一种比率量子点及其在同时检测APE1酶和miRNA-21中的应用、应用方法

本申请属于分析化学，尤其涉及一种比率量子点及其在同时检测ape1酶和mirna-21中的应用、应用方法。

背景技术：

1、脱嘌呤/脱嘧啶内切酶1(ape1)在dna碱基切除修复(ber)过程中起着关键作用。ber是一种细胞机制，负责修复由化学修饰或自然衰变引起的受损dna碱基。mirna-21是一种小型非编码rna，参与rna沉默和转录后调控等基本细胞过程。已有的研究已经确定了它们的异常表达与各种癌症的关联，如结肠癌、乳腺癌、胃癌等。基于这些信息，建立一种鉴定ape1酶和mirna-21的分析方法对促进早期癌症诊断至关重要。

2、传统的ape1酶和mirna-21检测方法中，大部分采用的是荧光标记的方法。荧光方法，它虽有安全、简单、灵敏度高的优点。然而，荧光方法依赖于用荧光团和猝灭剂进行外部标记，用于均相测定，涉及到复杂的设计，不仅设计序列繁琐而且费用高。如果进行复杂生物样本的检测时，荧光修饰法很容易受到背景信号的干扰，影响实验的准确度和灵敏度。

技术实现思路

1、本申请实施例的目的在于提供一种比率量子点及其在同时检测ape1酶和mirna-21中的应用、应用方法，旨在解决现有的ape1酶和mirna-21检测方法存在的准确度和灵敏度差、设计序列繁琐且费用高的问题。

2、本申请实施例的第一方面提供了一种比率量子点，所述比率量子点是由发射峰为520-530纳米的cdte量子点和发射峰为637-647纳米的cdte量子点混合得到。

3、本申请实施例的第二方面提供了一种上述的比率量子点在同时检测ape1酶和mirna-21中的应用。

4、本申请实施例的第三方面提供了一种上述的比率量子点在同时检测ape1酶和mirna-21中的应用方法，包括：

5、将ap探针、ape1酶、mops缓冲液混合孵育后进行退火处理，得到酶切产物；

6、在所述酶切产物中加入发夹探针和mirna-21进行扩增反应，得到第一复合体；

7、在所述第一复合体中加入银纳米材料进行反应，得到第二复合体；

8、在所述第二复合体中加入酸溶液进行酸裂解处理，将ph值调至中性后，经磁分离，在所得上清液中加入上述的比率量子点进行离子交换反应后，进行荧光强度测量，对所得荧光强度进行荧光比率分析，以实现对ape1酶和mirna-21的检测。

9、本申请实施例提供的一种比率量子点，该比率量子点是由发射峰为520-530纳米的cdte量子点和发射峰为637-647纳米的cdte量子点混合得到，与传统的单一cdte量子点相比，采用该比率量子点作为检测ape1酶和mirna-21方法的信号报告器，可以降低反应体系背景信号的干扰，降低实验的假阳性现象，提高实验的准确度和灵敏度，便于有效地实现ape1和mirna-21的同时检测，实现了ape1最低检测浓度可低至0.25u每毫升；此外，该比率量子点在ape1酶抑制剂的药物筛选上也体现出了巨大的潜能。

10、本申请实施例提供了比率量子点在同时检测ape1酶和mirna-21中的应用方法，该方法可简单、灵敏的检测ape1酶和mirna-21，为以后的研究、生产、临床检测等提供了方便；另外，该方法采用的dna探针设计简单、合成方便、可重复性高、制备成本低，所采用的比率量子点能够降低反应体系背景信号，操作简单、成本低，不但为ape1酶和mirna-21的检测提供了一种新的手段，而且为构建高选择性的生物传感器提供了一种新的思路。

技术特征：

1.一种比率量子点，其特征在于，所述比率量子点是由发射峰为520-530纳米的cdte量子点和发射峰为637-647纳米的cdte量子点混合得到。

2.根据权利要求1所述的比率量子点，其特征在于，所述发射峰为520-530纳米的cdte量子点和发射峰为637-647纳米的cdte量子点的质量比例为(2-8):(12-18)。

3.根据权利要求1所述的比率量子点，其特征在于，所述发射峰为520-530纳米的cdte量子点和发射峰为637-647纳米的cdte量子点的质量比例为8:12。

4.一种权利要求1所述的比率量子点在同时检测ape1酶和mirna-21中的应用。

5.一种权利要求1所述的比率量子点在同时检测ape1酶和mirna-21中的应用方法，其特征在于，包括：

6.根据权利要求5所述的比率量子点在同时检测ape1酶和mirna-21中的应用方法，其特征在于：

7.根据权利要求5所述的比率量子点在同时检测ape1酶和mirna-21中的应用方法，其特征在于，所述将ap探针、ape1酶、mops缓冲液混合孵育后进行退火处理，得到酶切产物的步骤，包括：

8.根据权利要求5所述的比率量子点在同时检测ape1酶和mirna-21中的应用方法，其特征在于，所述ap探针的5’端通过生物素共价键修饰了磁珠；

9.根据权利要求5所述的比率量子点在同时检测ape1酶和mirna-21中的应用方法，其特征在于，所述银纳米材料的加入量为0.8微升；所述比率量子点的加入量为50微升。

10.根据权利要求5所述的比率量子点在同时检测ape1酶和mirna-21中的应用方法，其特征在于，包括：

技术总结本申请适用于分析化学技术领域，提供一种比率量子点及其在同时检测APE1酶和miRNA‑21中的应用、应用方法，所述比率量子点是由发射峰为520‑530纳米的CdTe量子点和发射峰为637‑647纳米的CdTe量子点混合得到。本申请采用该比率量子点作为检测APE1酶和miRNA‑21方法的信号报告器，可以降低反应体系背景信号的干扰，降低实验的假阳性现象，提高实验的准确度和灵敏度，实现了APE1最低检测浓度可低至0.25U每毫升；此外，该比率量子点在APE1酶抑制剂的药物筛选上也体现出了巨大的潜能。技术研发人员：王绘珍,张琼丹,李斌,王炜,盛文兵,邱伊星,刘青怡受保护的技术使用者：湖南中医药大学技术研发日：技术公布日：2024/6/2