，s);2.9-3.25(2H，m);4.36-4.75(2H，m);4.95-5.03 and 5.30-5.45(1H，m);6.85-7.3(8H，m)制备11向冰浴冷却的起始化合物(2.00g)的乙酸乙酯(7.5ml)溶液中加入4N盐酸的乙酸乙酯溶液(15ml)。溶液在同样温度下搅拌35分钟并浓缩。向残留物中加入二氯甲烷及碳酸氢钠水溶液，分离有机层，用硫酸镁干燥干燥并浓缩到5ml体积(溶液Ⅰ)。在另一反应器中向冰浴冷却的Boc-(2S，4R)-Pro(40H)-OH(1.06g)的二氯甲烷(15ml)溶液中加入TEA(0.7ml)及新戊酰氯(0.62ml)，该混合物在同样温度搅拌15分钟。向这个溶液中加入前面制备的溶液(溶液Ⅰ)，所得的溶液在冰浴冷却下搅拌1小时并在室温静置过夜。向这个溶液中加入N，N-二甲基-1，3-丙二胺(0.23ml)并将混合物在室温下搅拌1小时。浓缩后，向残留物中加入乙酸乙酯和水，有机层顺序用碳酸氢钠水溶液、水、0.5N盐酸、水及氯化钠水溶液洗涤并用硫酸镁干燥。蒸去溶剂得到目的化合物(2.43g)为无定形固体。IR(CHCl3)3400-3260，2960，2930，1625 cm-1NMR(DMSO-d6，δ)1.19，1.38(9H，s);1.50-2.10(2H，m)，270-3.10(5H，m);3.15-3.50(2H，m);4.05-5.05(6H，m);7.00-7.65(8H，m);8.25-8.40(1H，m)MASSM+550制备12目的化合物可按制备11前一部份类似的方式得到。mp219-221℃IR(石蜡)2750，1650，1550 cm-1NMR(DMSO-d6，δ)2.15(3H，s)，2.19(3H，s)，2.5(6H，m)，2.85-3.0(1H，m)，3.17-3.35(1H，m)， 4.65(1H，dd，J＝4.5Hz，9.3Hz)，6.9-7.1(5H，m)，7.3(3H，m)，9.5(2H，br)制备13目的化合物可按制备11后一部份类似的方式得到。IR(CHCl3)3450，1690，1660(sh)，1640 cm-1NMR(DMSO-d6，δ)1.09，1.21，1.27，1.28，1.37 and 1.38(9H，s);1.2-1.4，1.4-1.6，2.0-2.2(2H，m);1.99 and 2.13(6H，s);2.6-2.8(4H，m);3.0(3H，m);3.2-3.45(3H，m);4.1-4.7(4H，m);5.0(1H，m);5.4-5.6(1H，m);6.8-7.3(8H，m)制备14向冰浴冷却的起始化合物(2.20g)的乙酸乙酯(7.5ml)溶液中加入4N盐酸的乙酸乙酯溶液(15ml)。溶液在同样温度下搅拌2小时。浓缩后，残留物用乙醚结晶得到目的化合物(1.59g)。mp168.0-175.0℃IR(石蜡)3270，1640cm-1NMR(DMSO-d6，δ)1.60-1.90，2.10-2.40(2H，m);2.80，2.93(3H，s);2.70-3.40(4H，m);4.05-4.75(4H，m);4.85-5.10(1H，m);5.50-5.60(1H，m);7.00-7.65(8H，m);8.30-8.80，9.60-10.15(2H，br s);9.17(1H，d，J＝8.08Hz)制备15目的化合物可按制备1类似的方式得到。(1)IR(石蜡)3350，1720，1690，1530，1415，1240 cm-1NMR(DMSO-d6，δ)1.32(9H，s)，2.25(3H，s)，2.7-3.0(2H，m)，3.95-4.1(1H，m)，6.85-7.15(4H，m)，12.57(1H，br s)MASSM+1 280，M+279(2)IR(CHCl3)2960，1720，1510 cm-1NMR(DMSO-d6，δ)1.25，1.31(18H，s);2.65-3.05(2H，m);3.95-4.15(1H，m);7.00-7.35(5H，m);12.58(1H，br s)MASSM+321制备16目的化合物可按制备2类似的方式得到。(1)mp74-77℃IR(石蜡)3390，1691，1642 cm-1NMR(DMSO-d6，δ)1.23，1.28，1.35(9H，s);2.24，2.26(3H，s);2.65-2.95(5H，m);4.30-4.70(3H，m);6.90-7.40(10H，m)MASSM+382(2)IR(CHCl3)3310，2960，1708，1640 cm-1NMR(DMSO-d6，δ)1.25，1.33(18H，s);2.70-2.90(5H，m);4.35-4.65(3H，m);6.95-7.40(10H，m)MASSM+424制备17目的化合物可按制备3类似的方式得到。(1)mp135-138℃IR(石蜡)3450，1651，1610 cm-1NMR(DMSO-d6，δ)2.28，2.31(3H，s);2.61，2.68(3H，s);2.85-3.20(2H，m);3.90-4.05，4.35-4.70(3H，m);7.05-7.40(9H，m);8.48(3H，s)(2)IR(石蜡)1645，1580cm-1NMR(DMSO-d6，δ)1.23，1.29(9H，s);2.54(3H，s);2.85-3.20(2H，m);4.25-4.65(3H，m);7.05-7.40(9H，m);8.47(3H，br s)制备18目的化合物可按制备4类似的方式得到。(1)IR(CHCl3)3320，2900，1680，1640 cm-1NMR(DMSO-d6，δ)1.25，1.39(9H，s);1.55-2.10(2H，m);2.26(3H，s);2.77，2.85(3H，s);2.65-3.10(2H，m);3.15-3.50(2H，m);4.05-5.05(6H，m);6.90-7.35(9H，m);8.25-8.40(1H，m)MASSM+495(2)IR(CHCl3)3420，3320，2970，1690-1630 cm-1NMR(DMSO-d6，δ)1.24，1.39(18H，s);1.55-2.05(2H，m);2.65-3.05(5H，m);3.15-3.45(2H，m);4.05-5.00(6H，m);6.95-7.35(9H，m);8.25-8.35(1H，m)MASSM+537制备19向冰浴冷却的起始化合物(3.00g)的二氯甲烷(12ml)溶液中加入12ml4N-盐酸的乙酸乙酯溶液。所得混合物在室温下搅拌1个半小时。蒸除溶剂，残留物用乙醚研制。沉淀过滤、用乙醚洗涤并在真空下干燥得到目的化合物(2.81g)。IR(石蜡)3350-3200，1641，1566，1548 cm-1NMR(DMSO-d6，δ)1.65-1.90，2.20-2.40(2H，m);2.27(3H，s);2.76，2.84(3H，s);2.70-3.45(4H，m);4.20-4.60(4H，m);4.80-5.05(1H，m);5.55(1H，br s);6.95-7.40(9H，m);8.59(1H，br s);9.15(1H，d，J＝7.6Hz);10.04(1H，br s)制备20目的化合物可按制备19类似的方式得到。IR(石蜡)3350-3200，1675，1640，1561，1541 cm-1NMR(DMSO-d6，δ)1.25，1.26(9H，s);1.70-1.95，2.20-2.40(2H，m);2.75-2.80(3H，s);2.80-3.40(4H，m);4.20-4.65(4H，m);4.80-5.00(1H，m);5.57(1H，br s);7.00-7.40(9H，m);8.61(1H，br s);9.16(1H，d，J＝7.6Hz);10.01(1H，br s)实施例1起始化合物(2.42g)溶于乙酸乙酯(15ml)中并用冰冷却，向该溶液中加入4N-盐酸的乙酸乙酯(30ml)溶液并将混合物在室温下搅拌40分钟。蒸发后，残留物溶于二氯甲烷(50ml)中。该溶液用饱和碳酸氢钠溶液洗涤并分离。水层用二氯甲烷再萃取并将萃取液合并、用盐水洗涤并用硫酸镁干燥。过滤得到由起始化合物衍生的去保护胺的溶液(0.0826mmol/g)。该溶液的一部份24ml加到1-(N，N-二甲氨基乙基)吲哚-3-羧酸(537mg)及HOBT(270mg)的二甲基甲酰胺(15ml)溶液中去。混合物用冰冷却并加入WSC·HCl(420mg)。混合物在这个温度下搅拌1个半小时并在室温下再搅拌6小时。向混合物中加入TEA(0.14ml)并在室温下搅拌过夜。混合物浓缩，残留物用水及碳酸氢钠溶液稀释。混合物用二氯甲烷萃取二次，合并的萃取液用盐水洗涤并用硫酸镁干燥。蒸发后，残留物通过硅胶(25g)色谱柱，用氯仿及甲醇(从2%-5%梯度)的混合溶剂洗脱。主要部份浓缩并将残留物(0.25g)溶于THF(9ml)中。溶液用冰冷却并加入于乙酸乙酯中的4N盐酸(0.20ml)并将混合物浓缩。残留物用乙醚研制、过滤并干燥得目的化合物(0.23g)。NMR(DMSO-d6，δ)1.5-2.0(2H，m)，2.14(6H，s)，2.7-2.9(9H，m)，3.12 and′3.16(3H，s)，3.6-4.0(4H，m)，4.3-4.6(3H，m)，4.73(2H，br s)，5.1(1H，m)，5.5(1H，m)，6.87-7.3(10H，m)，7.7(1H，m)，8.05(2H，m)，10.91(1H，br s)MASSM+517实施例2向冰浴冷却的苯并呋喃-2-羧酸(0.15g)、起始化合物(0.45g)及HOBT(0.12g)于9ml二氯甲烷中的混合物中加入WSC(0.17ml)。所得的溶液在同样温度下搅拌半小时并在室温下搅拌过夜。向其中加入N，N-二甲基-1，3-丙二胺(0.05ml)并将混合物再搅拌2h。混合物蒸发，残留物用水稀释并用乙酸乙酯萃取。有机层顺序用饱合碳酸氢钠溶液、水、0.5N盐酸及盐水洗涤，并用硫酸镁干燥。蒸发后，粗品通过硅胶(20g)层析，用氯仿及甲醇(从1%-2.5%梯度)的混合溶剂洗脱。(流出)部份浓缩并用二异丙醚磨成粉状得目的化合物(0.40g)。IR(石蜡)3300，1630，1565 cm-1NMR(DMSO-d6，δ)1.85-2.15(2H，m)，2.15-3.10(2H，m)，2.76，2.77 and 2.89(3H，s)，3.60-5.20(8H，m)，6.85-7.80(13H，m)，8.50-8.80(1H，m)MASSM+594实施例3室温下向苯并呋喃-2-羧酸(0.31g)及HOBT(0.26g)于二氯甲烷(10ml)中的混合物中加入WSC·HCl(0.37g)。所得溶液搅拌30分钟。在此期间，起始化合物(1.0g)及TEA(0.29ml)的二氯甲烷(10ml)溶液在另一反应器中冰浴冷却。这两个反应混合物于室温下混合，所得的混合物在室温下搅拌过夜。蒸发后，残留物用水稀释并用乙酸乙酯萃取。有机层顺序用碳酸氢钠溶液、水、1N盐酸及盐水洗涤，并用硫酸镁干燥。蒸发后，粗品通过硅胶(54g)柱纯化，用二氯甲烷及甲醇(50∶1-20∶1，梯度洗脱)混合溶剂洗脱。纯化后物质用乙酸乙酯及二异丙醚混合溶剂结晶得到目的化合物(0.77g)。熔点137-139℃IR(石蜡)3400，3250，3100，1630，1570，1420 cm-1NMR(DMSO-d6，δ)1.7-1.9(1H，m);four singlet at 2.05，2.10，2.11 and 2.17(6H);2.2-2.4(1H，m);four singlets at 2.60，2.64，2.73 and 2.79(3H);2.8-3.5(2H，m);3.6-4.1(2H，m);4.3-5.2(6H，m)，6.6-7.8(14H，m);8.54 and 8.73(1H，d，J＝8Hz)MASSM+553实施例4目的化合物可按实施例3类似的方式得到。(1)IR(石蜡)3300，1625，1560 cm-1NMR(DMSO-d6，δ)1.70-2.20(2H，m);2.25(3H，s);2.20-3.10(5H，m);3.50-5.25(8H，m);6.70-7.90(14H，m);8.45-8.80(1H，m)MASSM+539(2)IR(石蜡)3280，1620，1560，1508 cm-1NMR(DMSO-d6，δ)1.21，1.22，1.24(9H，s);1.60-2.45(2H，m);2.58，2.72，2.77(3H，s);2.75-3.10(2H，m);3.60-3.70，3.75-4.10，4.20-5.25(8H，m);6.75-7.85(14H，m);8.45-8.80(1H，m)MASSM+581(3)mp171-173℃IR(石蜡)3400，3250，1667，1630，1561 cm-1NMR(DMSO-d6，δ)1.70-2.35(2H，m);2.12，2.17(6H，s);2.60，2.73，2.79(3H，s);2.65-3.10(2H，m);3.60-5.20(8H，m);6.50-8.10(13H，m);8.50-8.85(1H，m)MASSM+569实施例5冰浴冷却下向起始化合物(3.20g)的二氯甲烷(32ml)溶液中加入TEA(1.61ml)。保持温度低于6℃向此溶液中加入MsCl(0.45ml)的二氯甲烷(5ml)溶液。搅拌3小时后，加入TEA(1.61ml)并滴加MsCl(0.45ml)的二氯甲烷(5ml)溶液。混合物再搅拌半小时并用水洗涤。有机层用硫酸镁干燥，蒸发得到目的化合物(3.61g)为无定形固体。IR(CHCl3)3300，1680，1630，1175 cm-1NMR(DMSO-d6，δ)1.9-2.3(2H，m)，2.10，2.12 and 2.17(6H，s)，2.64，2.74，2.78(3H，3s);2.6-2.3(2H，m)，3.26 and 3.30(3H，2s);3.8-5.0(5H，m);5.1-5.4(2H，m);6.5-7.8(3H，m);8.67and8.81(1H，2d，J＝8Hz)实施例6向起始化合物(3.60g)的DMSO(18ml)溶液中加入叠氮化钠(0.74g)。溶液在70℃加热16.5小时，冷却后加入乙酸乙酯(100ml)，溶液用水(三次)及盐水洗涤。有机层用硫酸镁干燥并浓缩得到中间体化合物(ca.50ml)的浓缩物。向该溶液中加入三苯膦(1.49g)，然后在50℃加热2小时。加水(0.31ml)后，混合物在65℃加热4.5小时。沉淀过滤，并通过硅胶色谱柱(150g)，用氯仿-甲醇(从20∶1-5∶1梯度)洗脱。主要流份经蒸发得目的化合物(1.97g)。加热下起始化合物(0.43g)溶于乙醇中。冰浴冷却后加入4N-HCl/DOX(0.21ml)并将溶液蒸发，残留物用二异丙醚磨成粉状，过滤并干燥得到目的化合物(0.40g)。mp130℃(分解)IR(石蜡)3450，3250，1625，1565 cm-1NMR(DMSO-d6，δ)1.6-2.2(2H，m)，2.10，2.13 and 2.18(6H，3s)，2.66 and 2.76(3H，2s)，2.6-3.0(2H，m)，3.7-5.3(7H，m)，6.6-7.9(13H，m)，8.39(3H，s)，9.04(1H，m)权利要求1.通式化合物及其药学上可接受的盐其中R1是氢或低级烷基，R2是低级烷基或卤素，R3是氢、低级烷基或卤素，R4是低级烷基，R5是芳(低级)烷基，R6是氨基或任意被保护羟基，及X是O、S或N-R7，其中R7是N，N-二(低级)烷氨基(低级)烷基。2.根据权利要求1的化合物，其中R5是单-或双-或三苯基(低级)烷基，及R6是氨基或羟基。3.根据权利要求2的化合物，该化合物选自4.制备通式化合物及其药学上可接受的盐的方法其中R1是氢或低级烷基，R2是低级烷基或卤素，R3是氢、低级烷基或卤素，R4是低级烷基，R5是芳(低级)烷基，R6是氨基或任意被保护羟基，及X 是O、S或N-R7，其中R7为N，N-二(低级)烷氨基(低级)烷基。该方法包括使下式化合物或其氨基活性衍生物或其盐其中R1、R2、R3、R4、R5及R6各自定义同前与下式化合物或其羧基活性衍生物或其盐反应其中X定义同前。5.含有权利要求1化合物及药学上可接受的载体及赋形剂的药物组合物。6.制备药物组合物的方法，该方法包括将权利要求1化合物与药学上可接受的载体或赋形剂混合。7.权利要求1化合物作为药物的用途。8.权利要求1化合物作为速激肽拮抗剂的用途。9.权利要求1化合物作为物质P拮抗剂的用途。10.权利要求1化合物用于制备治疗速激肽调节疾病的药物的用途。11.治疗速激肽调节疾病的方法，该方法包括向人或动物施用权利要求1化合物。全文摘要本发明涉及新的肽化合物及其药学上可接受的盐，它具有药理学活性如速激肽A拮抗作用特别是物质P拮抗作用、神经激肽A拮抗作用、神经激肽B拮抗作用等；也涉及它的制备方法，涉及含同样化合物的组合物及其用作药物的用途。文档编号C07K5/02GK1083074SQ9310591公开日1994年3月2日 申请日期1993年4月20日 优先权日1992年4月21日发明者松尾昌昭, 萩原大二郎, 三宅宏 申请人:藤泽药品工业株式会社